AULA3-C4E CAM A consequéncia imediata dos mecanismos de concentragéo de CO2 que aumentam os niveis de CO2 nas proximidades da rubisco é um decréscimo na reagdo de oxigenacao. A fixagéo do carbono via C4 e CAM sao encontrados em algumas angiospermas e envolvem adigdes ao ciclo de Calvin-Benson que separa a captura do CO2 atmosférico do suprimento de substrato para a rubisco, MECANISMOS DE CONCENTRACAO DE CARBONO INORGANICO: CICLO C4 DO CARBONO A fim de minimizar a atividade oxigenasse da rubisco e a consequente perda de carbono por meio do ciclo fotorrespiratério, a fotossintese C4 parece ter evoluido como um dos principais mecanismos de concentragdes de carbono utilizado pelas plantas terrestres, para compensar pelas limitagdes associadas com os baixos niveis de CO2 atmosférico. O malato ¢ o aspartato sao produtos da carboxilacao do ciclo C4 is detectaveis da no 4 do malato, ato. Essa rota as do mesofilo & 3uas respectivas ieee won ae aNo ciclo C4, em vez da rubisco, a enzima fosfoenolpiruvato carboxilase (PEPCase) catalisa a carboxilagao primaria num tecido que esta préximo da atmosfera externa. O acido de 4 carbonos resultante flui, através da barreira de difusdo, para a regio vascular, onde 6 descarboxilado, liberando CO2 que & refixado pela rubisco via ciclo de Calvin-Benson. Embora todas as plantas C4 compartilhem a carboxilagao primaria via PEPCase, as rotas especificas pelas quais 0 CO2 & concentrado nas proximidades da rubisco variam substancialmente entre as espécies C4. © ciclo C4 tem sido associado com uma estrutura foliar particular chamada anatomia Kranz, que exibe um anel interno de células de bainha ao redor dos tecidos vasculares e uma camada extema de células do mesofilo em contato com a epiderme. Essa anatomia foliar particular garante a compartimentalizago das enzimas essenciais para o funcionamento da rota C4 em dois tipos diferentes de células. Assim, o transporte de metabilitos entre 08 dois compartimentos, que é essencial para a operagao do ciclo C4, & acionado para o gradientte nao apenas entre, mas também dentro das células. Dois tipos diferentes de células participam no ciclo C4 As caracteristicas-chave do ciclo C4 foram inicialmente encontradas em folhas de plantas nas quais os tecidos vasculares sdo rodeados por dois tipos distintos de células: um anel interno de células da bainha do feixe vascular, 0 qual é circundado por um anel externo de células do mesofilo. Os cloroplastos das células da bainha estao arranjados concentricamente e exibem grandes graos de amido e membranas dos tilacoides nao empilhadas. Por outro lado, as células do mesofilo contém cloroplastos aleatoriamente arranjados, com tilacoides empilhados aleatoriamente arranjados, com tilacoides empilhados e pouco ou nenhum amido. O transporte de CO2 da atmosfera externa para as células da bainha vascular segue através de cinco estagios sucessivos: 1. Fixagéo do HCO3- através da carboxilagéo do fosfoenolpiruvato catalizado pela PEPCase nas células do mesofilo. O produto da reagao, oxaloacetato, é sibsequentemente reduzido a malado pela NADP-malato ou convertido a aspartato por transaminagao com glutamato,2. Transporte dos acidos de 4 carbonos (malato ou aspartato) para as células da bainha do feixe vascular. 3. Descarboxilagao dos Acidos de 4 carbonos e produgao de CO2, que & entéo reduzido a carboidrato via ciclo de Calvin-Benson. Antes dessa reagao, uma aspartato aminotransferase catalisa a converséo do aspartato de volta a oxaloacetato em algumas plantas C4. Diferentes subtipos de plantas C4 fazem uso de diferentes descarboxilases para liberar CO2 para a supressdo efetiva da reagdo de oxigenasse da rubisco. 4. Transporte do esqueleto de 3 carbonos (piruvato ou alanina), formado pela etapa de descarboxilagao, de volta a célula do mesofilo. 5. Regeneracao do aceptor de HCO3-. O piruvato acido residual de 3 carbons, é convertido em fosfoenolpiruvato na reagao catalisada pela piruvaro-fosfato dicinase, Nesse estagio, uma molécula adicional de ATP 6 requerida para a transformagéo do AMP a ADP, catalisada pela adenilato cinase. Quando a alanina é 0 composto de 3 carbonos exportado pelas oélulas da bi piruvato pela ado da alanina aminotransferase precede a fosforilagao ha do feixe vascular, a formagao do pela piruvato-fosfato dicinase ‘A compartimentalizagéo das enzimas garante que o carbono inorganico da atmosfera pode ser assimilado inicialmente pelas células do mesofilo ¢ fixado subsequentemente pelo ciclo de Calvi finalmente exportado para o floema. Benson das células da bainha, e © ciclo C4 concentra CO2 nos cloroplastos das células da bainha do feixe vascular A operagao do ciclo C4 requer o esforgo cooperative dos dois tipos distintos de células contento cloroplastos: células do mesofilo e da bainha do feixe vascular arranjadas na anatomia Kranz caracteristicaw Anatomia ane toca ct ine GURA. 012 A rot fotsseen Cy nat cata do lado (Gurl eset Ea cacao moots eno inetaiza egies travis mane dedinado 0 dor dos vine. At cles de sib dos sain Semmes itera Meri ie ‘coves Coneto ‘ve, cas pla Sonacrowa areas secur snosar toners crop, crt os eur veriatzaao C, em ta ‘gon Grave Se cevonaton, os cut _ctopisimancor © pesivem lunge anaiogse Sivas a stoma kone @) awoma vos Borrow aac (eq) « ie O processo de transporte facilitado por plasmodesmos que conecta os dois tipos de células gera uma concentragdo muito elevada de CO2 nas células da baixa do feixe (regiéo vascular) do que nas células do mesofilo (a regido “externa”). Essa concentragao elevada de CO2 nos sitios de carboxilagéo da Tubisco resulta na supressdo da oxigenacdo da ribulose-1,5-bifosfato e, por consequéncia, da fotorrespiragao. Somadas a essas caracteristicas anatémicas, estas células apresentam grandes diferengas na composigao de enzimas. A PEPCase e a rubisco esto localizadas no mesofilo e nas células da bainha, respectivamente, enquanto as descarboxilases s4o encontradas em varios compartimentos intracelulares das células da bainha: a enzima NADP-malica nos cloroplastos, enzima NAD-malica nas mitocéndrias, e a enzima fosfoenolpiruvato carboxicinase no citosol. Amido, o produto transitério de armazenamento da fotossintese, acumula predominantemente nos cloroplastos das células da bainha. Os cloroplastos nas células do mesofilo e da bainha das plantas C4 também exibem outras diferengas anatémicas e bioquimicas, Atividade do PSII e o consequente fluxo linear de elétrons ao PSI, o qual produz tanto NADPH como ATP, sao geralmente encontrados em cloroplastos que contém extensivapresenga de grana, enquanto o fluxo ciclico de elétrons mediado pelo PSI, 0 qual produz principalmente ATP, esté presente em cloroplasto com poucos grana, Esses dois tipos de cloroplastos se correlacionam com o requerimento de energia da fotossintese C4. As espécies C4 que sao predominantemente formadoras de malato requerem mais poder redutor para a conversao do acido oxalacético do que espécies que sao formadoras de aspartate. Como consequéncia, as espécies C4 do tipo NAFP-mdlica, onde o malato é transportado do mesofilo para as células da bainha, exibem grana bem desenvolvido nos cloroplastos do mesofilo, enquanto os cloroplastos da bainha so deficientes em grana. Em contraste, nas espécies C4 do tipo NAD-malica, © produto primério da fixagéo do CO2 nas células do mesofilo é aspartato, o qual requer menos poder redutor e, portanto, menor fluxo linear de elétrons ao PSI. Como 0 ATP produzido pelo fluxo ciclico de elétrons do PSI gera a conversdo do piruvato a fosfoenolpiruvato, os cloroplastos das células do mesofilo nas espécies C4 do tipo NAD-mdlica exibem menos grana do que os cloroplastos das células da bainha. A existéncia de fotossintese tipo C4 em células que circundam os feixes vasculares de algumas plantas C3 sugere que apenas umas poucas modificagdes so necessdrias para a evolugao da fotossintese C4 a partir da rota C3, O ciclo C4 também concentra CO2 em células individuais A descoberta de fotossintese C4 em organismos desprovidos de anatomia Kranz desvendou uma diversidade muito maior de modo de fixagao C4 do carbono. Duas plantas que crescem na Asia — Borszozowia aralocaspica e Bienertia cycloptera - podem realizar a fotossintese C4 completa dentro de uma Unica célula do clorénquima. Diatomaceas, que sao protistas marinhos unicelulares, também realizam a fotossintese C4 dentro de uma unica célula. A luz regula a atividade de enzimas-chave de C4 Além de suprir ATP e NADPH, a luz é essencial na regulagao de varias enzimas do ciclo C4. Assim, variagdes na densidade de fluxo de fétons promovem alteragdes nas atividades de NADP-malato desidrogenase, PEPCase e piruvato-fosfato dicinase por dois mecanismos diferentes: troca dosgrupos tiol-dissulfeto e fosforilagdo-desfosforilacao de residuos de aminoacidos especificos. A NADP-malato desidrogenase é regulada via o sistema classico ferredoxina-tiorredoxina. A enzima reduzida (ativada) pela tioredoxina quando as folhas so iluminadas, mas é oxidada (inativada) no escuro. Por outro lado, a fosforilagao diurna da PEPCase por uma cinase especifica serina-treonina, denominada PEPCase cinase, aumenta a captagéo do CO2 ambiente, A desfosforilagao noturna da serina fosforilada pela fosfatase proteica 2* leva a capacidade catalitica da PEPCase de volta a atividade basal (baixa). Por outro lado, uma proteina reguladora muito estranha medeia a estreita regulagao escuro/luz da atividade da piruvato fosfato dicinase. A piruvato fosfato dicinase (PPDK) & modificada pés-tradugao por uma treonina cinase-fosfatase bifuncional que catalisa tanto a fosforilagao dependente do ADP, como a desfosforilagao dependente de Pi da piruvato fosfato dicinase. O escuro induz a adigéo de um grupo fosforil em uma treonina especifica da piruvato fosfato dicinase pela cinase-fosfatase reguladora, causando a perda da atividade enzimtica. A clivagem fosforolitica desde grupo fosforil restaura a capacidade catalitica da piruvato fosfato dicinase. Em climas quentes € secos, 0 ciclo C4 reduz a fotorrespiragdo e a perda de gua Temperaturas elevadas reduzem tanto a capacidade de carboxilagdo da Tubisco como a solubilidade do CO2 limitando assim a taxa de assimilagao fotossintética de CO2 nas plantas C3. Nas plantas C4, as duas caracteristicas spbrepujam os efeitos deletérios da temperatura alta © Primeiro: a afinidade da PEPCase por seu substrate, HCO3-, 6 suficientemente alta para saturar a enzima nos niveis reduzidos de CO2, presente em climas quentes. Além disso, a atividade da PEP carboxilase permite as plantas C4 reduzir sua abertura estomatica e, assim, conservar agua, enquanto fixa CO2 em taxas iguais ou maiores que as plantas C3. * Segundo: a alta concentragao do CO2 nas células da bainha do feixe vascular minimiza a operacao do ciclo oxidativo fotossintético C2.Por permitir uma fotossintese mais eficiente, estas caracteristicas dao as plantas uma vantagem competitiva em que os custos da fotorrespiragao sao importantes — isto é, em solos secos e climas quentes. MECANISMOS DE CONCENTRACAO DE CARBONO = INORGANICO: METABOLISMO ACIDO DAS CRASSULACEAS (CAM) Muitas plantas que habitam ambientes 4ridos, incluindo plantas. comercialmente importantes como o abacaxi, cactos e orquideas, exibem um outro mecanismo de concentragao do CO2 no sitio da rubisco. Um atributo importante das plantas CAM é a sua capacidade de atingir grande quantidade de biomassa em habitats onde a precipitagdo é inadequada, ou onde a evaporagdo ¢ tao grande que a chuva ¢ insuficiente para o crescimento das culturas. O CAM é geralmente associado com caracteristicas anatémicas que minimizam a perda de agua, como cuticulas espessas, baixa razdo e volume/superficie, grandes vacuiolos e estématos com aberturas pequenas. Além disso, 0 arranjo préximo das células do mesofilo aumenta o desempenho do CAM pela restrigdo da perda de CO2 durante o dia. Normalmente, uma planta CAM perde de 50 a 100 gramas de agua para cada grama de CO2 ganho, comparado 250 a 300 gramas para as plantas C4 e 400 a 500 gramas para as plantas C3. Dessa forma, as plantas CAM tém uma vantagem competitiva em ambientes secos, como desertos. A formagao dos acidos de 4 carbonos nas plantas C4 acontece em um compartimento segundos antes da descarboxilagdo e refixagéo do CO2 resultante pelo ciclo de Calvin-Benson ocorra em outro compartimento. Nas plantas CAM, a captura inicial do CO2 atmosférico e a incorporagao final do C02 em esqueletos de carbono estéo espacialmente préximos, porém temporalmente fora de faze - por aproximadamente 12 horas em um ciclo de luz/escuro de 24 horas. A noite, a PEPCase fixa 0 CO2 atmosférico (e respiratorio) em oxaloacetato, usando fosfoenolpiruvato formado via quebra glicolitica dos carboidratosestocados. Uma NAD-malato desidrogenase citosdlica converte 0 oxaloacetato em malato, o qual é estocado no vactiolo dcido pelo restante da noite. ero: erinetn abortion ot eotmetonfechedor ‘stonato aber permite Seaptura do COz02 ‘rd d 120 Gesprexse) FIGURA 813 Metabclamo Acti das Crassuldess (CAM). No rretabelima CAV, a captra do CO, et spur tereralmen te ea faac30 peo coo de Calnn-Benscn. A cptura eo CO, at rrosfere em lugar rote qunnao os andra: eatio aberos Neste estigio,0€0, gseso No dtl vido tata da atrosera seems coms ds respragao “atoconsial, aumenta os thes de HCO. (CO, + HO «7 HCO, + H' Endo, 9 FEPCase closes Catala a reago erie @ HCO, e0 fesionnsipraato fomecido ea auebranotura de amie do coroplso. 0 acide de 4 cae Doves weslare, naaceate, ¢eduzds a raat, cue, po sua vez posieque para o abien‘edcido do vacicle, Duarte oa, 0 Seco alien que fora stecaco ro vacua a ote fuse valla 26 ‘osc, A mao cexcaroonase erzra NAD-mdic) age sobre © ‘alto prs Serr CO, quel tefiado em exqucetos de carbo oad cei de Cabirtenson. Em essirc, a acrlac dura Se amidoracorplsioeantta« anh quis care ntur 1a de casera iorainco. A vantagem adabatna do echarerto fstoreco dante oda ¢ que ela evita no apenas a gerda de ‘ua oor varsotaci, mas também @ toca 40 CO, nena coma ‘Sosfen oxen. durante o dia, o malato estocado & transportado para o cloroplasto e descarboxilado por mecanismos similares aqueles das plantas C4 ~ isto 6, por uma enzima NADP-mdlica citosélica, uma enzima NAD-mélica mitocondrial ou © coz disponibilizado ao cloroplasto para processamento via ciclo de Calvin-Benson, uma fosfoenolpiruvato carboxicinase mitocondrial. liberado 6 enquanto os acidos de 3 carbonos complementares sao convertidos em trioses fosfato e subsequentemente em amido ou sacarose pela gliconeogénese como nas plantas C4, Alteragdes na taxa de captura de carbono e regulagdo enzimatica ao longo do dia criam um ciclo CAM de 24hrs que é dividido em quatro fases distintas: fase | (noite), fase Il (inicio da manha), fase III (dia), fase IV (final da tarde). Durantea fase I, quando os estématos esto abertos e as folhas estdo respirando, o C02 é capturado e estocado como malato no vactiolo. A captura do CO2 pela PEPCase domina na fase I. na fase III, quando os estématos esto fechados e as folhas estéo fotossintetizando, 0 malato estocado é descarboxilado. Isto resulta em altas concentragées de CO2 ao redor do sitio ativo da rubisco, desta forma aliviando os efeitos adversos da fotorrespiragao. As fases transientes II e IV alteram 0 metabolismo em preparacdo para as fases Ill e |, respectivamente. Na fase Il, a atividade da rubisco aumenta, mas decresce na fase IV. Em contraste, a atividade da PEPCase aumenta na fase IV, porém decai na fase II ‘A duragéo e a contribuigéo de cada fase para o balango geral de carbono variam consideravelmente entre diferentes plantas CAM. Plantas CAM constitutivas utilizam a captura noturna de CO2 sempre, enquanto as plantas facultativas recorrem a rota CAM somente quando induzidas por estresse hidrico. Se as trioses fosfato produzidas pelo ciclo de Calvin-Benson serao estocadas como amido no cloroplasto ou utilizadas para a sintese de sacarose, vai depender da espécie vegetal. Entretanto, esses carboidratos, em ultima analise, garantem nao apenas o crescimento vegetal, mas também o suprimento de substratos para a préxima carboxilagao noturna. A separagéo temporal do ciclo virtualmente fechado da carboxilagéo e descarboxilagao reduz a inevitavel ineficiéncia da rubisco e otimiza o uso da agua, desta forma melhorando a performance fotossintética em ambientes limitantes. CAM E UM MECANIISMO VERSATIL SENSIVEL A ESTIMULOS AMBIENTAIS Aalta eficiéncia de uso de agua nas plantas CAM é provavelmente responsavel Por sua extensiva diversificagao e especiagao em ambientes limitados em agia. As plantas CAM crescem em desertos, como os cactos, abrem seus estématos durante as noites frias e os fecham durante os dias quentes e secos. 0 fechamento dos estématos durante o dia minimiza a perda de agua, mas devido ao fato de que a H20 e 0 CO2 compartilham a mesma rota de difusao, © CO2 necessita ser capturado pelos estématos abertos durante a noite.A presenga da luz mobiliza as reservas de acido malico no vactiolo para a ago de enzimas especificas de descarboxilago — NAD(P)-mdlica e fosfoenolpiruvato carboxicinase — e a assimilagao do CO2 resultante via ciclo de Calvin-Benson Quando os estématos esto fechados, nem 0 CO2 liberado pelas enzimas de descarboxilagao e tampouco 0 CO2 liberado pela respiragao mitocondrial escapam da folha. Como consequéncia, 0 CO2 gerado internamente ¢ fixado & convertido a carboidratos pelo ciclo de Calvin-Benson, Assim, o fechamento estomatico nao apenas auxilia na conservagao da agua, mas também assiste na acumulagao da elevada concentragdo interna que melhora a carboxilagdo fotossintética da ribulose-1,5-bifosfato, Atributos genotipicos fatores ambientais modulam a extensdo na qual as capacidades bioquimicas e fisiolégicas das plantas CAM sao expressas. Em muitas espécies de plantas suculentas na familia Crassulaceae sejam plantas CAM obrigatérias que exibem ritmocidade circadiano, outras apresentam fotossintese C3 e CAM simultaneamente em folhas opostas. A proporgo de CO2 capturada pela PEPCase a noite ou pela rubisco durante o dia (assimilagao liquida de CO2): é ajustada pelo (1) comportamento estomatico; (2) flutuagdes na acumulagao dos Acidos orgdnicos e carboidratos de reserva; (3) a atividade das enzimas primdrias (PEPCase) e secundaria (rubisco) de carboxilagao; (4) a atividade das enzimas de descarboxilagao; e (5) sintese e quebra dos esqueletos carbénicos C3. Muitos representantes das plantas CAM sao capazes de ajustar seu padrao de captagéo de CO2 em resposta a variagdo de longo prazo das condigées ambientais. A planta de gelo, agave e Clusia estéo entre as plantas que utilizam © CAM quando a agua é escassa, mas fazem transi¢o gradual para C3 quando a agua se toma abundante. © amido é sintetizado no cloroplasto durante o dia; A degradagao do amido a noite requer a fosforilagdo da amilopectina; A exportagao de maltose prevalece na quebra noturna do amido transitério;fas Soaterootecanneuare esate ‘evar comin sane ene csscs an or. ‘Gocco oe caningecnn a tle (ase ‘S Aopaice mo deceiuce 510) rng fe 8s fata» dn de aoe A ote, agen designe lest ‘asco ums tar putas eis, ue flung ac {rose celta att oan ohn este ner (tsar de mene Be oe fr ota, cree Eesmiaao secon vera C0) rations sna eo carer enneen sneer areas ‘arctan ae cna Ovreapate os Arlee kate, ‘ea denog aside ansneserome