Informe de laboratorio,22 de marzo-diciembre de 2023.

BIOLOGIA APLICADA LABORATORIO

Informe de laboratorio

Componentes del protoplasma

Protoplasm components
Laura Daniela Arrieta Caro, Laura Vanessa Jiménez Flores, Claudia Esperanza Mosquera
Morales, Valeria Sofia Pérez García, Kenther Augusto Salas Córdova

Laboratorio de microbiología, facultad de ingeniería y cencías exactas, universidad de Cartagena, Cartagena,

Colombia.

Resumen
En este laboratorio se estudiarán los dos primeros niveles de
Citación: estudiar los dos niveles de
complejidad estructural de algunas
complejidad estructural de algunas biomoléculas, se consultaron las
biomoléculas, Marzo de 2023. características físico-químicas para poder comprender los resultados
Correspondencia: de los ensayos de estas.
Laura Daniela Arrieta caro Las principales biomoléculas son los carbohidratos, las proteínas, los
Laura Vanessa Jiménez Flórez lípidos, los aminoácidos, las enzimas y los ácidos nucleicos. Los
Claudia Esperanza Mosquera Morales carbohidratos cumplen funciones muy específicas dentro de la célula,
Valeria Sofia Pérez García así como los lípidos los cuales son sustancias orgánicas solubles y las
Kenther Augusto Salas Córdova proteínas al ser sustancias complejas que forman dispersiones
coloidales. Conocer las diferentes biomoléculas garantiza buenos
Recibido: Marzode 2022 resultados.
Palabras claves: Carbohidratos, Proteínas, Reactivos, Lípidos
Abstract
In this laboratory, the first two levels of structural complexity of some biomolecules
will be studied, the physical-chemical characteristics were consulted in order to
understand the results of their tests.
The main biomolecules are carbohydrates, proteins, lipids, amino acids, enzymes,
and nucleic acids. Carbohydrates fulfill very specific functions within the cell, as well
as lipids, which are soluble organic substances, and proteins, as they are complex
substances that form colloidal dispersions. Knowing the different biomolecules
guarantees good results.
Keywords: Carbohydrates, Proteins, Reagents, Lipids

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Introducción
Las biomoléculas o moléculas biológicas son todas aquellas
moléculas propias de los seres vivos, ya sea como producto de sus
funciones biológicas o como constituyente de sus cuerpos. Se
presentan en un enorme y variado rango de tamaños, formas y
funciones. Las principales biomoléculas son los carbohidratos, las
proteínas, los lípidos, los aminoácidos, las enzimas y los ácidos
nucleicos. Para la identificación de los componentes del protoplasma
celular, de manera cualitativa es necesaria la utilización de reactivos
que nos permiten determinar la presencia y/o cantidad del
componente protoplasmático en estudio. Ciertos conceptos de
solución fueron imprescindibles al momento de desarrollar la
práctica, ejemplo de esto fue en la determinación de carbohidratos
atreves del reactivo de Benedict, los lípidos a partir del Sudan III
como compuesto liposoluble y finalmente las proteínas a través de
unas mezclas de soluciones que permitían precipitado y
solubilizarían.

Materiales y métodos
Materiales
1. Tubos de ensayos
2. Pipetas Beaker
3. Goteros
4. Gradillas para tubos de ensayos
5. Mechero de alcohol
6. Pinzas
7. Reactivo de Benedict
8. Solución de glucosa
9. Fruta madura
10. Macerado de pan
11. Lugol
12. Huevo
13. Suero fisiológico
14. Hidróxido de sodio
15. Sulfato de cobre
16. Aceite vegetal
17. Grasa animal
18. Sudan III o IV
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19. Baño de maría

20. Agua destilada
21. Papel filtro
22. Anhídrido acético
23. Cloroformo
Método de investigación
Determinación de carbohidratos
Monosacáridos:
 Se agregan 5ml de reactivo de Benedict en un tubo de ensayo, y se
calienta hasta llegar a la ebullición. No debe cambiar de color
 Adiciona al mismo tubo 1 ml de una solución glucosa y se calienta hasta
ebullición. Si aparece una turbidez verde, indica de 0,1 a 0.3 % de azúcar
reductor y un precipitado de rojo naranja o un rojo ladrillo, indica que la
concentración de azúcar supera el 5 ml %.
 Macere un trozo de fruta madura y adiciónela a un tubo de ensayo que
contiene 5 ml de activo de Benedict y caliente hasta ebullición.
Polisacáridos:
 Realice una suspensión acuosa de almidón y se vacíe en un tubo de
ensayo de 2ml de ella
 Adicione a la anterior solución dos gotas de Lugol. ¿Qué observa?
Caliente hasta ebullición esta solución alrededor de 2 min ¿Qué logra
apreciar? El tubo de ensayo déjelo en reposo hasta que logre
enfriarse ¿Qué sucede?
 Deposite dos gotas de Lugol en una solución acuosa de un macerado
de pan ¿Qué se logra observar?

Proteínas:
 Disuelva la clara de huevo en 50 ml de suero fisiológico o en agua.
 A 1ml de la anterior solución se agregan 2 gotas de sulfato de cobre
al 0.5% y 1ml de hidróxido de sodio al 10%.
 Coloque 2ml de solución de gelatina sin sabor, en un tubo de
ensayo, y proceda como en el anterior caso, 2 gotas de sulfato de
cobre al 0.5% y 1ml de hidróxido de sodio al 10%.
Lípidos:
 En un tubo de ensayo coloque 3 ml de agua. Agregue una pizca de
sudan III y agite
 En este mismo tubo adicione aceite vegetal, agite nuevamente y
deje en reposo.
 Coloque en otro tubo de ensayo 2ml de grasa animal y pizca de
sudan III. Si la grasa esta solidificada, calentar un poco para así
derretirla y agite.
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Reacción de Lieberman burchard para colesterol:

 Disuelva una parte de la yema de huevo en 10 ml de cloroformo. –
 Tome 1 ml de la solución clorofórmica y lo coloca en un tubo de
ensayo limpio y seco.
 Agregue 1 ml de anhídrido acético
 Adicione 3 o 4 gotas de Ácido sulfúrico concentrado - Agite
suavemente y observe el cambio
Resultados
Proteínas: Para este procedimiento se buscaba saber si la clara de huevo era
una fuente de proteínas, una vez realizados los pasos, la muestra se tornó de
un color morado lo cual significaba que era una reacción positiva y
efectivamente alta en proteínas. En caso de la gelatina sin sabor, esta también
se tornó de color violeta, lo cual significo fuente de proteínas.
Carbohidratos: En la muestra de monosacáridos, la cual se utilizó almidón y
Lugol, la azúcar reductora pasa del 1.5, y en los polisacáridos si la muestra
se torna de un color morado es una reacción positiva en los carbohidratos
para los polisacáridos.
Lípidos: Se realizaron dos muestras cada una con sudán, una con agua, aceite
vegetal y otra con grasa animal. En la primera muestra se pudo observar que
el sudan se separó del aceite gracias al efecto del agua, en cambio con la
grasa animal se mezclaron. Para los lípidos se determinó que la reacción fue
positiva, porque la muestra se tornó de un color verde, lo cual en las
reacciones esto es positivo para colesterol.

Imagen 1. (resultado de
proteínas)

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Imagen 2. ( resultado de carbohidratos)

Imagen 3. (resultado de los lípidos)

Discusión
En las muestras que se realizaron se pudieron observar que los alimentos al
exponerse a diferentes reactivos y procedimientos se convierten en
reacciones positivas que determinan el grado de colesterol, proteína,
diferencia de densidad y azúcares. Esto fue posible gracias a los cambios
químicos que ocurrieron en estos. Las diferentes reacciones como la de biuret
indican el grado de proteína dependiendo de su color, y si es muy violeta es
fuerte en proteína. Al igual que está y otras reacciones permiten reconocer
los cambios en las muestras. Procesos que fueron asignados como los ácidos
nucleídos y enzimas, no se realizaron debido a fallas técnicas. Al momento
de realizar la práctica de enzimas, hubo un fallo al añadir la saliva, ya que
era necesario que las muestras de lugol estuvieran ordenadas en serie y no
fueron colocadas de esa manera, por lo que al final no se llevo a cabo este
experimento.
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Conclusiones
En este informe se logró identificar que el protoplasma es la sustancia viva
que se encuentra en el interior de las células, y se compone de diferentes
componentes que desempeñan funciones específicas y esenciales para la
supervivencia de la célula. Los componentes del protoplasma incluyen el
citoplasma, el núcleo y las organelas celulares. En conjunto, los
componentes del protoplasma son esenciales para mantener la vida celular,
ya que trabajan juntos para llevar a cabo las funciones necesarias para la
supervivencia y el crecimiento de la célula. Cualquier disfunción en alguno
de estos componentes puede tener efectos perjudiciales en la salud celular
y, en última instancia, en la salud del organismo. Por lo tanto, es crucial
entender la función y la interacción de los componentes del protoplasma
para comprender mejor cómo funcionan las células y cómo se pueden tratar
las enfermedades que pueden surgir como resultado de su disfunción.

Agradecimientos
A Valeria Pérez y Laura Arrieta por la realización en la determinación de
carbohidratos en los polisacáridos , a Laura Jiménez y Claudia Morales, en
los monosacáridos, a Kenther Salas por su apoyo en el proceso de
recolección de información. A cada integrante por su ayuda en la limpieza
de las muestras para la identificación.

Referencias

 https://es.wikipedia.org/wiki/Az%C3%BAcar_reductor
 https://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_de_Benedict
 https://www.quimica.es/enciclopedia/Lugol.html
 https://www.quimica.es/enciclopedia/Biuret.html
 https://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_xantoproteica
 https://es.wikipedia.org/wiki/Sud%C3%A1n_III
 https://es.wikipedia.org/wiki/Levadura

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Revista de la Academia Colombiana de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Riqueza de insectos con dos métodos de recolección

Cuestionario.
1. ¿Qué Es un azúcar reductor?
Un azúcar natural o carbohidrato que contiene un grupo aldehído o
cetona libre. Pueden reaccionar con otras partes de la comida para
cambiar el color o el sabor de ésta.
REDUCTORES: • Glucosa • Fructosa • Galactosa • Maltosa
NO REDUCTORES: • Sacarosa • Polisacáridos • Tercer tipo de
disacáridos

2. ¿Cuáles son los componentes del reactivo de Benedict?

• Sulfato de cobre pentahidratado (CuSO4.5H20)
• Carbonato de Sodio (Na2CO3)
• Citrato trisódico (Na3C6H5O7)
• Agua destilada

3. ¿Qué reacción se produce cuando se calienta el tubo de ensayo que

contiene el reactivo de Benedict y glucosa?
Se presenta un precipitado de color rojo ladrillo o anaranjado, dando
resultado positivo a la evidencia de azúcar reductor.

4. ¿Cuál es la naturaleza del precipitado de color rojo ladrillo que se

forma en la anterior reacción?
La naturaleza de esta reacción radica en que, en un medio alcalino, el
ión cúprico es capaza de reducirse por efecto del grupo aldehído del
azúcar (-CHO) a su forma de CU+. El color rojo ladrillo es
correspondiente al óxido cuproso.

5. ¿Cuál es la composición química del Lugol?

Consiste en 5g de I2 y 10 g de Kl diluidos con 85 ml de agua destilada,

dando una disolución marrón con concentración total de yodo de 150
mg/ml.

6. ¿A qué se debe la desaparición de color azul violáceo de la

solución de almidón cuando se calienta hasta ebullición?
El color azul desaparece momentáneamente ya que al calentarse la
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solución, el complejo de yodo con almidón que se formó en frío, se

desnaturaliza.

7. ¿Por qué aparece nuevamente el color cuando la anterior solución

se enfría?
El proceso de formación del complejo colorido es reversible, por lo que
al enfriarse la solución, se vuelve a estabilizar y se observa como
reaparición del color azul.

8. ¿En qué consiste la reacción del biuret?

Se caracteriza por un color violeta tras la adición de sulfato de cobre a

todos los componentes que tengan dos enlaces peptídicos unidos
directamente o a través de un átomo de carbono intermedio. Se usa en
la detección y estimación de las proteínas y péptidos que tienen más de
dos aminoácidos.

9. ¿En qué consiste la reacción xantoproteica?

Es un método que se puede utilizar para determinar la presencia de

proteínas solubles en una solución, empleando ácido nítrico
concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con
aminoácidos portadores de grupos aromáticos, especialmente en
presencia de tirosina. Una vez realizada la prueba se neutraliza con un
álcali, se torna color amarillo oscuro.

10. ¿Qué es el sudan III?

Es un tinte diazoo del tipo liso cromo (tinte soluble en grasa) usado
para marcar triglicéridos en secciones congeladas, algunos lípidos y
lipoproteínas encuadernados de la proteína en secciones de la parafina.
Tiene el aspecto de cristales rojizos y una absorción máxima en 507
(304) nanómetros

11. ¿A qué se debe la aparición de color cuando al extracto de rábano

se le adiciona solución acética de bencidina y agua oxigenada?
Esta aparición se debe a que la solución acética de bencidina y el agua
oxigenada son agentes oxidantes y estas hacen perceptibles a las
enzimas en el rábano haciendo que este color sea posible.

12. ¿Por qué no aparece color cuando al extracto de rábano calentado

hasta ebullición se le añade solución acética de bencidina y agua
oxigenada?
Esto pasa porque las enzimas al ser alteradas debido a la calidez
muestran inmovilidad a medida que ésta aumenta su temperatura.
Revista de la Academia Colombiana de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Riqueza de insectos con dos métodos de recolección

13. ¿Por qué es necesario incluir en el experimento de ácidos nucleicos

un tubo con agua?
Porque el agua estabiliza la estructura tridimensional de los ácidos
nucleicos. Las moléculas de DNA se unen a una cantidad significativa
de moléculas de H2O.

14. ¿Considera que las levaduras contienen más RNA que DNA?
Sí, porque El ARN ribosomal de las levaduras se encuentra codificado
por 120 secuencias repetitivas en tándem en el cromosoma, en tanto
que existen 262 genes que codifican para ARN de transferencia, 80 de
los cuales poseen intrones. A demás todas las levaduras contienen
virus de ARN de doble cadena presentes como elementos virales
endógenos que constituyen el 0.1% del genoma y codifican para
generar las toxinas defensivas.

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