Professional Documents
Culture Documents
Efecto Antimicrobiano
Efecto Antimicrobiano
HECHO EN MÉXICO
ISBN: 978-607-506-205-1
ACADEMIAS PARTICIPANTES
Academia de Español
Academia de Informática
Academia de Inglés
Academia de Matemáticas
ASOCIACIÓN DEL IMC Y EL SISTEMA DE PUNTAJE Z CON LA TENSIÓN ARTERIAL EN ADOLESCENTES ................. 41
LA PERSPECTIVA DE LOS ALUMNOS DEL “ATENEO FUENTE” ACERCA DEL BULLYING ........................................ 103
RELACIÓN DEL PERFIL LIPÍDICO Y LA CIRCUNFERENCIA DE CINTURA E ÍNDICE DE MASA (Z-IMC) CORPORAL EN
ADOLESCENTES DE SECUNDARIA ........................................................................................................................ 115
EVALUACIÓN ENZIMÁTICA DEL VENENO DE CROTALUS AQUILUS Y SU EFECTO TÓXICO EN RATONES ............ 131
SÍNTESIS VERDE DE UN CHALCONOIDE, EMPLEANDO ULTRASONIDO COMO FUENTE DE ACTIVACIÓN ............ 217
CÁLCULO DEL MÓDULO VOLUMÉTRICO DE NANOCOMPUESTOS POLIMÉRICOS POR DINÁMICA MOLECULAR 279
FUNCIONALIZACIÓN DE POLY (HEC) CON LA SAL DE OXOAMONIO BROMO-TEMPO USANDO DMF COMO
MEDIO DE REACCIÓN. ......................................................................................................................................... 349
EL USO DEL INTERNET COMO HERRAMIENTA DE MERCADOTECNIA EN EL ÁREA DE LA SALUD ........................ 360
2
MODELO LOGIT EN EL ESTUDIO DE DATOS CATEGÓRICOS ................................................................................. 428
ADSORCIÓN DE ROJO CONGO EN SOLUCIÓN ACUOSA SOBRE UN ADSORBENTE DE CAFÉ-POLIPIRROL ............ 466
CAPÍTULO II
LOS EXVOTOS MEXICANOS, COMO APORTACIÓN CULTURAL DEL PATRIMONIO POPULAR TRADICIONAL AL
DISEÑO GRÁFICO................................................................................................................................................. 494
CARACTERÍSTICAS CATEGORIALES DE DISEÑO GENERADAS POR LOS PRODUCTOS TIPO BEBIDAS RELAJANTES
(CASO BIODRINK GO GABA) ................................................................................................................................ 508
CUANDO EL ROJO NO ES COMO DEBERÍA SER. DALTONISMO EN DISEÑADORES GRÁFICOS ............................. 563
RECURSOS EVIDENCIALES EN LIBROS DE TEXTO GRATUITOS DE LA SEP DEL 16° VERANO DE LA CIENCIA ........ 600
INFLUENCIA DE LAS REDES SOCIALES EN EL AVANCE ACADÉMICO DE LOS ALUMNOS DEL I.D.E.A. TURNO
MATUTINO .......................................................................................................................................................... 615
3
ESTRELLAS SÚPER MASIVAS: ANÁLISIS ESTADÍSTICO EN LA FÍSICA .................................................................... 636
CAPÍTULO III
LOS ENTIERROS DENTRO DEL TEMPLO DE SAN ESTEBAN DE LA NUEVA TLAXCALA, Y SU DESPLAZAMIENTO A LOS
CEMENTERIOS, SIGLO XIX. .................................................................................................................................. 875
IMPLEMENTACIÓN MODELO ACADEMICO “MENOS TEORIA MÁS PRÁCTICA” MT+P ........................................ 911
INGENIERIA TISULAR: OBTENCIÓN, CULTIVO Y CARACTERIZACION DE CELULAS MADRE DE PULPA DENTAL.... 988
5
ANALISIS MORFOLOGICO Y EVALUACION DE LA FRAGMENTACION DEL DNA
EN ESPERMATOZOIDES HUMANOS EXPUESTOS A PLOMO
CIENCIAS DE LA SALUD
Labastida Arzate, María Margarita (1), Betancourt Martínez Nadia (2), Jiménez
Villarreal Joel (2), Morán Martínez, Javier (3)
(1)Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Autónoma de Coahuila. Blvd.
Venustiano Carranza, C.P: 25280, Saltillo, Coahuila.
(2)Departamento de Química, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad
RESUMEN
El objetivo principal de este trabajo es la evaluación de la toxicidad del plomo en el
daño al material genético mediante la técnica del “Ensayo Cometa” por microscopia
de fluorescencia. En este estudio, además se identificaran y clasificaran las
anomalías más frecuentes en la anatomía del espermatozoide. Las diferencias
estadísticas entre el grupo expuesto y no expuesto (P=0.000, IC 95%) muestran un
grado de significancia para una alta concentración de Pb y los niveles de
fragmentación en el daño al ADN espermático de las muestras seminales obtenidas
de hombres ocupacionalmente expuestos a Plomo en la zona aledaña al municipio
de Torreón, Coah.
Palabras clave: ADN, Plomo, Ensayo cometa, Morfología espermática.
INTRODUCCIÓN
En más del 60% del territorio mexicano prevalece el clima seco y semiseco, por lo
que ha sido de gran importancia para el sustento del país el consumo de agua
subterránea ya que esta, es un recurso vital para el desarrollo de todos los sectores
pues abastece a la mayoría de las instalaciones industriales, y casi la totalidad de la
demanda de agua de la población rural [1].
La Organización Mundial de la Salud refiere que el plomo se encuentra de forma
natural en los acuíferos de Coahuila y Durango en donde las concentraciones
exceden 15 veces los valores recomendados [2].
6
El plomo es un metal blando, gris azulado, estable y resistente a la corrosión. Este
existe en forma inorgánica y orgánica. Tiene la particularidad de encontrarse en los
ambientes naturales y en la mayoría de los materiales comunes de nuestra vida
diaria, tales como en ciertas pinturas de casas, esmaltes, baterías, cables, artículos
de alfarería, sustancias químicas como los pesticidas inorgánicos y en regiones con
alta actividad industrial, siendo los principales afectados los trabajadores de la región
[3]. La contaminación por Plomo se clasifica en 3 tipos de acuerdo a su contacto,
estos son: 1) Inhalación, 2) Absorción 3) Ingestión, además de otros factores que
afectan a la población tales como la edad, nutrición, estatus económico y los hábitos
individuales de cada persona.
Afecta la acción del calcio y lo sustituye en el organismo e interactúa con proteínas
uniéndose a grupos sulfhidrílo, amino, fosfato y carboxilo. Afecta a diferentes
órganos causando una alteración en los ciclos de oxidación– reducción de las
células [4], provocando estrés oxidatívo y especias reactivas al oxigeno (ERO) lo
que conduce al bloqueo del óxido nítrico (NO)[5] lo que esta correlacionado
positivamente con la tasa de morfología anormal, defectos de cabeza y un índice de
deformidad espermática [6].
El plomo tiene un efecto primordial en la espermatogénesis, alterando la función
endocrina lo que traerá como resultado una calidad seminal disminuida [7]. El plomo
al entrar en el organismo por sus diferentes vías, es transportado en la sangre hacia
los distintos músculos y tejidos, llegando a sitios como el cerebro, riñón, hígado, piel,
entre otros.
En la actualidad, existen diferentes métodos para medir la viabilidad espermática, el
estudio más importante para evaluar la calidad espermática es la
espermatobioscopía directa, midiendo principalmente número, morfología, motilidad
y la vitalidad de los zoospermos eyaculados por el paciente [8].
METODOLOGÍA
Se trabajaron con cuatro diferentes muestras provenientes de hombres
ocupacionalmente expuestos al plomo. El paciente recoge la muestra por
masturbación después de haber mantenido una abstinencia sexual de 4 a 7 días
para una mayor concentración seminaria. Se recoge en un frasco limpio, seco y
estéril de boca ancha.
7
En el año de 1999 la OMS diseño parámetros por los cuales se clasificara la muestra
obtenida por el paciente, siento estos:
Tipo A: movilidad progresiva rápida (espermatozoides moviéndose
rápidamente, por lo general en línea recta)
Tipo B: motilidad progresiva lenta o débil (el esperma puede ser menos lineal
en su progresión).
Tipo C: in situ
Tipo D: muy mala.
8
Figura 1.- Diferentes morfologías espermáticas presentes en mutaciones.
Se fijan 100000 células espermáticas (10 µl) con Agarosa de Bajo Punto de Fusión
5% (75 µl) en laminillas tratadas con Agarosa de Punto de Fusión Normal (NMP 7%)
Las laminillas son sumergidas en una solución de Lisis 1 (DMSO 10%, NaCl 2.5M,
EDTA 100mM, Tris base 10 mM a pH=10, Tritón 1%) por cuatro horas a 4°C.
Posteriormente, es realizada una solución de Neutralización (Tris base .4 M, pH=
7.5) y son colocadas en la misma. Pasadas 4 hrs, las laminillas son sometidas a la
ruptura celular por medio de la solución de lisis 2 (Tris base 10 mM a pH=10,
Proteincinasa y DTT), y se dejan en la misma por 18 horas. Se retiran y son
colocadas en una cámara de electroforesis mantenida a 4°C (previamente enfriada)
y es agregado un buffer (NaOH 0.3M, EDTA 200mM). Se deja correr a 25 volts, a
100 mA por 10 minutos bajo la luz amarilla, posteriormente, son enjuagadas con
agua destilada y sumergidas con Solución Neutralizante por 5 minutos, se retira el
exceso y se dejan secar. Se sumergen en un Koplin con etanol 96% por un
transcurso de 5 min. Se retiran y se dejan secar.
Se procede a su tinción con colorante Gel Green 4x (40 µl) para observar al
microscopio de fluorescencia, el cual revelara el material genético como una cola
9
fluorescente y un centro compacto, el cual se evaluara el daño causado dentro de la
célula.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Cada muestra obtenida presento similitudes en las malformaciones espermáticas a
diferentes niveles en la anatomía del espermatozoide, siendo las observadas:
Se evaluó la segmentación del material genético en base a 100 células por lámina,
la cual se clasificara por medio de niveles de migración (ninguna, corta, media, larga
y muy larga) a los cuales se les da valores numéricos (0, 1, 2, 3 y 4
correspondientemente) en base a la siguiente ecuación:
UA= 0 x TCG0 +1 x TCG1 + 2 x TCG2 + 3 x TCG3 + 4 x TCG4
Considerando:
0TCG0= Total de células grado 0 (células no dañadas).
1TCG1= Total de células grado 1 (mínima frecuencia de lesiones en el ADN).
2TCG2= Total de células grado 2 (daño bajo, con frecuencia moderadamente alta de
lesiones en el ADN).
3TCG3= Total de células grado 3 (daño bajo, con frecuencia moderadamente alta de
lesiones en el ADN).
4TCG4= Total de células grado 4 (células totalmente dañadas con cometas visibles).
10
Tabla 2. Valores de TUA en cada una de las Muestras.
Muestra TUA
Sujeto 1 185
Sujeto 2 170
Sujeto 3 189
Sujeto 4 215
TUA
400
200
TUA
0
TUA
Sujeto 1 Sujeto 2
Sujeto 3 Sujeto 4
Concentración de TUA
Plomo en Sangre
μg/dL
28 185
24.4 170
37 189
54.3 215
11
EFECTO ANTIMICROBIANO DEL FRUTO DE Solanum elaeagnifolium
CIENCIAS DE LA SALUD
Torres N. Manuel A (1a), López L. Lluvia I (1a), De la Cruz G. María G (1b), González Z.
María A (1b), Silva B. Sonia Y (1a,b)Guevara María Gabriela (2).
RESUMEN
Solanum elaeagnifolium es una planta nativa del noreste de México y se ha
reportado el uso de sus frutos para la manufactura del queso tipo artesanal, lo cual
indica la presencia de una enzima capaz de cuajar la leche. En la actualidad no
existe documentación científica que valide el uso de S. elaeagnifolium como agente
antimicrobiano, y en este trabajo se propuso como objetivo la evaluación de la
actividad antimicrobiana de un extracto acuoso de su fruto (EASe) sobre
microorganismos de importancia médica. Se determinó el efecto antimicrobiano por
el método de microdilución en placa de 96 pozos, empleando como control positivo
el ciprofloxacino. Los resultados del estudio del EASe presentaron actividad
proteolítica, un porcentaje de recuperación de 4.180 ± 0.056 y actividad
antimicrobiana sobre los microorganismos probados de 0.2 ppm sobre
Staphylococcus aureus y 15 ppm sobre Salmonella choleraesuis.
Palabras clave: Antimicrobiano, Enzima, Extracto.
INTRODUCCIÓN
Desde tiempos remotos la humanidad ha buscado la curación para sus diversas
enfermedades utilizando diferentes alternativas, una de las más importantes y de la
cual se hablara en este texto es el uso de las plantas.
El hombre ha sacado provecho de las propiedades que tienen las plantas
utilizándolas para el tratamiento de padecimientos tales como afecciones en la piel,
sistema circulatorio, endocrino, nervioso, reproductor, respiratorio y urinario además
21
de cáncer y tratamiento de infecciones. En la actualidad se han realizado estudios a
diferentes plantas para el tratamiento de enfermedades y una de ellas es la familia
Solanaceae y se ha encontrado mediante estudios científicos actividad
antiparasitaria, antimicrobiana, antiinflamatoria de los extractos de esta especie.
Tanto en México como en el mundo las personas hacen uso de las plantas para el
tratamiento de diferentes enfermedades incluyendo las infecciosas. Durante muchos
siglos las plantas nos han proporcionado un sin número de moléculas con
aplicaciones médicas e industriales. Por tanto, la humanidad busca la curación para
diversas enfermedades mediante métodos alternativos, donde se emplean las
plantas medicinales.
METODOLOGÍA
Extracto acuoso
Se obtuvo por precipitación sulfato de amonio a partir del extracto acuoso crudo, lo
cual se llevó a cabo de la siguiente manera: La extracción del material vegetal se
realizó con agua por 3 horas en un agitador eléctrico a 40°C (método de extracción
de Rao y colaboradores 2010 modificado) en una relación 25% p/v, posteriormente
se filtraron el extracto con papel filtro Whatman No.4, luego se procedió a la
determinación del porcentaje de recuperación por análisis gravimétrico, los extractos
se almacenaron a -20°C hasta su utilización [12].
La obtención del complejo enzimático se realizó por precipitación a partir del extracto
acuoso de S. elaeagnifolium, a partir del cual se pesó 891 gr, se resuspendió en
agua, posteriormente se le agregó una cantidad conocida de NH4SO4, hasta la
disolución completa del sulfato de amonio, luego se mantuvo en condiciones de
refrigeración a 4 °C, por 24 horas para lograr una precipitación completa de
proteínas totales, al precipitado se le denomino CEFSE (complejo enzimático de
fruto de S. elaeagnifolium). El CEFSE se recuperó en forma de precipitado por
centrifugación a 12,000 rpm, por 20 minutos, posteriormente se lavó en dos tubos
con 20 mL de una solución amortiguadora de acetato de sodio 2.0 mM, pH 5.2 cada
uno, el CEFSE recuperado se resuspendió en 10 mL de una solución amortiguadora
de acetato de sodio 50 mM, pH 5.2, y se tomaron alícuotas de 25 mL, se
centrifugaron a 9,500 rpm, por 5 minutos a 4°C. Luego se realizó una diálisis con
membrana de poro medio en la misma solución amortiguadora, el proceso se realizó
23
por 24 horas. Posteriormente el contenido recuperado de la membrana de diálisis se
dividió en viales, en alícuotas de 1 mL.
Actividad antimicrobiana
La determinación de la actividad antimicrobiana se realizó por el Método de
microdilución en placa, mediante las especificaciones del método M11-A6 del
Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria, del NCCLS.
Para desarrollar el procedimiento anterior fue necesario realizar el método de Mc.
Farland, para ajustar la suspensión microbiana, este método relaciona la turbidez de
unos patrones de sulfato bario (mezcla de cloruro barico al 1% y ácido sulfúrico al
1%), empleando la escala de 0.5 y determinando su absorbancia en un
espectrofotómetro a una de 625 nm, la cual va de 0.08- 0.1, esta escala de 0.5 de
Mc Farland, corresponde a una suspensión de 1.5 x 10 8 UFC/mL, a partir de la cual
se hizo la suspensión para en inóculo de la microplaca de 96 pozos [13].
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Se obtuvo el complejo enzimático en medio acuoso, a partir del fruto mediante el
procedimiento descrito en la metodología. El análisis se realizó por quintuplicado y
se encontró un % de 4.180 ± 0.056 para el extracto acuoso. Acorde al análisis de
datos mostrado se encontró que los datos son confiables, y que el % de
recuperación es bastante alto comparado con la extracción de otros metabolitos
secundarios de especies vegetales tales como el extracto metanólico de la hoja de
Solanum elaeagnifolium el cual fue de 0.0870 % R [14]. Los resultados se muestran
en la tabla No. 1
24
Promedio 4.180
Desviación
estándar 0.056
100
80
% In h ib ic ió n
60
40
20
0
.1 .1 .2 .5 .0 .0 .9 .8 .6 .3 .5 .0 .0
0 0 0 0 1 2 3 7 5 1 2 5 0
1 3 6 2 5
1 2
ppm
Estos resultados son similares a lo reportado por Murado y col. 2010, quienes
presentan un análisis de los tratamientos dosis-respuesta de diferentes
antimicrobianos (nisina, pediocina y fenol), probados frente a Carnobacterium
piscícola y Leuconostoc mesenteroides, cuyos gráficos tienen un comportamiento
25
semejante al obtenido con S. aureus frente al complejo enzimático de Solanum
elaeagnifolium, en donde el perfil del gráfico muestra tendencias bifásicas que
normalmente se atribuyen a una respuesta hormética. Esto también se puede
explicar cómo, el resultado de la evolución temporal de la respuesta de una
población microbiana con una distribución bimodal de la sensibilidad a un efecto
[15].
También se observó efecto antimicrobiano del extracto acuoso sobre S.
choleraesuis, por debajo del 20% de inhibición, además se encontró una respuesta
hormética frente al complejo enzimático. La hormesis es un fenómeno que ocurre
cuando a bajas dosis el efecto es contrario al que se presenta en dosis más
elevadas. Los resultados se presentanS .en ellegráfico
cho r a e s u is 3.
EA
100
80
% In h ib ic ió n
60
40
20
0
.1 .2 .5 .0 .9 .8 .6 .3 .5 2
5
5
0
0 0 0 1 3 7 5 1 2 1 2
1 3 6
ppm
CONCLUSIONES
Se obtuvo el porcentaje de recuperación del extracto acuoso del fruto de Solanum
elaeagnifolium.
El extracto presento actividad antimicrobiana a bajas concentraciones esto
probablemente debido a un efecto de hormesis en contra de Staphylococcus aureus
y Salmonella choleraesuis.
BIBLIOGRAFÍA
[1] Vega Ávila E, Velasco Lezama R, Jiménez Estrada M. 2006. Las plantas como
fuente de compuestos antineoplásicos. Bioquímica. 3:31, 97-111.
26
[2] Barrera Jaime B. 2000. La farmacia moderna está en los productos naturales.
Rev. Acad. Colom. Cienc. 92:24, 441-447.
[3] Duarte N, Gyémant N, Abreu P.M, Molnár J, Ferreira M.J.U. 2007. La riqueza
florística del estado de México: licopidos y helechos. Adumbrationes ad Summae
Editionem. 57:27, 1-32.
[4] Duarte N, Gyémant N, Abreu P.M, Molnár J, Ferreira M.J.U. 2006. New
macrocyclic lathyrane diterpenes, from Euphorbia lagascae, as inhibitors of multidrug
resistance of tumour cells. Planta Med. 72, 162-168.
[6] Rocha Fábio F, Neves Evandro M.N, Costa Elson A, Matos Lécia G, Müller H.A.,
Guilhom Giselle M.P, Cortes Wellington S, Vanderlinde F.A. 2008. Evaluation of
anticonceptive and antiinflammatory effects of Croton pullei var. glabior Lanj.
(Euphorbiaceae). Revista Brasileira de Farmacognosia. 18:3, 344-349.
[8] Rzedowski, G.C. de y Rzedowski J. 2001. Flora fanerogáma del Valle de México.
2a ed. Instituto de Ecología y Comisión Nacional para el Conocimiento y Uso de la
Biodiversidad. Pátzcuaro, Michoacán, México.
[9] Nee M. 1993. Solanaceae II (II). En: Sosa, V. (ed.). Flora de Veracruz. Fascículo
72. Instituto de Ecología. Xalapa, Veracruz, México.
[10] Villaseñor R.J. L., Espinosa G.F.J. 1998. Catálogo de malezas de México.
Universidad Nacional Autónoma de México. Consejo Nacional Consultivo
Fitosanitario. Fondo de Cultura Económica. México, D.F.
27
[11] Swapna Latha P y Kannabiran K. 2006. Antimicrobial activity and
phytochemicals of Solanum trilobatum Linn. African Journal of Biotechnology. 5:23,
2402-2404
28