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Producción de biopolímeros polihidroxialcanoatos (PHA) a partir de residuos de

desechos industriales de manzana: una revisión

Hong Liu a, Vinay Kumar B, Linjing Jia C, Surendra Sarsaiya D, Deepak Kumar C, Ankita Juneja mi,
Zengqiang Zhang a, Raveendran Sindhu F, Parameswaran Binod F, Shashi Kant Bhatia gramo, Mukesh
Kumar Awasthi a,*
a Facultad de Recursos Naturales y Medio Ambiente, Universidad Northwest A&F, Yangling, provincia de Shaanxi, 712100, China
B Departamento de Biotecnología, Instituto Indio de Tecnología (IIT) Roorkee, Roorkee, 247667, Uttarakhand, India
C Departamento de Ingeniería Química, SUNY College of Environmental Science and Forestry, 402 Walters Hall, 1 Forestry Drive, Syracuse, NY, 13210, EE. UU.
D Laboratorio clave de farmacología básica y Laboratorio de investigación internacional conjunto de etnomedicina del Ministerio de Educación, Universidad Médica de Zunyi, Zunyi,
Guizhou, China
mi Departamento de Ingeniería Agrícola y Biológica, Universidad de Illinois en Urbana Champaign, 1304 W. Pennsylvania Avenue, Urbana, IL, 61801, EE. UU.
F División de Tecnología y Procesos Microbianos, CSIR-Instituto Nacional de Ciencia y Tecnología Interdisciplinarias (CSIR-NIIST), Thiruvananthapuram, Kerala,
695019, India
gramo Departamento de Ingeniería Biológica, Facultad de Ingeniería, Universidad Konkuk, Seúl, 05029, República de Corea

INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO ABSTRACTO

Editor de manejo: Derek Muir El orujo de manzana, el residuo que queda después del procesamiento de la manzana, sirve como una fuente potencial de
carbono para la producción de biopolímero, PHA (polihidroxialcanoatos). Es rico en carbohidratos, fibras y polifenoles. La
Palabras clave: utilización de estos recursos de desechos tiene un doble beneficio social: la gestión de desechos y la conversión de desechos
Biopolímero en un biopolímero ecológico. Esto reducirá la economía general del proceso. Una limitación importante para la
pulpa de manzana
comercialización de biopolímeros en comparación con los polímeros derivados del petróleo es el alto costo. Este artículo
Polihidroxialcanoatos
ofrece una visión general de la valorización del orujo de manzana para la producción de biopolímero, las diversas estrategias
Plásticos verdes
adoptadas, las limitaciones y las perspectivas de futuro.
Biodegradable

1. Introducción Los polihidroxialcanosatos (PHA) son un tipo de biopoliester macromolecular que

La creciente población y la industrialización han llevado a la sobreexplotación de los
recursos fósiles, que son de naturaleza limitada y no renovable. El aumento de la
demanda mundial y la disminución de los recursos fósiles han provocado un cambio de
paradigma hacia alternativas de recursos energéticos sostenibles. Los residuos
orgánicos de todo tipo de operaciones diarias, desde el hogar hasta el industrial,
terminan en vertederos, donde la descomposición de estos compuestos orgánicos
contribuye de manera significativa a las emisiones de gases de efecto invernadero. Estos
desechos orgánicos podrían utilizarse para la producción de bioproductos como
biocombustibles, bioquímicos y biopolímeros para un futuro sostenible. Actualmente, la
acumulación masiva de residuos plásticos petroquímicos ha provocado graves
problemas de contaminación plástica ("contaminación blanca" y contaminación
"microplástica"). El creciente agotamiento de los recursos fósiles, así como las
preocupaciones ambientales, llevan a la búsqueda de “plásticos verdes” biodegradables.
Esto servirá como una alternativa a los plásticos derivados de combustibles fósiles (Koller
y Braunegg, 2015).
existe ampliamente en el microorganismo y se utiliza principalmente como fuente
de carbono y acumulación de almacenamiento de energía en el organismo (Lee,
1996; Alias y Tan, 2005). Aunque el uso de PHA puede evitar eficazmente los
peligros ambientales causados por los plásticos petroquímicos, la participación
de mercado de PHA es todavía pequeña (Aeschelmann y Carus, 2015).
Sin embargo, su costo de producción, que es mucho más alto que el de
los plásticos convencionales, limita la aplicación a gran escala de PHA.
Actualmente, el precio de la producción comercial de PHA es tan alto como
€2,2–5,0 por kg, mientras que el precio del plástico de polipropileno es solo €1,0
por kg (Berwig et al., 2016; Ong et al., 2018). Los sustratos juegan un papel clave
en ser rentables, afectando hasta el 50% del costo final de los PHA (Choi y Lee,
1997; Bhatia et al., 2017). Esto significa que los ácidos grasos y azúcares delicados
deben reemplazarse con sustratos más baratos. Para producir PHA de bajo costo
a escala industrial, es necesario obtener una alta productividad y un alto
rendimiento total a partir de materiales baratos y ampliamente disponibles.

* Autor correspondiente. Facultad de Recursos Naturales y Medio Ambiente, Universidad Northwest A&F, Yangling, provincia de Shaanxi, 712100, PR China.
Dirección de correo electrónico: mukesh_awasthi45@yahoo.com (MK Awasthi).

https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2021.131427
Recibido el 1 de junio de 2021; Recibido en forma revisada el 27 de junio de 2021; Aceptado el 1 de julio de 2021
Disponible en línea el 2 de julio de 2021
0045-6535 / © 2021 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.
H. Liu y col.
materia prima de carbono. Por lo tanto, producir PHA a partir de desechos se ha convertido en
una estrategia prometedora para la producción industrial de PHA.
La industria de procesamiento de alimentos genera enormes
residuos orgánicos destinados al vertedero, lo que contribuye a varios
problemas ecológicos y ambientales. El procesamiento de manzanas
es una de esas industrias, donde el orujo de manzana (sobrante
después de la producción de jugo, sidra, vino o cualquier producto
principal de la manzana) representa más del 25% de la masa original
de fruta (Okoro y Shavandi, 2021). Según la Organización de las
Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO), la
producción de manzanas a nivel mundial en 2018 fue de 86,14
millones de toneladas (Bhatia et al., 2015; Duan y col., 2021(Dhillon et
al., 2013). Con compuestos valiosos como carbohidratos (48-83,8%),
pectina (3,5-14,32%), fibra (4,7-51,10%) y polifenoles en el orujo de
manzana, existe un interés creciente en la utilización eficaz de estos
biorresiduos (Zinn y col., 2001; Dionisi y col., 2005).
Esta revisión tiene como objetivo discutir los pasos que se están tomando a
nivel mundial a través de los organismos reguladores y rectores para impulsar la
agenda de la economía circular y la producción sostenible de biopolímeros (PHA),
energía y productos químicos utilizando recursos de desechos orgánicos. Esta
revisión destaca el progreso actual realizado para abordar la producción de
biopolímeros (PHA), una hoja de ruta viable para el futuro de las biorrefinerías de
residuos de desechos industriales de manzana al conciliar los avances técnicos
con los impulsores y desafíos del mercado.
2. Ventajas del biopolímero (PHA) sobre los plásticos sintéticos
El PHA tiene propiedades materiales similares a las de los plásticos
tradicionales a base de petróleo, pero puede sintetizarse a partir de recursos
renovables. El PHA tiene las características de biodegradable, biocompatible e
independiente de los recursos fósiles y puede degradarse por completo en el ciclo
ecológico de la naturaleza (Zinn y col., 2001; Jendrossek y Handrick, 2002; Israni et
al., 2020). El ciclo de degradación de los plásticos de embalaje tradicionales en la
superficie del suelo es de aproximadamente 1 a 2 siglos, mientras que la película
de acolchado de campo producida por PHA puede degradarse rápidamente en el
entorno del suelo rico en microbios, que tiene mayores ventajas ecológicas y
económicas (Jendrossek y Handrick, 2002; Gobi y Vadivelu, 2013). La evaluación
del ciclo de vida mostró que el PHA tiene grandes ventajas en términos de
desempeño ecológico en comparación con los plásticos tradicionales,
especialmente el uso de subproductos industriales y ecológicos como sustrato (
Narodoslawsky et al., 2015).
PHA se ha utilizado ampliamente en diversas aplicaciones. La buena
biocompatibilidad de PHA permite su uso en el campo médico. Puede
proporcionar un entorno para el crecimiento de una variedad de tejidos y
órganos, y no es cancerígeno. La mayoría de sus productos de degradación
existen en animales. Para el PHB más común, la concentración en sangre de su
producto de degradación 3HB es de 0,3 a 1,3 mmol / L (Zinn y col., 2001; Koller,
2018). Por lo tanto, los materiales PHA tienen un gran potencial como materiales
de implantes médicos, como suturas quirúrgicas, membranas antiadherentes y
varios stents utilizados en operaciones quirúrgicas, incluido el andamio de válvula
cardíaca y el stent vascular (Ray y Kalia, 2017; Sodian et al., 2000). En 2007, el hilo
de sutura absorbible (TephaFLEX®) El uso de P4HB como materia prima fue
aprobado por la FDA de EE. UU., convirtiéndose en el primer producto médico
PHA comercializado (Koller y col., 2010; Martins et al., 2020). El PHA también se
puede utilizar para cargar fármacos en forma de geles, microesferas,
microesferas, nanopartículas, andamios porosos y otros (Ueda y Tabata, 2003;
Nigmatullin et al., 2015). Se han utilizado P (3HB), P (3HB-co-3HV) y P (3Hb-
co-4Hb) para preparar micrones / nanopartículas para la carga de fármacos (
Nigmatullin et al., 2015). El PHA como portador degradable para la
liberación controlada y dirigida de fármacos y hormonas también ha atraído
cada vez más la atención de los investigadores (Bansal et al., 2011; Li et al.,
2018).
2
Chemosphere 284 (2021) 131427
3. Potencial de los residuos de desechos de manzana (orujo de manzana, etc.) para la
producción de PHA
Se han identificado varios desechos de la industria alimentaria, que contienen
almidón, celulosa, lípidos o proteínas, como materia prima para la bioproducción de
PHA. Dependiendo del componente predominante en la materia prima, las rutas de
conversión y los microorganismos se utilizan para maximizar la producción de PHA. Los
detalles fueron representados enFigura 1. La investigación anterior que utilizó varias
rutas para la producción de PHA a partir de diferentes componentes en los desechos de
alimentos se resume entabla 1 y se analiza en las subsecciones siguientes. El vino es una
de las bebidas más consumidas a nivel mundial. Durante el proceso de vinificación se
genera una gran cantidad de residuos sólidos, de los cuales el 60% es principalmente
orujo de uva, que está compuesto por una mezcla de piel y pepitas. Durante el proceso
de elaboración del vino se genera una gran cantidad de residuos sólidos, de los cuales el
60% es principalmente orujo de uva, que está compuesto por una mezcla de piel y
pepitas. Por lo general, estos orujos de uva se utilizan como alimento destilado, tintes
para teñir, vertederos o se venden como alimento para animales. Debido a que el orujo
de uva tiene una alta concentración de glucosa y fructosa, es un buen sustrato de
fermentación, por lo que ha atraído la atención de los investigadores (Pernicova et al.,
2019; Nanni y col., 2021). Follonier y col.
(2015) intentó utilizar el orujo de uva Solaris como una fuente de carbono de bajo
costo para producir PHA de cadena media. Utilizaron celulasa para sacarificar el
orujo de uva antes de la fermentación para obtener 106 g / L de monosacárido
para la fermentación posterior. UsaronPseudomonas resinatum para
fermentación discontinua, y el rendimiento final de MCL-PHA alcanzó 1,4 g / L con
una productividad volumétrica de 0,05 g / L / h. Con la ampliación del proceso de
2 pasos a 100 L, otra cepa,Pseudomonas putida KT2400, se investigó utilizando
azúcar residual extraído de orujo de uva Gewürztraminer como sustrato, y se
observó un mayor rendimiento y productividad volumétrica de 5,84 g / L y 0,10 g /
L / h, respectivamente (Follonier et al., 2015). Kovalcic y col. (2020)ensayaron la
producción de PHB utilizando el aceite de pepitas de uva y el extracto de azúcar
obtenido de orujo de uva sacarificado como fuente de carbono de C. necator H16
en un biorreactor de 2 L en condiciones de cultivo discontinuo. Con un tiempo de
cultivo de 29.5 h con 40 g / L de extracto de glucosa, el rendimiento final de PHB
fue de 5.2 g / L, con una productividad volumétrica de 0.176 g / Lh También
explicaron que el aceite de semilla de uva es similar a otros aceites usados y es
adecuado como sustrato para la producción de PHA, y su productividad
volumétrica puede alcanzar 0.117 g / Lh Además, el autor también propuso un
concepto de biorrefinación circular alrededor del orujo de uva, prediciendo que
una tonelada de orujo de uva tiene un potencial para producir alrededor de 42.7
kg de PHB, junto con otros subproductos valiosos, como los compuestos fenólicos
(Kovalcic et al., 2020). Martinez y col. (2016)propuso otra forma de producir PHA a
partir de residuos de uva. Utilizaron orujo de uva desfenolizado para producir
ácidos grasos volátiles a través de la digestión por acidogénesis anaeróbica, que
posteriormente se utilizó como sustrato para la fermentación (Bomrungnok et al.,
2020). Las últimas décadas han sido testigos de una gran demanda de
concentrado de jugo de manzana. Debido a la abrumadora demanda, las
industrias han mostrado su interés por la producción de jugo de manzana. Las
industrias del jugo de manzana producen una gran cantidad de desechos como
corrientes laterales (Chen y Lahaye, 2021). Se ha observado que solo se utiliza el
65-70% de la masa de la manzana mientras que el resto de la biomasa conocida
como orujo se considera desperdicio (Povolo et al., 2010; Rebocho et al., 2019). El
orujo constituye el corazón, las semillas y las cáscaras. El orujo no tiene usos
económicos excepto el uso como fertilizante orgánico o alimento para animales.
Pero se sabe que el orujo tiene altos contenidos de azúcares fermentables como
galactosa, glucosa, sacarosa, arabinosa y fructosa. En microbiología industrial, los
azúcares anteriores se utilizan como materia prima de carbono para producir
productos valiosos (Pratto et al., 2016; Gowman et al., 2019). En este contexto, el
orujo de manzana puede servir como materia prima de carbono más barata
designada como residuos agrícolas para la producción de bioplásticos
económicos conocidos como polihidroxialcanoatos (PHA) (Pereira et al., 2021).
Muy pocos estudios han informado sobre la producción de PHA utilizando
orujo de manzana (Pereira et al., 2021; Rebocho et al., 2019). Al considerar la
producción de PHA a partir del orujo de manzana, se deben considerar varios
parámetros. Estos incluyen, contenido total de azúcar, monómero
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Figura 1. Utilización de residuos de manzana para la producción de polihidroxialcanoatos (PHA).

4. Análisis de la composición de los residuos de desechos de manzanas

tabla 1
Composición elemental del orujo de manzana en diferentes estudios (C-carbono, H-
El orujo de manzana está compuesto de celulosa, hemicelulosa, lignina,
hidrógeno, O-oxígeno, N-nitrógeno y S-Azufre).
pectina y azúcares fermentables (Cargnin y Gnoatto, 2017; Gonz´ález-García et al.,
Elemento (% p / C H O S Referencias
2018). Constituye alrededor del 25-30% de la masa seca de la fruta (Magyar et al.,
norte

w)
2016; Tyagi et al., 2018). Se observa que el orujo de manzana tiene un bajo
1. 47,98 6,65 37,44 0,78 - Guerrero y col. contenido proteico. Por tanto, su valor nutricional es bajo para la alimentación
(2014)
animal y se considera desperdicio (Cargnin y Gnoatto, 2017; Wongsirichot et al.,
2. 44,56 6.18 44,78 0,42 0,05 Mason y col. (1985)
3. 48,80 6,50 43,0 1,70 - Verma y col. (2011) 2020). Contiene azúcares solubles altos que pueden causar alcoholemia en
animales causando toxicidad (Chen y Lahaye, 2021; Demiray et al., 2021). Hay una
variedad de técnicas disponibles para la recuperación de azúcares fermentables
composición de azúcar y composición de nitrógeno (Kalia y col., 2021). El PHA se produce del orujo de manzana (Du et al., 2019). En la ultrafiltración, el lodo restante es una
en condiciones limitantes de fosfato y nitrógeno (P´érez et al., 2019; Talan et al., 2020). El rica fuente de azúcares fermentables (Martins el a., 2020). Varios estudios han
contenido de azúcar total en un parámetro importante para maximizar el rendimiento realizado análisis de composición del orujo de manzana (Guerrero et al., 2014;
general de PHA. Considerando que la composición de monómeros individuales juega un Persic et al., 2017; Zupan et al., 2016). El contenido de carbono, hidrógeno,
papel importante en la producción de monómeros PHA selectivos (Liu et al., 2020; oxígeno, nitrógeno y azufre en varios desechos de manzanas se enumera entabla
Pereira et al., 2021; Rebocho et al., 2019). El orujo de manzana se puede utilizar 1. Se observa que el orujo de manzana tiene un contenido de carbono ~ 50% que
directamente utilizando cepas bacterianas para producir PHA en varias combinaciones. se puede utilizar como materia prima para la producción de PHA utilizando
En un estudio reciente, los residuos de manzana fueron utilizados porPseudomonas bacterias. Otro parámetro para una mayor producción de PHA es el bajo
chlororaphis sub-sp. aurantiaca para producir monómeros de PHA, incluidos 17,9 ± 1,0% contenido de nitrógeno que<2% en orujo de manzana. Por lo tanto, proporciona
en moles de 3-hidroxioctanoato, 42,7 ± 0,1% en moles de 3-hidroxidocanoato, 14,5 ± una relación C: N más alta que es una condición deseable para la producción de
1,1% en moles de 3-hidroxibutirato y 11,1 ± PHA. La producción de PHA tiene lugar cuando hay exceso de limitación de
0,6% en moles de 3-hidroxitetradecanoato con un rendimiento de 49,25 ± carbono y nitrógeno. El valor del contenido de celulosa, hemicelulosa y lignina se
4,08% (Pereira et al., 2021). En otro estudio,Pseudomonas citronellolis utilizó presenta enTabla 2. La composición de los monómeros de azúcar fructosa,
orujo de manzana rico en fructosa y glucosa para producir monómeros glucosa y sacarosa se presentaTabla 3.
de PHA (3-hidroxidocanoato (68% mol), 3-hidroxioctanoato (22% mol), 3-
hidroxidodecanoato (5% mol), 3-hidroxitetradecanoato (4% mol) y
3hidroxihexanoato (1% mol)) con un rendimiento total de 1,2 ± 0,05 (g / L) (
Rebocho et al., 2019). Los estudios anteriores han evidenciado la aplicación
potencial de desechos de manzana para la producción de monómeros PHA
Tabla 2
de alto valor para diversas aplicaciones (Taniguchi et al., 2003; Liu et al., Composición del contenido de celulosa, hemicelulosa y lignina en varias manzanas.
2020). Por lo tanto, los desechos de manzana se pueden utilizar para orujos estudiados.
producir valiosos monómeros PHA. Se ha observado que la biomasa de la
Componentes Celulosa Hemicelulosa Lignina Referencias
manzana debe pretratarse antes de la producción de PHA. Después del (%)
pretratamiento, tanto la suspensión entera como el filtrado se pueden
1. 16.44 4.09 8,87 Wang y Thomas
utilizar para la producción de PHA. El pretratamiento es responsable de la (1989)
hidrólisis del orujo de manzana a azúcares fermentables. De este modo, es 2. 43,6 24,4 20,4 Nawirska y
más fácil para las bacterias metabolizar azúcares como la glucosa y la Kwa´śniewska
fructosa para producir PHA. (2005)
3. 47,49 27,77 24,72 Guerrero y col.
(2014)
4. 20,2-26,4 20-29,9 13,8-17,1 Gullón et al. (2007)

3
H. Liu y col. Chemosphere 284 (2021) 131427

Tabla 3 5. Tratamiento previo de los residuos de desechos de manzanas

Se estudió la composición del azúcar en varios desechos de manzana.

Azúcares (%) Fructosa Glucosa Sacarosa Referencias El orujo de manzana contiene pectina, celulosa y hemicelulosa que pueden
convertirse en monómeros de azúcar y otros productos de valor añadido (
1. 21,85 10,55 4,39 Wang y Thomas (1989)
2. 6,06 1,98 2,41 Zupan et al. (2016) Vendruscolo y Ninow, 2014). Durante la fermentación, la celulosa y la
3. 3.025 0,76 1,26 Persic y col. (2017) hemicelulosa producen azúcares fermentables que incluyen glucosa y fructosa. La
lignina es recalcitrante a la degradación y al ataque de bacterias (van den

Figura 2. Sistemática de producción de polihidroxialcanoatos (PHA), diversos pasos de pretratamiento, proceso tecnológico, factores limitantes, fermentación y su
aplicación.

4
H. Liu y col.
Brink y de Vries, 2011). Por tanto, para obtener azúcares fermentables, se puede
pretratar el sustrato lignocelulósico. El pretratamiento se puede realizar
utilizando varios métodos, tales como químicos, físicos, fisicoquímicos y
biológicos. El tratamiento con ácido diluido seguido de hidrólisis enzimática se
considera el método más eficaz entre otros (Sharma et al., 2019). Se ha observado
que la hidrólisis enzimática tiene algunos inconvenientes, como que, después del
tratamiento, la lignina permanece en la suspensión que puede absorber las
enzimas, lo que reduce la eficiencia de la hidrólisis (Bhagia et al., 2018). Una alta
carga de enzima puede ser una solución, pero puede aumentar el costo del
pretratamiento y, por lo tanto, el costo de producción de PHA.Figura 2 describe el
proceso desde el procesamiento de la manzana hasta la producción de PHA. Una
de las soluciones válidas al problema puede ser el uso de aditivos que pueden
disminuir la unión no productiva entre la enzima y la lignina.
Los estudios han demostrado que los aditivos pueden reducir la unión no
productiva, promoviendo así la hidrólisis enzimática (Bhagia et al., 2018). De los
aditivos más baratos puede ser la proteína de soja soluble. Se ha informado que
la adición de proteína de soja soluble puede causar una reducción de ocho veces
en la carga de enzimas para la biomasa lignocelulósica (Luo y col.,
2019). En un estudio H2ASI QUE4 (1%) se utilizó para tratar el orujo de manzana a 121 ◦C
durante 15 min y se filtró a través de papel Whatman (Demiray et al., 2021).
El extracto obtenido se utilizó como materia prima de carbono. En un estudio, el
pretratamiento de orujo de manzana en combinación de método enzimático y químico
dio como resultado la producción de 116,8 g / kg de glucosa (Wikiera et al., 2015). Se
sabe que la concentración de azúcar reductor era mayor en la suspensión entera
después del pretratamiento en comparación con la fracción lavada. Un estudio dio como
resultado un mayor rendimiento de xilosa y glucosa en la suspensión completa (
Koppram y Olsson, 2014). En forma de aumento de la concentración de glucosa
Se observaron 23,9 g / L a 37,5 g / L al usar lechada entera de paja de trigo
hidrolizada (Tomas-Pejo y Oliva et al., 2008). Se observó una mayor
concentración de glucosa después de la hidrólisis enzimática del orujo de
manzana en comparación con el sustrato no tratado (Demiray et al., 2021).
La biorrefinería a base de azúcar se basa en la producción de azúcares
utilizando sustratos para producir productos de valor agregado. Para que la
biorrefinería a base de azúcar tenga éxito; hay algunos parámetros que deben
considerarse detenidamente. Estos incluyen tratamiento de biomasa, hidrólisis
del sustrato, producción de alta cantidad de azúcar, ahorro de energía y
reducción de la fermentación en inhibidores. Es necesario modificar los métodos
tradicionales de pretratamiento e hidrólisis (Pandiyan et al., 2019). Los principales
objetivos del pretratamiento incluyen (1) disminuir la cristalinidad de la celulosa,
(2) eliminar la lignina de la biomasa y (3) aumentar la porosidad de la biomasa (
Kumar y col., 2009). Para la producción de PHA se requiere una alta proporción de
carbono a nitrógeno. Esta alta relación se puede mantener solo cuando la
concentración de azúcar obtenida del pretratamiento es alta. Por lo tanto, el
proceso de pretratamiento debe modificarse de manera que aumente la
concentración de azúcares fermentables. Para lograr la alta demanda de azúcar,
la concentración de biomasa en el proceso de pretratamiento se puede ajustar al
máximo. Pero los límites de actividad de las enzimas como la lacasa también
deben tenerse en cuenta que requieren la disolución de oxígeno. Desde las
últimas décadas, los reactores de columna de burbujas se utilizan para el
pretratamiento del sustrato para producir productos de valor agregado (
Mulakhudair et al., 2016). Existen varias ventajas de utilizar un reactor de columna
de burbujas para la hidrólisis y deslignificación enzimática de la biomasa residual
utilizando celulasa y lacasa. Estos incluyen excelente transferencia de masa y
calor, diseño simple y bajo costo operativo (Pino et al., 2018). Un procedimiento
detallado y secuencial para el pretratamiento de biomasa lignocelulósica se
describe previamente (Giacobbe et al., 2018). Un estudio investigó la producción
de productos de valor agregado con hidrólisis enzimática de piel de plata de café (
Niglio et al., 2019). En un estudio se realizó un análisis comparativo y cinético de
paja de trigo y celulosa microcristalina (Monschein et al., 2013). Se desarrolló un
modelo semimecanicista para estudiar la cinética de la hidrólisis enzimática de la
paja de caña de azúcar pretratada (Pratto, de Souza, Sousa y da Cruz, 2016). En un
estudio reciente, se utilizó un reactor de columna de burbujas para la
deslignificación sucesiva utilizando lacasa e hidrólisis del orujo de manzana
pretratado con celulasa (Niglio et al., 2019). La concentración final de azúcar
obtenida en
5
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el estudio fue relativamente alto, es decir, 51,8 g / L, que se puede
utilizar para producir PHA.
En el orujo de manzana, tanto los compuestos hidrófilos como los lipófilos se
integran enlazados con diferentes macromoléculas en una matriz. Durante la
hidrólisis enzimática, la liberación de azúcares hidrolizados de las
macromoléculas se evita principalmente por la presencia de pectina y lignina (
Yang y Wyman, 2006). La lignina tiene una estructura muy compleja y compacta
que provoca un mayor grado de reducción de la hidrólisis enzimática. El
rendimiento de glucosa en la hidrólisis enzimática se puede mejorar mediante un
pretratamiento con peróxido de hidrógeno alcalino (Li et al., 2018). El
pretratamiento con peróxido de hidrógeno alcalino dio como resultado una
reducción del 55,77% de hemicelulosa y del 91,53% de lignina en el rastrojo de
maíz. Otro componente, la pectina se puede eliminar una combinación de enzima
y ácido como el ácido trifluoroacético (Wikiera et al., 2015). Después de eliminar la
lignina y la pectina del orujo de manzana, se pueden usar mezclas de enzimas
comerciales como Cellic HTec2 y Cellic CTec2 para hidrolizar la celulosa de la
biomasa lignocelulósica (Oladi y Aita, 2018; Shao et al., 2015). Algunos estudios
han utilizado Viscozyme, Celluclast, Cellic CTec y β-glucosidasa para la hidrólisis
del orujo de manzana (Gama et al., 2015; Hijosa-Valsero et al., 2017). En un
estudio reciente, la hidrólisis del orujo de manzana fue promovida por el uso de
enzimas celulasa y pectinasa (Liu et al., 2019). Esto resultó en la producción de
glucosa (61,05%), galactosa (9,87%), arabinosa (17,1%) y xilosa (12,06%).
Los disolventes eutécticos profundos naturales (NADES) son sistemas de disolventes
utilizados para la extracción de biopolímeros y moléculas procedentes de plantas. En el
sistema, los donantes y aceptores de enlaces de hidrógeno se combinan formando redes
intermoleculares. En el sistema, todos los componentes se mezclan en una proporción
fija, de modo que todos los componentes se congelan a una temperatura única que es
más baja que la temperatura de fusión de los componentes individuales o de la mezcla.
En virtud de esta propiedad, se presentan como líquido transparente a temperatura
ambiente facilitando su preparación. Está compuesto por metabolitos ecológicos,
económicos, biodegradables y no tóxicos como aminoácidos, azúcares y ácidos
orgánicos. En un estudio, se utilizó la proporción de cloruro de colina a ácido oxálico y
ácido láctico en una proporción fija para el pretratamiento de orujo de manzana para
producir pectina (Chen y Lahaye, 2021). El pretratamiento fue seguido de extracción con
agua caliente para la pectina. La degradación y las pérdidas de polisacáridos de la pared
celular se controlaron mediante la variación de la temperatura y la duración del
pretratamiento. Se evaluó la composición del azúcar y los rendimientos de extracción
para analizar la eficiencia de la extracción de pectina. Los resultados del estudio
demostraron que el uso de disolventes eutécticos a temperaturas más altas conducía a
la degradación de los polisacáridos. Se concluyó que el pretratamiento de orujo de
manzana con cloruro de colina: ácido láctico es una alternativa verde a la extracción de
pectina de ácido mineral.
5.1. Producción de PHA a partir de residuos de desechos de manzana utilizando microbios
Se han estudiado muchos microorganismos, incluidas bacterias y
hongos, para la producción de poliésteres de PHA. Algunas de las especies
bacterianas investigadas para la producción a pequeña escala de PHA son
Bacillus megaterium, Pseudomonas oleovorans, Pseudomonas aeruginosa,
Pseudomonas stutzeri y Cupriavidus necator son algunos de los más
estudiados en (Muneer et al., 2020). Rebocho et al. (2019)encontró que la
cultura combinada de la Cupriavidus necator y P. citronellolis para producir
P (3HB) y mcl-PHA se elabora con la única fuente de carbono de los residuos
de pulpa de manzana de la industria de procesamiento de frutas. La mezcla
obtenida de P (3HB) / mcl-PHA, compuesta aproximadamente por el mismo
contenido de biopolímeros, se procesa para formar películas flexibles y
elásticas que combinan estructuras de P (3HB) y mcl-PHB. Las propiedades
mecánicas de las películas eran comparables a las de mcl-PHA y sus
emisiones de oxígeno y dióxido de carbono eran similares a las de P (3HB).
Pseudomonas citronellolis logró un contenido de polímero del 30% en peso
en la biomasa residual de pulpa de manzana y un producto volumétrico de
0.025 gL- 1h- 1. La composición del polímero (peso molecular de 3,7× 105 Da)
era 3-hidroxidodecanoato (68% mol) y 3-hidroxioctanoato (22% mol), 3-
hidroxidodecanoato (5% mol), 3-hidroxitetradecanoato (4% mol) y 3-
H. Liu y col.
hidroxihexanoato (1% mol), (Rebocho et al., 2020). Bacilo Las especies, por
otro lado, son más útiles que otras bacterias debido a su abundancia
incluso en las peores condiciones naturales, altas tasas de crecimiento
incluso en jardines baratos, alta capacidad de producción de PHA y fácil
liberación de PHA. Bacilo Las especies contienen una enzima hidrolítica que
se puede utilizar para producir PHA de ahorro (Mohapatra et al., 2017).
Los PHA se encuentran en una variedad de cepas Gram-positivas y Gram-
negativas, así como en otras subespecies de haloarqueas. Haloarcula, Haloferax,
Natrialba, Halococcus, Haloterrigena, Haloquadratum, Natronobacterium,
Halorubrum, Natronococcus y Halobacterium. Estos son capaces de combinar
polihidroxialcanoatos (SCL-PHAs), PHB y poliβ-hidroxibutirato-coCopolímeros de
-3-hidroxivalerato (PHBV) como fuente de energía y almacenamiento de carbono (
Poli et al., 2011). Pseudomonas citronellolis La producción de mcl-PHA utilizando
fracciones solubles de pulpa de manzana como sustrato produjo 1,2 g / L de mcl-
PHA. Los ácidos grasos, derivados de la hidrólisis del orujo de manzana (AP), son
utilizados porBacilo sp. por su crecimiento y producción de PHA (Ranganathan et
al., 2020). La pulpa de manzana se dividió en una fracción sólida y una fracción
soluble que contenía glucosa, fructosa y cierta cantidad de sacarosa; esos
azúcares actúan como sustratos en el bioproceso, produciendo biomasa con
fracción intracelular de mcl-PHA de
0,3 g- 1. Mcl-PHA estaba compuesto principalmente de 3-
hidroxidocanoato y 3-hidroxioctanoato, exhibía termomecánica y
propiedades físico-químicas del "bio-látex" mcl-PHA estándar, y se
procesó en películas poliméricas transparentes (Koller, 2019). Se
agregó jugo de anacardo como fuente de carbono paraCupriavidus
necator para producir PHA usando (NH4)2ASI QUE4, NH4Cl, NH4NO3 y compañía
(NUEVA HAMPSHIRE2)2. En condiciones ideales, se encontró que el rendimiento final de PHA era
15,78 g / L con un inóculo de 50 mL / L, reduciendo la concentración de azúcar
una concentración de 50 g / L y una concentración de urea de 3 g / L. Se
analizó que el producto era un copolímero de hidroxibutirato e
hidroxivalerato, cuando se analizó con NMR, DSC, TGA y FT-IR (Arumugam
et al., 2020).
5.2. Limitaciones en la producción de PHA a partir de desechos industriales de manzana
Los microorganismos han acumulado PHA en forma de granos como fuente de
energía y almacenamiento de carbono. La acumulación de PHA generalmente ocurre
cuando los recursos de nitrógeno son limitados pero las fuentes de carbono son más
frecuentes en la cultura tradicional (Penkhrue et al., 2020). Ray y col. (2018)
biorresiduos de manzana combinados con glicerol crudo (CG) para probar el
potencial de aumento de las limitaciones metabólicas utilizando B. thuringiensis
EGU45 para producir PHA y sus polímeros. Ya que,Bacilo tiene la capacidad única
de producir hidrógeno y PHA a partir de una variedad de contaminantes e incluso
en entornos libres de nitrógeno, por lo que la investigación realizada por Ray y
col. (2018)ayudará a explotarlos aún más en una variedad de alimentadores en
varios compuestos. Como el rango de aplicación de PHA es limitado debido a su
gran altitud y baja expansión a la rotura, por lo que varios estudios han propuesto
sustratos aditivos para favorecer la incorporación de otras unidades, como 3-
hidroxivalerato y 3-hidroxihexanoato en la composición de PHA. Se añade ácido
propiónico como cosustrato para producir la producción de unidades de 3-
hidroxivalerato.
Cantidades mayores de ácido propiónico en lugar de glucosa han
mejorado la fracción de 3-hidroxivalerato de PHB-co-3-hidroxivalerato (
Rodríguez-Pérez et al., 2018). Se obtuvo una alta concentración de PHA del
51% con un ciclo P anaeróbico / aeróbico con unPAG-límite, con un
rendimiento estimado de 0.05 gPHA (producido) / gCOD (usado) o 25 kg
PHA / tonelada de residuo de alimentos, con un supuesto de más del 40%
del contenido de PHA devuelto. Los valores de PHB / PHA variaron de 0,74 a
0,77 debido a la alta concentración de acetato. Hoy en día, la producción a
gran escala de PHA depende de la inversión constante de fed-batch en
grandes biorreactores. Estos procesos imponen muchas limitaciones como
el improductivo tiempo de respuesta de la reacción, la inusual calidad del
producto, las limitadas posibilidades de suministro de ciertos componentes
de carbono y, sobre todo, una producción insuficiente. Por lo tanto, se sigue
investigando la biosíntesis continua de PHA única y multidisciplinaria para la
producción de diferentes tipos de PHA virales; esto es para cristales,
6
Chemosphere 284 (2021) 131427
homopoliésteres termoplásticos de PHA y copoliésteres de PHA altamente
flexibles, así como PHA bien estructurados que contienen componentes
blandos y duros (Koller y Braunegg, 2015).
Los PHA se producen en condiciones que reducen el crecimiento excesivo de carbono y se
almacenan en forma de polímero como cuerpos de entrada. Copoliésteres almacenados por
PHBHHx enAeromonas hydrophila Se ha descrito que 4AK4 soporta una variedad de estresores
ambientales tales como condiciones genéticamente modificadas.
ciones, tratamientos fríos, irradiación UV, H2O2, etanol y choque osmótico (
Cuadro 4). La producción de PHA mejora su capacidad para sobrevivir en
condiciones severas desfavorables para el crecimiento celular normal (Singh y col., 2014).
Un obstáculo importante para el uso generalizado de PHA son sus altos costos de
producción en comparación con los de plástico hechos a partir de gasolina. El uso de
cultivos microbianos mixtos (MMC) permite el uso de una gran cantidad de desechos
como precursores, como manzanas de desecho de alimentos, en la producción de PHA (
Montiel-Jarillo et al., 2021). La inanición de N puede determinar una conversión
importante de carbono en PHA debido al límite de crecimiento celular. Además de los
parámetros de adquisición preparados, el análisis del valor de PHA en la biomasa se
limita a una fuerte densidad de señal, especialmente en la región alifática (0 a 80 ppm).
Como análisis del valor de PHA para la biomasa real, la relación entre COPHA y la
biomasa de CO se estimó en 30-35 M%, utilizando un software de simulación (Topspin) (
Colombo et al., 2017). Synechocystis sp. UNIWG, ySynechocystis sp. El PCC 6803 acumuló
un PHB de hasta el 14% y el 15% de CDW bajo limitación de nitrógeno, respectivamente.
Producción de PHB con
Synechocystis sp. El PCC 6803 mejoró cuando se sometió a condiciones limitantes
de intercambio de nitrógeno, fósforo y gas (Singh y col., 2014). Existen otras
restricciones en la selección de microorganismos que pueden producir todo tipo
de genes PHA. Se necesitan estudios sobre la formulación de hiper-éster de este
poliéster a partir de ingredientes de bajo costo y recursos de biomasa. Existe la
necesidad de bacterias modificadas genéticamente para producir PHA a gran
escala (Muneer et al., 2020).
5.3. Enfoques para superar las limitaciones y la perspectiva de futuro.
Algunos enfoques están cerca de superar el proceso de extracción, incluida la
extracción por solvente, el método de flotación, el método de digestión, la
extracción líquida profunda y la fase líquida de los PHA. La regeneración celular y
la regeneración de PHA son probablemente el paso más común en estos métodos
de extracción y purificación. Se utilizan solventes o tensioactivos separados para
separar estas macromoléculas poliméricas de otros contaminantes celulares para
asegurar pureza y calidad (Muneer et al., 2020). Si bien las estrategias sostenibles
para la fermentación cultural tienen indudables beneficios sobre los métodos
establecidos y consistentes, aún se espera que se utilicen ampliamente a nivel
industrial. El PHA actúa como un almacenamiento de energía y carbono
intracelular, y brinda a las células microbianas la oportunidad de superar
condiciones potencialmente mortales en condiciones de estrés y / o inanición. La
acumulación de PHA de cadena corta (scl-PHA) o PHA de cadena media (mcl-PHA)
depende del mecanismo enzimático de las células; está muy irritado por el límite
del compuesto más importante para el crecimiento y fuente de carbono externo
residual. La producción de PHA en quimiostato agrega importancia al proceso, ya
que la recolección de biomasa que involucra la fracción requerida de masa de
PHA ocurre continuamente. (Koller y Braunegg, 2015).
Los avances en la ingeniería genética y los procesos biológicos metabólicos
han permitido un mayor uso de una variedad de fuentes de carbono, para lograr
un mayor rendimiento de PHA con composiciones de monómeros fijos. El alto
contenido de ácidos grasos (FFA) le da una oportunidad adicional para ser
utilizado como fuente de carbono para la biosíntesis de PHA (Surendran et al.,
2020). Una estrategia diferente para obtener compuestos de PHA es combinar
dos o más tipos de bacterias que pueden utilizar el mismo sustrato para producir
diferentes tipos de PHA.Rebocho et al. (2020)investigó la conversión de glicerol en
compuestos naturales P (3HB) / mcl-PHA con compuestos flexibles utilizando
Pseudomonas oleovorans NRRL B-14682 y Pseudomonas corrugata 388 (Rebocho
et al., 2020). Métodos químicos, físicos o biológicos de tratamiento previo
utilizados para facilitar el diagnóstico de PHA. Estos mecanismos tienen como
objetivo el deterioro de la estructura celular que protege y encapsula los gránulos
de PHA. Después de la cosecha, la biomasa se
H. Liu y col. Chemosphere 284 (2021) 131427

Cuadro 4
Estudio comparativo de limitaciones y enfoques para superar las limitaciones de la producción de PHA a partir de residuos de manzana.

Llave indicadora Limitación Supere las limitaciones Dirección futura Referencia

Acumulación de PHA Los recursos de nitrógeno son Dependiendo del mecanismo enzimático de las Los métodos biológicos moleculares conducirán a Penkhrue y col. (2020);
limitado pero de carbono células, se usa un PHA más corto (scl-PHA) o un problemas tecnológicos con mejor desempeño en Koller y Braunegg
los recursos son abundantes PHA más nítido (mcl-PHA) relación a su aplicación industrial (2015); Kourmentza y col.
(2017)
Aplicación PHA Es limitado debido a su Adición de ciertos cosustratos para promover la Incluido en la línea de producción existente para la línea de Ray y col. (2018);
distancia alta densidad y baja incorporación de otras unidades como producción de bioetanol de sacarosa para beneficiarse de los Arumugam y col. (2020)
extensión para romperse. 3hidroxivalerato y 3-hidroxihexanoato en la costos de viaje reducidos, la eficiencia energética y la
formulación de PHA disponibilidad dentro de los productos químicos de escape para
obtener PHA
Nutrientes Limitación P, C Máximo al 51% de PHA obtenido usando un Se sigue investigando la biosíntesis de PHA única y Koller y Braunegg (2015)
ciclo anaeróbico / aeróbico continua y de múltiples etapas para la producción de
diferentes tipos de PHA microbianos; esto es para
cristales, PHA termoplástico
homopoliésteres y copoliésteres de PHA flexibles, así
como PHA bien estructurados que contienen algunos
componentes blandos y duros
Crecimiento celular N hambre Mayor alteración del carbono en PHA El alto contenido de ácidos grasos (FFA) le brinda una Colombo y col. (2017);
limitación oportunidad adicional de uso como fuente de carbono para la Surendran. Et al., 2020
biosíntesis de PHA.
Alta produccion Contaminación microbiana El uso de cultivos microbianos mixtos (MMC) permite el Use una combinación de dos o más cepas para producir Montiel-Jarillo y col.
costos causa una amplia gama uso de una gran cantidad de desechos de manzana como diferentes tipos de PHA a partir del mismo sustrato para (2021); Rebocho et al.
pérdida económica precursores, como manzanas de desecho de alimentos, en reducir costos; La liofilización tiene características (2020); Kourmentza y col.
la producción de PHA. interesantes, tiene problemas económicos y técnicos que (2017)
reducen su efectividad futura en el proceso de
recuperación de PHA industrial
Selección de microorganismos PHA no expresada Producción de hiper poliéster a partir de materiales La ingeniería genética y la ingeniería biomédica han Muneer y col. (2020);
hospedadores. sintetizar genes baratos y fuentes de biomasa utilizando organismos facilitado un mayor uso de diversas fuentes de Surendran y col. (2020)
de bioingeniería. carbono.
Riesgo de microbios Poner en peligro todo El uso de formas extremófilas de producción (por Mejora de cepas mediante ingeniería genética; Koller y Braunegg (2015)
contaminación lotes de fermentación ejemplo, termófilos, osmófilos) es más fuerte y Aplicación de cepas de producción robustas
supera la tasa de crecimiento de los competidores
por bacterias.
Agitación y Las células microbianas se Si es posible, sin agitación y aireación Aplicación de sistemas especiales de agitación (impulsor), que Koller y Braunegg (2015)
aireación interrumpido excesivas; generan menos esfuerzo cortante;
Aplicación de cepas microbianas robustas
Desbordamiento de Causa del caldo de desbordamiento Uso de agentes antiespumantes activos para una Uso del régimen Mass-Stat en combinación con Koller y Braunegg (2015)
fermentación contaminación combinación de sustratos cepas; sensores de espuma y soluciones antiespuma.
caldo Máquina de espuma a presión con centrífuga
antiespuma
Pretratamiento Alto costo y bajo Enfoques químicos, físicos y biológicos Debilitar la estructura celular que protege y rodea los Kourmentza y col. (2017)
rendimiento del producto empleados para simplificar la gránulos de PHA para un rendimiento máximo; Uso de
recuperación de PHA pretratamiento para secado y liofilización Para separar
Proceso de extracción Afectar la productividad Base solvente, método de flotación, método macromoléculas poliméricas de todos los demás Muneer y col. (2020)
de digestión, extracción de fluido supercrítico materiales de desechos celulares, lo que garantiza su
y fase acuosa pureza y calidad.
Fermentación Limitación del proceso por lotes Continuamente en regímenes de quimiostato, La estrategia de fermentación de cultivo continuo Koller y Braunegg (2015)
estrategia lo que constituye otra ventaja considerable tiene ventajas incuestionables sobre los enfoques
a los procesos por lotes discontinuos y semicontinuos establecidos

secar utilizando un tratamiento tradicional como el secado por calor y la
liofilización; y esta biomasa tratada se utiliza en procedimientos de recuperación
de PHA. Este método elimina la mayoría de las moléculas de agua de la biomasa
que provocan la liberación de PHA en segundo plano. Si bien la liofilización es un
procedimiento efectivo, tiene limitaciones tecnológicas y económicas que limitan
su potencial efectividad en el proceso de recuperación de PHA a escala industrial (
Kourmentza et al., 2017).
Además, la producción de PHA se introduce como parte importante de los futuros
sistemas de depuración (bio), como se muestra en el caso de los autótrofos.
Producción de PHA por cianobacterias usando CO2 de emisiones de dióxido de
carbono como fuente de carbono, o compuestos de biosíntesis de PHA (Koller,
2018). Además, la cantidad de bacterias halófilas cuyo genoma se rastrea continúa
aumentando a lo largo de los años. A continuación, en un futuro próximo, las técnicas de
biología química conducirán a problemas tecnológicos con mejor desempeño en
relación a su aplicación industrial (Kourmentza et al., 2017). Alternativamente, las
instalaciones de producción de PHA también deberían incluirse en el futuro en la línea
de producción existente para la producción de bioetanol de sacarosa para beneficiarse
de los costos de viaje reducidos, la eficiencia energética y el acceso dentro de la
liberación química de la recuperación de PHA a partir de la biomasa de manzana (
Alsafadi y Al-Mashaqbeh, 2017). Por una economía circular sostenible que alivie los
impactos adversos de los
plásticos en el medio ambiente y el ecosistema, la investigación de polímeros
biodegradables es fundamental. En general, los datos revisados destacan que el
PHA es un biopolímero muy prometedor para una amplia gama de aplicaciones,
obtenido del residuo de la manzana utilizando varios microbios. La síntesis
microbiana de PHA bioplástico y su aplicación es una solución atractiva para
prevenir este problema. En comparación con otros microbios, las bacterias han
sido bien estudiadas por su proceso biotecnológico en la síntesis de PHA. Se las
ha considerado una prometedora fábrica de células para la síntesis de PHA
debido a sus ventajas características.
6. Conclusión
Este artículo da una idea de la producción futura de PHA y analiza los factores
limitantes para desarrollar estrategias para satisfacer la demanda global de PHA.
Las diferentes técnicas de procesamiento pueden ayudar a mejorar el área de la
superficie y reducir la cristalanidad. Además, los productos de degradación de
PHA se incorporan fácilmente en productos utilizables para el crecimiento
microbiano. Los avances recientes en las PHA para mejorar el rendimiento de las
PHA y reducir el costo y también se han discutido para perspectivas futuras.
Empleando cepas genéticamente modificadas, evaluación de la economía general
del proceso mediante análisis del ciclo de vida (LCA) y tecnología

7
H. Liu y col.
El análisis económico (TEA) proporcionará insumos para el desarrollo de una estrategia
económicamente viable para la producción de PHA utilizando desechos de la industria de la
manzana.
Contribución del autor
Señorita Hong Liu. Tiene curaduría de datos, análisis formal y redacción
- borrador original. Dr. Vinay Kumar, Miss. Linjing Jia, Dr. Surendra Sarsaiya,
Dr. Deepak Kumar, Dr. Ankita Juneja, Dr. Raveendran Sindhu, Dr.
Parameswaran Binod y Dr. Shashi Kant Bhatia. Ha realizado alguna
contribución a la curación de datos, análisis formal. Prof. Zengqiang Zhang.
Tiene conceptualización, diseño y supervisión de revisión, así como
adquisición de fondos y administración de proyectos. Dr. Mukesh Kumar
Awasthi. El Dr. Mukesh Kumar Awasthi es Supervisión, Validación,
Visualización, Redacción - borrador original, Redacción - revisión y edición.
Declaración de intereses en competencia
Los autores declaran que no tienen intereses económicos en competencia o
relaciones personales conocidas que pudieran haber influido en el trabajo
informado en este documento.
Reconocimiento
Este trabajo fue apoyado por la financiación de investigación de talento introducida
por Shaanxi (A279021901), China y el fondo de puesta en marcha de introducción de
investigación de talento (Z101022001), Facultad de Recursos Naturales y Medio
Ambiente, Universidad Northwest A&F, Yangling, provincia de Shaanxi
712100, China. También estamos agradecidos a todos nuestros colegas de laboratorio y
miembros del personal de investigación por sus constructivos consejos y ayuda.
Referencias
Aeschelmann, F., Carus, M., 2015. Bloques de construcción y polímeros de base biológica en el mundo:
capacidades, producción y aplicaciones: status quo y tendencias hacia 2020. Ind.
Biotechnol. 11, 154-159.
Alias, Z., Tan, IKP, 2005. Aislamiento de polihidroxialcanoato (PHA) que utiliza aceite de palma -
producir bacterias mediante una técnica de enriquecimiento. Bioresour. Technol. 96 (11),
1229-1234.
Alsafadi, D., Al-Mashaqbeh, O., 2017. Un proceso de cultivo de una etapa para la producción
de poli-3- (hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) de las aguas residuales de la almazara por
Haloferax mediterranei. N Biotechnol 34, 47–53.
Arumugam, A., Anudakshaini, TS, Shruthi, R., Jeyavishnu, K., Harini, SS, Sharad, JS,
2020. Producción de bajo costo de PHA utilizando anacardo (Anacardium occidentale L.)
jugo como sustrato potencial: optimización y caracterización. Conv. De biomasa Bioref.
10, 1167-1178.
Bansal, SS, Goel, M., Aqil, F., Vadhanam, MV, Gupta, RC, 2011. Fármaco avanzado
sistemas de administración de curcumina para la quimioprevención del cáncer. Canc. Prev. Res. 4
(8), 1158-1171.
Berwig, KH, Baldasso, C., Dettmer, A., 2016. Producción y caracterización de poli (3-
hidroxibutirato) generado por Alcaligenes latus utilizando lactosa y suero después del proceso de
precipitación de proteínas ácidas. Bioresour. Technol. 218, 31–37.
Bhagia, S., Dhir, R., Kumar, R., Wyman, CE, 2018. Desactivación de celulasa en el aire
La interfase líquida es la principal causa de conversión incompleta de celulosa a bajas cargas
enzimáticas. Sci. Rep. 8, 1350.
Bhatia, SK, Bhatia, RK, Yang, Y.-H., 2017. Una descripción general del microdiésel: un
futura fuente de energía renovable. Renovar. Sostener. Energy Rev. 79, 1078–1090.
Bhatia, SK, Shim, Y.-H., Jeon, J.-M., Brigham, CJ, Kim, Y.-H., Kim, H.-J., 2015. Almidón
producción de polihidroxibutirato basado en ingeniería Escherichia coli. Bioproc.
Biosista. Ing. 38, 1479-1484.
Bomrungnok, W., Arai, T., Yoshihashi, T., Sudesh, K., Hatta, T., Kosugi, A., 2020. Directo
producción de polihidroxibutirato a partir de almidón de desecho por recién aislado
Bacilo aryabhattai T34-N4. Reinar. Technol. 41 (25), 3318–3328.
Cargnin, ST, Gnoatto, SB, 2017. Ácido ursólico de orujo de manzana y plantas tradicionales:
un valioso triterpenoide con propiedades funcionales. Food Chem. 220, 477–489.
Chen, M., Lahaye, M., 2021. Pretratamiento con disolventes eutécticos profundos naturales como ayuda para
extracción de pectina de orujo de manzana. Hidrocoloides alimentarios 115, 106601.
Choi, J.-I., Lee, SY, 1997. Análisis de procesos y evaluación económica para poli (3-
hidroxibutirato) por fermentación. Biotechnol. Bioproc. Ing. 17, 335–342.
Colombo, B., Favini, F., Scaglia, B., Pep`è Sciarria, T., D'Imporzano, G., Pognani, M.,
Alekseeva, A., Eisele, G., 2017. Producción mejorada de polihidroxialcanoato (PHA) a partir de la
fracción orgánica de residuos sólidos urbanos mediante el uso de cultivo microbiano mixto.
Biotechnol. Biocombustibles 10, 201.
8
Chemosphere 284 (2021) 131427
Demiray, E., Kut, A., Ertuğrul Karatay, S., Dönmez, G., 2021. Uso de proteína de soja soluble
sobre la hidrólisis enzimática del orujo de manzana para una producción rentable de
bioetanol. Combustible 289, 119785.
Dhillon, GS, Kaur, S., Brar, SK, 2013. Perspectiva de los desechos de procesamiento de manzanas tan bajos
costos de sustratos para la bioproducción de productos de alto valor: una revisión. Renovar.
Sostener. Energy Rev. 27, 789–805.
Dionisi, D., Carucci, G., Papini, MP, Riccardi, C., Majone, M., Carrasco, F., 2005. Olive
efluentes de molinos de aceite como materia prima para la producción de polímeros biodegradables. Agua Res.
39 (10), 2076–2084.
Du, G., Zhu, Y., Wang, X., Zhang, J., Tian, C., Liu, L., Guo, Y., 2019. Composición fenólica
de productos y subproductos de manzana basados en tecnología de prensado en frío. J. Food Sci.
Technol. 56, 1389-1397.
Duan, Y., Mehariya, S., Kumar, A., Singh, E., Yang, J., Kumar, S., 2021. Huerto de manzanas
reciclaje de residuos y valorización de producto valioso-A revisión. Bioingeniería 12
(1), 476–495.
Follonier, S., Riesen, R., Zinn, M., 2015. Producción a escala piloto de mcl-PHA funcionalizado
de orujo de uva suplementado con ácidos grasos. Chem. Biochem. Ing. P. 29 (2),
113–121.
Gama, R., Van Dyk, JS, Pletschke, BI, 2015. Optimización de la hidrólisis enzimática de
orujo de manzana para la producción de biocombustibles y productos químicos de biorrefinería utilizando
enzimas comerciales. 3 Biotech 5 (6), 1075–1087.
Giacobbe, S., Pezzella, C., Lettera, V., Sannia, G., Piscitelli, A., 2018. Laccase
pretratamiento para la valorización de residuos agroalimentarios. Bioresour. Technol. 265, 59–65.
Gobi, K., Vadivelu, VM, 2013. Subproductos de la planta de tratamiento de efluentes de molinos de aceite de palma – A
paso hacia la sostenibilidad. Renovar. Sostener. Energy Rev. 28, 788–803.
González-García, S., Argiz, L., Míguez, P., Gullón, B., 2018. Explorando la producción de
ácido bio-succínico de orujo de manzana utilizando un enfoque ambiental. Chem. Ing.
J. 350, 982–991.
Gowman, A., Picard, M., Rodríguez, A., Misra, M., Alleston, L., 2019. Fisicoquímico
análisis de orujos de manzana y uva. Recursos biológicos 14 (2), 3210–3230.
Guerrero, MRB, da Silva Paula, MM, Zaragoza, MM, Guti´érrez, JS, Velderrain, VG,
Ortiz, AL, Collins-Martínez, V., 2014. Estudio termogravimétrico sobre la cinética de
pirólisis del orujo de manzana como biomasa residual. En t. J. Hydrogen Energy 39 (29),
16619–16627.
Gullón, B., Falqu´é, E., Alonso, JL, Parajó, JC, 2007. Evaluación del orujo de manzana como
materia prima para aplicaciones alternativas en industrias alimentarias. Food Technol.
Biotechnol. 45 (4), 426–433.
Hijosa-Valsero, M., Paniagua-García, AI, Díez-Antolínez, R., 2017. Biobutanol
producción a partir de orujo de manzana: la importancia de los métodos de pretratamiento en la
fermentabilidad de los residuos agroalimentarios lignocelulósicos. Apl. Microbiol. Biotechnol. 101
(21), 8041–8052.
Israni, N., Venkatachalam, P., Gajaraj, B., Varalakshmi, KN, Shivakumar, S., 2020.
Valorización del suero para la producción sostenible de polihidroxialcanoatos por Bacillus
megaterium: producción, caracterización y evaluación de biocompatibilidad in vitro.
J. Environ. Manag. 255, 109884.
Jendrossek, D., Handrick, R., 2002. Degradación microbiana de polihidroxialcanoatos.
Annu. Rev. Microbiol. 56, 403–432.
Kalia, VC, Singh Patel, SK, Shanmugam, R., Lee, J.-K., 2021. Polihidroxialcanoatos:
tendencias y avances hacia aplicaciones biotecnológicas. Bioresour. Technol. 326,
124737.
Koller, M., 2018. Enfoques avanzados para producir polihidroxialcanoato (PHA) bio-
poliésteres de forma sostenible y económica. J. Biotechnol. 280, S5.
Koller, M., 2019. Vinculación de la industria alimentaria con los “plásticos ecológicos”: polihidroxialcanoato
(PHA) biopoliésteres de subproductos agroindustriales para garantizar la seguridad alimentaria. Apl.
Food Biotechnol. 6 (1), 1–6.
Koller, M., Atli´ć, A., Dias, M., Reiterer, A., Braunegg, G., 2010. Producción de PHA microbiano
a partir de materias primas de desecho. Plásticos de bacterias 14, 85–119.
Koller, M., Braunegg, G., 2015. Potencial y perspectivas de la poli-
producción de hidroxialcanoato (PHA). Bioingeniería (Basilea) 2 (2), 94-121.
Koppram, R., Olsson, L., 2014. Alimento combinado de sustrato, enzima y levadura en
La sacarificación y la fermentación simultáneas permiten la producción de bioetanol a partir de
biomasa de abeto pretratada con altas cargas de sólidos. Biotechnol. Biocombustibles 7, 54.
Kourmentza, C., Pl´ácido, J., Venetsaneas, N., Burniol-Figols, A., Varrone, C., Gavala, H.
N., Reis, MAM, 2017. Avances y desafíos recientes hacia la producción
sostenible de polihidroxialcanoato (PHA). Bioingeniería (Basilea) 4 (2), 55.
Kovalcik, A., Pernicova, I., Obruca, S., Szotkowski, M., Enev, V., Kalina, M., Marova, I.,
2020. Residuos de bodegas de uva como materia prima prometedora para la producción de
polihidroxialcanoatos y otros productos de valor agregado. Alimentos Bioprod. Proceso. 124, 1–10.
Kumar, P., Barrett, DM, Delwiche, MJ, Stroeve, P., 2009. Métodos para el pretratamiento de
Biomasa lignocelulósica para una hidrólisis eficiente y producción de biocombustible. Ind. Eng.
Chem. Res. 48 (8), 3713–3729.
Lee, SY, 1996. Bacterial polyhydroxyalkanoates. Biotechnol. Bioeng. 49, 1–14.
Li, J., Lu, M., Guo, X., Zhang, H., Li, Y., Han, L., 2018. Información sobre la mejora del
pretratamiento con peróxido de hidrógeno alcalino (AHP) en la hidrólisis enzimática del
maíz rastrojo: análisis químicos y microestructurales. Bioresour. Technol. 265, 1–7.
Liu, L., You, Y., Deng, H., Guo, Y., Meng, Y., 2019. Promoción de la hidrólisis del orujo de manzana
por pectinasa y celulasa para producir aceites microbianos utilizando ingeniería Yarrowia
lipolytica. Bioenergía de biomasa 126, 62–69.
Liu, Y., Guo, L., Liao, Q., Ran, Y., Hu, F., Gao, M., Wang, G., 2020. Polihidroxialcanoato
(PHA) con lodo líquido acidógeno pretratado ácido o alcalino como fuente de carbono:
metabolismo del sustrato y composición de monómeros. Process Saf. Reinar. Proteger. 142,
156–164.
Luo, X., Liu, J., Zheng, P., Li, M., Zhou, Y., Huang, L., Shuai, L., 2019. Promoción
hidrólisis enzimática de biomasa lignocelulósica por proteína de soja barata.
Biotechnol. Biocombustibles 12 (1), 1–13.
H. Liu y col.
Magyar, M., da Costa Sousa, L., Jin, M., Sarks, C., Balan, V., 2016. Conversión de manzana
residuos de orujo en etanol en condiciones industriales relevantes. Apl. Microbiol.
Biotechnol. 100, 7349–7358.
Martínez, GA, Rebecchi, S., Decorti, D., Domingos, JMB, Natolino, A., Del Rio, D.,
Bertin, L., Da Porto, C., Fava, F., 2016. Hacia plataformas de biorrefinería polivalentes para
la valorización del orujo de uva tinta: producción de polifenoles, ácidos grasos volátiles,
polihidroxialcanoatos y biogás. Green Chem. 18, 261–270.
Martins, LC, Monteiro, CC, Semedo, PM, S´ á-Correia, I., 2020. Valorización de pectina-
Residuos agroindustriales ricos por levaduras: potencialidades y desafíos. Apl. Microbiol.
Biotechnol. 104, 6527–6547.
Mason, NB, Hyde, GM, Davis, DC, 1985. El orujo de frutas como combustible. Trans. ASABE (Am.
Soc. Agric. Biol. Ing.) 28 (2), 588–591.
Mohapatra, S., Maity, S., Dash, HR, Das, S., Pattnaik, S., Rath, CC, Samantaray, D.,
2017. Bacilo y biopolímero: perspectivas y desafíos. Biochem. Biophys. Reps.
12, 206–213.
Monschein, M., Reisinger, C., Nidetzky, B., 2013. Hidrólisis enzimática de
celulosa microcristalina y paja de trigo pretratada: una comparación detallada utilizando un
análisis cinético conveniente. Bioresour. Technol. 128, 679–687.
Montiel-Jarillo, G., Gea, T., Artola, A., Fuentes, J., Carrera, J., Su´árez-Ojeda, ME, 2021.
Hacia la producción de PHA a partir de desechos: el potencial de bioconversión de diferentes
lodos activados y desechos de la industria alimentaria en AGV mediante fermentación
acidógena. Plaza de la Investigación.https://doi.org/10.21203/rs.3.rs-341352/v1.
Mulakhudair, AR, Hanotu, J., Zimmerman, W., 2016. Explotación de microburbujas-microbio
sinergia para el procesamiento de biomasa: aplicación en el pretratamiento de biomasa
lignocelulósica. Bioenergía de biomasa 93, 187-193.
Muneer, F., Rasul, I., Azeem, F., Siddique, MH, Zubair, M., 2020. Microbiano
polihidroxialcanoatos (PHA): sustitución eficaz de polímeros sintéticos.
J. Polym. Reinar. 28, 2301–2323.
Nanni, A., Parisi, M., Colonna, M., 2021. Subproductos del vino como materias primas para la
producción de biopolímeros y de rellenos reforzantes naturales: una revisión crítica.
Polímeros 13 (3), 381.
Narodoslawsky, M., Shazad, K., Kollmann, R., Schnitzer, H., 2015. LCA of PHA
producción: identificación del potencial ecológico del bioplástico. Chem. Biochem. Ing.
P. 29 (2), 299-305.
Nawirska, A., Kwa´śniewska, M., 2005. Fracciones de fibra dietética de frutas y verduras
procesamiento de residuos. Food Chem. 9 (2), 221–225.
Niglio, S., Procentese, A., Russo, ME, Piscitelli, A., Marzocchella, A., 2019. Integrado
pretratamiento enzimático e hidrólisis de orujo de manzana en un biorreactor de columna
de burbujas. Biochem. Ing. J. 150, 107306.
Nigmatullin, R., Thomas, P., Lukasiewicz, B., Puthussery, H., Roy, I., 2015.
Polihidroxialcanoatos, una familia de polímeros naturales y sus aplicaciones en la administración de
fármacos. J. Chem. Technol. Biotechnol. 90 (7), 1209–1221.
Okoro, O., Shavandi, A., 2021. Una evaluación de la utilización de purines de manzana de desecho en
producción de ácido bio-succínico y bioenergía. En t. J. Environ. Sci. Technol. 1-12.
Oladi, S., Aita, GM, 2018. Efecto interactivo de enzimas y tensioactivo sobre la celulosa
digestibilidad del bagazo de caña energético pretratado con amoniaco diluido sin lavar y
lavado. Bioenergía de biomasa 109, 221-230.
Ong, SY, Zainab-L, I., Pyary, S., Sudesh, K., 2018. Un nuevo enfoque de recuperación biológica
para PHA empleando digestión selectiva de biomasa bacteriana en animales. Apl.
Microbiol. Biotechnol. 102 (11), 2117–2127.
Pandiyan, K., Singh, A., Singh, S., Saxena, AK, Nain, L., 2019. Tecnológico
intervenciones para la utilización de residuos de cultivos y biomasa de malezas para la
producción de bioetanol de segunda generación. Renovar. Energy 132, 723–741.
Penkhrue, W., Jendrossek, D., Khanongnuch, C., Pathom-aree, W., Aizawa, T.,
Behrens, RL, Lumyong, S., 2020. Método de superficie de respuesta para la acumulación de
bioplásticos de polihidroxibutirato (PHB) en Bacilo drentensis BP17 usando cáscara de piña. PloS
One 15 (3), e0230443.
Pereira, JR, Araújo, D., Freitas, P., Marques, AC, Alves, VD, Sevrin, C., Freitas, F.,
2021. Producción de polihidroxialcanoatos de cadena media por Pseudomonas
chlororaphis subsp. aurantiaca: cultivo de residuos de pulpa de frutos y caracterización de
polímeros. En t. J. Biol. Macromol. 167, 85–92.
P´érez, R., Casal, J., Muñoz, R., Lebrero, R., 2019. Producción de polihidroxialcanoatos
de las emisiones de metano en Esfagno musgos: evaluación del efecto de la limitación de la
temperatura y el fósforo. Sci. Entorno total. 688, 684–690.
Pernicova, I., Kucera, D., Nebesarova, J., Kalina, M., Novackova, I., Koller, M.,
Obruca, S., 2019. Producción de polihidroxialcanoatos en aceite de fritura
de desecho empleando Halomonas son. Bioresour. Technol. 292, 122028.
Persic, M., Mikulic-Petkovsek, M., Slatnar, A., Veberic, R., 2017. Composición química
de manzana, jugo y orujo y la correlación entre contenido fenólico, actividad
enzimática y pardeamiento. LWT - Ciencia de los alimentos. Technol. (Lebensmittel-
Wissenschaft -Technol.) 82, 23–31.
Pino, MS, Rodríguez-Jasso, RM, Michelin, M., Flores-Gallegos, AC, Morales-
Rodríguez, R., Teixeira, JA, Ruiz, HA, 2018. Diseño de biorreactor para hidrólisis enzimática
de biomasa bajo el concepto de biorrefinería. Chem. Ing. J. 347, 119-136.
Chemosphere 284 (2021) 131427
Poli, A., Di Donato, P., Abbamondi, GR, Nicolaus, B., 2011. Síntesis, producción y
Aplicaciones biotecnológicas de exopolisacáridos y polihidroxialcanoatos por
Arqueas, pag. 693253. Archaea.
Povolo, S., Toffano, P., Basaglia, M., Casella, S., 2010. Polihidroxialcanoatos
producción por ingeniería Cupriavidus necator de material de desecho que contiene
lactosa. Bioresour. Technol. 101, 7902–7907.
Pratto, B., de Souza, RBA, Sousa, R., da Cruz, AJG, 2016. Hidrólisis enzimática de
paja de caña de azúcar pretratada: estudio cinético y modelado semimecanicista. Apl.
Biochem. Biotechnol. 178 (7), 1430–1444.
Ranganathan, S., Dutta, S., Moses, JA, Anandharamakrishnan, C., 2020. Utilización de
corrientes de residuos alimentarios para la producción de biopolímeros. Heliyon 6 (9), e04891.
Ray, S., Kalia, VC, 2017. Aplicaciones biomédicas de polihidroxialcanoatos. Indio J.
Microbiol. 57, 261–269.
Ray, S., Sharma, R., Kalia, VC, 2018. Co-utilización de glicerol crudo y residuos biológicos para
produciendo polihidroxialcanoatos. Indian J. Microbiol. 58 (1), 33–38.
Rebocho, AT, Pereira, JR, Freitas, F., Neves, LA, Alves, VD, Sevrin, C., Grandfils, C.,
Reis, MAM, 2019. Producción de polihidroxialcanoatos de cadena media de longitud por
Pseudomonas citronellolis cultivado en desechos de pulpa de manzana. Food Technol. Biotechnol. 6 (1), 71–82.
Rebocho, AT, Pereira, JR, Neves, LA, Alves, VD, Sevrin, C., Grandfils, C.,
Filomena, F., Reis, MAM, 2020. Preparación y caracterización de películas basadas en una
mezcla natural de P (3HB) / mcl-PHA obtenida a través del cocultivo de Cupriavidus Necator
y Pseudomonas Citronellolis en desechos de pulpa de manzana. Bioingeniería (Basilea) 7
(2), 34.
Rodríguez-Pérez, S., Serrano, A., Pantión, AA, Alonso-Fariñas, B., 2018. Desafíos de
aumentar la producción de PHA a partir de corrientes de desechos. Una revisión. J. Environ. Manag. 205, 215–
230.
Shao, X., DiMarco, K., Richard, TL, Lynd, LR, 2015. El centeno de invierno como bioenergía
materia prima: impacto de la madurez del cultivo en la composición, la solubilización biológica y los
ingresos potenciales. Biotechnol. Biocombustibles 8, 35.
Sharma, HK, Xu, C., Qin, W., 2019. Pretratamiento biológico de biomasa lignocelulósica
para biocombustibles y bioproductos: una descripción general. Valorización de residuos de biomasa 10 (2),
235–251.
Singh, SB, Grewal, A., Kumar, P., 2014. Producción biotecnológica de
Polihidroxialcanoatos: una revisión de las tendencias y los últimos desarrollos. Zhong
Guo Sheng Wu Zhi Pin Xue Za Zhi 2014 (1), 1-18.
Sodian, R., Hoerstrup, SP, Sperling, JS, Daebritz, S., Martin, DP, Moran, AM, Kim, B.
S., Schoen, FJ, Vacanti, JP, Mayer, JE, 2000. Experiencia inicial in vivo con válvulas cardíacas trileaflet
diseñadas por ingeniería de tejidos. Circulación 102. Iii-22-9.
Surendran, A., Lakshmanan, M., Chee, JY, Sulaiman, AM, Thuoc, DV, Sudesh, K.,
2020. ¿Se pueden producir polihidroxialcanoatos de manera eficiente a partir de aceites vegetales y
animales de desecho? Frente Bioeng Biotechnol 8, 169.
Talan, A., Kaur, R., Tyagi, RD, Drogui, P., 2020. Bioconversión de residuos aceitosos en
polihidroxialcanoatos: tecnología sostenible con enfoque de bioeconomía circular e
impactos multidimensionales. Bioresour. Technol. Informes. 11, 100496.
Taniguchi, I., Kagotani, K., Kimura, Y., 2003. Producción microbiana de poli
(hidroxialcanoato) de residuos de aceites comestibles. Green Chem. 5, 545–548.
Tomas-Pejo, E., Oliva, JM, Olsson, L., Ballesteros, M., 2008. Comparación de Shf y Ssf
Procesos de paja de trigo explotada con vapor para la producción de etanol mediante
fermentación de xilosa y fermentación robusta de glucosa. Saccharomyces cerevisiae Son.
Biotechnol. Bioeng. 100 (6), 1122–1131.
Tyagi, P., Saxena, NK, Sharma, A., 2018. Producción de polihidroxialcanoatos (PHA)
de un componente no lignocelulósico del bagazo de caña de azúcar: alimentando una economía de base
biológica. Biocombustible Bioprod Biorefin 12 (4), 536–541.
Ueda, H., Tabata, Y., 2003. Derivados de polihidroxialcanonato en la clínica actual.
aplicaciones y ensayos. Adv. Drug Deliv. Rev. 55 (4), 501–518.
van den Brink, J., de Vries, RP, 2011. Conjuntos de enzimas fúngicas para polisacáridos vegetales
degradación. Apl. Microbiol. Biotechnol. 91 (6), 1477–1492.
Vendruscolo, F., Ninow, JL, 2014. Orujo de manzana como sustrato para el quitosano fúngico
producción en un biorreactor de transporte aéreo. Biocatal. Agric. Biotechnol. 3 (4), 338–342.
Verma, VK, Bram, S., Gauthier, G., De Ruyck, J., 2011. Evaluación del desempeño de
una caldera doméstica multicombustible con respecto a la norma europea existente y las
etiquetas de calidad: Parte-1. Bioenergía de biomasa 35 (1), 80–89.
Wang, H., Thomas, R., 1989. Uso directo de orujo de manzana en productos de panadería. J. Food Sci.
54 (3), 618–620.
Wikiera, A., Mika, M., Starzyńska-Janiszewska, A., Stodolak, B., 2015. Desarrollo de
hidrólisis completa de pectinas de orujo de manzana. Food Chem. 172, 675–680.
Wongsirichot, P., Gonzalez-Miquel, M., Winterburn, J., 2020. Harina de colza
estrategias de valorización a través de la producción limitada de nitrógeno y oxígeno de
polihidroxialcanoatos con Pseudomonas putida. Waste Manag. 105, 482–491.
Yang, B., Wyman, CE, 2006. Tratamiento con BSA para mejorar la hidrólisis enzimática de
celulosa en sustratos que contienen lignina. Biotechnol. Bioeng. 94 (4), 611–617.
Zinn, M., Witholt, B., Egli, T., 2001. Ocurrencia, síntesis y aplicación médica de
polihidroxialcanoato bacteriano. Adv. Drug Deliv. Apocalipsis 53 (1), 5–21.
Zupan, A., Mikulic-Petkovsek, M., Stampar, F., Veberic, R., 2016. Azúcar y fenol
contenido en manzana con o sin corazón de agua. J. Sci. Alimentos Agric. 96 (8), 2845–2850.