SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE

CENTRO NACIONAL DE HOTELERÍA, TURISMO Y ALIMENTOS

TECNÓLOGO PROCESAMIENTO DE ALIMENTOS LABORATORIO DE
MICROBIOLOGÍA
INFORME:
FICHA: 2620484 RESULTADO DE
INTEGRANTES: EDWARD INSTRUCTOR: Camila Ubaque APRENDIZAJE:
DANILO OVALLOS, EDWIN COMPETENCIA: Control de calidad Fecha
SEBASTIAN LAGOS en los procesos de producción en la practica: 12
DANIELA BASTO CASTRO industria de alimentos demayo
Fecha
entrega: 2

+
+ de bacterias tales como cocos y bacilos.
INTRODUCCIÓN
Existen numerosos colorantes, en su mayoría
compuestos orgánicos. Los colorantes que se utilizan
son moléculas cargadas positivamente y se combinan
con los componentes celulares llamados
negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los
polisacáridos (azul metileno, el cristal violeta). Otros
colorantes son cargados negativamente. Los que se
combinan con elementos celulares cargados
positivamente (eosina, la fucsina acida y el rojo
Congo). La tinción de Gram es una técnica de
laboratorio que permite identificar distintos tipos
de bacterias según se tiña su superficie, aportando
información muy útil para orientar el tratamiento
antibiótico, diseñada por Christian Gram, un
científico danés, en el año 1884. El fundamento de la
técnica se hace con base a las paredes celulares de
las bacterias; Gram positivas y Gram Negativas.
La pared celular de las bacterias Gram positivas
posee una gruesa capa de peptidoglucano. Además
de dos ácidos ticónico. La capa de peptidoglucano
de las Gram negativas es delgada, y se encuentra
unida a una segunda membrana plasmática
exterior por medio de lipoproteínas.
En cuanto al procedimiento, la aplicación
bacteriana se fija a la placa, se flamea en el
fuego no por mucho tiempo porque se puede quemar
la muestra pasado de esto se tiñe con los diferentes
reactivos antes mencionados. Tales como el cristal
violeta que se deja por 1 min, el lugol que también
se deja por 1 min segundo el alcohol que dejamos
por mucho más tiempo 15 min y de ultimo la
safranina que se deja por 1 min se lavan las muestras
con agua corriente sin fijar el agua a las placas para
que no se corran la muestras después del secado se
observa en el microscopio la separación de los grupos
Los microorganismos son demasiado pequeños
pequeños para observarse a simple vista: protozoos,
algas, hongos bacterias y virus. Estos microrganismos
difieren en características tales como forma de
nutrición, estructura, tamaño, composición entre otros
aspectos; es por ello que se emplea el estudio
microscópico el facilita notablemente la observación;
principalmente en las bacterias se facilita al tratarlas
con colorantes o tintes los cuales facilitan también la
observación de ciertas estructuras celulares.
OBJETIVOS
Objetivos generales (Describir un Objetivo general,
en el cual se contempla las metas concretas que se
esperan cumplir; después de ejecutar la práctica de
laboratorio).
Objetivos específicos (Desglosar 2 o mas objetivos
específicos). Se deben identificar los objetivos
planteados y necesarios para cumplir finalmente con
el objetivo general.
MARCO TEÓRICO
Incluir en el marco teórico; las bases bibliográficas
y/o la fundamentación teórica de la temática a
desarrollar. Sintetizar brevemente en
aproximadamente 20 renglones.
Tinción: proceso y resultado de teñir (agregar
color a una cosa) es una técnica que se emplea en el
laboratorio con el fin de optimizar la visión de
aquello que se observa en un microscopio. la tinción
de este modo consiste en aplicar los colorantes a
una sustancia o un tejido para que resulte más simple
detectarlo y analizarlo.
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Bacterias: Organismos unicelulares, procariotas fisiológicos y etológicos.
con un solo cromosoma sin núcleo ni clorofila,
que pueden presentarse desnudas o con una MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y
capsula gelatinosa aisladas o en grupos, las MEDIOS DE CULTIVOS.
bacterias es el más simple y abundante de los
organismos y pueden vivir en tierra, agua, Especificar los materiales, equipos, reactivo y
materia orgánica o en plantas y animales. Son medios de cultivos empelados en la ejecución de la
también muy importante en las fermentaciones y práctica.
aprovechadas por industrias y la producción de
antibióticos. Tienen diferentes formas: Bastones MATERIALES:
(bacilos) Redondos (coco) o en espiral  Agua
(espirilos). los cocos pueden asociarse:  Placa de vidrio
diplococos, estafilococos, estreptococos (cadenas)  Frasco schock
 Probeta de 500ml
Reactivos: Es una sustancia, que como su nombre  Guantes
lo indica reacciona con otra para así poder  Mechero
determinar de qué tipo son es un elemento que se  Microscopio
une con otro y permite la preparación de una  Embudos
muestra para su posterior estudio.  Cinta indicadora de proceso de esterilización
 Puntas azules
Gram positivas: se designan como Gram positivas  Asas de siembra
las bacterias que parasen coloreadas de color violeta  Frasco lavador
en un microscopio cuando se emplea la técnica
de coloración de Gram tienen una pared muy rica en
ácido teicoico y en peptidoglucano y muy EQUIPOS
espesas.
 Plancha de calentamiento
Gram negativas: Estas bacterias aparecen  Autoclave
teñidas de rosa, fucsia, su pared celular está  Micropipetas
formada por dos membranas lipídicas, una interna  PH metro
(citoplasmática) y otra externa con un espacio entre  Contador de colonias
ellas que se denomina espacio periplasmatico en
este espacio se encuentra el peptidoglicano. REACTIVOS Y MEDIOS DE CULTIVO
Grupos taxonómicos: Caracteres morfológicos  Cristal violeta
que son propios o comunes a un grupo de  Acetona
organismos y sirven para diferenciar unos seres  Lugol
vivos de otros tales como (presentar el cuerpo  safranina
cubierto de pelos) este tipo de carácter se
denomina taxonómicos. Todo tipo de carácter debe METODOLOGÍA (Gráfica)
ser taxonómico debe ser constante. pueden ser Explicar detalladamente mediante una gráfica, el
citológicos, morfológicos, bioquímicos paso a paso de la metodología: Especificar la
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información más relevante. Como por

se alista agua
Tomamos las cajas de Petri
con colonias

se toma una asa de siembra y se

caliente en el mechero hasta obtener la burbuja de
agua
Con ayuda del contador de
colonias y un marcador señalamos con puntos la
cantidad colonias en cada caja de Petri

se sumerge en el agua hasta

optener el agua dentro del asa de siembra para
vertirla en la lamina

Se enciende mechero

luego con el asa de siembra se

toma de la colonia

Se marcan laminas
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se enjuaga la lamina con

el frasco lavador

se extiende la muestra de
colonia en la lamina portaobjetos

se procede a la aplicación de reactivo

se acerca al fuego la muestra Lugol con ayuda de una pipeta plástica por 1
2 veces y alrededor del fuego hasta que seque la minuto se retira el exceso.
muestra

se enjuaga la lámina con

el frasco lavador

se procede a la aplicación de
reactivo cristal violeta safranina con ayuda de
una pipeta plástica y se deja en la lamina por 1
minuto y se retira el exceso.
se procede a la aplicación de
reactivo acetona , se deja por 30 segundos y se retira
el exceso.
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se enjuaga la lámina con el frasco lavador

Se pasa la muestra al
microscopio y se aplica aceite de inmersión

se procede a la aplicación de reactivo safranina con

ayuda de una pipeta plástica, se deja en la lamina
por 1 minuto y se retira el exceso.
se utiliza el
microscopio para visualizar los microorganismos
presentes en la muestra.

Se toma la lamina y
pasa por el fuego 1 veces y luego se agita hasta
secar
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ejemplo se deben contemplar los volúmenes, Muestra 2:
nombres de soluciones y medios de cultivos,
concentraciones de las soluciones y reactivos,
tiempos y temperaturas de incubación, cantidades a
pesar, etc. La metodología puede estar sintetizada
en una gráfica bien detallada.

TABLA DE RESULTADOS

DATOS DE LA MUESTRA:

Muestra 1:

En la muestra se evidencias microorganismos gran

positivos cocos

En la muestra se evidencia microorganismos bacilos

gran positivos
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Muestra 3:

En la muestra se evidencias microorganismos

bacilos gran negativos

Cálculos de resultados

No aplica
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TABLA DE RESULTADOS Tanto las

bacterias Gram
1 PARÁMETRO EVALUADO Mesófilos aerobios positivas como
las Bacterias
Gram negativas
se presentan
2 UNIDADES DE EXPRESIÓN UFC/ 100<g
3 RESULTADO 5,2 X 103

4 TÉCNICA ANALÍTICA Recuento en placa

5 MÉTODO NTC 4519

6 NORMATIVIDAD – VALOR MÁXIMO Resolución 3929-
PERMISIBLE m= 1000 – M=5000
UFC/g.

7 CONFORMIDAD No cumple

DISCUSIÓN DE RESULTADOS morfológicamente como cocos o bacilos, sin

Redactar el producto de un análisis exhaustivo de
los resultados obtenidos en el ensayo analítico. El
análisis se realiza con el fin de dar una respuesta
congruente con los resultados y se deben tener en
cuenta aspectos como:
Condiciones de la muestra, Errores analíticos,
instalaciones y condiciones ambientales, calidad de
los materiales, reactivos y medios de cultivos,
estado de funcionamiento de los equipos que
intervienen en el proceso de análisis, métodos
implementados, etc.
Considerar la importancia de cada uno de estos
aspectos y el impacto que pudo generar en el
proceso de análisis de laboratorio.
CONCLUSIONES
embargo al ejecutar tinción de Gram en estas para
identificar su grupo taxonómico, las Gram positivas se
tiñen de color violeta mientras que las Gram negativas
se tiñen de color rosado. Mediante la tinción de
Gram se identifican bacterias Gram positivas y
Gram negativas gracias al color que tornan
después de ser teñidas; en el caso de las bacterias
Gram positivas se tiñen de violeta, esto se debe a que
gracias a que contienen una pared gruesa de
peptidoglicano y gran cantidad de ácidos teicóicos
que permiten fijar y retener rápidamente el
colorante inicial el cual es, el cristal violeta de
Hucker, y además son resistentes a la
decoloración. Lo contrario ocurre con el caso de las
Gram negativas, las cuales poseen una pared delgada
con menos cantidad de peptidoglicano y lípidos, la
cual requiere de un colorante de contratincion como la
safranina o la fucsina en este caso, ya que el colorante
inicial es fácilmente retirado en la decoloración con
alcohol, debido a que por su delgada pared celular no
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lo retienen. La tinción de Gram permite conocer Revista Agronomia Colombiana, 29 (3).
la morfología celular, el tamaño, la forma y su Páginas 465 – 472.
clasificación taxonómica (Gram positivos o Gram
negativos) de acuerdo al color que tornan las Fuentes cibernéticas: Fuentes derivadas de páginas
bacterias después de la tinción, sin embargo no de internet, Ejemplo:
permite conocer la especie o género de la bacteria al Cubillos J., Milian P., Hernandez J. 2011.
cual pertenece. Las colonias de bacterias a las que Biological nitrogen fixation by Rhizobium sp.
se les realizó tinción de Gram se tomaron de una native gliricidia (Gliricidia sepium [Jacq.] Kunth ex
muestra de suelo, lo cual explica la presencia de Walp.) under greenhouse conditions. Revista
estas bacterias, debido a que en el suelo Agronomia Colombiana, 29 (3).
predominan las bacterias Gram negativas. Sin Páginas 465 – 472. Disponible en:
embargo en el suelo también se encuentran http://www.redalyc.org/pdf/1803/180322995015
bacterias Gram positivas, pero en menor .pdf
proporción que las Gram negativas, lo cual
también explica la presencia de estas bacterias en el
suelo. De acuerdo a esto fue posible observar
bacterias Gram negativas con forma de bacilo (con
forma de barra o vara) y Gram positivas como
Staphylococcus sp.

BIBLIOGRAFÍA

Fuentes físicas: fuentes de origen físico, como

revistas, libros, manuales etc. Ejemplo:

Cubillos J., Milian P., Hernandez J. 2011.

Biological nitrogen fixation by Rhizobium sp.
native gliricidia (Gliricidia sepium [Jacq.] Kunth ex
Walp.) under greenhouse conditions.