FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE ENFERMERÍA

ASIGNATURA
MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

TEMA - PRÁCTICA N°8

SIEMBRA DE ENTEROBACTERIAS Y BACTERIAS GRAM
NEGATIVAS NO FERMENTADORES

• Ignacio Tarrillo Alondra Nicolle.

• Guillermo Bautista Anita.
• Flores Rojas Jazmin.
• Flores Bravo Daniel.
• Diaz Vega Leydi Cristhina
• Gonzales Acosta Angie yamelli

CICLO
III
Docente
Yaipen Gonzales Hector Filamir

Pimentel – Perú
2023
 I. INTRODUCCIÓN

La siembra de enterobacterias y bacterias gram negativas no fermentadoras es un

procedimiento fundamental en el campo de la microbiología clínica. Permite el aislamiento,
cultivo y posterior identificación de estos microorganismos en muestras clínicas. Las
enterobacterias, como Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae, y las bacterias gram
negativas no fermentadoras, como Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumannii, son
patógenos importantes que pueden causar infecciones oportunistas en pacientes
hospitalizados, especialmente aquellos con sistemas inmunológicos comprometidos (1).

El objetivo de este estudio es proporcionar una guía detallada para la siembra de

enterobacterias y bacterias gram negativas no fermentadoras en el laboratorio clínico. Esta
técnica es esencial para el diagnóstico preciso de infecciones y la selección adecuada de
tratamientos antimicrobianos. Además, ayuda a establecer perfiles de resistencia y
epidemiología de estas bacterias, lo que es crucial para la gestión de la resistencia
antimicrobiana y la implementación de medidas de control de infecciones (2).

En esta hoja de introducción, se presentarán los fundamentos teóricos y prácticos de la

siembra de enterobacterias y bacterias gram negativas no fermentadoras. Se describirá el
protocolo general, desde la preparación de las muestras clínicas hasta el análisis de los
resultados obtenidos. Además, se discutirán los criterios de interpretación de los resultados y
las limitaciones del método (3).

El conocimiento y dominio de la siembra de enterobacterias y bacterias gram negativas no

fermentadoras son esenciales para los microbiólogos clínicos, ya que permiten una
identificación precisa de los agentes infecciosos y una intervención terapéutica adecuada.
Asimismo, contribuyen a la vigilancia epidemiológica y al control de la resistencia
antimicrobiana. A través de esta hoja de introducción, se espera proporcionar una base sólida
para llevar a cabo este procedimiento de manera efectiva en el laboratorio clínico (3).
 II. OBJETIVOS DE LA SIEMBRA:

El objetivo principal de la siembra de enterobacterias y bacterias gram negativas no

fermentadoras es obtener cultivos puros de estas bacterias a partir de muestras clínicas, como
muestras de sangre, orina, secreciones respiratorias, entre otras. Esto permite llevar a cabo
una serie de análisis e identificación de las cepas bacterianas presentes. Algunos objetivos
específicos de la siembra incluyen:

OBJETIVOS:

● Identificar la presencia de enterobacterias y bacterias gram negativas no

fermentadoras en muestras clínicas.
● Determinar la sensibilidad de estas bacterias a diferentes antimicrobianos para ayudar
en el tratamiento adecuado de las infecciones.
● Establecer perfiles de resistencia de las enterobacterias y bacterias gram negativas no
fermentadoras para fines epidemiológicos y de vigilancia de la resistencia
antimicrobiana.
● Contribuir al conocimiento de la prevalencia de estas bacterias en la comunidad y en
el ámbito hospitalario.
● Apoyar en el diagnóstico y seguimiento de infecciones causadas por enterobacterias y
bacterias gram negativas no fermentadoras, permitiendo una intervención clínica
temprana y precisa.
III. MATERIALES
1. UROCULTIVO
● Frasco estéril tapa roja

● Muestra de orina

● Agar Sangre

● Agar MAC
 ● Mechero

● Asa de argolla

2. COPROCULTIVO
● Muestra de heces
● Lugol

● Hisopo

● Aplicador

● Solución fisiológica estéril

● Agar EMB

● Agar S.S

● Agar TCBS

● Caldo tetrationato
 ● Agua perdonada alcalina

IV. PROCEDIMIENTO

❖ Para la recolección de muestras de orina en niños, puede utilizarse una bolsa de

plástico estéril colectora de orina. La bolsa se colocará después de haber lavado los
genitales adhiriéndose a la piel por medio de un anillo adhesivo. Si no es posible
recolectar orina en los siguientes 45 minutos, deberá cambiarse la bolsa por una
nueva.
❖ En mujeres se debe higienizar la zona genital con agua y jabón, de adelante hacia
atrás, secar con toalla limpia, y se debe colocar un tapón vaginal (torunda de gasa o
algodón). Se elimina el primer chorro (10 ml.) y se recolecta en frasco estéril la
fracción siguiente (10 – 20 ml.) Se recomienda orinar separando los labios mayores.
❖ En hombres se debe retraer el prepucio e higienizar el glande y surco balano prepucial
con agua y jabón, y secar con toalla limpia. Se elimina el primer chorro (10 ml.) y se
recolecta en frasco estéril la fracción siguiente (10 – 20 ml.)
❖ Se homogeniza la orina agitándose suavemente (No centrifugar).
❖ Con ayuda de una asa bacteriológica calibrada (0.01 ml.) se siembra en agar sangre y
Macconkey.
❖ Dejar en incubación de 37ºC por 24 horas
❖ Después de transcurrida las 24 horas de incubación.
❖ Se retiran las placas de la estufa.
❖ Se procede a analizar, en caso de estar positiva (crecimiento de colonias).
❖ Realizar el recuento de colonias en UFC/ml.
❖ Proceder a la identificación Bioquímica del microorganismo
 V. RESULTADO
Una prueba de urocultivo nos muestra si existen bacterias u otros microbios en una
muestra de orina. Esta también es utilizada para buscar una infección urinaria en
adultos y niños. Está basada en la presencia de un número significativo de bacterias
(generalmente >100.000 bacterias/ml.)

Mientras que un coprocultivos nos revela la flora saprófita ya sea libre de bacterias o
con algunas que afecten a su funcionamiento y puedan causar infecciones bacterianas.

VI. DISCUSIÓN

Durante el desarrollo de esta investigación se presentaron varias situaciones que es necesario

resaltar:

- Las bacterias obtenidas originalmente que se presumía trabajar eran de 2 tipos; los
Bacilos Gram Negativos No Fermentadores anaerobios facultativos y los anaerobios
estrictos. En el proceso se encontró que no era posible realizar los anaerobios estrictos, ya
que no se contó con la tecnología adecuada, es decir, medios de cultivo, jarras
anaeróbicas y control ambiental para que ellas puedan desarrollarse, con ello el punto
principal que era detectar con estas muestras son las bacterias que se presumen
importantes (Shewanella y Geobacter) para las Celdas Microbianas en la producción de
electricidad.

- El desarrollo de una metodología adecuada fue importante ya que nos permitió no

divagar entre tanto medio de cultivo y por lo tanto en la identificación de colonias
importantes en tan poco tiempo. Fue de vital importante el solo darle seguimiento a un
determinado número colonias de bacterias, ya que morfológicamente eran muy idénticas
y fue muy interesante descubrir que se identificaron a un número de importante y todas
serán probadas en diferentes procesos.
VII. CONCLUSIÓN

La siembra de enterobacterias y bacterias gram negativas no fermentadoras desempeña un

papel crucial en el diagnóstico, tratamiento y vigilancia de las infecciones causadas por estos
patógenos. Proporciona información vital para la toma de decisiones clínicas, el control de
infecciones y la investigación científica.

REFERENCIAS

1.- Blanco María Alejandra, Casimir Lidia, Lopardo Horacio Ángel. Identificación y
sensibilidad de bacilos gramnegativos: Evaluación del uso de un sistema automatizado
directamente desde frascos de hemocultivo. Acta biochim. Me incliné latino [Internet]. marzo
de 2008 [citado el 19 de junio de 2023]; 42(1): 5-10. Disponible en:
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-
29572008000100002&lng=es.

2.- Consuegra J, Gutiérrez S. J, Jaramillo A, Sanz I, Olave G, Soto J. E, Valencia C, ,

Contreras A. Bacilos Gram negativos entéricos y no fermentadores de la glucosa en
pacientes con enfermedad periimplante. Biomédica [Internet]. 2011;31(1):21-26. Disponible
en: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=84322444004

3.- Consuegra Jessika, Gutiérrez Sonia Jakeline, Jaramillo Adriana, Sanz Ignacio, Olave
Gilberto, Soto Jorge Enrique et al. Bacilos Gram negativos entéricos y no fermentadores de la
glucosa en pacientes con enfermedad preimplante. Biomédica [Internet]. marzo de 2011
[citado el 18 de junio de 2023]; 31(1): 21-26. Disponible en:
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-
41572011000100004&lng=en.