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Métabolisme énergétique cellulaire: aspects physiologiques et

pathologiques

Article  in  Annales Françaises d Anesthésie et de Réanimation · February 1999

DOI: 10.1016/S0750-7658(99)90434-3

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8 authors, including:

Francois Sztark jean-francois Payen

Centre Hospitalier Universitaire de Bordeaux University of Grenoble
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Michel Rigoulet Renée Ventura-Clapier

Université Victor Segalen Bordeaux 2 Université Paris-Sud 11
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Ann Fr Anesth Rdanim 1999 ; 18 : 261-9
© Elsevier, Paris
Article special

M~tabolisme 6nerg~tique cellulaire:

aspects physiologiques et pathologiques*

E Sztark 1.2, J.E Payen 3, V. Piriou 4, M. Rigoulet~, R. Ventura-Clapier6,

J.P. Mazat 2, X. Leverve 7, G. J a n v i e r t
I Ddpartement d'anesthdsie-rdanhnation, CHU de Bordeaux, 33076 Bordeaux cedex,
2CJF Inserm 9705, universitd Bordeaux 2, 33076 Bordeaux cedex,
3ddpartement d'anesthgsie-rdanimation L CHU, BP 217, 38043 Grenoble cedex 09,
4service d'anesthdsie-rdanimation, h@ital cardiovasculaire Louis-Pradel, 69500 Lyon Bron,
51BC-CNRS, 33077 Bordeaux cedex,
6 U446 lnserm, cardiologie cellulaire et molgculaire, 92296 Ch~tenay-Malabry cedex,
7laboratoire de biodnergdtique, universitd Joseph-Fourier, 38041 Grenoble cedex, France

RI~SUMI~ anesthesiques Iocaux lipophiles diminuent la production

Le fonctionnement cellulaire normal necessite une pro-
duction et une consommation permanentes d'dnergie.
L'adenosine triphosphate (ATP) est le compos~ energe-
tique fondamental pour la cellule. II est produit essentiel-
lement dans les mitochondries, o0 les phosphorylations
oxydatives realisent un couplage entre la consommation
d'O 2 et la synthese d'ATP. La production anaerobie
d'ATP est quantitativement peu importante, mais elle
joue, cependant, un r61e fondamental au niveau du meta-
bolisme intermediaire. Les complexes enzymatiques de
la chaine respiratoire des mitochondries sont des trans-
ducteurs d'~nergie de type pompe & protons; leur r~gula-
tion est complexe et permet une recherche permanente
du meilleur compromis entre vitesse maximale et rende-
merit optimal. Dans les cellules myocardiques, le sys-
teme de la crdatine kinase assure un couplage efficace
entre la production d'ATP dans les mitochondries et son
utilisation & distance au niveau des filaments de myosine.
Ceci explique, en partie, la difficult~ d'analyse du mdta-
bolisme dnergetique in vivo et la dissociation apparente
entre la fonction myocardique et les param~tres m~tabo-
liques habituellement mesurds. La mitochondrie est un
site d'action potentiel pour les agents anesth~siques. Les
Re~:u le 27 juillet 1998; accept6 apr~.s r6vision en septembre 1998
"Travail pr6sent6 au Club d'anesth6sie exp6rimental~e0 39¢ Congr~.s
national d'anesth6sie et de rdanimation, Paris, 25 septembre 1997
d'ATP par la mitochondrie, ce qui pourrait expliquer, en
partie, certains effets toxiques de ces moldcules. La
spectroscopie RMN et en proche infrarouge sont des
techniques d'evaluation in vivo du metabolisme energe-
tique; elles sont applicables a I'homme et permettent
I'etude des tissus cerebraux, cardiaques et musculaires
dans des situations normales ou pathologiques. © 1999
Elsevier, Paris
mdtabolisme dnergdtique / mitochondrie / addnosine
triphosphate / spectroscopie / agents anesthdsiques
ABSTRACT
Cellular energetic metabolism: physiological and
pathological aspects.
Cellular homeostasis requires permanent energy produc-
tion and consumption. Adenosine triphosphate (ATP) is
the major energy component for the cell. Its synthesis
occurs mainly in mitochondria where the oxidative phos-
phorylations realise the coupling between oxygen
consumption and phosphorylation of adenosine diphos-
phate. The anaerobic production of ATP plays an impor-
tant role in the intermediary metabolism. The enzymatic
complexes of the mitochondrial respiratory chain are
energy transducers acting as proton pumps. In cardio-
myocytes, the phosphocreatine circuit allows a substrate
channelling between mitochondria and myofibrils. This
metabolic compartmentation explains the difficulties of
262
studying energetic metabolism in the beating heart and
the lack of correlation between cardiac function and the
usual energy parameters. Mitochondria are a potential
site of action of anaesthetic agents. Lipophilic local
anaesthetics impair cellular energy metabolism and mito-
chondrial ATP production. Such effects could be associa-
ted with toxic effects of these molecules. NMR or near-
infrared spectroscopy are non invasive techniques for
monitoring energetic metabolism in vivo. Clinical applica-
tions are developed for analysing brain, muscle or car-
diac function in physiological and pathological conditions.
© 1999 Elsevier, Paris
energetic metabolism / mitochondria I adenosine
triphosphate / spectroscopy / anaesthetic agents
La reunion du Club d'anesthEsie expfrimentale,
organisEe h Paris en septembre 1997, a porte sur le
mEtabolisme EnergEtique cellulaire, un domaine
souvent m6connu des anesthEsistes-rEanimateurs.
Pourtant, ce mEtabolisme est directement concernE
lors des Etats d'agression et d'hypercatabolisme, de
choc septique, d'ischEmie et d'hypoxie. Au cours
de cette reunion, les aspects les plus rEcents de la
recherche fondamentale en bioEnergEtique ont EtE
prEsentEs ainsi que les dEveloppements des investi-
gations cliniques du mEtabolisme et de la pharma-
cologic des agents anesthEsiques.
PRODUCTION ET UTILISATION
DE L'I~NERGIE DANS LA CELLULE
Le f o n c t i o n n e m e n t c e l l u l a i r e nEcessite une
consommation permanente d'Energie, de la rEac-
tion chimique la plus EIEmentaire h l'activitE phy-
sique la plus intEgrEe. Une telle d e p e n d a n c e
implique la presence de structures de stockage et
de transport d'Energie, faciles h utiliser, flexibles et
disponibles en permanence. L'adEnosine triphos-
phate (ATP) est le compose EnergEtique fondamen-
tal pour la cellule, mais il est, paradoxalement,
quantitativement tr~s limitE. Un adulte produit au
cours de 24 heures environ 70 kg d'ATP, alors que
la quantitE totale de celui-ci dans l'organisme est
de l'ordre de I00 grammes; ainsi tout I'ATP est
consomme en 2 h 3 minutes environ. L'organisme
utilise l'Energie contenue dans les diffErents sub-
strats (glucose, acides gras en particulier) pour
rEgEnErer I'ATP. L'extraction la plus complete de
F. Sztark et al.
l'Energie des nutriments correspond ~ une reaction de
combustion en presence d'O 2. Si la majeure pattie de
la production d'ATP est liEe ~ une consommation
d'O 2, la voie de la glycolyse joue Egalement un rEle
important pour l'homEostasie EnergEtique. Inverse-
ment, la totalitE de 1'O 2 consomme par l'homme n'est
pas exclusivement liEe h une synth~se d'Energie.
Utilisation des nutriments dans la production
d'~nergie
Un nutriment, qu'il soit de nature glucidique, lipi-
dique ou protEique, est une molecule plus ou moins
complexe possEdant une certaine quantitE d'Energie
intrins~que. Celle-ci est libErEe progressivement au
cours d'une succession de reactions qui scindent
ces nutriments en molecules de plus en plus petites,
et qui aboutissent h des molecules pouvant ~tre Eli-
minEes par l'organisme (CO 2, urEe, ammoniaque en
particulier). Les Electrons transfErEs au cours de ces
reactions sont pris en charge par des molecules spE-
cialisEes comme le NADH.
Oxyg~ne et production d'Energie
Cet ensemble de reactions d'oxydation se dEroule
par Etapes au niveau du cytosol et de la mitochon-
drie (figure 1). Les mitochondries produisent la
majeure partie de l'Energie nEcessaire ~t la cellule.
Dans celles-ci, l'Energie libErEe lors de la consom-
mation d'O 2 (respiration mitochondriale) est cou-
plEe a la synth~se d'ATP. Cet ensemble de reactions
biochimiques porte le nom de phosphorylations
oxydatives; elles s'effectuent dans la membrane
interne de la mitochondrie par les complexes enzy-
matiques de la cha~ne respiratoire et de l'ATP-syn-
thEtase. Ceux-ci se comportent comme des pompes
protons qui gEnt:rent un gradient 61ectrochimique
de protons de part et d ' a u t r e de la m e m b r a n e
interne. La membrane interne de la mitochondrie
joue un r61e fondamental, comparable ~ celui d'un
barrage hydraulique. Elle est en effet impermeable
et dElimite deux compartiments diffErents, dont les
Echanges sont assures par des transporteurs spEci-
fiques. De m~me que l'eau contenue dans un bar-
rage constitue une forme d'Energie pouvant ~tre
transformEe en ElectricitE, le gradient Electrochi-
mique est une force poussant les protons h rentrer
dans la mitochondrie (force protomotrice). Pour
 Bio6nerg6tiquecellulaire 263

ailleurs ou dissip6e directement sous forme de cha-

:!
, l.aetate~
/.
1 NAy÷ N~,nn:,k~
Are
Pyruvate
. . . . .

AeylCoA
.
leur. Deux groupes de m6canismes ont 6t6 propo-
s6s pour expliquer ces variations de couplage entre
consommation d'O 2 et synth~se d'ATP: une per-
m~abilit6 variable de la membrane mitochondriale
aux protons et une modification du rendement des
Pyruvate Acyl CoA pompes ~ protons.
Si la r6alit6 de ces deux m6canismes est 6tablie in
Ac6tyl CoA - -
vitro, leur r61e sp6cifique in vivo n'est pour le moment
~NADH que sp6culatif, m~me si certains exemples sont
d6monstratifs, en particulier l'int6r~t du d6couplage

CO,
Cdyecle•/
Krebs II
~'.1~ NAD+
3 OH Butyrate
dans le tissu adipeux brun, les dysthyro'fdies. Par
ailleurs, il est possible de modifier la stoechiom6trie
intrins~que de l'ATP-synth6tase mitochondriale [1 ].

Autre voie de production d'~nergie

NADH,FADH2
,~0/ ADP+Pi
o,
I¢'
Figure 1. Reprfsentation sch~matique du m6tabolisme 6nerg6-
tique cellulaire. Les substrats 6nergdtiques prtSsents dans le
cytosol (en gris6) sont transportds dans les mitochondries (en
blanc). Dans la membrane interne mitochondriale, la synth~se
d'ATP par I'ATP-synth6tase est coupl6e, par un gradient 61ec-
trochimique de protons, "h la consommation d'oxyg;zne au
niveau de la chMne rcspiratoire (CR).
cela, ils empruntent la voie de l'ATP-synth6tase et
l'6nergie lib6r6e est alors utilis6e pour la synth~se
d'ATP h partir d'ADP et de phosphate.
Relation entre consommation d'oxyg~ne
et synth~se d'ATP
Cette suite de r6actions qui peut paraTtre complexe
aboutit h la production d'ATP, mais 6galement
une d6perdition d'6nergie sous forme de chaleur.
La gen~se de ce gradient de protons peut ~tre utili-
s6e, en privil6giant la production de chaleur par
rapport ~ celle d'ATP, comme dans le tissu adipeux
brun ou lors du transport actif de diff6rentes mol6-
cules, comme le calcium, h travers la membrane
m i t o c h o n d r i a l e . Ainsi, le r a p p o r t entre 1'O 2
consomm6 et I'ATP synth6tis6 ne peut ~tre fixe,
puisqu'une partie de cette 6nergie est consomm6e
ADP
Chez l'homme, comme chez tousles mammif'eres,
le m6tabolisme 6nerg6tique est principalement
assur6 par les phosphorylations oxydatives. Ainsi,
la majeure partie de la production d'6nergie d6pend
de la respiration. Cependant, la productiofi ana6ro-
bie d'ATP joue un r61e fondamental dans le m6ta-
bolisme interm6diaire, comme source unique ou
c o m p l 6 m e n t a i r e d'6nergie. Les h6maties, par
exemple, sont d6pourvues de mitochondries et toute
la production d'ATP est assur6e par la glycolyse
ana6robie avec formation de lactate. D'autres cel-
lules de l'organisme ont des caract6ristiques iden-
tiques. Ainsi, certaines cellules de l'oeil, ayant pour
finalit6 d'etre parfaitement transparentes pour lais-
ser passer la lumi~re, sont 6galement d6pourvues
de mitochondries. Certains tissus tr6s faiblement
vascularis6s, comme les cellules de la m6dullaire
r6nale, ont 6galement un m6tabolisme 6nerg6tique
principalement ana6robie. Dans d'autres situations,
la production ana6robie d'fnergie intervient comme
source compl6mentaire, dont l'importance varie
selon les besoins 6nerg6tiques. C'est le cas par
exemple des tissus musculaires, pour lesquels un tel
ph6nom~ne est bien connu h la phase initiale du
mouvement et lorsque les capacitfs oxydatives
commencent 5 ~tre limit6es. Enfin, au cours de
situations pathologiques particuli~res, telles que,
l'hypoxie chronique de l'insuffisance respiratoire,
la d6faillance circulatoire, les modifications m6ta-
boliques li6es ~ la croissance tumorale ou les 6tats
d'agression, le rapport entre production glycoly-
tique et a6robie d'ATP peut ~tre modifi6.
264 F. Sztark et al.
R61e de la glucon~ogen~se h~patique
Le lactate, lib6r6 par la glycolyse ana6robie, est en
grande pattie recycl6 dans la glucon6ogen~se, ce qui
explique le r61e fondamental du foie dans l'hom6o-
stasie 6nerg6tique. Chez l'homme, in vivo, l'impor-
tance du m6tabolisme du lactate au sein du m6tabo-
lisme 6nerg6tique est parfois sous-estim6e, alors que
le recyclage des atomes de carbone entre diff6rents
organes par l'interm6diaire du cycle glucose-lactate
de Cori est un m6canisme qui peut avoir un r61e
adaptatif de grande importance. I1 permet de pro-
duke de I'ATP par la glycolyse dans certaines cei-
lules p6riph6riques, musculaires ou tumorales, par
exemple. L'6nergie consomm6e par le foie pour le
recyclage du lactate en glucose provient principale-
ment de l'oxydation des acides gras. Par exemple, si
l'on perfuse du lactate ~ des volontaires sains, en
mesurant la consommation d'O 2 et le quotient respi-
ratoire afin d'6valuer le surcofit 6nerg6tique et la
nature des substrats utilis6s, les r6sultats montrent
que la quantit6 d'O 2 consomm6e au-dessus de la
valeur basale correspond environ ~ 1'6nergie n6ces-
saire pour transformer le lactate perfus6 en glucose.
La diminution du quotient respiratoire jusqu'~ 0,7
indique que cette 6nergie provient, au moins pour
partie, de l'oxydation des lipides. L'int6r~t d'un tel
m6canisme r6side dans la possibilit6 d'alimenter une
production d'ATP glycolytique h partir de la d6gra-
dation des r6serves lipidiques, qui sont beaucoup
plus importantes que les r6serves glucidiques.
Au total, chaque fois que des n6cessit6s physiolo-
giques ou pathologiques ont pour cons6quence une
augmentation de la production d'ATP par ia glyco-
lyse ana6robie, cette production se fait au d6triment
de la masse lipidique, sans entra~ner une d6pl6tion
trop importante du pool des hydrates de carbone. La
perte de masse graisseuse, observ6e tant au cours de
l'adaptation ~ la haute altitude qu'au cours de cer-
taines maladies comme les cancers, pourrait s'ex-
pliquer par un tel m6canisme.
RI~GULATION DES SYSTi~MES
TRANSDUCTEURS D'I~NERGIE
Les organismes vivants sont des syst~mes ouverts,
tendant h se maintenir dans des 6tats stationnakes,
souvent tr~s 61oign6s de l'6quilibre thermodyna-
mique. Dans de tels syst~mes, les flux de mati~re,
de charges 61ectriques, de transformations chi-
miques ou de chaleur sont d6termin6s par des
forces thermodynamiques. On parle de flux et de
force conjugu6s, quand le flux est directement asso-
ci6 ~ la force (diffusion d'une mol6cule non charg6e
travers une membrane associ6e ~ la diff6rence de
concentration de part et d'autre de cette mem-
brane), de flux et de force non-conjugu6s, quand la
force gouverne indirectement un flux (gradient de
concentrations en protons utilis6 pour la production
d'ATP dans les mitochondries). Quand une force
thermodynamique d6termine un flux non-conjugu6,
le processus impliqu6 est appel6 transduction
d'6nergie. I1 n6cessite une structure particuli~re,
souvent complexe, qui joue un r61e c!6 dans 1'6ner-
g6tique cellulaire.
Dans le cas des phosphorylations oxydatives mito-
chondriales, il s'agit de convertisseurs chimio-osmo-
tiques (pompes h protons) capables de coupler des
mouvements de protons h des r6actions chimiques
(oxydor6ductions ou synth~se d'ATP). Pour com-
prendre les facteurs contr61ant ie fonctionnement de
ces syst~mes, il convient de ne pas dissocier artifi-
ciellement les aspects purement 6nerg6tiques (ther-
modynamiques) des aspects rn6canistes (cin6tiques
et stoechiom&riques) qui sont directement li6s aux
propri6t6s intrins~ques des pompes h protons. Cer-
taines r~gles de fonctionnement sont ~ prendre en
consid6ration: a) le travail n6cessaire pour synth6ti-
ser une mol6cule d'ATP peut varier d'une cellule
une autre et dans une m~me cellule, en fonction de
son 6tat stationnaire; de m6rne, le travail que peut
fournir I'hydrolyse d'une mol6cule d'ATP n'a pas
une valeur constante; b) du fait du couplage indirect
entre mouvements de protons et r6actions chi-
miques, des changements de stoechiom6trie (rapport
des flux de protons et de transformation chimique)
sont susceptibles de modifier la r6ponse d'un flux
une force non-conjugu6e; c) un des principes fonda-
mentaux de la thermodynamique associe le rende-
ment d'une machine h sa vitesse: le rendement est
d'autant plus 61ev6 que le syst~me fonctionne pros
de l'6quilibre et donc, que la vitesse est faible;
inversement, des flux 61ev6s n6cessitent des d6s6qui-
libres importants entre les forces, qui s'accompa-
gnent de fortes dissipations d'6nergie.
En conclusion, il n'y a pas de situations modules,
mais des 6tats stationnaires particuliers condition-
n6s par un ensemble de contraintes cin6tiques et
 Biofnergftique cellulaire
thermodynamiques s'exer~ant sur le rfseau 6tudif.
De nombreux exemples biologiques peuvent illus-
trer les difffrentes tentatives d'optimisation des
syst~mes transducteurs d ' f n e r g i e qui sont des
recherches de compromis entre vitesse maximale et
rendement optimal [2].
CONTROLE DU MI~TABOLISME
I~NERGI~TIQUE DANS LE MYOCARDE
I1 existe une relation linfaire entre le travail cardiaque
et la consommation d'O 2. L'fnergie nfcessaire au
fonctionnement du cceur est produite, dans les mito-
chondries, par l'oxydation du glucose, des acides gras
et du lactate; I'ATP ainsi synthftis6 est utilis6 par
l'ATPase de la myosine pour produire le travail car-
diaque. Les composts riches en 6nergie, ATP et phos-
phocrfatine (PCr), dont les concentrations respectives
dans les cellules myocardiques sont de 8 h 10 mM et
15 h 20 mM, reprfsentent une'rfserve 6nergftique
limitfe permettant.de maintenir I'activit6 cardiaque
pendant environ 30 secondes. Le myocarde doit donc
ajuster en permanence sa production h sa consomma-
tion d'fnergie. Les mfcanismes de cette rfgulation ne
sont pas encore tous connus.
Parmi les facteurs ou systfmes impliqufs dans
cette rfgulation fine des flux 6nerg6tiques cellulaires,
le syst~me de la crfatine-kinase (CK) joue un r61e
important. La CK catalyse le transfert rfversible
d'une liaison riche en 6nergie entre I'ATP et la crfa-
tine (Cr): ADP + PCr + H + ~ ATP + Cr. I1 existe plu-
sieurs isoformes de la CK, dont l'expression a une
spfcificit6 tissulaire et varie au cours du dfveloppe-
ment. Le myocarde adulte prfsente quatre isoformes:
une isoforme exclusivement mitochonckiale (mi-CK)
et trois isoformes cytosoliques (MM, et en faible
quantit6 MB et BB). Dans la cellule myocardique, la
MM-CK est soit sous forme libre dans le cytosol,
soit fixfe dans les compartiments intracellulaires h
proximit6 des ATPases (membrane plasmique, myo-
filaments, rfticulum sarcoplasmique). Dans les myo-
filaments, la MM-CK, couplfe h l'ATPase de la
myosine, catalyse la phosphorylation de I'ADP pro-
duite par la rfaction ATPasique et permet ainsi de
maintenir un rapport ATP/ADP 61evf, favorisant un
fonctionnement optimal de l'ATPase. Contrairement
aux prfparations in vitro de mitochondries isol6es,
les mitochondries in situ prfsentent une ,faible sensi-
bilit6 h I'ADP cytosolique. Cette sensibilit6 est aug-
265
~ADP~~- PCr CYTOSOL
--
MITOCHONDRIE
PCr.4~ ...,D,-AD P ~
ATP "~ ~ Cr --
Figure 2. Transport 6nergftique par le systfme crfatine (Cr) -
phosphocrfatine (PCr) dans le cardiomyocyte.
mentfe en prfsence de Cr. En effet, la mi-CK est
couplfe aux phosphorylations oxydatives et produit
de la PCr h partu" de I'ATP. L'ADP libfr6 par la mi-
CK est alors immfdiatement disponible et stimule la
respiration. La respiration mitochondriale est donc
sous le contr61e de la mi-CK. Cette polarisation de la
rfaction de la mi-CK, en connexion avec les CK
cytosoliques, pourrait permettre un transfert rapide
(channeling) des liaisons riches en 6nergie depuis les
mitochondries jusqu'aux sites d'utilisation et, en
retour, le transfert rapide des signaux depuis les sites
d'utilisation jusqu'aux mitochondries (figure 2). Cet
ensemble de rfactions permet, ainsi, un couplage
efficace entre production et utilisation de I ener~,le
• o"
dans les cardiomyocytes et les cellules musculaires
oxydatives en gfn6ral [3].
RI~SERVES I~NERGI~TIQUES
EN PRI~SENCE
D'UNE SIDI~RATION MYOCARDIQUE
Les mfcanismes intimes de la dysfonction myocar-
dique aprfs une isch6mie transitoire (sidfration myo-
cardique, stunned myocardium) ne sont pour l'instant
pas totalement expliqufs. Les principaux facteurs
mis en jeu sont la surcharge calcique intracellulaire
(le paradoxe calcique), la formation de radicaux
libres lors de la reperfusion, ainsi qu'une diminution
de la sensibilit6 des myofilaments au calcium. Les
modifications du mftabolisme 6nergftique et leur
r61e dans la physiopathologie de cette situation sont
encore discutfs.
Le nicorandil, ester nicotinamide, est un agent
ouvreur des canaux potassiques ATP-dfpendants
(KATp). I1 est c o m m e r c i a l i s t en France, depuis
266 F. Sztark et al.
1992, du fait de ses propriEtEs cardioprotectrices. I1
a 6t6 montr6 rEcemment, que l'isoflurane a des pro-
priEtEs vasodilatatrices et cardioprotectrices qui
seraient antagonisEes par le gibenclamide, un blo-
queur des canaux KAa-v [4]. Les effets de l'associa-
tion isoflurane et nicorandil sur la fonction car-
diaque, Evalu6e par ultrasonomicromEtrie, et sur le
m6tabolisme 6nerg6tique ont 6t6 6tudiEs au cours de
l'isch6mie rEgionale transitoire du coeur de lapin
[5]. Quatre groupes d'animaux ont 6tE compar6s
selon le protocole anesthdsique: fentanyl seul, iso-
flurane seul, fentanyl et nicorandil, isoflurane et
nicorandil. I1 existait une diff6rence significative en
termes de rdcup6ration fonctionnelle post-isch6-
mique en.tre les diff6rents groupes : apr~s sid6ration,
la rdcup6ration 6tait meilleure dans le groupe nico-
randil et isoflurane que dans le groupe nicorandil et
fentanyl; la fonction systolique 6tait meilleure dans
ces deux groupes en comparaison avec les animaux
ayant requ soit l'isoflurane seul, soit le fentanyl
seul. Cependant, les concentrations myocardiques
en ATP 6taient diminu6es dans tousles groupes, et
celles du lactate n'6taient pas significativement dif-
f6rentes, apr~s deux heures de reperfusion.
Ces r6sultats soulignent la dissociation qui existe
entre la rEcup6ration fonctionnelle post-isch6mique
et l'6volution des param6tres m6taboliques (nucldo-
tides adEnyliques, lactate). Le lactate est h la fois un
produit et un substrat du m6tabolisme myocardique
et, plus que la simple mesure d'une concentration,
il faudrait 6tudier les flux de lactate. Cependant,
une concentration de lactate identique dans les
zones contr61es et ischdmides n'est pas en faveur
d'une dysfonction mitochondriale sdv~re. Ceci
t6moigne d'une sid6ration myocardique avec une
bonne rEcup6ration m6tabolique, plut6t que d'un
tissu ayant subi un infarctus irr6versible. L'am61io-
ration de la fonction systolique, malgr6 des concen-
trations d'ATP diminudes, a ddjh 6t6 observ6e avec
le nicorandil. L'isch6mie entra~ne une diminution
brutale de l'apport en 0 2, avec une chute de la pro-
duction mitochondriale d'ATP et de sa concentra-
tion tissulaire. Ces modifications du m6tabolisme
6nerg6tique entra~nent une fuite de potassium vers
le milieu extracellulaire par les canaux KATP qui
pourrait expliquer en partie l'effet cardioprotecteur
du nicorandil. Lors de la reperfusion du myocarde,
il existe un 6quilibre dynamique entre production et
utilisation de I'ATP, et le param~tre important est la
capacit6 de synth~se mitochondriale d'ATP et non
pas la valeur absolue d'ATP intratissulaire. Par
ailleurs, il existe une compartimentation de I'ATP
avec un gradient de concentration d'ATP entre la
mitochondrie et le cytosol o?a il est utilis6. Le
dosage d'ATP obtenu ~ partir d'une biopsie myo-
cardique est une mesure globale qui ne prend pas en
compte ces differences de concentration.
En conclusion, le contenu tissulaire en nucl6o-
tides adEnyliques ne refl~te pas la rEcupEration
fonctionnelle du myocarde soumis ~ une ischEmie
transitoire. Sa mesure unique est insuffisante dans
les Etudes de cardioprotection et devrait 8tre com-
pl6t6e par I'analyse fonctionnelle du m6tabolisme
6nergEtique mitochondrial.
EFFETS DES ANESTHESIQUES LOCAUX
SUR LE MI~TABOLISME ENERGI~TIQUE
MITOCHONDRIAL
La mitochondrie est un site d'action potentiel pour
les agents anesth6siques. Les anesth6siques g6n6-
raux entra~nent des modifications de diff6rentes
fonctions mitochondriales (synth~se d'ATP, accu-
mulation du calcium). Plusieurs 6tudes se sont intd-
ress6es aux effets des anesth6siques locaux (AL)
sur le m6tabolisme mitochondrial. Les moi6cules
les plus lipophiles, comme la bupivaca'fne, dimi-
nuent la production d'6nergie, sous forme d'ATP,
dans la cellule [6]. Une telle action peut expliquer,
en pattie, la toxicit6 de ces mol6cules: dysfonction
myocardique avec la bupivacafne, toxicitE neuro-
logique locale. Deux m6canismes d'action des AL
ont 6tE dEcrits au niveau des phosphorylations oxy-
datives mitochondriales: un effet dEcouplant entre
la consommation d'O 2 et la synth~se d'ATP, et une
inhibition directe de certains complexes enzyma-
tiques de la cha~ne respiratoire mitochondriale, avec
comme consfquence une diminution de la synth~se
d'ATP par 1' ATP-synthEtase.
La ropivaca'ine est l'homologue propyl de la bupi-
vaca'fne; ~ la diff6rence de cette derni~re, les solu-
tions de ropivaca'ine ne contiennent que l'6nantio-
m~re S(-). Les Etudes p h a r m a c o l o g i q u e s ont
montrE que la toxicit6 cardiaque de la ropivaca'fne
6tait moindre que celle de la bupivacafne. Les effets
de ces molecules sur la bio6nergEtique mitochon-
driale des cellules cardiaques ont 6t6 6tudi6s. Bupi-
vaca'fne et ropivacaine dEcouplent les phosphoryla-
 Bio~nergEtiquecellulaire
tions oxydatives, alors que la lidocai'ne ne modifie
pas la respiration mitochondriale. In situ, dans des
fibres cardiaques permEabilisEes, un effet inhibiteur
des deux anesthEsiques au niveau du complexe I de
la chMne respiratoire (NADH dEshydrogEnase) a
EtE mis en Evidence. Cependant la ropivacai'ne est
moins puissante que la bupivacai'ne; ~ une concen-
tration de 3 mM, la synth~se d'ATP est compl~te-
ment inhibEe par la bupivacai'ne, alors qu'elle n'est
diminuEe que de 40 % avec la ropivacaine [7].
Selon le module utilisE (mitochondries isolEes,
cellules permEabilisEes ou non), ou selon les condi-
tions expErimentales et l'6tat d'Energisation des
mitochondries, les mEcanismes d'action des AL
peuvent 8tre diffErents, mSme s'ils concourent tous
une diminution de la synth~se d'ATP [8]. In vivo,
l'effet principal de ces molecules est une inhibition
enzymatique, le complexe I de la cha3ne respiratoire
appara3t, au niveau de la mitochondrie, comme la
cible prEfErentielle des agents ahesthEsiques.
I~VALUATION PAR SPECTROSCOPIE
DU MI~TABOLISME I~NERGI~TIQUE
CELLULAIRE CHEZ L'HOMME
De nombreuses techniques permettent de mesurer
les c o n d i t i o n s d ' a p p o r t sanguin en O~ c h e z
l'homme (dEbits gEndraux ou IocorEgionaux, diffE-
rences artErioveineuses en 0 2, extraction tissulaire).
De m~me, le rEsultat final de cet apport en 0 2 est
aussi accessible par la mesure du fonctionnement
de l'organe (EEG, Echocardiographie, force muscu-
laire). En.revanche, la phase intermEdiaire, au cours
de laquelle 1'O 2 apportE est utilisE pour la produc-
tion de l'Energie nEcessaire au fonctionnement de
l'organe, est difficile/~ Evaluer chez l'homme.
La detection d'un trouble du mEtabolisme oxyda-
tif appara/t cependant essentielle. La diminution de
la pression intramitochondriale d'O 2, qu'elle soit
due h u n dEfaut d'apport ou ~ une augmentation des
besoins, donne lieu ?~ de nombreuses modifications
de l'Equilibre EnergEtique. La dysoxie cellulaire est
dEfinie comme l'insuffisance de production d'ATP
par la mitochondrie pour assurer les besoins cellu-
laires. Le seuil d'apparition de la dysoxie est appelE
PcritO2 . Cependant, la stimulation puissante de la
glycolyse anaErobie peut permettre le maintien
d'une production totale d'ATP suffisante. L'hypoxie
cellulaire apparait quand cette production totale
267
devient insuffisante, perturbant le fonctionnement
cellulaire. Ainsi, il existe toute une gamme d'adap-
tations mEtaboliques face aux besoins cellulaires.
En outre, un apport sanguin en 0 2 suppose correct
n'est pas synonyme d'une production mitochon-
driale d'ATP adequate (sepsis, par exemple); il peut
exister une alteration siEgeant ~ diverses Etapes du
processus d'utilisation de 1'O2: distribution rEgio-
nale du debit cardiaque, microcirculation, diffusion
de 1'O 2, autres voies d'utilisation de 1'O 2, apport en
substrats, activitE des dEshydrogEnases. Enfin, les
marqueurs de la dysoxie cellulaire doivent 8tre
identifies h la lumi~re des donnEes rEcentes sur le
mEtabolisme EnergEtique cellulaire. Ainsi, le lactate
intracellulaire ne serait plus/t considErer comme un
dEchet toxique, tEmoin d'une souffrance cellulaire
irreversible, mais comme un substrat EnergEtique
utilisable par la cellule cErEbrale, musculaire, ou
hEpatique.
Ainsi, la mesure du mEtabolisme o x y d a t i f h
l'Echelon cellulaire reprEsente un enjeu important,
tant pour les cliniciens que pour les chercheurs.
Cependant, les mEthodes applicables ~ l'homme
doivent rEpondre/~ un cahier des charges precis: une
information d'ordre cellulaire sur un tissu ou un
organe in vivo, et une mesure non-invasive de com-
poses biochimiques d'intEr6t (ATE ADP, lactate, pH
intracellulaire, potentiel oxydorEducteur). Trois
outils rEpondent actuellement h cette demande: la
spectroscopie RMN du phosphore 31 (RMN 31p), la
spectroscopie RMN du proton (RMN IH), et la
spectroscopie en proche infrarouge (NIRS).
Spectroscopie RMN 31p
Le principe gEnEral de la RMN, tr~s complexe, est
base sur la propriEtE des noyaux de certains atomes
qui sont animEs d'un mouvement rotatif en presence
d'un champ magnEtique intense et homog~ne. Une
impulsion radiofrEquence ~ la frEquence de rEso-
nance de ces noyaux entra/ne un changement dans
leur orientation, dont le retour ~t la position initiale
est fonction du temps. La transformEe de Fourier de
ce signal donne un pic de frEquence, dont l'intensitE
est fonction du nombre de noyaux resonant ~ cette
frEquence. Plusieurs esp~ces biochimiques pouvant
contenir le m~me noyau RMN pourront 8tre identi-
flees, en raison de leur environnement 61ectronique
16g~rement different les unes des autres.
268
La spectroscopie RMN 31p a 6tE la premi&e
technique appliquEe chez l ' h o m m e h partir des
annEes 1980 pour l'Etude du muscle squelettique.
Le sujet est install6 dans un aimant supraconduc-
teur, les muscles h explorer au contact d ' u n e
bobine de surface. L'acquisition des spectres RMN
se fait au repos, au cours de l'effort, et durant la
phase de rEcupEration. I1 est ainsi possible de
m e s u r e r le degrE d ' a c i d o s e intracellulaire, la
consommation et la synth6se de la PCr, navette
essentielle entre les sites de production et d'utilisa-
tion de 1' ATP.
La RMN 3tp ne mesure pas la concentration
d'ADP qui est infErieure au seuil de detection des
composes biochimiques (0,5 mM). Or, I'ADP est
un EIEme.nt essentiel pour la regulation de la respi-
ration mitochondriale: un niveau ElevE d'ADP,
donc un potentiel phosphate ATP/ADP faible, sti-
mule la consommation d'O 2. Cependant, si l'effort
est quantifiE, il est possible d'estimer le niveau
d'ADP requis pour produire l'effort considErE, par
la mesure du rapport entre phosphate inorganique
(Pi) et PCr. Ainsi, un sportif entrainE aura un rap-
port Pi/PCr plus faible qu'un sujet sEdentaire pour
un mSme niveau d'effort: moins d'ADP est nEces-
saire pour stimuler la production mitochondriale
d'ATP. Ceci s'explique par les modifications tissu-
laires locales induites par l'entrainement (taille et
proportion de fibres oxydatives augmentEes en rap-
port avec une activitE e n z y m a t i q u e oxydative
accrue, augmentation du nombre des mitochon-
dries, augmentation du contenu en myoglobine et
de la densitE capillaire).
MalgrE la richesse de l'information biochimique
obtenue par la RMN 31p, l'Etude du mEtabolisme
oxydatif en presence d'une hypoxEmie a donne lieu
peu d'Etudes chez l'homme. Le mEtabolisme
musculaire, de sujets atteints d'insuffisance respira-
toire chronique en oxygEnothErapie ~ domicile, a
EtE 6valuE: pour le m~me niveau d'effort de flexion
plantaire, l'administration d'O 2 entrainait une amE-
lioration du mEtabolisme oxydatif des muscles du
mollet par rapport ~ la situation en air (diminution
du rapport Pi/PCr en fin d'exercice, reduction de
l'acidose intracellulaire, synth6se de PCr plus
rapide). Cette am61ioration n'Etait que partielle et
l'atteinte EnergEtique restait nette par rapport aux
rEsultats observes chez le sujet sain [9]. L'hypoxE-
mie chronique peut ainsi induire des lesions tissu-
F. Sztark et al.
laires non corrigeables par l'administration d'O 2
(atteinte enzymatique, histologique).
En pathologie humaine (muscle, cceur, cerveau),
la RMN 31p se heurte cependant ~ quelques difficul-
tEs: nEcessit6 d'un appareillage sophistiquE (aimant
supraconducteur ~t haut champ, spectrom6tre, quan-
tification de l'exercice), autonomie des sujets. De
plus, les mesures effectuEes sont relatives et expri-
mEes sous forme de rapport ou de variation de
concentrations.
Spectroscopie RMN IH
L'abondance naturelle du proton dans tousles tissus
a p e r m i s l ' e s s o r c o n s i d 6 r a b l e de I ' i m a g e r i e
RMN IH, dont le principe s'appuie sur les diff6-
rences des temps de relaxation des noyaux de pro-
tons h l'int6rieur d'un tissu, en rapport avec la den-
site en eau. La spectroscopie ~H nEcessite des
sequences d'impulsion visant h supprimer le pic de
l'eau. L'information biochimique ainsi obtenue
concerne le N-acEtyl aspartate, marqueur de la via-
bilitE neuronale, le couple glutamine-glutamate, le
couple Cr-PCr, les radicaux h choline, et surtout le
lactate. L'intEr& de la spectroscopie RMN t H reside
aussi dans sa bonne resolution spatiale. Ainsi, le
suivi mEtabolique d'un accident vasculaire cErEbral
est possible avec identification du pic de lactate
dans un volume inf6rieur h 1 mL chez I'homme.
Cependant, les Etudes expErimentales ou humaines
par spectroscopie RMN IH au cours d'une rEduc-
tion d'apport sanguin en 0 2 (ischEmie partielle,
hypoxEmie) restent peu nombreuses. Au cours
d'une hypoxEmie expErimentale modErEe et rEver-
sible, l'imagerie RMN IH a permis de mettre en
Evidence une augmentation du pic de lactate dans le
nEocortex de rat, alors que les conditions d'oxygE-
nation cErEbrale (dEbit sanguin tissulaire) 6taient
pr6servEes [10]. Ceci signifie que l'accumulation
intracErEbrale de lactate n'est pas synonyme de
souffrance tissulaire irreversible, mais tEmoignerait
plut6t d' une adaptation mEtabolique prEcoce.
La localisation precise de l'information biochi-
mique et son inter& clinique mEritent certainement
un dEveloppement en clinique, malgrE des contraintes
(sujet autonome, mesure relative, disponibilitE
de l'appareillage). Les tissus actuellement explores
par RMN IH sont le cerveau, le coeur et le muscle
squelettique.
 Bio~6nergCtiquecellulaire
Spectroscopie en proche infrarouge
Depuis quelques ann6es, la NIRS a 6t6 proposEe
comrne m6thode d'Evaluation de l'oxygEnation tis-
sulaire, notamment au niveau c6r6bral et muscu-
lake. Le principe repose sur la quantit6 de lumi~re
absorb6e dans le spectre proche de l'infrarouge
(longueur d'onde 700-1000 nm) par deux princi-
paux chromophores biologiques: l'hEmoglobine et
le cytochrome aa 3 (la myoglobine pour le muscle
squelettique). Bien que d'intensit6 faible (15 % de
l'ensemble du spectre), le signal du cytochrome aa3
a un int6rEt clinique 6vident: l'augmentation de
la p r o p o r t i o n de c y t o c h r o m e sous sa f o r m e
r6duite dans le cerveau apparalt d6s une PaO 2 de
60 mmHg, chez l'animal comme chez I'homme
sain. Pour certains, il pourrait s'agir d'un marqueur
pr6coce de l'adaptation cEr6brale h l'hypoxie.
L'avantage de la NIRS est aussi sa possibilit6
d'analyse au lit du patient. De nombreux travaux de
validation restent b. faire, avant l'utilisation de la
NIRS en routine clinique, car plusieurs param~tres
peuvent influencer les r6sultats: la position de la
sonde qui est sensible au mouvement, les tissus
superficiels (vaisseaux extracrfiniens), la distance
interoptode qui fixe la profondeur de tissu analyse
et la r6solution spectrale, I'identification de chaque
spectre (h6moglobine totale, h6moglobine oxyd6e,
cytochrome) par un ou plusieurs algorithmes; enfin,
comme avec la spectroscopie RMN, les r6sultats
sont exprim6s en unites relatives.
En conclusion, des outils pour l'6valuation de
l'6nerg6tique cellulaire existent et sont applicables
View publication stats
269
h. l'homme. Ils apportent des informations m6tabo-
liques compl6mentaires aux donn6es cliniques.
Leur accessibilit6 (RMN) et leur difficult6 d'ana-
lyse (NIRS) ne permettent pour le moment de les
utiliser que dans le cadre de la recherche.
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