Woe | | | i i i i ‘46. Color Additives Sandra Bell, Chapter Editor Food and Drug Administration (Number in brackets following name ofa color represents number ‘of that color as listed in Society of Dyers and Coloursts' “Colour Index,” third edition, 2nd revision, 1982. In conformity with common usage, throughout this chapter the reagent designated as “amyl alookol™ is actually “soamyl aleo- hol) ‘Subchapter 1 ‘SEPARATION AND IDENTIFICATION OF COLOR ADDITIVES IN FOODS, DRUGS, AND COSMETICS 46.1.0 AOAC Official Method 920.207% Color Additives ‘Separation and Identification of Pigments and Lakes Procedure ‘Surplus 1970 See 34.001, 11th ed, 46.1.02 AOAC Official Method 920.208 Color Additives (Soluble) and Their Lakes Separation by immiscible Solvents ‘Surplus 1970 A. Sypthele Organic Color Adttives In General See 34.002, 11th ed B. Dyes (OllSolubte) Fire Action See 34.003, Nth ed. ©. Water-Soluble Dyes “Final Retion See 34,004-34.006, 11h ed 46.1.03 AOAC Official Method 930.38 Color Additives (Synthetic Organic) in Foods First Acton (Amerants*, poncemu 3R*, poncea SX*, erythrosine, orange I, light green SF yellowish®, fast green FCF, guinea green B¢,briliant blue FCF, indigotine, naphthol yellow S*, sunset yellow FCF, ‘artrazine, yellow ABY, yellow OB*, orange 8S*, and cil ed XO") "Wo aie pemed Ta We United Sate, 484 A. Immiselble Solvent Method Surplus 1970 ‘See 34.007-34.008, 11th ed, Column Chromatographic Method Identiication—Procedure (a) Oit-soluble dyes—Prepare solution of the isolated dye of suitable concentration in CHCl,. Determine spectrophotometeric curve ofthis solution and coraare curve with those of known dyes jn CHCl, solutions determined on same instrament under same conditions. If spectrophotometeric data cannot be comeated with that of known color, unknosin color may be mixture. In such cases, proceed as in 966.21 (eee 461.04). (D) Heater soluble dyes.—Prepare ca neutral solution of the €ye in concentration suitable or spectrophotometeri analysis with cells ‘and instruments available, Divide soltion into 3 portions and to L portion add few crystals of NH,CH,COO. To second portion add HC to make ca 0.1. To third potion add NaOH solution to make ‘ca 0.1. Determine spectrophotometeri curves ofthe 3 solutions and compare with eoresponding cuves of known dyes determined under same conditions on same instrument. Tf spectrophotometerc data of unknowa color eannot be corre- Jated with that of a known color, unknown color may be mixture. In such cases subject unknown color solution to chromatograpiy. For oil-soluble colors, paper chromatographic procedure of JAOAC 35, 425(1952); 36, 802(1953), or following column chromatographic method may be used, Reference: USDA Bull, 1390, Supplement 1 (1930). ©. Preparation of Column Lightly tmp glass wool plug into constricted end of chroma tographic tube ca 100 cm long x 2.54 cm diameter, Prepare thin ‘aqueaus slurry of ca 40g powered cellulase, suchas SolkaFioc BW 40 Brown Co , Berlin, NH03570),and pour into column. Let quid drain as cellulose settles and aid more slurry as needed uni all is added, When liquid level drops almost to top of adsorbent bed, ad ‘ash of 20% NaCI solution. Just before last ofthis solution enters adsorbent, close constricted end of column. Column may be used immediately ormay be stored for several weeks beforeuse. (Column described is adequate for 0.5-2.0mg total dye, Column size may be varied if more or less dye is present) . Chromatographie Separation ‘Toneutral aqueous solution ofthe color add enough NaCltomake 120% solution. Pour solution nto column so that sorbent bed isnot 5% so shat tation volume is-<10 mL) and wansfor to 250 mil beaker. Add several boiling granules and ca 100 iL H,0. Cover with watch glass and bol gendy 30 mn on hoc pate. ‘Remove from heat and cool to oom temperature Dilute to 100 mi. in volumetric flask Pipet 10 mL int trator beaker, tute toca 100 ‘mL with H,O, and add 5 mL HNO, (1 +99). (Altematively, weigh 0.1 g sample directly without dting if ccuracy of determination is satisfactory) Insert electrodes and tats in avtomatic mode with O.QIN AgNO to preset end pein. NaCl = mL AgNO, x normality AgNO, x .844/g sample48. Colorantes Sandra Boll, Editora del capitulo Acministracién de Farmacos y Alimentos (Namero entre paréntesis que siguen al nombre de un color representa el nimero de ese color que se eniistan en la Sociedad de Tintoreros y Colotistas "Colour Index’, tercera_edicion, segunda revisién, 1982. De acuerdo oon el uso comdn, a través de este capitulo el reactivo denominado “alcohol amilico” es en realidad * alcohol isoamilico.” -, Subcapitulo 1 SEPARACION E IDENTIFICACION DE LOS ‘COLORANTES EN LOS ALIMENTOS, MEDICAMENTOS Y COSMETICOS, 461.01 AOAC Método Oficial 920.207 * Colorantes Separacién e identificacién de plgmentos y Tacas Procedimiento ‘Superdvit 1970 Ver 34.001, 11° ed. 46.1.02 ‘AOAC Método Oficial 920.208 * Los colorantes (solubles) y sus lacas Separacién por inmiscibilidad en solventes. ‘Superavit 1970 A. Colorantes Organicos Sintéticos en general = Accién Final Ver 34.002, 11° ed. B. Colorantes (soluble en aceite) = Accién Primera Ver 34.003, 11° ed. C. Los colorantes solubles en agua = Acci6n Final Ver 3.004-34.008, 11° ed, 46.1.03 AOAC Método Oficial 930.38 Colorantes (Orgénicos sintéticos) en los ‘Alimentos Primera Accién (Amaranto *, ponceau 3R *, ponceau SX eritosina, naranja |*, verde amarilento caro SF*, verde obscuro FCF, verde guinea B *, azul brilante FCF, inaigo, amarillo naftol S*, amarillo ocaso FCF, tartrazina, amarilo AB *, amatilo OB *, narania * SS y aceite rojo XO*1.) ‘No permitido en los Estados Unidos ‘A. Método de Solvente Inmiscible* -Suporavit 1970 Ver 34.007-34.000, 112.Ed. ‘Método de cromstogratia en coltnna 8 lgentdae-Procedimiento (@) Cobranies solities on acne, Prepacar folorana alage de concertrson ad ‘eleeminar acura espestolototiiea de eta sluien do aa sollén compares. con acluseres ae colons do Concontacion ‘conociia en CHOIS, compaciag conf ‘eqpeciae sunas do clorares ef nisna nsumesso bap tae memat condesones. Stor dace expectotcomene To ‘uoden sa" calaconadot con a slrano conoesa, oO Duede ser une mescia desconocida, En tlee cece, proce Como en 96021 ver 4.108. (0) Colorants sousies on agua, Prparar una soliton noua | eoleranle en concenwecon acacuada pete ot anal ‘spectators ences onstanonis depois, Dt {a olan en 3 pares y para a primera pte shad ganas ciate de CHICOONME As eoguncs ore aad HCI gra ace: una coneonsoessa de ON Para la tareera pore aad ‘ia seussn de NaOH para hacer una concenvaisa de ON, ‘Steinar ns cures expestofoondiicss dens’ slasonesy omperar con lab cues covtospondienies. de catantes co coneeniacon coveeide, seleminanae oh lat marae ‘ondconesy en mismo neuer, ‘i os dates especrotcometrns det color desconccida ro ‘unde ee covtsconadoe can ls 9 un ear conocido caot pode cer une mezca deacerecida, En tl asso la soln co slr deeconoelde ae ansias por exematografia Pata les coors Sclutes en acai procedimieto comatonafica en papel co TAGAG Ss, “za(io82) 36, e02(1959) 0 segura matoso ‘romatogico de clumea pues car atzace. eters: USDA Bal 1300, Suomen (1050) .Preparacién dela Colmes Acisonar un tap go lana dvr Sgeramente en el extrem ‘evocha de tb eromatogafcn cx 0) om do argo r2.54 ot ‘demava Poparar ura suvaneio acuosa ce goroumadaranio ‘eq 40 9 de clulesa en po, tales coro Salaror BW #0 {Grown Ca. Bein, NH 03370) vers enle cour. Drenar al ua nasa eolocar Ia caklose, arepat més fSoueson como fea pecesarlo hata qua lada ta eaulcea fea jlonads. Cuando a ive de quo deslenda cas dl preino echo adorei rela’ unto eon soliton de NaC! a 2h. Justo aries de emrarse rein carr a exam do i columns, Ua eaumea so puede visa Inmedataento 9 50 fuodo lmacerst cuanto varse semanas. ator do ues. (Courna desctas os adecuado para until ce 0.52.0 ma ce Calorie. El Tanato dele core puede sr vated st es breenla més omencs corte) 2. Separacién romatogrtcs ‘Ane soln ocuasa bev dl color afd sufiente NaC! ‘asi obtener ne soleil 20% Vener lemamenta la shia this columna para ue et leon acsotmante noe alte. oninasin, sear el eutert.eelacho del tubo. Cuando la Sitima. parte de la sluson este sa. pazara.en el Teche ‘usarente, aad algunos nl Ge tclucién ee NaC ob 20%. Si ual eater se despaza or lo alumna hacia aba 2 ura ‘eldaa moderaca, corns lavage eon oicin ge NSCs 2. SI lode o coke pormanoca on la pate eupetor edo io cola, cambiar una slvcisn de NoCl a 108%. 8 gon exe ‘Solin nose muse nngin color en la. clues foi sala, {ambi 9 una eolbeisn So NaCl Al 5%. Coa Bano oneontoessn de NaCl ala tg” hacia ener fa oneentacon que mueva al eclorenla cola favs abajo & ‘a veordad oderadaColorantes. Capitulo 48, 912 AOAC Métodos Oficiales de Anélisis (1995) aoa Método oficial ADAG 950.04" Color total en Colorants ‘Contenido de Azufre ‘Superdvit de 1970 A. Método de Fusién = Accion Final Ver 34.030, 11% od. B. Método de digestion con Acido perclérico ~ Aecion Primera Ver 34.031-54.032, 11° ed 464.12 AOAC Método Oficial 95.39 Color total en colorantes Método espectrotetométrice ‘Accian Final 1960 A Aparato (2) Espestofotémeto - Capaz de realizar mediclones precisas de soluciones en ia regién ce 400-750 nm, preferblemente con longtud de onda efecva = 10 am. (0) Dos o més caidas de sbsorcion emparejades. B, Reactivos (@) Determiner in muestra estinder de colorane. Las Muestras de referencia deben ser culdadosamerte preparadas y do ata pureza. El contenido de cclerante puro en muesires. esténdar se debe conocer con ‘execttud paral resulados cuanttalivos. (©) Solventes ~Lieres de mataral suspendico, . Estanderizacién Preparar una seria de solclones estandar de Cconcentvacién conccida y determinar la Af=log (UP) de Jas soluciones, coregir A debldo a los solvertes y ala celda, a una longitu de onda adecuada. (Le longiud de ‘onda selectionada A, usualmente es el maximo). Ajustar Jas concentracones de las soluciones para obtener un valor de 0,4 a 1.0 con ef instumento y las celdas Uiladas, Tabular los datos abtenisos. D. Determinacién Preparer la salucién de la muestra en el disolvente uilzads en estandarzacion. (La soleién dobo sor tal ‘ue la concertvacion perma examinar que la A este {en el rango cubierto por los estandares) Determinar A do testa solucién bajo las mismas condiciones uliizades en Ta ectanderzacion, Calculer el contenido total de color dela muestra, 2 patr 6e Ia A de la sclucién muestra y de A" de la solucén stander: Color Total = (Aconcentrcién de la _muestra) (concontacién de estandar/A") x pureza del estandar. ‘Si no resuta una linea recta cuando A’ y tos datos do oncentracin obtenidos son tazados, es Sec, sila ey de Beer no se mantiene, determinar Ia conceniracion esconccida de la selucién, por comparacion con datos Dblenidos de seluciones conccidas, muy cercanas ala Inisma concertacien, Referencias: JAOAC 27, 576(1955): 30,522(1947) 31, 588, 674(1048), 82, 180, 635(1940), a3 AOAC Método Ofc! 950.65, Materia volatile Colorantes Método gravimetico ‘Recion Final Psat acoximadamente ca 2 9 de musica en un cris! de oso taredo ca dem de dametto y scar en una etula als fempealura prescla, 950.608 (ver 48.107), por 6 horas 0 toda la noche, enflar en desecador afcente y poear 06 reve Reperar la péraia de peso come mele vole, aaa6 AOAC Método Otic! 950.56 Materia insoluble en Colorantes ‘A. Matoiasineolubles on agua —Aeet6n Final 1860 Diselier'2 9 de muestra en 200 mL de agua caliente y mir que la selon se ente 9 tempecalura smbient Fiirar 2 tavés de un fro Gooch, equipado con un dsce de fore e wcrc, sacar a 136°C y pesar. Lavar con aqua fis hasla que Jes lavados sean ‘ncclores, secar 3 horas. @ 135°C, ‘ena an un desecador y posar. Reportar ‘aumrte de peso com le materia inaguble on ag 1. Matera Insoluble on tetractoruro de carbono Accién Final (Precaucin: Consute Apéndice 8, noias de seguried en ‘isclveiestoieosyteacorure de carbono,) Hezclar 02.0.5 9 de la muestra con 100 mide COI4 en un vaso de 250 mit, agtar y ealenar 2 obulicon. Far luc eaionte através de zo pasado Gooch anseie € resivo en ol vasa para Biliary lavar con poclenes de 10 IL de CCl, hasia que fos lvados sean Inedoros. Secar durante 3 hares a 100-105°C y posse. Reporter a aumecto ‘depeso como matersnsolbia en CO Matera Insoluble en Tolueno nection Final 1060 Proveder como se indica en 980.688, pero sus olueno porcels D Materia insoluble en Benceno = Aectén Final 1960 Proceder como se indice en 980.668, pero susitir benceno porccls E Matera insoluble en acetona ~Aeclén Final Proveder como se inca en 850.668, pero susie acetona perce Matera insoluble en alcohol “Aecton Final Proceder como se ingica en 950.688, pero suture! porcold .Hetera insoluble en tetracloruo de carbono Aectén Final = Superavit 1970, ‘Vor 34.086, 1° ea HL Matoria insoluble on siteno Acetén Final Procader como se iniica en 950.668, pero sustiur leno parca 1 Materia insoluble (Solucton aeatina) = Aeetéa Final Prozeder come. $e lndles en. 950.66A, pero usar une saucién de NOH al 1% 0 NHAOH (1 + 44) en lugar de aya,Colorantes Capitulo 48, p24 AOAC Métodos Oficiales de Andlisis (1995) Subcapitulo 5 Los halégenos 48.501 AOAG Método oficial 950.79 hhalégenos en colorantes, ‘Accién Final Superavit de 1970 A. Yodo Ver 34.108-34.107, 11° ed, B. Bromo, Ver 34,108-34.109, 11° ed, C.Cloro, Ver 34.110, 119 ed. D, Gioro en presencia de Bromo Ver 34.111-34.113, 11% 0d E. Libre de Cloro 0 Bromo Ver 34.114-34.118, 11° 6. 46.502 AOAC Método Oficial 980.25, Cloruros Los colorantes hidrosolubles Métodos para potenciémetros manuales y ‘autométicos Primera Accién 1980 ‘Accién Final 1981 (Precaucién: Ver el Apéndice B, notes de seguridad Ge nitrate de plata) Ain Disolver la muestra en H20, acidular y_tiular Potenciometricemente con AgNO3 de forma automatics 0 manvalmente. Apicable a todos los colores hidrosolubles excepto el Rojo No. 19 D&C y los niveles de > 0.09% de NaCl. con la florescencia {de los haldgenos, a [2 y Br2 son determinados como NaCl pero las cantidades maximas presentes usualmente son equivalentes 2 <0.2 % de NaCl B. Aparato (a) Electrodos. Electrodo combinado de plata 0 separado de plata, indicado como ullizando ‘como referencia Ag/AgCl, u olfo par de electrodes ‘adecuados © combinasién de electrodes. Limplar ol lectrodo de plata con alumina “levigada” (Fisher No. ‘A642 0 equivalente), impiar el poo, 9 con otto ‘materiel no coloreado. Lavar con agua. Limpiar otros electrodes como ol fabricate Io indica. No es rnecesariolimpiar la plata con AgCl (0) Titulscién por método automético. Con un petenciométro automatico se dispensa la solucién Valorada y se hace la determinacién en mV (Fisher Scientife Co. Tiralyzer o Tirimeter 0 equivalentes) (6) Titulacién por méfodo manual, Polenciémetro, Dreferentemente de lectura de tbo digital directa, con divisions de le escala < 10 mV y el rango > + 700 mV. El uso de agtador magnético operando a una velocidad constant, Cc. Reactives (3) Perfas de ebuticisn, SiC, Carborundum Co., No. 12, grinulos Hengar No. 1388 (HengarCo, 6825 Greenway Ave, Philedelphia, PA 19142), 0 eauivalente (©) Soluciones esténdar de nirato de plata. ~(1) Para ‘metodo automatizado. -0.01N. Proparar ia solucién madre 0.4 N clsohiendo 16.99 g de AgNO3 en H20 y diluir hasta 260 ml en un matvaz velumético. Tomar 25 mL. de solucién madre y leverla a 1. (2) como lo festablece en el manual de procedimiento 0.05 N. Disolver 8.50 g de AgNO3 en H20 y dir a tL con 20 en el matrae aforedo. Solucién Estandar como en 980.25D. Las soluciones son estables sige almacena en frascas Pyrex a la luz ambiental, pero fuera de la luz directa del Sl. (6) Solucion estindar de clruro de sooio ~ (1) Para ‘método automatizado, -0.01N. Seoar NaCi2 8 110" Praparar la solucién madre a 0.4 N disolviendo 8.8 {@-de NaCl en H20 y dil @ 260 mL en un matraz sforado. (@) Agua, — Destiada 0 desionizada, libre de halégenos, siguiendo la prueba: Agregar 2 mL de AQNOS 0.05 Ny 5 mi HNOS (1 + 4) (0 volumenes ‘equivalentes 2 estas concentraciones) en 100 ml. de H20 se produce no més que una igera turbidez D.estandarlzacién (2) Método autematico, -Pipetear 10 ml de NaCl 0.01 N ‘98 un vaso de ttulacién, div con 100 mL de H20, y ‘aftacir § ml HNOS (| + 98). Insert los electrodes y se valora de forma manual con solucién AgNO3 O.O1N, ‘ajustanda inctementos eon las cambio de volsle para ‘obtener una medida exacta de mV contra, AgNO3 aftadide y recén preparedo. Anas un volumen total 6& 20 mL. pera la curva completa. Determinar ! punto de Infexién etujanda 2 tneas rectas con 45° de pendterte con respecto @ los eles y tangentes a la curva de ‘ulacién, en los 2 puntos mayores de la cura. El purto de inlenén esta en la intersoccién de la curva do ‘Holasion con Ia tinea paralola a la ita enie, los tras 2iineas, Con el velunen ulileada de AgNOS, cleule la Normalidac. Vice mv del punto de inflexion come punto final en las muestras gradualmente en ta ttuscsn. Prepare una nueva curva de. valoracion cuando 6° Feomplace cualquier eleciodo o instrumento (8) Metogo manual. Pipetear 10 mL. de NeCi 0.1N en un matraz de 250 mL, cir aproximadiamente con 100 mL. do H20, y afaat’§ mL de HNOS {I + 4). Insert los electrodes, iicle ef agtador magnétice, y age todo a velocided constante produclendo agtacién vigorosa sin Saboar. Valorar con estindar 2 ANOS 005 \N, ‘ajustando incrementos a un yolumen total de 40 mL Continuar como en (a) E.Determinacion (Omir calefeccién si la musstia se cisuelve o se disperse completamente a temperatura ambiente (2), Método automatizado =. Pesar con precsién ‘Spfoximadamente 1.0 g de, muestra (user menos si et ‘contenido de NaCl es > 5% por lo que el volumen de tiuacion es <10 mL) y transferia a un vaso do preciptedes de 250 mL. Afacit varias "paris de ‘bulleién y 100 ml de H2O. Cubrk eon vidio de reo] y ‘delet henir suavemente 30 minutos en una pala ‘calente, Retver y enfier @ temperatura ambiente. Dikit hasta 100 mL en un matraz volumtic. Pipetear 10 mL. ‘en el vaso de tiulacin, dur hasta aproxmadaments 100 mL con H20, y afar § mL de HNO3 (1 + 89). (Por ‘tra parte, pesar $0.1 g de la muestra directamente sin lui sila precision da la dotermingcién es ealstactoria Insentar electrodos y valorar en modo aulomalico eon ‘AgNO O.AIN al punt final predeterminado. S@-NaCl = mL de AgNOS x Normallded del AgNOS 5.84dig muesta