el “Año de la unidad, la paz y el desarrollo” Con

Profesor: Julio Ivan Cruz Colque

Alumna: Tania Rosmery Perez Aroni
Código: 212165
Grupo: C

ABANCAY-2023
 PRACTICA

CARACTERISTICAS CULTURALES DE LAS COLONIAS BACTERIANAS

I. INTRODUCCION

Las colonias bacterianas son organismos extremadamente pequeños, que sólo

miden algunos micrómetros de tamaño y pueden ser observadas de manera
macroscópica. Estas poblaciones de células parten de una sóla célula y crecen en
un medio sólido, para cuantificarlas, existe un equipo contador de colonias
bacterianas. En los laboratorios de microbiología, química, biología, bioquímica y
farmacéuticos, un equipo contador de colonias bacterianas se utiliza con más
frecuencia, ya que entrega un conteo rápido, preciso y confiable, además de realizar
estas funciones sin dañar la muestra.

El contador de colonias bacterianas permite visualizar estos objetivos sin la

necesidad de un fondo oscuro o de una luz brillante y continua. Este equipo es
mayormente utilizado en procesos como el tratamiento de aguas residuales o de la
red domiciliaria, en la fabricación de alimentos y bebidas, en laboratorios clínicos o
universitarios y en la industria farmacéutica y cosmetológica.

En la naturaleza, los microorganismos se encuentran formando poblaciones mixtas

con otros tipos de microorganismos. Los cultivos de estas mezclas se llaman por
ello cultivos mixtos. Sin embargo, el conocimiento de los microorganismos se
consigue mediante el estudio de cepas aisladas, cultivadas en el laboratorio en
cultivos puros (o axénicos). En ocasiones el estudio molecular conduce a la
caracterización de los microorganismos, aún en poblaciones mixtas. Sin embargo,
la identificación bacteriana y la caracterización completa solo es posible tras el
aislamiento de la bacteria y la obtención de cultivos puros. Por ello el primer
problema al estudiar una bacteria es su aislamiento del resto de los
microorganismos presentes (en una muestra patológica, de agua, de suelo, de
alimentos, etc.). Una vez que se ha logrado el aislamiento es posible obtener la
bacteria de interés en cultivo puro.

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Estos contadores se utilizan para lograr observar microorganismos presentes en un
cultivo líquido, para ello, se debe lograr la dilución precisa de la muestra que se va
a analizar. Una vez lograda la dilución, esta se debe propagar de manera estéril en
una placa, en la cual se realizará el cultivo de las bacterias en la muestra para luego
ser observadas y analizadas.

Existen contadores de colonias bacterianas automáticos y manuales, pero ambos

están compuestos, de manera básica, de una lupa, un contador y una bandeja de
muestras. El más utilizado y moderno es el contador automático, el cual disminuye
la carga laboral del equipo de trabajo del laboratorio, mejora su eficacia y entrega
resultados precisos. Adicional a las partes ya mencionadas del contador de colonias
bacterianas automático, estos equipos poseen una pantalla LED para la
visualización de parámetros y resultados, una fuente de luz, la cual se puede ajustar
a las necesidades de cada muestra a trabajar y finalmente un botón contador, el
cual se presiona para el conteo y cuyo valor es reflejado en la pantalla.

II. OBJETIVOS
- Se determina la importancia del aislamiento de microorganismos en
diferentes ambientes como agua, tierra y aire con el principal fin de pasar de
tener una población de microorganismos que se sabe habitan en dichos
medios, pero son imposibles de observar e identificar, a tener un cultivo que
si lo permita.
- Cada colonia bacteriana tiene unas características determinadas en cuanto
a su forma, borde, elevación, tamaño, consistencia, etc. Los tipos de
bacterias presentes en la muestra original es visible como tipos diferentes de
colonias.
- La identificación de una bacteria sospechosa de ser la causa de una infección
es uno de los instrumentos principales del diagnóstico de enfermedades
infecciosas, ya que el conocimiento de éste nos lleva a saber con lo que se
enfrenta el paciente, y saber de qué armas se dispone para ayudar a combatir
la enfermedad.

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 - De cualquier forma, la verificación de las diferentes formas, tamaños y
aspectos de las colonias va a servir como: Un dato más en la tipificación de
la bacteria problema. Una medida de control para una siembra correcta.
- La forma de la colonia puede ser circular (Staphylococcus), irregular o
filamentosa (Bacillus). Los bordes pueden ser ondulados (característicos de
los bacilos largos como Bacillus anthracis), en sierra o dentados (Yersinia
pestis) o lisos (por ejemplo, Proteus vulgaris o Escherichia coli).
- Una colonia celular es un grupo de células con similares características, que
actúan en conjunto, con la particularidad de no formar una unidad estructural
mayor o tejido. La colonia de bacterias puede variar según el método de
cultivo que se elija.
- Caracterización microbiana mediante diversas aproximaciones. Comprende
el estudio de la morfología colonial de la cepa (homogeneidad, tamaño,
forma, color, opacidad y textura de las colonias) y su observación al
microscopio (forma y tamaño celular, movilidad, etc.).
- El instrumento usado para medir la turbiedad es un espectrofotómetro
(colorímetro). En el espectrofotómetro, un haz de luz es transmitido a través
de la suspensión bacteriana a un detector sensible a la luz. Mientras
incremente el número de bacterias, menor será la luz captada por el detector.

III. MARCO TEÓRICO

3.1. Una colonia

Es una agrupación de bacterias formada a partir de la reproducción de:

 una Unidad Formadora de Colonia (UFC) sobre un medio sólido

 aunque varía de tamaño
 generalmente es visible a simple vista.

Una UFC puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de microorganismos

de una misma especie como en el caso de bacterias que tienen tendencia a
permanecer unidas como los estafilococos o los estreptococos.

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  Las colonias bacterianas tienen una medida, forma, textura y en algunos
casos color característicos
- Que, aunque puede variar de acuerdo al medio en que se encuentren, es
constante bajo condiciones controladas y depende de la especie bacteriana
que la forme.
- Debido a que las características de las colonias ocurren en varios grados y
combinaciones dependiendo de las bacterias y son a menudo muy uniformes
- Sirven para identificar bacterias en cultivos mezclados.
- Sin embargo, además de éstas características se requiere también estudiar
la fisiología y propiedades inmunológicas de las bacterias para poder realizar
una identificación completa.
- La morfología colonial es comparable a una estadística ya que se deriva de
una célula individual
- Pero es la característica de la masa celular. Así pues, por ejemplo
- la pigmentación es aparente en la colonia, pero no en la célula individual
- en el caso de la consistencia mucosa de algunas colonias esta se deriva de
la sustancia capsular en aquellas bacterias con cápsula muy grande.

IV. MATERIALES DE PRACTICA

PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

MEDIOS DE CULTIVO

Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros

componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metabólica de estos es tan grande que la variedad
de medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal
adecuado para todos ellos, ni siquiera refiriéndonos a las bacterias con exclusividad.

CONSTITUYENES HABITUALES DE LOS MEDIOS DE

CULTIVO

A continuación, se da una idea general sobre algunos de los constituyentes

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habituales de los medios de cultivo.

AGAR. Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo.
En el agar bacteriológico el componente dominante es un polisacárido que se
obtiene de ciertas algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que, a
excepción de algunos microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente. Un
gel de agar al 1-2% se licua alrededor de los 100ºC y se gelifica alrededor de los
40ºC, dependiendo de su grado de pureza.

EXTRACTOS. Su preparación consiste en que ciertos órganos o tejidos animales o

vegetales ( carne, hígado, cerebro, semillas, etc.) son extraídos con agua y calor y
posteriormente concentrados hasta la forma final de pasta o polvo. Estos
preparados deshidratados son a menudo empleados en la elaboración de los
medios de cultivo. Los más utilizados son el extracto de carne, de levadura y el de
malta.

PEPTONAS. Son mezclas complejas de compuestos orgánicos, nitrogenados y

sales minerales, que se obtienen por digestión enzimática o química de proteínas
animales o vegetales (soja caseína carne, etc.). Las peptonas son muy ricas en
pépticos y aminoácidos, pero pueden ser deficientes en determinadas vitaminas y
sales minerales.

FLUIDOS CORPORALES. Con frecuencia es necesario añadir a los medios de

cultivo de algunas patógenas sustancias como sangre completa, sangre
desfibrinada, plasma o suero sanguíneo, sobre todo para conseguir el primer
aislamiento a partir del hospedador. La sangre no puede ser esterilizada, y por tanto
debe de ser obtenida en condiciones asépticas directamente de un animal sano, y
adicionada al medio de cultivo después de que este haya sido auto clavado. Los
fluidos corporales no solo aportan factores de crecimiento, sino que también aportan
sustancias que neutralizan a inhibidores del crecimiento de algunas bacterias. Un
ejemplo podría ser la catalasa presente en las células sanguíneas destruye el
peróxido de hidrógeno que algunas bacterias que no poseen este enzima acumulan

como producto del metabolismo del oxígeno.

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SISTEMAS AMORTIGUADORES. Para mantener el pH dentro del rango optimo del
crecimiento bacteriano a veces, es necesario añadir algunos componentes al medio
de cultivo. Debido a que la mayoría de asbacterias son neutrófilos, se suelen
emplear sales del tipo de los fosfatos bisodicos ò bipotásicos u otras sustancias
como las peptonas para prevenir la desviación del pH.

INDICADORES DE PH. Con el objeto de poder detectar variaciones en el pH debido

a fermentaciones u otros procesos, se hace necesario a veces añadir indicadores
acido-base que nos lo indiquen.

AGENTES REDUCTORES. Con el objetivo de crear en los medios de cultivo

condiciones que permitan el desarrollo de los gérmenes microaerofilos ò anaerobios
se añaden estos agentes reductores siendo, los más empleados la cisteína y el
tioglicolato entre otros.

AGENTES SELECTIVOS. La adición de determinadas sustancias a un medio de

cultivo puede convertirlo en selectivo. Así, por ejemplo, la adición de cristal violeta,
sales biliares, azida sódica, telurito potásico, antibióticos, etc., a la concentración
adecuada hará que actúen como agentes selectivos frene a determinados
microorganismos.

V. PROCEDIMIENTO

Las bacterias son organismos unicelulares. Existen muchos tipos de bacterias.

Viven en todo el cuerpo y la piel. Algunos tipos de bacterias son inofensivos e incluso
beneficiosos. Otros causan infecciones y enfermedades. Una prueba de cultivo de
bacterias puede detectar bacterias perjudiciales dentro o sobre el cuerpo que
pueden estar causando enfermedades. Para hacer la prueba, necesitará entregar
una muestra de sangre, orina, piel u otro tejido. El tipo de muestra depende de
dónde parece estar localizada la infección.

Para detectar qué tipo de bacteria puede tener, un profesional de la salud examinará
un gran número de células bacterianas. Para esto, su muestra se enviará a un
laboratorio donde se cultivará hasta que haya suficientes bacterias para la prueba.
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En general, los resultados están listos en pocos días. Sin embargo, algunos tipos
de bacterias se reproducen lentamente, por lo que sus resultados pueden tardar
varios días o más.

Primero se colocó una gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio, se tomó

un asa de siembra y se flameó, con esta se tomó una pequeña cantidad del cultivo
de pseudomona y se colocó en el portaobjetos mezclándolo con el agua. Entonces
con la ayuda de otro portaobjetos limpio de realizó el frotis. Lo que queda de agua
en portaobjetos 1 se pasa por la vela para que se fijen los microorganismos.

Una vez se hizo esto, se colocó una gota de safranina en el portaobjetos y se dejó
reposar por 3 minutos. Entonces se lavó el portaobjetos para eliminar el exceso de
colorante. Y ya se pudo ver manchitas rojas en el portaobjetos entonces ya se
procedió a observar por el microscopio.

Se realizó la misma operación con el cultivo líquido de la klebsiella.

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Consiste en realizar diluciones seriadas 1:10 y extender 0.1 mL de cada dilución en
una placa; las placas se incuban hasta que las colonias son apreciables para su
recuento. Cuando se desea cuantificar el número de bacterias presentes en
múltiples muestras, los procedimientos de rutina suelen consumir mucho tiempo. En
ese periodo las muestras podrían sufrir modificaciones en su población.

La cuantificación de microorganismos es un elemento crítico en los estudios de

ecología microbiana y microbiología clínica. No solo es importante conocer al
responsable de un efecto benéfico o identificar al microorganismo potencial de
causar alguna infección severa, sino también es importante saber el número de
microorganismos implicados, para establecer si éstos serán capaces de desarrollar
una función benéfica o perjudicial

El área microbiológica forma parte de las actividades cotidianas, diariamente los

microorganismos los encontramos participando de manera benéfica y perjudicial,
desarrollando diferentes papeles. En el área biológica, una de las tareas es el
aislamiento y la identificación. Dependiendo del tipo de muestra y análisis es
necesario conocer el número de unidades formadoras de colonias (UFC) presentes,
este número es tomado en cuenta para cumplir los estándares establecidos bajo
normatividad en el área de los alimentos, en el área de salud, análisis de agua, aire
y suelo entre otros. Para estos análisis los expertos de estas áreas realizan conteos
manuales o muy rudimentarios que consumen grandes cantidades de tiempo con
resultados que varían según quien realice el conteo.

Este trabajo de investigación se ha planteado para el área de los alimentos debido

a que, a pesar de ser una fuente de nutrientes, a menudo constituyen un medio de
cultivo ideal para la multiplicación microbiana. Desde el punto de vista sanitario, los
alimentos pueden ser vehículos de infecciones o de intoxicaciones graves,
provocando las Enfermedades Transmitidas por los Alimentos (ETA) que
constituyen un gran problema de salud pública.

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De acuerdo a la importancia de estos microorganismos causantes de importantes
ETA, los laboratorios se ven en la necesidad de aplicar distintas técnicas para el
aislamiento y conteo de microorganismos presentes en los alimentos, sin embargo,
para la identificación se tienen que realizar pruebas con múltiples muestras, estos
procedimientos de rutina suelen consumir mucho tiempo y reactivos ya que para la
identificación los microorganismos se deben sembrar en varios medios de cultivo
para distinguir la bacteria de interés y realizarse por duplicado o triplicado para
obtener una mayor confiabilidad en los resultados.

En este trabajo se propone un simulador de colonias de bacterias con el fin de

controlar algunos parámetros que afectan al crecimiento de las bacterias, para así
generar imágenes de muestras controladas y realizar pruebas utilizando una
aplicación móvil para automatizar la cuantificación de colonias de bacterias en
placas de cultivo mediante un sistema de visión por computadora, en el que se
recorta la imagen, se convierte a escala de grises, se mejora el contraste y se
segmenta la imagen para poder realizar el conteo.

VI. RESULTADOS

El tamaño de las colonias bacterianas es generalmente uniforme entre una misma

especie. Por ejemplo, las colonias de estreptococos tienen un tamaño más pequeño
que las de los estafilococos y las entero bacterias. La forma está determinada por
los bordes y el grosor de la colonia.

La interpretación de un antibiograma es la categorización clínica del

microorganismo en SENSIBLE, INTERMEDIO (SENSIBLE CUANDO SE
INCREMENTA LA EXPOSICIÓN) o RESISTENTE. Ésta nos va a informar de las
posibilidades de éxito terapéutico con el antimicrobiano utilizado en su dosis habitual
o incrementada.

Un recuento bacteriano mayor de 100.000 UFC (unidades formadoras de colonias)

/ml, acompañado de respuesta inflamatoria, es indicativo de infección urinaria. En

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general, la contaminación por microbiota uretral debido a una mala recogida de la
muestra, se correlaciona con un recuento menor de 100.000 UFC/ml.

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VII. CONCLUCIONES

- Las bacterias son muy importantes para el ser humano, tanto para bien
como para mal, debido a sus efectos químicos y al rol que juegan en
dispersar enfermedades. En su efecto beneficioso, algunas bacterias
producen antibióticos, como estreptomicina, que es capaz de curar
enfermedades.
- Colonia de bacterias: Conjunto de bacterias de la misma especie que se
acumulan de forma característica cuando encuentran recursos favorables
para su reproducción. Pueden distinguirse las especies (entre otras
características); por la forma, tamaño, color de estas colonias.
- De cualquier forma, la verificación de las diferentes formas, tamaños y
aspectos de las colonias va a servir como: Un dato más en la tipificación
de la bacteria problema. Una medida de control para una siembra correcta.
- Es una técnica de estimación estadística basada en el hecho que, a mayor
número de bacterias en una muestra, mayor será la dilución necesitada
para reducir la densidad hasta el punto en que ninguna bacteria se le
permita crecer en la serie de tubos de dilución.
- La variedad de especies y tipos diferenciables por sus necesidades
nutricionales, temperatura requerida para su crecimiento, oxígeno
disponible, etc., hacen que el número de colonias contadas constituyan una

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 estimación de la cifra realmente presente y la misma refleja si el manejo
sanitario del producto

VIII. BIBLIOGRAFIA

Brajovic, F. (2021, March 8). Colonias Bacterianas: Así se cuentan en el

laboratorio - Cromtek. Cromtek. https://www.cromtek.cl/2021/03/08/colonias-
bacterianas-asi-se-cuentan-en-el-
laboratorio/#:~:text=Las%20colonias%20bacterianas%20son%20organismos,eq
uipo%20contador%20de%20colonias%20bacterianas.

Anonimo. (2023). Www.ugr.es. https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iv/pb-iv-2-

introduccion.htm

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COLONIAS BACTERIANAS. (2018). Prezi.com.
https://prezi.com/xpqkpckvl0kg/colonias-bacterianas/

IX. ANEXOS

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