Pengaruh Perendaman Ekstrak Buah Mengkud

IR - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI
PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK BUAH MENGKUDU

Morinda citrifolia L. TERHADAP PROFIL DARAH
IKAN NILA Oreochromis niloticus
THE EFFECT OF SOAKING NONI FRUIT Morinda citrifolia L.

EXTRACT TO HEMATOLOGY OF TILAPIA Oreochromis niloticus
PROGRAM S-1 AKUAKULTUR
Oleh:
M. TANDO RIDHO PRATAMA

BANDAR LAMPUNG - LAMPUNG
FAKULTAS PERIKANAN DAN KELAUTAN

UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2019
SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

ii
Yang bertanda tangan di bawah ini :
N a m a : M. Tando Ridho Pratama

N I M : 141611123003
Tempat, tanggal lahir : Bandar Lampung, 29 Oktober 1993
Alamat : Jl. Bunga Lili 6 Blok 7 G No. 3 Perumnas Way Kandis,
Bandar Lampung, Lampung Telp./HP 08994304810
Judul Skripsi : Pengaruh Perendaman Ekstrak Buah Mengkudu Morinda
citrifolia L. Terhadap Profil Darah Ikan Nila
Oreochromis niloticus
Pembimbing : 1. Dr. Woro Hastuti Satyantini, Ir., M.Si.
2. Sudarno, Ir., M. Kes.
Menyatakan dengan sebenarnya bahwa hasil tulisan laporan Skripsi yang

saya buat adalah murni hasil karya saya sendiri (bukan plagiat) yang berasal dari
Dana Penelitian : Mandiri / Proyek Dosen / Hibah / PKM. (coret yang tidak perlu)
Di dalam skripsi / karya tulis ini tidak terdapat keseluruhan atau sebagian
tulisan atau gagasan orang lain yang saya ambil dengan cara menyalin atau
meniru dalam bentuk rangkaian kalimat atau simbol yang saya aku seolah-olah
sebagai tulisan saya sendiri tanpa memberikan pengakuan pada penulis aslinya,
serta kami bersedia :
1. Dipublikasikan dalam Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan Fakultas

Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga;
2. Memberikan ijin untuk mengganti susunan penulis pada hasil tulisan skripsi /
karya tulis saya ini sesuai dengan peranan pembimbing skripsi;
3. Diberikan sanksi akademik yang berlaku di Universitas Airlangga, termasuk
pencabutan gelar kesarjanaan yang telah saya peroleh (sebagaimana diatur di
dalam Pedoman Pendidikan Unair 2010/2011 Bab. XI pasal 38 – 42), apabila
dikemudian hari terbukti bahwa saya ternyata melakukan tindakan menyalin
atau meniru tulisan orang lain yang seolah-olah hasil pemikiran saya sendiri
Demikian surat pernyataan yang saya buat ini tanpa ada unsur paksaan dari
siapapun dan dipergunakan sebagaimana mestinya.
ii

iii
SKRIPSI


Skripsi sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Perikanan
Pada Program Studi S-1 Akuakultur
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga
Oleh :
M. TANDO RIDHO PRATAMA

NIM. 141611123003
Menyetujui,
Komisi Pembimbing
Pembimbing Utama, Pembimbing Serta,
Dr. Woro Hastuti Satyantini, Ir., M.Si. Sudarno, Ir., M.Kes.

NIP. 19610907 198903 2 001 NIP. 19550713 198601 1 001
iii

iv
SKRIPSI


Oleh :
M. Tando Ridho Pratama

NIM. 141611123003
Telah diujikan pada

Tanggal : 15 November 2018
KOMISI PENGUJI SKRIPSI

Ketua : Dr. Laksmi Sulmartiwi, S.Pi., MP.
Sekretaris Penguji : Dr. Akhmad Taufiq Mukti, S.Pi., M.Si.
Anggota : Putri Desi Wulan Sari, S.Pi., M.Si.
Dr. Woro Hastuti Satyantini, Ir., M.Si.
Sudarno, Ir., M.Kes.
Surabaya, 28 Januari 2019

Fakultas Perikanan dan Kelautan
Universitas Airlangga
Dekan,
iv

v
RINGKASAN
M. TANDO RIDHO PRATAMA. Pengaruh Perendaman Ekstrak Buah

Mengkudu Morinda citrifolia L. Terhadap Profil Darah Ikan Nila
Oreochromis niloticus. Dosen Pembimbing Dr. Woro Hastuti Satyantini, Ir.,
M.Si., dan Sudarno, Ir., M.Kes.
Budidaya ikan nila Oreochromis niloticus tidak dapat dipisahkan dari

tingginya resiko tingkat kematian yang disebabkan oleh penyakit, seperti virus,
bakteri dan patogen lainnya. Pemberian ekstrak buah mengkudu Morinda
citrifolia L. dengan metode perendaman merupakan upaya untuk meningkatkan
respon imun ikan terhadap serangan penyakit. Ekstrak buah mengkudu yang
diterima oleh ikan dari lingkungannya dapat mempengaruhi struktur sel dan
jaringan. Profil darah merupakan salah satu indikator adanya perubahan respon
imun akan pengaruh zat asing yang masuk ke dalam tubuh. Efektivitas konsentrasi
ekstrak buah mengkudu terhadap parameter profil darah belum banyak diketahui,
sehingga penelitian mengenai pengaruh perendaman ekstrak buah mengkudu
terhadap profil darah ikan nila perlu dilakukan.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh perendaman
ekstrak buah mengkudu terhadap perubahan profil darah ikan nila. Metode yang
digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimental dengan Rancangan
Acak Lengkap (RAL), enam perlakuan dan empat ulangan, yaitu A (0 g/L), B (3,6
g/L), C (4,2 g/L), D (4,8 g/L), E (5,4 g/L) dan F (6 g/L). Parameter utama yang
diamati adalah total eritrosit, total leukosit, kadar hemoglobin dan kadar glukosa
darah. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan ANOVA kemudian
dilanjutkan dengan Uji Jarak Berganda Duncan.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa perendaman ekstrak buah
mengkudu berbeda nyata (P<0,05) terhadap profil darah, yaitu total eritrosit, total
leukosit, kadar hemoglobin dan kadar glukosa darah ikan nila. Konsentrasi ekstrak
buah mengkudu 4,8 g/L merupakan konsentrasi terbaik untuk meningkatkan
imunitas dengan persentase kelulushidupan lebih dari 50% hingga akhir penelitian
96 jam.

vi
SUMMARY
M. TANDO RIDHO PRATAMA. THE EFFECT OF SOAKING NONI

FRUIT Morinda citrifolia L. EXTRACT TO HEMATOLOGY OF TILAPIA
Oreochromis niloticus. Academic Advisor Dr. Woro Hastuti Satyantini, Ir.,
M.Si., and Sudarno, Ir., M.Kes.
The cultivation of tilapia Oreochromis niloticus is an inseparable from the

high risk of mortality caused by diseases, such as viruses, bacteria and other
pathogens. Provision of noni fruit Morinda citrifolia L. extract by soaking method
is an attempt to improve the fish's immune response to disease attacks. Extract of
noni fruit received by fish from its environment can affect cell structure and
tissue. Hematology is one indicator of changes in the immune response to the
influence of foreign substances that enter the body. The effectiveness of noni fruit
extract concentration on hematology parameters has not been widely known, so
research on the effect of soaking of noni fruit extract on hematology of tilapia
needs to be done.
The purpose of this study was to determine the effect of soaking of noni
fruit extract on changes in hematology of tilapia. The method used in this study
was an experimental method with a completely randomized design (CRD), six
treatments and four replications, namely A (0 g/L), B (3.6 g/L), C (4.2 g/L ), D
(4.8 g/L), E (5.4 g/L) and F (6 g/L). The main parameters observed were total
erythrocyte, total leukocyte, hemoglobin level and blood glucose level. The data
obtained were analyzed using ANOVA then continued with Duncan's Multiple
Range Test.
The results of this study indicate that the soaking of noni fruit extract was
significantly different (P<0.05) on blood profile, that is total erythrocytes, total
leukocytes, hemoglobin level and blood glucose level of tilapia. The concentration
of 4.8 g/L noni fruit extract is the best concentration to improve immunity and
survival rate of tilapia more than 50% until the end of research 96th hours.
vi

vii
KATA PENGANTAR
Segala puji syukur atas kehadirat Allah SWT atas limpahan rahmat dan
karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan Skripsi dengan judul
Pengaruh Perendaman Ekstrak Buah Mengkudu Morinda citrifolia L.
Terhadap Profil Darah Ikan Nila Oreochromis niloticus. Skripsi ini merupakan
salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Perikanan pada Program Studi
S-1 Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga,
Surabaya.
Penulis sangat menyadari Skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan,
sehingga kritik dan saran yang membangun penulis harapkan demi perbaikan dan
kesempurnaan Skripsi. Semoga Skripsi ini dapat bermanfaat khususnya bagi
penulis, umumnya dapat memberikan informasi bagi semua pihak dan masyarakat
luas.
Surabaya, November 2018
Penulis
vii

viii
UCAPAN TERIMA KASIH
Pada kesempatan ini, dengan penuh rasa hormat penulis haturkan terima
kasih yang sebesar-besarnya kepada:
1. Ibu Prof. Dr. Mirni Lamid., drh. MP, selaku Dekan Fakultas Perikanan dan
Kelautan Universitas Airlangga Surabaya.
2. Bapak Agustono, Ir., M.Kes selaku dosen wali yang telah memberikan
motivasi dalam bidang akademik dan non akademik.
3. Ibu Dr. Woro Hastuti Satyantini, Ir., M.Si selaku Dosen Pembimbing
Utama dan Bapak Sudarno, Ir., M.Kes selaku Dosen Pembimbing Serta
yang telah memberikan arahan, masukan serta bimbingan sejak
penyusunan proposal hingga terselesaikannya penyusunan skripsi ini.
4. Ibu Dr. Laksmi Sulmartiwi, S.Pi, MP., Bapak Dr. Akhmad Taufiq Mukti,
S.Pi., M.Si dan Ibu Putri Desi Wulan Sari, S.Pi., M.Si., selaku dosen
penguji yang telah memberikan masukan, kritik dan saran atas
penyempurnaan Skripsi ini.
5. Seluruh dosen dan staf kependidikan Fakultas Perikanan dan Kelautan
Universitas Airlangga yang telah membantu dalam pelaksanaan dan
penyelesaian skripsi ini.
6. Ayah, Ibu, dan Adik yang senantiasa memberikan dukungan moril dan
materiil dalam menyelesaikan skripsi ini..
7. Tim penelitian MengkuduSquad dan teman-teman Alihjenis Budidaya
Perairan 2016 yang senantiasa memberikan semangat dan dukungan
penulis untuk menyelesaikan penyusunan karya ilmiah skripsi ini.
viii

ix
DAFTAR ISI
Halaman
RINGKASAN ..........................................................................................................v
SUMMARY ......................................................................................................... ..vi
KATA PENGANTAR .......................................................................................... vii
UCAPAN TERIMA KASIH ...............................................................................viii
DAFTAR ISI ..........................................................................................................ix
DAFTAR TABEL ..................................................................................................xi
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................xii
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................xiii
I PENDAHULUAN ..............................................................................................1
1.1 Latar Belakang ............................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah ....................................................................................... 3
1.3 Tujuan.......................................................................................................... 3
1.4 Manfaat........................................................................................................ 3
II TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................................... 4
2.1 Mengkudu .................................................................................................... 4
2.1.1 Klasifikasi ........................................................................................... 4
2.1.2 Morfologi............................................................................................4
2.1.3 Kandungan Bioaktif Buah Mengkudu................................................5
2.2 Ikan Nila ......................................................................................................7
2.2.1 Klasifikasi ...........................................................................................7
2.2.2 Morfologi............................................................................................8
2.3 Hematologi ..................................................................................................9
2.3.1 Sel Darah Merah (Eritrosit) ..............................................................10
2.3.2 Sel Darah Putih (Leukosit) ...............................................................11
2.3.3 Glukosa Darah ..................................................................................12
2.3.4 Hemoglobin ......................................................................................13
III KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS.........................................15
3.1 Kerangka Konseptual ................................................................................15
ix

x
3.2 Hipotesis ....................................................................................................20

IV METODOLOGI PENELITIAN ......................................................................21
4.1 Waktu dan Tempat Penelitian ...................................................................21
4.2 Materi Penelitian .......................................................................................21
4.2.1 Alat Penelitian...................................................................................21
4.2.2 Bahan Penelitian ...............................................................................21
4.3 Metode Penelitian ......................................................................................22
4.3.1 Rancangan Penelitian .......................................................................22
4.3.2 Variabel Penelitian ...........................................................................23
4.3.3 Prosedur Kerja ..................................................................................23
4.3.4 Parameter Penelitian .........................................................................28
4.3.5 Analisis Data ....................................................................................28
4.4 Diagram Alir Penelitian .............................................................................29
V HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................30
5.1 Hasil ...........................................................................................................30
5.1.1 Sel Darah Merah (Eritrosit) ..............................................................30
5.1.2 Sel Darah Putih (Leukosit) ...............................................................31
5.1.3 Hemoglobin ......................................................................................33
5.1.4 Glukosa Darah ..................................................................................34
5.1.5 Kualitas Air ......................................................................................35
5.1.5 Kelulushidupan .................................................................................36
5.2 Pembahasan ...............................................................................................37
VI KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................................42
6.1 Kesimpulan ................................................................................................42
6.2 Saran ..........................................................................................................42
DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................................43
LAMPIRAN ..........................................................................................................48

xi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Desain Penelitian..............................................................................................21

4.2 Desain Pengacakan Akuarium .........................................................................21
5.1 Hasil Total Eritrosit ..........................................................................................30
5.2 Hasil Total Leukosit ........................................................................................32
5.3 Hasil Kadar Hemoglobin .................................................................................35
5.4 Hasil Kadar Glukosa Darah.............................................................................35
5.5 Hasil Kualitas Air ............................................................................................37
5.6 Hasil Kelulushidupan ......................................................................................37
xi

xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Buah mengkudu.................................................................................................5

2.2 Morfologi Ikan Nila (Oreochromis niloticus)....................................................8
2.3 Eritrosit dan Jenis Leukosit Ikan........................................................................9
3.1 Bagan Kerangka Konseptual Penelitian...........................................................19
4.4 Diagram Alir Penelitian...................................................................................28
xii

xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Uji pendahuluan LC50-96jam ............................................................................51

2. Hasil pengukuran total eritrosit pengamatan jam ke-24 ...................................52
3. Hasil pengukuran total eritrosit pengamatan jam ke-96 .................................. 53
4. Hasil pengukuran total leukosit pengamatan jam ke-24 .................................. 54
5. Hasil pengukuran total leukosit pengamatan jam ke-96 .................................. 55
6. Hasil pengukuran kadar hemoglobin pengamatan jam ke-24 .......................... 56
7. Hasil pengukuran kadar hemoglobin pengamatan jam ke-96 .......................... 57
8. Hasil pengukuran kadar glukosa darah pengamatan jam ke-24 ........................58
9. Hasil pengukuran kadar glukosa darah pengamatan jam ke-96 ........................59
10. Dokumentasi penelitian ...................................................................................60
xiii

iv
iv

1
I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Ikan nila Oreochromis niloticus dikenal sebagai ikan yang memiliki
pertumbuhan yang sangat pesat dan tingkat produktivitasnya tinggi, sehingga ikan
nila menjadi komoditas budidaya perikanan andalan di Indonesia (Putri dkk.,
2013). Budidaya ikan nila tidak dapat dipisahkan dari tingginya resiko tingkat
kematian yang disebabkan oleh gangguan penyakit, baik infeksi oleh virus,
bakteri, jamur, maupun patogen lainnya (Aisiah, 2012). Buah mengkudu Morinda
citrifolia L. terbukti efektif digunakan sebagai bahan imunostimulan dalam upaya
preventif mempengaruhi respon imun tubuh melawan penyakit patogen (Chan-
Blanco et al., 2006).
Wang et al. (2002) melaporkan bahwa ekstrak buah mengkudu memiliki
kandungan bioaktif yaitu skopoletin, octoanoic acid, kalium, vitamin C, alkaloid,
antrakuinon, β-sitosterol, karoten, vitamin A, glikosida flavonoid, linoleat acid,
alizarin, amino acid, acubin, L-asperuloside, kaproat acid, kaprilat acid, ursolat
acid, rutin, pro-xeronine dan terpenoid. Kandungan bioaktif ekstrak buah
mengkudu menghasilkan efek terapeutik seperti analgesik, antimikrobial,
antioksidan, antikanker, antiinflamatori dan imunostimulan (Chan-Blanco et al.,
2006).
Haryani dkk. (2012) menyatakan bahwa pengobatan ikan menggunakan
metode perendaman mempermudah proses pengobatan pada benih ikan dalam
skala banyak. Ekstrak buah mengkudu sebagai imunostimulator pada kondisi
tertentu mampu memodulasi fungsi dan aktivitas sistem imun dengan cara

2
merangsang dan memperbaiki fungsi sistem imun, sehingga menyebabkan
perubahan fisiologi yang mempengaruhi profil darah (Zumrotul, 2013).
Beberapa kandungan ekstrak buah mengkudu yang bermanfaat ialah
senyawa flavonoid, saponin, dan skopoletin. Flavonoid mampu meningkatkan sel
darah merah dan hemoglobin, serta menurunkan kadar glukosa darah
(Wahjuningrum et al., 2008). Saponin berfungsi sebagai inhibitor enzim alfa-
glukosidase yang dapat menurunkan kadar glukosa darah, serta merangsang sel β
pankreas untuk menghasilkan lebih banyak insulin (Nayak dkk., 2009).
Selanjutnya, skopoletin dapat meningkatkan aktifitas fagositosis dan kapasitas
makrofag, mengikat serotonin, dan memperlebar pembuluh darah (Solomon,
1998). Ekstrak buah mengkudu digunakan sebagai imunostimulan bagi ikan, akan
tetapi belum banyak diketahui mengenai tingkat toksisitasnya pada ikan nila dan
korelasinya terhadap perubahan profil darah ikan nila. Uji toksisitas mengkudu
pada ikan nila dapat diketahui berdasarkan analisis Lethality Concentration 50
(LC50) dalam uji kesehatan ikan (Al-Attar, 2005).
Hasil penelitian yang dilakukan Kinasih et al. (2013) menunjukkan, terjadi
kematian ikan mas Cyprinus carpio yang disebabkan oleh zat toksikan dari
ekstrak daun babadotan Ageratum conyzoides yaitu saponin, flavonoid, polifenol
yang terserap ke dalam tubuh ikan berinteraksi dengan membran sel dan enzim.
Senyawa aktif antimikroba jika pada konsentrasi yang tinggi dapat meracuni
benih ikan nila karena adanya senyawa antimikroba yang bersifat racun yaitu
senyawa saponin (Ezraneti dan Fajri, 2013). Dilaporkan oleh Deng et al. (2012)
bahwa toksisitas ekstrak berupa aquous bunga mengkudu yang di uji

3
menggunakan Brine Shrimp Lethality Test (BLST) diperoleh hasil LC50 yaitu
76,13%. Selain itu, hasil uji LD50 ekstrak buah mengkudu selama 24 jam tidak
bersifat racun bagi ikan nila pada konsentrasi 1,42 g/L (Muharrama dkk., 2015).
Pemeriksaan darah bermanfaat untuk membantu meneliti sistem imun,
diagnosa penyakit dan mengetahui status kesehatan ikan (Salasia dkk., 2001).
Sejauh ini pengaruh konsentrasi ekstrak buah mengkudu dengan metode
perendaman terhadap profil darah ikan nila belum banyak dilaporkan, maka perlu
dilakukan penelitian terhadap total eritrosit, total leukosit, kadar hemoglobin dan
glukosa darah ikan nila.
1.2 Rumusan Masalah
Masalah yang dapat diidentifikasi adalah apakah ekstrak buah mengkudu
mempengaruhi total eritrosit, total leukosit, kadar hemoglobin dan glukosa darah
ikan nila, serta berapa konsentrasi terbaik untuk meningkatkan imunitas ikan nila?
1.3 Tujuan
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak buah
mengkudu terhadap total eritrosit, total leukosit, kadar hemoglobin dan glukosa
darah ikan nila, serta berapa konsentrasi terbaik untuk meningkatkan imunitas
ikan nila.
1.4 Manfaat
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dan pengetahuan
mengenai pengaruh ekstrak buah mengkudu terhadap total eritrosit, total leukosit,
kadar hemoglobin dan glukosa darah ikan nila.

4
II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Mengkudu
2.1.1 Klasifikasi
Tanaman mengkudu Morinda citrifolia L. diklasifikasikan sebagai berikut
(Djauhariya, 2003).
Filum : Angiospermae
Sub filum : Dicotyledoneae
Divisi : Malvales / Columniferae
Famili : Rubiaceae
Genus : Morinda
Spesies : Morinda citrifolia L.
Gambar 2.1 Buah mengkudu (Kusuma et al., 2017)
2.1.2 Morfologi
Suryowinoto (1997) menyatakan bahwa mengkudu termasuk jenis
tanaman pohon dan berbatang bengkok, ketinggiannya mencapai 3-8 m, berdaun
tunggal dengan ujung dan pangkal runcing. Buah mengkudu berbentuk bongkol
dengan permukaan buah benjol-benjol tidak teratur, berukuran panjang 5-10 cm
dan lebar 3-6 cm, buah muda yang belum masak berwarna hijau, kemudian
berubah warna kuning-kuningan pada saat buah telah masak, serta daging
buahnya berair.

5
2.1.3 Kandungan Bioaktif Buah Mengkudu
Buah mengkudu yang biasa disebut noni atau pace, memiliki kandungan
bioaktif yaitu skopoletin, octoanoic acid, kalium, vitamin C, alkaloid,
antrakuinon, β-sitosterol, karoten, vitamin A, glikosida flavonoid, linoleat acid,
alizarin, amino acid, acubin, L-asperuloside, kaproat acid, kaprilat acid, ursolat
acid, rutin, pro-xeronine dan terpenoid (Wang et al., 2002). Ekstrak buah
mengkudu memiliki efek terapeutik sebagai analgesik, antimikrobia, antioksidan,
antikanker, antiinflamatori dan imunostimulan (Chan-Blanco et al., 2006).
Manfaat buah mengkudu menurut penelitian Nayak dkk. (2009) bahwa
ekstrak buah mengkudu berfungsi sebagai obat diabetes karena dapat menurunkan
kadar glukosa darah di dalam tubuh. Selain itu, kandungan buah mengkudu
memiliki efek imunostimulan bagi tubuh. Pemberian ekstrak buah mengkudu
mampu meningkatkan respon fisiologi makrofag dan persentase jumlah sel
leukosit (Aldi dkk., 2016). Ekstrak buah mengkudu mampu mengaktivasi dan
meningkatkan sistem imun dengan cara merangsang dan memperbaiki fungsi
sistem imun (Zumrotul, 2013).
A. Flavonoid
Flavonoid merupakan senyawa aktif polifenol yang dapat meningkatkan
eritropoiesis (proses pembentukan eritrosit), berfungsi sebagai antioksidan dalam
menghambat peroksidasi lipid yang terjadi akibat stres oksidatif, menghambat
enzim alfa-glikosidase sehingga menunda penyerapan glukosa yang dapat
menurunkan kadar glukosa darah (Wahjuningrum et al., 2008). Flavonoid dapat
merangsang sel-sel fagosit untuk melakukan respon fagositosis (Nugroho, 2012).

6
Wahjuningrum et al. (2008) melaporkan bahwa aktivitas flavonoid yang
terkandung pada setiap tanaman dapat meningkatkan kadar hemoglobin di dalam
darah, serta meningkatkan kinerja organ-organ penghasil darah sehingga produksi
darah meningkat. Kandungan flavonoid dalam buah mengkudu mentah adalah
2.826 mg/kg, buah mengkudu matang 1.528 mg/kg, dan buah mengkudu sangat
matang 1.468 mg/kg (Singh et al., 2016).
B. Skopoletin
Skopoletin merupakan fitonutrien yang dapat mengikat serotonin.
Serotonin adalah salah satu zat penting didalam trombosit yang melapisi saluran
pencernaan dan otak, serta memiliki peran sebagai neurotransmiter dan perkusor
hormon melatonin (Harrison, 2000). Skopoletin berguna memperlebar saluran
pembuluh darah yang mengalami penyempitan dan melancarkan peredaran darah
agar meringankan kerja jantung dalam memompa darah sehingga tekanan darah
menjadi normal, tetapi tidak dapat menurunkan tekanan darah yang telah normal
(Solomon, 1998). Selain itu, skopoletin mampu meningkatkan aktifitas fagositosis
dan kapasitas makrofag sel darah putih (Aldi dkk., 2016). Sholehah (2010)
melaporkan bahwa pengukuran kandungan skopoletin pada buah mengkudu
mentah 95,95 g/kg, buah matang 289 g/kg, dan sangat matang 70,55 g/kg.
C. Saponin
Saponin merupakan senyawa aktif permukaan yang membentuk larutan
koloidal, sehingga dapat menimbulkan busa jika dikocok dalam air serta tidak
akan hilang dengan penambahan asam. Saponin merupakan senyawa yang

7
beracun untuk ikan, karena memiliki aktivitas hemolisis yang dapat merusak
eritrosit serta dapat menghambat proses pernapasan ikan. Tingginya kandungan
saponin dapat bersifat racun biasanya disebut sebagai sapotoksin (Singh et al.,
2016). Sifat hemolitik saponin terhadap darah terjadi akibat interaksi antara
selaput sterol eritrosit dimuati senyawa saponin, sehingga selaput menjadi pecah,
dan hilangnya hemoglobin (Muharrama dkk., 2015).
Saponin dapat merubah kadar glukosa darah dengan cara menghambat
absorpsi nutrisi yang masuk ke dalam darah. Saponin dapat meningkatkan sistem
kekebalan tubuh dengan merangsang sel β pankreas untuk mensekresikan lebih
banyak insulin (Nayak dkk., 2009). Kandungan saponin pada buah mengkudu
mentah adalah 2.250 mg/kg, buah mengkudu matang 2.450 mg/kg, dan buah
mengkudu sangat matang 2.600 mg/kg (Singh et al., 2016).
2.2 Ikan Nila
2.2.1 Klasifikasi
Saanin (1984) melaporkan bahwa ikan nila Oreochromis niloticus
mempunyai klasifikasi sebagai berikut:
Kingdom : Animalia
Filum : Chordata
Subfilum : Vertebrata
Kelas : Osteichtyes
Subkelas : Acanthopterygii
Ordo : Percomorphi
Subordo : Percoidea
Famili : Cichlidae
Genus : Oreochromis
Spesies : Oreochromis niloticus

8
2.2.2 Morfologi
Saanin (1968) menyatakan bahwa morfologi ikan nila Oreochromis
niloticus mempunyai ciri-ciri bentuk tubuh bulat pipih, punggung lebih tinggi,
pada badan dan sirip ekor ditemukan gurat sisi (linea lateralis) yang terputus
menjadi dua bagian. Bagian pertama terletak dari operkulum insang hingga
belakang sirip punggung, bagian kedua terletak dari sirip punggung hingga sirip
ekor. Warna tubuh yang dimiliki ikan nila adalah hitam keabu-abuan pada bagian
punggungnya dan semakin terang pada bagian perut ke bawah. Ikan nila memiliki
mata yang besar dan menonjol. Jumlah sisik pada garis rusuk sebanyak 34 yang
memiliki tipe sisik ctenoid (Hidayah, 2015).
Ikan nila memiliki lima buah sirip, yaitu sirip punggung (dorsal fin), sirip
dada (pectoral fin), sirip perut (ventral fin), sirip anal (anal fin), dan sirip ekor
(caudal fin). Ikan nila memiliki sirip dorsal dengan rumus (D XV, 10) terdiri dari
15 tulang keras dan 10 tulang lunak, sirip ekor dengan rumus (C II, 15) terdiri dari
2 tulang keras dan 15 tulang lunak, sirip ventral dengan rumus (V I, 16) terdiri
dari 1 tulang keras dan 16 tulang lunak. Ikan nila mempunyai 2 lubang hidung dan
mulut mengarah ke atas (Arifin, 2016).
Gambar 2.2 Morfologi ikan nila Oreochromis niloticus (Hidayah, 2015)

9
2.2.3 Habitat Hidup
Amri dan Khairuman (2003) menjelaskan bahwa ikan nila memiliki
toleransi hidup yang tinggi, bersifat euryhaline atau dapat hidup pada kisaran
salinitas yang luas, sehingga dapat dibudidayakan di air laut, air payau dan air
tawar. Habitat hidup ikan nila cukup beragam, dari sungai, danau, waduk, rawa,
sawah, kolam hingga tambak. Ikan nila dapat hidup optimal pada suhu berkisar
25-320C dan pH optimal air media pemeliharaan adalah 6,5-8,5. Ikan nila
membutuhkan oksigen terlarut (DO) ≥ 3 mg/L (Djarijah, 1995). Sedangkan, kadar
ammonia di perairan ≤ 1 mg/L (Hidayah, 2015).
2.3 Hematologi
Hematologi adalah cabang ilmu fisiologi yang mempelajari struktur,
fungsi, penyakit darah, serta mempelajari jaringan tubuh dan organ yang
membentuk bagian darah (Karlinda, 2017). Darah terdiri atas dua kelompok besar
yaitu sel dan plasma. Pada sel terdiri dari sel darah merah (eritrosit), sel darah
putih (leukosit) dan keping-keping darah (Affandi dan Tang, 2002). Komponen
dari plasma yaitu fibrinogen, ion-ion anorganik dan organik (Fujaya, 2004).
Keterangan: L= Limfosit ; E= Eritrosit ; N= Netrofil ; M=Monosit ; T= Trombosit
Gambar 2.3 Eritrosit dan jenis leukosit ikan (Chinabut et al., 1991)

10
Fujaya (2004) menyatakan bahwa darah ikan berfungsi sebagai transfor
oksigen, karbondioksida, sari-sari makanan, maupun hasil metabolisme. Sistem
peredaran darah ikan bersifat tunggal, artinya hanya terdapat satu jalur sirkulasi
peredaran darah. Organ pembentuk respon imun dan darah pada ikan dikenal
sebagai organ limfomieloid, karena jaringan limfoid (organ yang merespon
antigen) dan mieloid (organ penghasil darah) bergabung menjadi satu. Pada ikan
teleostei organ limfomieloid adalah limpa, timus dan ginjal anterior (Affandi dan
Tang, 2002).
Analisa hematologi dapat digunakan untuk mengevaluasi respon fisiologi
pada ikan. Karakteristik profil darah menjadi indikator kekebalan tubuh yang
berkaitan dengan kesehatan ikan sehingga sangat bermanfaat dalam budidaya ikan
nila. Pengamatan hematologi dapat digunakan dalam memonitoring lingkungan
budidaya, oleh sebab itu digunakan sebagai diagnosis awal terjadinya gangguan
kesehatan pada suatu organisme budidaya (Salasia dkk., 2001).
2.3.1 Sel Darah Merah (Eritrosit)
Sel darah merah berbentuk seperti piringan membulat, cekung pada dua
sisinya dan diameternya mendekati sekitar 1 per 7.500 milimeter. Komponen
terpenting dalam sel darah merah kebiruan dan memiliki kemampuan untuk
mengikat oksigen dan mengangkut oksigen tersebut mulai dari insang keseluruh
jaringan tubuh dan melepaskan oksigen dalam jaringan pembuluh kapiler.
Hemoglobin yang mengikat oksigen atau oksihemoglobin inilah yang
menyebabkan eritrosit berwarna merah cerah (Wedemeyer dan Yasutake, 1977).

11
Proses pembentukan eritrosit disebut eritropoiesis. Proses eritropoiesis
dirangsang oleh hormon eritropoietin. Hormon eritropoietin secara normal
merangsang organ pembentuk eritrosit yaitu sumsum tulang belakang, limpa dan
ginjal yang berfungsi untuk meningkatkan produksi dan pelepasan eritrosit.
Hormon eritropoietin berjumlah sedikit di dalam plasma darah. Ginjal mempunyai
peranan yang dominan dalam produksi eritropoietin. Dalam mengatasi terjadinya
hipoksia, ginjal dipacu untuk menghasilkan eritrogenin, faktor ini diaktifkan di
hati menjadi eritropoietin (Secombes, 1988).
Tinggi rendahnya jumlah eritrosit dalam darah ikan salah satunya dapat
disebabkan oleh faktor lingkungan. Masuknya suatu zat asing ke dalam tubuh ikan
oleh akan mempengaruhi respon fisiologi berupa perubahan jumlah sel eritrosit.
Rizkiawan (2017) melaporkan bahwa pemberian perendaman sari buah mengkudu
dapat meningkatkan jumlah eritrosit pada ikan gurame. Jumlah eritrosit yang
rendah menunjukkan terjadinya anemia, sedangkan jumlah tinggi menandakan
ikan dalam keadaan stres (Mardin, 2011). Jumlah eritrosit ikan teleostei dalam
kisaran normal pada umumnya yaitu 1,05-3,0.106 sel/mm³ (Salasia dkk., 2001).
2.3.2 Sel Darah Putih (Leukosit)
Leukosit merupakan komponen darah yang mengandung inti, tetapi tidak
memiliki bentuk yang tetap. Leukosit memiliki dua tipe yaitu granular dan
agranular. Leukosit granular yaitu memiliki inti berkeping banyak dan fungsinya
sebagai imunitas, terdiri atas sel neutrofil yang bersifat menyerang dan
menghancurkan bakteri, sel eusinofil yang meningkatkan ketanggapan terhadap
timbulnya infeksi dan alergi, dan sel basofil yang menghasilkan antikoagulan

12
heparin dan substansi histamine. Leukosit agranular yaitu memiliki inti membulat
dan fungsinya adalah sistem pertahanan tubuh, terdiri atas sel limfosit yang
memproduksi antibodi dan sel monosit yang membantu fungsi makrofag (Guyton
dan Hall, 1997). Jumlah leukosit pada ikan bervariasi hal ini dipengaruhi oleh
umur ikan, saat ikan lahir jumlahnya lebih tinggi, kemudian secara bertahap
menurun sampai dewasa yaitu pada umur 2-12 bulan (Mardin, 2011).
Irianto (2005) menyatakan bahwa leukosit merupakan sel yang aktif
terdapat pada sistem imunitas tubuh yang dihasilkan di organ timus dan ginjal,
lalu diangkut dalam darah menuju ke seluruh tubuh. Peningkatan jumlah leukosit
merupakan indikator meningkatnya respon imunitas tubuh. Kandungan flavonoid
dan skopoletin pada ekstrak buah mengkudu dapat meningkatkan jumlah leukosit
pada ikan nila (Aisiah, 2012). Jumlah leukosit pada ikan air tawar dalam kisaran
normal pada umumnya yaitu 3.390-14.200 sel/mm³ (Salasia dkk., 2001).
2.3.3 Glukosa Darah
Glukosa darah merupakan sumber energi utama dan substrat esensial
untuk metabolism sel terutama sel otak. Glukosa darah diperlukan oleh otak
supaya berfungsi secara kontinyu (Rizkiawan, 2017). Glukosa darah disimpan
dalam bentuk glikogen yang dapat ditemukan di dalam hati dan otot rangka tubuh,
fungsinya sebagai cadangan makanan. Tubuh memiliki hormon katekolamin yang
berfungsi mengaktivasi enzim-enzim dalam proses katabolisme simpanan
glikogen hati dan otot, serta menekan sekresi hormon insulin, sehingga glukosa
darah mengalami peningkatan. Insulin merupakan hormon yang berperan dalam
metabolisme glukosa, yaitu sebagai perantara masuknya glukosa didalam darah

13
menuju jaringan tubuh lainnya, seperti otot dan jaringan lemak. Hormon insulin
merupakan hasil produksi dari kelenjar pankreas (Rochmawangi et al., 2013).
Ekstrak buah mengkudu memiliki kandungan saponin yang mekanisme
kerjanya merangsang sel β pankreas untuk mensekresikan lebih banyak insulin
(Nayak dkk., 2009). Senyawa flavonoid yang dimiliki ekstrak buah mengkudu
dapat menurunkan kadar glukosa darah dengan cara menghambat enzim alfa-
glikosidase (Wahjuningrum et al., 2008). Solomon (1988) menyatakan kandungan
skopoletin buah mengkudu mampu menurunkan tekanan darah. Hasil penelitian
Rizkiawan (2017) menunjukkan bahwa perendaman sari buah mengkudu pada
ikan gurame mengalami peningkatan glukosa darah. Peningkatan kadar glukosa
darah ikan dapat diindikasikan bahwa ikan mengalami kondisi stress. Glukosa
darah pada ikan normal yaitu berkisar 40-90 mg/dl (Rahardjo et al., 2011).
2.3.4 Hemoglobin
Hemoglobin adalah metalloporphyrin, merupakan kombinasi dari
haem/hem yang merupakan porphyrin besi, dan globin. Setiap molekul
hemoglobin elasmobransi dan teleostei mengandung empat molekul hem, yakni
dua rantai α dan dua rantai ß. Oleh karena itu, satu molekul hemoglobin
mengandung empat molekul oksigen (Fujaya, 2004). Ikan nila termasuk dalam
golongan ikan teleostei (ikan bertulang keras). Kadar hemoglobin pada ikan
teleostei berkisar 3,7–7% dari seluruh darah ikan. Selain itu, kadar hemoglobin
pada ikan bervariasi macamnya dan tingkat perkembangannya tergantung pada
spesies ikannya (Lagler et al., 1977).

14
Hemoglobin berfungsi mengikat oksigen yang digunakan dalam proses
katabolisme untuk dihasilkan energi. Kadar hemoglobin berbanding lurus
terhadap jumlah eritrosit, semakin tinggi kadar hemoglobin maka semakin tinggi
pula jumlah eritrosit (Lagler et al., 1977). Kadar hemoglobin yang rendah dapat
dijadikan sebagai petunjuk mengenai rendahnya kandungan protein pakan,
defisiensi vitamin atau infeksi, sedangkan kadar hemoglobin yang tinggi
menunjukkan bahwa ikan dalam kondisi stress (Wells, 2005). Salasia dkk. (2001)
melaporkan bahwa kadar hemoglobin normal ikan nila berkisar 5,05-8,33 g/dl.
Yunita dkk. (2016) melaporkan bahwa pemberian ekstrak buah mengkudu
meningkatkan kadar hemoglobin ikan nila. Kandungan flavonoid pada ekstrak
buah mengkudu mampu meningkatkan kerja-kerja organ penghasil darah sehingga
produksi darah meningkat (Wahjuningrum et al., 2008). Akan tetapi, ekstrak buah
mengkudu memiliki kandungan saponin yang cukup tinggi. Saponin diketahui
mampu menghemolisis sel darah merah dengan cara memecah selaput sterol
eritrosit, sehingga menyebabkan hilangnya hemoglobin di dalam eritrosit
(Muharrama dkk., 2015).

15
III KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS
3.1 Kerangka Konseptual
Upaya meningkatan respon imunitas ikan terhadap patogen dapat
dilakukan melalui berbagai cara, salah satunya dengan pemberian imunostimulan.
Buah mengkudu Morinda citrifolia L. diketahui efektif sebagai bahan stimulator
yang mempengaruhi respon imun tubuh untuk meningkatkan imunitas dan
antibodi terhadap infeksi penyakit (Nayak et al., 2009). Buah mengkudu memiliki
kandungan bioaktif diantaranya adalah skopoletin, octoanoic acid, kalium, vitamin
C, alkaloid, antrakuinon, β-sitosterol, karoten, vitamin A, glikosida flavonoid,
linoleat acid, alizarin, amino acid, acubin, L-asperuloside, kaproat acid, kaprilat
acid, ursolat acid, rutin, pro-xeronine dan terpenoid (Wang et al., 2002). Upaya
pencegahan dan pengobatan ikan dengan metode perendaman dinilai efektif bagi
pemeliharaan ikan dalam skala banyak (Haryani dkk., 2012).
Pada metode perendaman, insang adalah salah satu jaringan yang
merupakan jalur awal masuknya suatu zat ke dalam tubuh ikan. Kandungan
senyawa ekstrak buah mengkudu yang masuk ke dalam tubuh ikan melalui insang,
kemudian ditransfor bersama oksigen yang dibawa oleh darah dan disebarkan
pembuluh darah dari lamela-lamela insang menuju jantung. Jantung akan
memompa darah ke seluruh tubuh. Darah membawa nutrisi, oksigen dan zat
lainnya disaring oleh sistem sekresi untuk menetralisir bahan toksik dan sisa
metabolisme dari sistem pencernaan, sebelum akhirnya dikeluarkan melalui urin
dan feses (Fujaya, 2004).

16
Ginjal merupakan salah satu organ sekresi dan juga tempat pembentukan
darah, yaitu sel darah merah. Produktivitas eritrosit dipengaruhi oleh hormon
eritropoietin yang menstimulasi pembentukan eritrosit (eritropoiesis) di dalam
ginjal (Secombes, 1988). Ekstrak buah mengkudu memiliki kandungan flavonoid
yang diketahui bahwa flavonoid adalah senyawa yang mampu menstimulasi
hormon eritropoietin. Haryani dkk. (2012) melaporkan bahwa flavonoid pada
ekstrak daun pepaya Carica papaya memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi,
serta dapat mempengaruhi proses pembentukan sel darah merah pada ikan mas
koki yang diinfeksi oleh bakteri Aeromonas hydrophilla.
Leukosit dibentuk oleh organ limfomeiolid di dalam limpa, timus dan
ginjal anterior (Affandi dan Tang, 20102). Jantung memompa darah ke seluruh
bagian tubuh termasuk limpa. Kandungan skopoletin pada ekstrak buah
mengkudu dapat mempengaruhi pembentukan dan aktivitas leukosit. Skopoletin
menstimulasi produksi sel limfosit sehingga dapat meningkatkan fagositosis,
kemudian pada sel monosit dapat mempengaruhi aktivitas dan kapasitas makrofag
dalam menghancurkan antigen pada proses inflamasi (Aldi dkk., 2016). Ekstrak
buah mengkudu dapat meningkatkan total aktivitas fagositosis pada ikan nila yang
di infeksi oleh bakteri Streptococcus iniae (Yunita dkk., 2016).
Hati adalah organ sekresi yang berfungsi menyaring darah sebelum
dipompa jantung ke seluruh tubuh. Selain itu, hati merupakan tempat
penyimpanan glikogen darah. Glikogen adalah gula kompleks yang disimpan di
hati dan otot sebagai cadangan glukosa darah yang akan disintesis untuk menjadi
energi. Kandungan saponin pada ekstrak buah mengkudu diketahui dapat

17
menurunkan kadar glukosa darah ikan nila. Fiana dan Oktaria (2016) melaporkan
bahwa saponin bersifat inhibitor (penghambat) enzim alfa-glukosidase di dalam
usus. Enzim α-glukosidase berperan dalam mengubah karbohidrat menjadi
glukosa, sehingga mengurangi absorpsi glukosa dan mengganggu transfor
glukosa.
Hasil metabolisme dari usus akan disekresi oleh hati, selain itu sebagian
kadar glukosa darah akan disimpan oleh hati sebagai cadangan glukosa, apabila
kondisi ikan mengalami stress atau pemuasaan, maka kebutuhan glukosa darah
akan meningkat. Tubuh akan mengaktifkan syaraf simpatis pada organ hati untuk
meningkatkan penggunaan cadangan glikogen menjadi energi (glukoneogenesis)
pada saat kondisi pemuasaan, serta sebagai cara menjaga homeostatis ikan pada
saat kondisi stress (Rizkiawan, 2017). Apabila menurunnya absorpsi glukosa dan
terganggunya transfor glukosa di usus, maka akan mempengaruhi cadangan
glukosa darah di hati. Oleh karena itu, saponin dapat mempengaruhi kadar
glukosa darah didalam tubuh.
Aktivitas saponin juga dapat mempengaruhi kadar hemoglobin di dalam
darah. Wahjuningrum et al. (2008) menyatakan bahwa saponin yang masuk ke
dalam darah menghemolisis sel darah merah sehingga pecahnya selaput sterol
eritrosit yang mengakibatkan hilangnya hemoglobin pada eritrosit tersebut.
Kinasih et al. (2008) menyatakan bahwa menurunnya kadar hemoglobin pada ikan
mas yang diberikan ekstrak daun babandotan Ageratum conyzoides, diduga
disebabkan oleh aktivitas saponin yang mengganggu sistem pernafasan sehingga

18
transfor oksigen terhambat. Kadar hemoglobin dipengaruhi oleh jumlah eritrosit
di dalam darah.
Profil darah atau gambaran darah merupakan suatu parameter yang dapat
dijadikan indikasi adanya perubahan kondisi kesehatan ikan, baik karena faktor
infeksi (virus, bakteri, jamur dan patogen lainnya) dan faktor non infeksi
(lingkungan, nutrisi, pengobatan dan genetik). Pengaruh perendaman ekstrak buah
mengkudu pada ikan nila belum banyak dilihat dari profil darah. Beberapa hal
yang perlu dipertimbangkan dalam penelitian ini yaitu, ketepatan dosis, ketepatan
waktu dan cara penggunaan, serta ketepatan informasi. Oleh karena itu, penelitian
ini dilakukan untuk mengetahui efektivitas ekstrak buah mengkudu terhadap profil
darah pada ikan nila. Gambar bagan kerangka konseptual dapat dilihat pada
Gambar 3.1.

19
Ikan Nila
Imunostimulan
Ekstrak Buah Mengkudu

Skopoletin Flavonoid
Injeksi Soaking Oral
Menstimulasi Merangsang Hormon

Leukopoiesis Insang Eritropoietin
Mempengaruhi Pembuluh Darah Mempengaruhi

Limfomeiolid Eritropoiesis
Limpa Usus Ginjal Total Eritrosit

Total Leukosit
Hati Menghambat
Enzim Alfa- Saponin
Glukosidase
Glukoneogenesis
Hemolisis Sel Eritrosit

Kadar Glukosa
Darah
Memecah Selaput
Sterol Eritrosit
Kadar
Hemoglobin
Gambar 3.1 Bagan Kerangka Konseptual Penelitian

20
3.2 Hipotesis
Hipotesis pada penelitian adalah berpengaruh terhadap total eritrosit, total
leukosit, kadar glukosa darah dan hemoglobin ikan nila dengan berbeda
konsentrasi perendaman ekstrak buah mengkudu.

21
IV METODOLOGI PENELITIAN
4.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Februari – Juli 2018 di
Laboratorium Basah dan Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Perikanan dan
Kelautan Universitas Airlangga Surabaya.
4.2 Materi Penelitian
4.2.1 Alat Penelitian
Alat penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah pisau, kain,
saringan, botol kaca, beaker glass, cover glass, mikroskop, DO (dissolved oxygen)
meter, pH meter, syringe, glucometer, haemocytometer, handcounter, tabung
eppendorf, tabung Hb-meter, HCl, batang pengaduk, pipet Sahli, mikropipet, pipet
thoma eritrosit dan leukosit. Peralatan yang digunakan untuk pemeliharan ikan
nila adalah akuarium berukuran 40x30x30cm3, aerator, selang aerasi, dan batu
aerasi.
4.2.2 Bahan Penelitian
Bahan penelitian yang digunakan adalah ikan nila berukuran 7–9 cm
sebanyak 240 ekor yang berasal dari UPT PBAT Umbulan, Pasuruan, Jawa
Timur. Buah mengkudu yang telah matang berasal dari Surabaya, air tawar,
ammonia test kit, pakan pellet, larutan Hayem, larutan Turk, larutan EDTA,
aquades dan kertas label.

22
4.3 Metode Penelitian
4.3.1 Rancangan Penelitian
Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimental.
Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) menggunakan enam
taraf perlakuan dan empat kali pengulangan (Kusriningrum, 2010). Semua
dikondisikan sama (media percobaan dan keadaan lingkungan) kecuali perlakuan.
Pemilihan konsentrasi didasarkan atas uji pendahuluan yang telah dilakukan
sebelumnya. Berikut ini perlakuan pada penelitian dapat dilihat pada Tabel 4.1.
Tabel 4.1. Desain penelitian
Perlakuan kontrol pemeliharaan ikan nila tanpa perendaman

A1-4
ekstrak buah mengkudu
Perlakuan dengan perendaman 3,6 g/L ekstrak buah mengkudu
B1-4
pada media pemeliharaan ikan nila
C1-4
D1-4
E1-4
Perlakuan dengan perendaman 6 g/L ekstrak buah mengkudu
F1-4
Penempatan perlakuan-perlakuan setelah dilakukan pengacakan akuarium
dapat dilihat pada Tabel 4.2.
Tabel 4.2. Desain pengacakan akuarium
C2 B3 E1 C4 D1 A3
D4 F2 A2 E4 F3 B4
F1 C1 E3 D3 B2 A1
A4 D2 B1 F4 C3 E2

23
4.3.2 Variabel Penelitian
Variabel penelitian yang digunakan adalah variable bebas dengan
memberikan konsentrasi ekstrak buah mengkudu yang berbeda. Variable terikat
dengan mengamati hematologi, yaitu total eritrosit, total leukosit, kadar
hemoglobin dan glukosa darah ikan nila. Variabel terkendali jenis ikan, ukuran
panjang dan berat ikan, ukuran akuarium, ammonia, oksigen terlarut, pH dan
suhu.
4.3.3 Prosedur Kerja
A. Pembuatan Ekstrak Buah Mengkudu
Ekstrak buah mengkudu yang dibuat yaitu berupa ekstrak aquous.
Pemilihan buah mengkudu yang akan di ekstraksi yaitu menggunakan buah
mengkudu matang. Kusuma et al. (2017) menyatakan bahwa buah mengkudu
matang memiliki kulit buah berwarna putih kekuningan dan daging buahnya
sedikit lunak. Jumlah kandungan bioaktif yang bermanfaat di dalam buah
mengkudu lebih tinggi pada buah mengkudu matang, bila dibandingkan buah
mengkudu mentah (Chan-Blanco et al., 2006).
Buah mengkudu yang telah dibersihkan, selanjutnya dipotong menjadi
bagian kecil. Dosis yang digunakan yaitu 100 gr buah mengkudu per 1 L akuades.
Selanjutnya, diblender dan disaring menggunakan kain mori, lalu disimpan pada
suhu 4 °C selama 1-2 hari. Berdasarkan hasil studi Berkovich et al. (2013)
menjelaskan bahwa pembuatan ekstrak aqueous dari Moringa oleifera dengan
dosis 100 mg/mL atau 100 g/L dapat disimpan pada suhu 4 °C hingga 5 hari.

24
B. Persiapan Penelitian
Persiapan penelitian diawali dengan persiapan media yaitu akuarium yang
akan digunakan didesinfeksi menggunakan klorin dengan dosis 150 mg/L, lalu
dibilas hingga bersih. Air media hidup ikan nila menggunakan air yang telah
diendapkan terlebih dahulu dalam tandon, kemudian dilakukan pengisian air dan
pemasangan aerasi untuk setiap akuarium. Setelah dilakukan persiapan media,
selanjutnya dilakukan seleksi ikan uji yang akan digunakan berupa ukuran
panjang dan bobot ikan, kondisi kesehatan ikan, dan bentuk tubuh ikan.
Rahayu et al. (2013) menyatakan bahwa padat tebar ikan nila optimal
dengan ukuran 7-9 cm dan bobot rata-rata 11 gram dalam media akuarium adalah
sebanyak 10 ekor ikan dalam 10 liter air. Aklimatisasi ikan nila dilakukan di
akuarium selama 1 minggu, diberikan pakan komersil dan disiphon setiap harinya,
pada saat hari terakhir dilakukan pemuasaan.
C. Uji Pendahuluan LC50 –96 jam
Uji pendahuluan dilakukan dengan menggunakan 10 ekor ikan nila
berukuran 7–9 cm untuk setiap akuarium dengan 11 perlakuan dan 3 ulangan.
Konsentrasi yang digunakan pada penelitian pendahuluan yaitu 0 g/L (kontrol), 3
g/L, 6 g/L, 9 g/L, 12 g/L, 15 g/L, 18 g/L, 21 g/L, 24 g/L, 27 g/L dan 30 g/L, lalu
diperoleh rentang yang lebih spesifik yaitu 0 g/L (kontrol), 1,5 g/L, 3 g/L, 4,5 g/L,
6 g/L, dan 7,5 g/L. Hasil dari uji pendahuluan, diperoleh bahwa pada konsentrasi
0 g/L, 1,5 g/L, 3 g/L dan 4,5 g/L tidak terdapat mortalitas (0%), pada konsentrasi
6 g/L terdapat mortalitas 18 ekor ikan nila (60%), serta pada konsentrasi 7,5 g/L

25
terdapat mortalitas 30 ekor ikan nila (100%). Didapatkan nilai LC50 sebesar 18,2
% atau 5,46 g/L dengan menggunakan perhitungan probit analisis, serta menjadi
dasar menentukan konsentrasi ekstrak buah mengkudu untuk penelitian
selanjutnya. Hasil uji pendahuluan LC50-96 jam dapat dilihat pada Lampiran 1.
D. Pelaksanaan Penelitian
Setiap akuarium uji diberikan perlakuan dan kondisi yang sama, tetapi
berbeda pemberian konsentrasi ekstrak buah mengkudu. Setiap akuarium diisi
ikan uji sebanyak 10 ekor dengan padat tebar 1 ekor/L air (Rahayu et al., 2013).
Ikan nila dilakukan uji dengan perendaman ekstrak buah mengkudu selama 96
jam. Pengambilan sampel dilakukan pada jam ke-24 dan jam ke-96, tiga ekor
sampel ikan diambil dari setiap perlakuan pengamatan hematologis. Selama
pemeliharaan ikan tidak diberi pakan dengan tujuan tetap menjaga kualitas air.
Pengamatan kelulushidupan ikan dan pengukuran kualitas air dilakukan pada awal
dan akhir penelitian.
E. Metode Pengambilan Darah
Pengambilan sampel darah ikan nila dilakukan setelah perendaman pada
jam ke-24 dan jam ke-96. Ikan nila diambil masing-masing satu sampel pada
setiap perlakuan dan ulangan. Mardin (2011) menjelaskan bahwa ikan nila
diambil darahnya pada bagian vena caudalis menggunakan syringe 1 ml yang
telah diberikan EDTA 10%, lalu darah yang telah diambil sebanyak 1 ml
dimasukkan ke dalam tabung eppendorf untuk dilakukan pengamatan profil darah.

26
F. Perhitungan Total Eritrosit
Penghitungan sel darah merah atau eritrosit mengacu pada Blaxhall dan
Daisley (1973), sampel darah dihisap dari tabung eppendorf menggunakan alat
hisap eritrosit berupa pipet kapiler hingga garis menunjukkan skala 0,5 ml dan
diencerkan dengan larutan Hayem hingga skala 101 ml. Kedua ujung ditutup
sejajar, kemudian digoyangkan seperti membentuk angka delapan selama 3-5
menit hingga darah dan larutan Hayem tercampur. Darah dibuang dua tetes, lalu
berikutnya diteteskan pada kamar hitung haemocytometer yang telah ditutup
dengan cover glass. Pengamatan menggunakan mikroskop dengan perbesaran
400x dan jumlah eritrosit dihitung pada lima kotak kecil haemocytometer, lalu
dilakukan perhitungan dengan rumus:

1
Ʃ Eritrosit = N x volume kotak kecil x P
Keterangan :
N : Rataan jumlah sel terhitung

P : Rengenceran
G. Perhitungan Total Leukosit
Penghitungan sel darah putih atau leukosit mengacu pada Blaxhall dan
Daisley (1973), sampel darah dihisap dari tabung eppendorf menggunakan alat
hisap leukosit berupa pipet kapiler hingga garis menunjukkan skala 1 ml dan
diencerkan dengan larutan Turk hingga skala 11 ml. Kedua ujung ditutup sejajar,
kemudian digoyangkan seperti membentuk angka delapan selama 3-5 menit
hingga darah dan larutan Turk tercampur. Darah dibuang dua tetes, lalu
berikutnya diteteskan pada kamar hitung haemocytometer yang telah ditutup
dengan cover glass. Pengamatan menggunakan mikroskop dengan perbesaran

27
400x dan jumlah leukosit dihitung pada empat kotak besar haemocytometer, lalu
dilakukan perhitungan dengan rumus:

1
Ʃ Leukosit = N x volume kotak besar x P
Keterangan :
N : Rataan jumlah sel terhitung

P : Pengenceran
H. Pengukuran Hemoglobin
Wedemeyer dan Yasutake (1977) menyatakan bahwa prosedur
perhitungan kadar hemoglobin mengacu pada metode Sahli. Darah sampel dihisap
dengan menggunakan pipet Sahli hingga skala 20 mm 3 atau pada skala 0,2 ml.
Lalu, darah dalam pipet dipindahkan ke dalam tabung Hb-meter yang telah diisi
HCl 0,1 N hingga skala 10 (merah). Selanjutnya, darah tersebut lalu diaduk
dengan batang pengaduk selama ± 5 menit. Setelah itu, ditambahkan akuades ke
dalam tabung tersebut hingga warna darah tersebut menjadi seperti warna larutan
standar yang ada dalam Hb-meter. Kadar hemoglobin dinyatakan dalam g%.
I. Pengukuran Glukosa Darah
Sampel darah diambil pada daerah intravena menggunakan spuit sebanyak
1 ml. Sampel darah ikan yang didapat diteteskan pada alat glukosa blood glukose
monitoring system (BGMS) merk One Touch Horizon, sehingga hasil glukosa
darah yang terkandung dapat terbaca. Kadar glukosa darah dinyatakan dalam
mg/dl.

28
J. Penghitungan Kelulushidupan Ikan
Kelulushidupan ikan merupakan perbandingan antara jumlah ikan uji pada
awal penelitian hingga akhir penelitian. Perhitungan kelulushidupan ikan nila
adalah sebagai berikut.
Nt
SR = N0 x 100%
Keterangan :
SR : Survival Rate
Nt : Jumlah ikan uji yang hidup pada akhir penelitian
N0 : Jumlah ikan uji yang hidup pada awal penelitian
4.3.4 Parameter Penelitian
A. Parameter Utama
Parameter utama dalam penelitian ini adalah profil darah ikan nila yaitu,
total eritrosit, total leukosit, kadar hemoglobin dan glukosa darah.
B. Parameter Pendukung
Parameter pendukung dalam penelitian ini adalah LC50, kelulushidupan
dan kualitas air yaitu, suhu, pH, ammonia dan oksigen terlarut.
4.3.5 Analisis Data
Data yang diperoleh diolah dengan menggunakan Analysis of Variance
(ANOVA) untuk mengetahui pengaruh perlakuan dan dilanjutkan dengan Uji
Jarak Berganda Duncan (Duncan Multiple Range Test) untuk mengetahui
perbedaan antara perlakuan (Kusriningrum, 2010). Data dianalisis menggunakan
program SPSS Ver. 17 For Windows.

29
4.4 Diagram Alir Penelitian
Persiapan Alat dan Bahan
Uji Pendahuluan Penentuan

LC50 96 jam
Perendaman ekstrak buah mengkudu pada ikan nila

Konsentrasi : 0 g/L, 3,6 g/L, 4,2 g/L, 4,8 g/L, 5,4 g/L
dan 6 g/L
Perhitungan kelulushidupan,
Suhu, DO, Ammonia dan pH
Pengambilan sampel darah jam ke-24
Pengambilan sampel darah jam ke-96
Mengamati:
a. Hematologi, yaitu total eritrosit, total
leukosit, kadar hemoglobin dan
glukosa darah
b. Mengukur kualitas air dan
kelulushidupan
Analisis Data
Gambar 4.4 Diagram Alir Penelitian

30
V HASIL DAN PEMBAHASAN
5.1 Hasil
5.1.1 Sel Darah Merah
Pengukuran total eritrosit dilakukan untuk melihat perubahan total eritrosit
ikan nila yang terjadi setelah dilakukan perendaman ekstrak buah mengkudu.
Hasil Analysis of Variance (ANOVA) menunjukkan bahwa ekstrak buah
mengkudu yang diberikan berpengaruh terhadap total eritrosit ikan nila. Uji
statistik dilanjutkan dengan menggunakan Uji Jarak Berganda Duncan. Rata-rata
total eritrosit ikan nila dapat dilihat pada Tabel 5.1.
Tabel 5.1 Total eritrosit ikan nila Oreochromis niloticus pada perendaman
menggunakan ekstrak buah mengkudu Morinda citrifolia L.
Total Eritrosit (x10⁵ sel/mm³)

Perlakuan 24 Jam 96 Jam
a
A (0 g/L ekstrak buah mengkudu) 3,11 ± 0,01 5,58d ± 0,01
c
B (3,6 g/L ekstrak buah mengkudu) 6,48 ± 0,02 3,99c ± 0,03
C (4,2 g/L ekstrak buah mengkudu) 5,53b ± 0,00 3,22b ± 0,03
d
D (4,8 g/L ekstrak buah mengkudu) 7,99 ± 0,01 7,61e ± 0,00
E (5,4 g/L ekstrak buah mengkudu) 13,15f ± 0,03 10,1f ± 0,01
e
F (6 g/L ekstrak buah mengkudu) 11,22 ± 0,03 2,83a ± 0,01
Berdasarkan hasil Uji Jarak Berganda Duncan, maka diketahui
perendaman ekstrak buah mengkudu berbeda nyata (p<0,05) terhadap total
eritrosit ikan nila pada pemeliharaan jam ke-24. Nilai total eritrosit perlakuan A
sebagai perlakuan kontrol (3,11 x 105 sel/mm3) berbeda nyata (p<0,05) terhadap
perlakuan B (6,48 x 105 sel/mm3), C (5,53 x 105 sel/mm3), D (7,99 x 105
sel/mm3), E (13,15 x 105 sel/mm3) dan F (11,22 x 105 sel/mm3). Total eritrosit
tertinggi pada jam ke-24 terdapat pada perlakuan E, kemudian diikuti oleh
perlakuan F, D, C, B dan total eritrosit terendah adalah perlakuan A.

31
Nilai total eritrosit ikan nila pada akhir pemeliharaan atau jam ke-96
didapatkan perlakuan A sebagai perlakuan kontrol (5,57 x105 sel/mm3) berbeda
nyata (p<0,05) terhadap perlakuan B (3,99 x 105 sel/mm3), C (3,21 x 105
sel/mm3), D (7,61 x 105 sel/mm3), E (10,1 x 105 sel/mm3) dan F (2,83 x 105
sel/mm3). Total eritrosit tertinggi pada jam ke-96 terdapat pada perlakuan E,
kemudian diikuti oleh perlakuan D, A, B, C dan total eritrosit terendah adalah
perlakuan F.
Total eritrosit ikan nila selama penelitian yaitu berkisar 2,83 - 13,15 x 105
sel/mm3. Total eritrosit ikan nila pada awal penelitian yaitu jam ke-24 hingga
akhir penelitian jam ke-96 mengalami penurunan pada perlakuan B, C, D, E dan
F, sedangkan peningkatan total eritrosit pada perlakuan A (kontrol). Total eritrosit
pada perlakuan D dan E lebih tinggi jika dibandingkan dengan total eritrosit pada
perlakuan A (kontrol). Konsentrasi terbaik terdapat pada perlakuan D atau
konsentrasi 4,8 g/L menunjukkan total eritrosit yang stabil. Hasil analisa statistika
selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 2 dan 3.
5.1.2 Sel Darah Putih
Pengukuran total leukosit dilakukan untuk melihat perubahan total leukosit
ikan nila yang terjadi setelah dilakukan perendaman ekstrak buah mengkudu.
Hasil Analysis of Variance (ANOVA) menunjukkan bahwa ekstrak buah
mengkudu yang diberikan berpengaruh terhadap total leukosit ikan nila. Uji
statistik dilanjutkan dengan menggunakan Uji Jarak Berganda Duncan. Rata-rata
total leukosit ikan nila dapat dilihat pada Tabel 5.2.

32
Tabel 5.2 Total leukosit ikan nila Oreochromis niloticus pada perendaman
Total Leukosit (x10⁴ sel/mm³)

a
A (0 g/L ekstrak buah mengkudu) 2,96 ± 0,03 2,83a ± 0,04
b
B (3,6 g/L ekstrak buah mengkudu) 4,18 ± 0,01 5,10b ± 0,01
c
C (4,2 g/L ekstrak buah mengkudu) 5,75 ± 0,02 5,90c ± 0,04
D (4,8 g/L ekstrak buah mengkudu) 6,13c ± 0,01 7,42d ± 0,01
d
E (5,4 g/L ekstrak buah mengkudu) 8,06 ± 0,01 10,65f ± 0,02
F (6 g/L ekstrak buah mengkudu) 11,40e ± 0,01 9,07e ± 0,04
perendaman dengan ekstrak buah mengkudu berbeda nyata (p<0,05) terhadap
total leukosit ikan nila pada pemeliharaan jam ke-24. Nilai total leukosit
perlakuan A sebagai perlakuan kontrol (2,96 x 104 sel/mm3) berbeda nyata
(p<0,05) terhadap perlakuan B (4,18 x 104 sel/mm3), C (5,75 x 104 sel/mm3), D
(6,13 x 104 sel/mm3), E (8,06 x 104 sel/mm3) dan F (11,4 x 104 sel/mm3). Total
leukosit tertinggi pada jam ke-24 terdapat pada perlakuan F, kemudian diikuti
oleh perlakuan E, D, C, B dan total leukosit terendah adalah perlakuan A.
Nilai total leukosit ikan nila pada akhir pemeliharaan atau jam ke-96
didapatkan perlakuan A sebagai perlakuan kontrol (2,83 x 104 sel/mm3) berbeda
nyata (p<0,05) terhadap perlakuan B (5,1 x 104 sel/mm3), C (5,9 x 104 sel/mm3),
D (7,41 x 104 sel/mm3), E (10,6 x 104 sel/mm3) dan F (9,07 x 104 sel/mm3). Total
leukosit tertinggi pada jam ke-96 terdapat pada perlakuan E, kemudian diikuti
oleh perlakuan F, D, C, B dan total leukosit terendah adalah perlakuan A.
Total leukosit ikan nila selama penelitian yaitu berkisar 2,83 - 11,40 x 104
sel/mm3. Total leukosit ikan nila pada awal penelitian yaitu jam ke-24 hingga
akhir penelitian jam ke-96 mengalami penurunan pada perlakuan A dan F,

33
sedangkan peningkatan total leukosit pada perlakuan B, C, D dan E. Total leukosit
pada perlakuan B, C, D, E dan F lebih tinggi jika dibandingkan dengan total
leukosit pada perlakuan A (kontrol). Konsentrasi terbaik terdapat pada perlakuan
D atau konsentrasi 4,8 g/L menunjukkan total leukosit yang terus meningkat
hingga akhir penelitian. Hasil analisa statistika selengkapnya dapat dilihat pada
Lampiran 4 dan 5.
5.1.3. Hemoglobin
Pengukuran kadar hemoglobin dilakukan untuk melihat perubahan kadar
hemoglobin ikan nila yang terjadi setelah dilakukan perendaman ekstrak buah
mengkudu. Hasil Analysis of Variance (ANOVA) menunjukkan bahwa ekstrak
buah mengkudu yang diberikan berpengaruh terhadap kadar hemoglobin ikan nila.
Uji statistik dilanjutkan dengan menggunakan Uji Jarak Berganda Duncan. Rata-
rata kadar hemoglobin ikan nila dapat dilihat pada Tabel 5.3.
Tabel 5.3 Kadar hemoglobin ikan nila Oreochromis niloticus pada perendaman
Kadar Hemoglobin (gr%)

A (0 g/L ekstrak buah mengkudu) 5,5a ± 0,39 6,2b ± 0,92
B (3,6 g/L ekstrak buah mengkudu) 4,7a ± 0,89 4,6a ± 0,57
a
C (4,2 g/L ekstrak buah mengkudu) 5,2 ± 0,47 4,9a ± 0,42
a
D (4,8 g/L ekstrak buah mengkudu) 5,1 ± 0,64 5,0a ± 0,31
E (5,4 g/L ekstrak buah mengkudu) 5,2a ± 0,63 4,5a ± 0,83
a
F (6 g/L ekstrak buah mengkudu) 5,0 ± 0,60 4,3a ± 0,59
perendaman dengan ekstrak buah mengkudu tidak berbeda nyata (p>0,05)
terhadap kadar hemoglobin ikan nila pada pemeliharaan jam ke-24. Nilai kadar
hemoglobin perlakuan A sebagai perlakuan kontrol (5,5 g%) tidak berbeda nyata

34
(p>0,05) terhadap perlakuan B (4,7 g%), C (5,2 g%), D (5,1 g%), E (5,2 g%) dan
F (5,0 g%). Kadar hemoglobin tertinggi pada jam ke-24 terdapat pada perlakuan
A, kemudian diikuti oleh perlakuan C, E, D, F dan kadar hemoglobin terendah
adalah perlakuan B.
Nilai kadar hemoglobin ikan nila pada akhir pemeliharaan atau jam ke-96
terdapat berbeda nyata (p<0,05). Pada perlakuan A (6,2 g%) sebagai perlakuan
kontrol berbeda nyata (p<0,05) terhadap perlakuan B (4,6 g%), C (4,9 g%), D (5,0
g%), E (4,5 g%) dan F (4,3 g%). Kadar hemoglobin tertinggi pada jam ke-96
terdapat pada perlakuan A, kemudian diikuti oleh perlakuan D, C, B, E dan kadar
hemoglobin terendah adalah perlakuan F.
Kadar hemoglobin ikan nila selama penelitian yaitu berkisar 4,3 – 6,2 g%.
Kadar hemoglobin ikan nila pada awal penelitian yaitu jam ke-24 hingga akhir
penelitian jam ke-96 mengalami penurunan pada perlakuan B, C, D, E dan F,
sedangkan peningkatan kadar hemoglobin pada perlakuan A (kontrol). Kadar
hemoglobin pada perlakuan D lebih mendekati kadar hemoglobin pada perlakuan
A (kontrol). Konsentrasi terbaik terdapat pada perlakuan D atau konsentrasi 4,8
g/L menunjukkan kadar hemoglobin yang stabil. Hasil analisa statistika
selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 6 dan 7.
5.1.4. Glukosa Darah
Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan untuk melihat perubahan kadar
glukosa darah ikan nila yang terjadi setelah dilakukan perendaman ekstrak buah
mengkudu. Hasil Analysis of Variance (ANOVA) menunjukkan bahwa ekstrak
buah mengkudu yang diberikan berpengaruh terhadap kadar glukosa darah ikan

35
nila. Uji statistik dilanjutkan dengan menggunakan Uji Jarak Berganda Duncan.
Rata-rata kadar glukosa darah ikan nila dapat dilihat pada Tabel 5.4.
Tabel 5.4 Kadar glukosa darah ikan nila Oreochromis niloticus pada perendaman
Kadar Glukosa Darah (mg/dl)

A (0 g/L ekstrak buah mengkudu) 57,5a ± 12,82 66,3b ± 5,25
B (3,6 g/L ekstrak buah mengkudu) 58,5a ± 6,14 31,8a ± 4,57
a
C (4,2 g/L ekstrak buah mengkudu) 62,3 ± 7,93 28,5a ± 4,65
D (4,8 g/L ekstrak buah mengkudu) 75,3a ± 0,06 27,8a ± 1,71
b
E (5,4 g/L ekstrak buah mengkudu) 109,3 ± 0,10 29,3a ± 10,87
F (6 g/L ekstrak buah mengkudu) 103,8b ± 0,07 29,8a ± 7,58
perendaman dengan ekstrak buah mengkudu terdapat berbeda nyata (p<0,05)
terhadap kadar glukosa darah ikan nila pada pemeliharaan jam ke-24. Nilai kadar
glukosa darah pada perlakuan A sebagai perlakuan kontrol (57,5 mg/dl) tidak
berbeda nyata (p>0,05) terhadap perlakuan B (58,5 mg/dl), C (62,3 mg/dl) dan D
(75,3 mg/dl), tetapi berbeda nyata (p<0,05) pada perlakuan E (109,3 mg/dl) dan F
(103,8 mg/dl). Kadar glukosa darah tertinggi pada jam ke-24 terdapat pada
perlakuan E, kemudian diikuti oleh perlakuan F, D, C, B dan kadar hemoglobin
terendah adalah perlakuan A.
Nilai kadar glukosa darah ikan nila pada akhir pemeliharaan atau jam ke-
96 didapatkan perlakuan A sebagai perlakuan kontrol (66,3 mg/dl) berbeda nyata
(p<0,05) terhadap perlakuan B (31,8 mg/dl), C (28,5 mg/dl), D (27,8 mg/dl), E
(29,3 mg/dl) dan F (29,8 mg/dl). Kadar glukosa darah tertinggi pada jam ke-96
terdapat pada perlakuan A, kemudian diikuti oleh perlakuan B, F, E, C dan kadar
glukosa darah terendah adalah perlakuan D.

36
Kadar glukosa darah ikan nila selama penelitian yaitu berkisar 2,78 –
109,3 mg/dl. Kadar glukosa darah ikan nila pada awal penelitian yaitu jam ke-24
hingga akhir penelitian jam ke-96 mengalami penurunan pada perlakuan B, C, D,
E dan F, sedangkan peningkatan kadar glukosa darah pada perlakuan A (kontrol).
Kadar glukosa darah pada perlakuan D lebih rendah jika dibandingkan kadar
glukosa pada perlakuan A (kontrol). Konsentrasi terbaik terdapat pada perlakuan
D atau konsentrasi 4,8 g/L menunjukkan kadar glukosa yang stabil. Hasil analisa
statistika selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 8 dan 9.
5.1.5. Kualitas Air
Kualitas air memiliki peranan penting dalam kegiatan budidaya, sebab
kesesuaian kualitas air akan mempengaruhi pada kelangsungan hidup organisme
yang dibudidayakan. Parameter kualitas air yang diukur selama penelitian yaitu
suhu, oksigen terlarut (DO), pH, dan ammonia. Data kisaran parameter kualitas air
dapat dilihat pada Tabel 5.5.
Tabel 5.5 Kualitas air pemeliharaan ikan nila O. niloticus pada perendaman
Pengukuran
Kualitas Perlakuan Baku
Air A B C D E F Mutu*
28,5-
Suhu (oC) 29 29 29 29 29 28,9 25-32
DO (mg/L) 6,2-6,3 5,5-5,9 5,8-5,9 5,4-5,7 5,2 5-5,1 ≥3
pH 7-7,1 6,9-7,1 6,9-7,2 6,8-7,2 6,8-7,2 6,6-7,2 6,5-8,5
Ammonia
(mg/L) 0 0,5 0,5 0,5 1,0-2,0 2 ≤1

37
Hasil data pengukuran kualitas air selama penelitian diketahui bahwa suhu
air selama penelitian berkisar 28,5–29,4 °C, oksigen terlarut 5,07–6,37 mg/L, pH
6,8–7,2 dan ammonia 0–2 mg/L.
5.1.6 Kelulushidupan
Pengamatan persentase kelulushidupan dilakukan untuk mengetahui
efektivitas dan pengaruh perlakuan perendaman ekstrak buah mengkudu terhadap
tingkat kelangsungan hidup ikan nila. Hasil data rata-rata persentase
kelulushidupan selama penelitian dapat dilihat pada Tabel 5.6.
Tabel 5.6 Persentase kelulushidupan ikan nila O. niloticus pada perendaman

Kelulushidupan (%)
Perlakuan 24 jam 96 jam
A (0 g/L ekstrak buah mengkudu) 100a ± 0 100a ± 0
B (3,6 g/L ekstrak buah mengkudu) 100a ± 0 100a ± 0
a
C (4,2 g/L ekstrak buah mengkudu) 100 ± 0 90a ± 0
a
D (4,8 g/L ekstrak buah mengkudu) 97,5 ± 5 85a ± 5,8
E (5,4 g/L ekstrak buah mengkudu) 87,5a ± 5 47,5b ± 5
b
F (6 g/L ekstrak buah mengkudu) 50 ± 8,2 12,5b ± 5
Hasil analisa statistika menunjukkan bahwa pada pada jam ke-24
persentase kelulushidupan perlakuan A sebagai perlakuan kontrol tidak berbeda
nyata (p>0,05) terhadap perlakuan B dan C yaitu 100%, sedangkan berbeda nyata
(p<0,05) pada perlakuan D (97,5%), E (87,5%) dan F (50%). Pada akhir
penelitian jam ke-96, kelulushidupan pada perlakuan A yang berbeda nyata
(p<0,05) terhadap perlakuan C (90%), D (85%), E (47,5%) dan F (12,5%) tidak
berbeda nyata (p>0,05) terhadap perlakuan B yakni 100%.

38
5.2. Pembahasan
Hasil perhitungan total eritrosit ikan nila pada akhir penelitian (jam ke-96)
mengalami penurunan secara signifikan pada perlakuan B, C, D, E dan F, jika
dibandingkan dengan perlakuan A (kontrol). Hal ini diduga kandungan bioaktif
berupa saponin pada ekstrak buah mengkudu mempengaruhi menurunnya total
eritrosit. Muharrama dkk. (2015) menjelaskan bahwa sifat hemolisis saponin
terhadap darah mampu melisiskan sterol sel eritrosit hingga pecah, sehingga
menyebabkan total eritrosit menurun. Haryani dkk. (2015) juga menyatakan
bahwa senyawa flavonoid dapat mempengaruhi produktivitas eritrosit dengan cara
sintesis hormon eritropoietin. Hormon eritropoietin diperlukan untuk
menstimulasi eritropoiesis di dalam ginjal (Secombes, 1988). Total eritrosit pada
penelitian ini masih dalam kisaran normal. Jumlah eritrosit pada ikan normal
berkisar 150.000–3.000.000 sel/mm3 (Salasia dkk., 2001).
Penurunan total eritrosit pada setiap perlakuan yang diberikan ekstrak
buah mengkudu diduga juga dipengaruhi oleh menurunnya kinerja organ ginjal
dan hati. Jayaraman et al. (2006) melaporkan bahwa konsentrasi ekstrak buah
mengkudu yang tinggi dapat bersifat racun, sehingga mengganggu dan
menurunkan fungsi ginjal dan hati sebagai organ penghasil eritrosit dan hati
sebagai organ penyaring bahan toksik. Ginjal yang terganggu menyebabkan
produktivitas eritrosit menurun, sedangkan gangguan fungsi hati dapat
mempengaruhi transfer hemoglobin sehingga menurunkan jumlah eritrosit
didalam darah (Shalan et al., 2016).

39
Hasil perhitungan total leukosit ikan nila sama dengan total eritrosit yang
mengalami penurunan hingga akhir penelitian (jam ke-96), namun hanya terjadi
pada perlakuan A dan F, sedangkan perlakuan B, C, D dan E mengalami
peningkatan. Penurunan total leukosit pada perlakuan F terjadi diduga karena
pemberian konsentrasi ekstrak buah mengkudu yang tinggi dapat menyebabkan
imunosupresi atau menurunnya respon imun yang ditandai dengan menurunnya
total leukosit. Penurunan ini masih dalam kisaran normal, apabila dibandingkan
dengan total leukosit optimal pada ikan normal yang berkisar 32.000-146.000
sel/mm³ (Lagler et al., 1977).
Meningkatnya total leukosit pada keempat perlakuan (B, C, D, dan E)
diduga dipengaruhi oleh bahan bioaktif buah mengkudu, yaitu flavonoid, saponin,
skopoletin, dan lainnya. Skopoletin mampu meningkatkan aktivitas fagositosis
dan kapasitas makrofag sel darah putih (Aldi dkk., 2016). Purwatiningsih et al.
(2014) melaporkan bahwa flavonoid dapat meningkatkan fagositosis dan produksi
leukosit.
Hasil perhitungan kadar hemoglobin ikan nila pada akhir penelitian (jam
ke-96) sejalan dengan nilai total eritrosit yang menunjukkan penurunan kadar
pada setiap perlakuan yang diberikan ekstrak buah mengkudu yaitu perlakuan B,
C, D, E dan F, dibandingkan dengan perlakuan A. Kadar hemoglobin yang rendah
dapat disebabkan oleh faktor fisiologi, lingkungan atau ikan mendapat infeksi
(Wells, 2005). Muharrama dkk. (2015) menyatakan bahwa saponin pada buah
mengkudu memiliki aktivitas hemolisis yang dapat mengakibatkan hilangnya
hemoglobin pada sel eritrosit yang rusak. Kandungan saponin juga dapat

40
menurunkan kadar hemoglobin di dalam darah dengan cara menghambat proses
pernafasan ikan (Kinasih et al., 2008). Kadar hemoglobin merupakan indikator
kemampuan adaptasi ikan terhadap perubahan fisiologis yang ditimbulkan oleh
zat asing yang menyebabkan stess atau menurunnya kondisi lingkungan (Mardin,
2011). Kadar hemoglobin penelitian ini masih dalam kisaran normal, sesuai
dengam yang disebutkan oleh Salasia dkk. (2001), yaitu kadar hemoglobin pada
ikan normal berkisar 5,05-8,33 g%.
Hasil perhitungan kadar glukosa darah ikan nila pada akhir penelitian (jam
ke-96) mengalami penurunan pada setiap perlakuan yang diberikan ekstrak buah
mengkudu yaitu perlakuan B, C, D, E dan F. Penurunan kadar glukosa darah
diduga dipengaruhi oleh ekstrak buah mengkudu yang diberikan, karena adanya
kandungan bioaktif saponin yang berfungsi sebagai inhibitor α-glukosidase yang
bekerja dengan cara menunda absorbsi glukosa darah dari saluran cerna menuju
pembuluh darah, sehingga mengurangi kadar glukosa darah (Wahjuningrum dkk.,
2008). Saponin dapat merangsang sel β pankreas untuk menghasilkan lebih
banyak insulin untuk membantu kondisi homeostatis pada saat ikan mengalami
stress (Nayak dkk., 2009). Kadar glukosa darah penelitian ini masih dalam kisaran
normal, karena masih berkisar 40-90 mg/dl, sesuai dengan Rahardjo et al. (2011).
Konsentrasi ekstrak buah mengkudu yang diberikan pada ikan dengan
jumlah yang semakin tinggi mengakibatkan penurunan kelulushidupan ikan nila.
Hal ini ditunjukkan dengan hasil presentase kelulushidupan ikan pada akhir
penelitian (jam ke-96) yang terjadi pada perlakuan C, D, E, dan F, dibandingkan
dengan perlakuan A dan B. Penurunan presentase kelulushidupan pada ikan nila

41
ini merupakan pengaruh perubahan profil darah yang telah diamati (total eritrosit,
total leukosit, kadar hemoglobin, dan kadar glukosa darah). Al-Attar (2005)
menjelaskan bahwa parameter profil darah menjadi indikator terhadap tingkat
kelangsungan hidup pada ikan akibat pengaruh suatu pengobatan.
Tingkat kelulushidupan pada perlakuan D tampak memberikan nilai yang
lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan lain, disamping mampu
mempertahankan total eritrosit, total leukosit, kadar hemoglobin, dan kadar
glukosa darah dalam batas normal. Hal ini menyebabkan perlakuan D (pemberian
ekstrak mengkudu konsentrasi 4,8 g/L) merupakan perlakuan terbaik dalam
menurunkan stress pada ikan nila, karena menghasilkan presentase kelulushidupan
lebih dari 50% dan memberikan profil darah ikan nila yang baik.
Kandungan oksigen terlarut selama penelitian masih dalam kisaran normal
yaitu 5,07–6,37 mg/L. Baku mutu nilai oksigen terlarut pada pemeliharaan ikan
nila adalah lebih dari 3 mg/L (Djarijah, 1995). Nilai pH selama penelitian masih
dapat ditoleransi untuk kehidupan ikan nila berkisar 6,6–7,2. Baku mutu pH
optimal untuk pemeliharaan ikan nila berkisar 6,5–8,5 (Djarijah, 1995). Nilai suhu
pada setiap perlakuan masih dalam ambang batas normal untuk kehidupan ikan
nila yaitu 28,5–29 oC, sedangkan baku mutu suhu untuk pemeliharaan ikan nila
berkisar 25–32 oC (Djarijah, 1995). Kandungan ammonia selama penelitian mulai
meningkat pada perlakuan F yaitu 2 mg/L yang melebihi baku mutu kandungan
ammonia pada pemeliharaan ikan nila yaitu ≤ 1 mg/L menurut Hidayah (2015).
Tingginya kandungan ammonia yang melebihi ambang batas, diduga karena ikan
uji mengalami stress, sehingga banyak mengeluarkan urine dan feses.

42
VI KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa
perendaman ekstrak buah mengkudu terhadap profil darah ikan nila menunjukkan
adanya pengaruh pada total eritrosit, total leukosit, kadar hemoglobin dan kadar
glukosa darah. Perendaman ekstrak buah mengkudu dengan konsentrasi 4,8 g/L
merupakan konsentrasi terbaik yang mampu meningkatkan imunitas dengan
persentase kelulushidupan lebih dari 50% hingga akhir penelitian 96 jam.
6.2 Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh perendaman
ekstrak buah mengkudu pada histopatologi ikan nila, maupun pengaruhnya
terhadap profil darah yang di uji tantang menggunakan bakteri ataupun virus.

43
DAFTAR PUSTAKA
Aisiah, S. 2012. Efikasi Ekstrak Mengkudu Morinda citrifolia L. terhadap Bakteri

Aeromonas hydrophilla dan Toksisitasnya pada Ikan Nila Oreochromis
niloticus. Sains Akuatik, 14 (1): 55-63 hal.
Al-Attar, A.M. 2005. Changes in Hematology Parameters of The Fish,
Oreochromis niloticus Treated with Sublethal Concentration. Pakistan
Journal of Biological Sciences, 8 (3): 421-424 p.
Aldi, Y., Amdani dan Bakhtiar, A. 2016. Aktivitas Senyawa Skopoletin dari Buah
Mengkudu Morinda citrifolia L. terhadap Respon Fisiologi Makrofag
Mencit Putih Jantan. Jurnal Scientia, 6 (1): 25-28 hal.
Amri, K. dan Khairuman. 2003. Membuat Pakan Ikan Konsumsi. Agromedia

Pustaka. Tanggerang. Hal. 45.
Angka, S. L. 1990. The Pathology of Walking Catfish, Clarias batrachus Infected

Intraperitoneally with Aeromonas hydrophila. Asian Fish, 3: 343-351 p.
Arifin, M., Y. 2016. Pertumbuhan Dan Survival Rate Ikan Nila (Oreochromis sp.)
Strain Merah dan Strain Hitam yang Dipelihara pada Media Bersalinitas.
Jurnal Ilmiah Universitas Batanghari Jambi, 16 (1): 2-5 hal.
Au, D. W. T. 2004. The Application of Histo-Cytopathological Biomarkers in

Marine Pollution Monitoring: a Review. Mar. Poll. Bull, 48: 817-834 p.
Barton, B. A., J. D. Morgan, M. M. Vijayan. 2002. Physiological and Condition

Related Indicators of Environmental Stress in Fish. Biological Indicators of
Aquatic Ecosystem Stress. American Fisheries Society. 111-118 p.
Berkovich, L., G. Earon, I. Ron, A. Rimmon, A. Vexler S. Lev-Ar. 2013.

Moringa oleifera Aqueous Leaf Extract Down-Regulates Nuclear Factor-
Kappa β and Increases Cytotoxic Effect of Chemotherapy in Pancreatic
Cancer Cells. BMC Complementary and Alternative Medicine, 13: 1-7 p.
Blaxhall, P. C. and K. W. Daisley. 1973. Routine Haematological Methods for

Use with Fish Blood. J. Fish Biology, 5: 577-581 p.
Chinabut, S., Limsuwan, C., and Kitsawat P. 1991. Histology of the Walking
Catfish Clarias batrachus. Departemen of Fisheries Thailand. 96 p.
Chan-Blanco, Y., Vaillant, F., Perez, A. M, Reynes, M., Brillouet, J. M., Brat, P.
2006. The Noni Fruit Morinda citrifolia L. a Review of Agricultural

44
Research, Nutritional and Therapeutic Properties. J. Food Compos, 19: 645–

654 p.
Deng, S., B. J. West, A. K. Palu, and C. J. Jensen. 2012. Phytochemical,

Antioxidant and Toxicological Investigation of Morinda citrifolia L.
Blossoms. ISRN Analytical Chemistry, 5 p.
Djarijah, A. S. 1995. Pembenihan dan Pembesaran Nila Merah Secara Intensif.

Kanisius. Yogyakarta. 87 hal.
Djauhariya, E., Raharjo, M., dan Ma’un. 2006. Karakterisasi Morfologi dan Mutu
Buah Mengkudu. Buletin Plasma Nutfah, 12 (1) : 1-8 hal.
Djauhariya, E. 2003. Mengkudu Morinda citrifolia L. Tanaman Obat Potensial.

Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat. Pengembangan Teknologi
TRO, 15 (1) : 1-16 p.
Ezraneti, R. dan N. Fajri. 2013. Uji Toksisitas Serbuk Daun Mahkota Dewa
Phaleria macrocarpa terhadap Benih Ikan Nila Oreochromis niloticus.
Acta Aquatica, 3 (2): 62-65 hal.
Fiana, N. dan Oktaria, D. 2016. Pengaruh Kandungan Saponin Dalam Daging

Buah Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) Terhadap Penurunan Kadar
Glukosa Darah. Jurnal Kedokteran Universitas Lampung, 5 (4): 128-131
hal.
Fujaya, Y. 2004. Fisiologi Ikan: Dasar Pengembangan Teknologi Perikanan.

Rineka Cipta. Jakarta. 179 hal.
Guyton, A. C. dan Hall, J. E. 1997. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 9.

EGC. Jakarta. 69-75 hal.
Harrison. 2000. Prinsip-Prinsip Ilmu Penyakit Dalam. Volume 1. EGC. Jakarta.
Haryani, A., R. Grandiosa, I. D. Buwono, Ayi S. 2012. Uji Efektivitas Daun

Pepaya Carica papaya untuk Pengobatan Infeksi Bakteri Aeromonas
hydrophila pada Ikan Mas Koki Carassius auratus. Jurnal Perikanan
Kelautan, 3 (3): 213-220 hal.
Hidayah, R. Y. 2015. Pengaruh Penggunaan Berbagai Massa Lengkuas Alpinia

galanga terhadap Sifat Organoleptik dan Daya Simpan Ikan Nila
Oreochromis niloticus Segar. Skripsi. Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam. Universitas Negeri Semarang. Semarang. Hal. 9-11.
Irianto, A. 2005. Patologi Ikan Teleostei. Gajah Mada University Press.

Yogyakarta. 256 p.

45
Jayaraman, S. K., Saravanan, M. M., Illanchezian, S. 2008. Antibacterial,

Antifungal and Tumor Cell Supression Potential of Morinda citrifolia Fruit
Extract. Internatonal Journal of Integrative Biology, 3 (1): 44-49 p.
Karlinda, V. 2017. Pengaruh Kadmium (Cd), Seng (Zn), dan Kombinasi Cd-Zn
terhadap Respon Hematologis Ikan Nila Oreochromis niloticus. Tesis.
Universitas Airlangga. Surabaya. Hal. 22-30.
Kinasih, I., A. Supriyatna dan R.N. Rusputa. 2013. Uji Toksisitas Ekstrak Daun
Babadotan Ageratum conyzoides L. terhadap Ikan Mas Cyprinus carpio L.
sebagai Organisme Non-Target. Journal UINSGD, 7 (2): 121-132 hal.
Kusriningrum, R. 2010. Perancangan Percobaan. Universitas Airlangga. Surabaya.

165 hal.
Kusuma, S. F., R. E. Pawening dan R. Dijaya. 2017. Otomatisasi Klasifikasi

Kematangan Buah Mengkudu Berdasarkan Warna dan Tekstur. Jurnal
Ilmiah Teknologi Sistem Informasi, 3(1): 17-23 hal.
Lagler, K. F., J. E. Bardach, R. R. Miller, and D. R. M. Passino. 1977.

Ichthyology. John Willey and Sons. Inc. New York-London. 506 p.
Mardin. 2011. Toksisitas Nikel (Ni) terhadap Ikan Nila Gift Oreochromis
niloticus pada Media Berkesadahan Lunak (Soft Hardnes). Thesis. Institut
Pertanian Bogor. Bogor. Hal 18-33.
Meyer, D. J. and Harvey, J. W. 2004. Veterinery Laboratory Medicine

Interpretation & Diagnosis. 3rd Edition. USA: Saunders.
Muhammad, F. 2002. Penentuan Toksisitas Air Limbah dengan Indikator Ikan

Tombro Cyprinus carpio. Majalah Ilmiah Biologi BIOMA, 4 (2): 54-58 hal.
Muharrama, A. R. W., Syawal, H. dan Lukistyowati, I. 2015. Sensitivitas Ekstrak

Buah Mengkudu Morinda citrifolia L. terhadap Bakteri Streptococcus
agalactiae. Jurnal Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Riau, 2 (1): 1-8
hal.
Nayak, S. and Sushma, M. 2009. Immunostimulant Activity of The Extracts and

Bioactives of The Fruits of Morinda citrifolia. Pharmaceutical Biology, 47
(3): 248–254 p.
Nugroho, Y. A. 2012. Efek Pemberian Kombinasi Buah Sirih Piper betle L. Fruit,
Daun Miyana Plectranthus scutellarioides L. Leaf, Madu dan Kuning Telur
terhadap Peningkatan Aktivitas dan Kapasitas Fagositosis Sel Makrofag.
Media Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, 22 (1): 3-5 hal.
Purwatiningsih, T. I., Yustina, Y. S., dan Widodo. 2014. Aktivitas Senyawa Fenol
Dalam Buah Mengkudu Morinda citrifolia sebagai Antibakteri Alami untuk

46
Penghambatan Bakteri Penyebab Mastitis. Buletin Peternakan, 38 (1): 59-64

hal.
Putri, R. R., Basuki, F. dan Hastuti, S. 2013. Profil Darah dan Kelulushidupan
Ikan Nila Pandu F5 Oreochromis niloticus yang Diinfeksi Bakteri
Streptococcus agalactiae dengan Kepadatan Berbeda. Journal of
Aquaculture Management and Technology, 2 (2): 47-56 hal.
Rahayu, S. D., Z. L. Zulfatin dan A. Nuriliani. 2013. Efek Histopatologis

Insektisida λ-Cyhalothrin terhadap Insang, Hati, dan Usus Halus Ikan Nila
(Oreochromis niloticus L., 1758). Biosfera, 30 (2): 52-65 hal.
Rachmawati, F. N., U. Susilo dan Y. Sistiana. 2010. Respon Fisiologi Ikan Nila
Oreochromis niloticus yang Distimulasi dengan Daur Pemuasaan dan
Pemberian Pakan Kembali. Seminar Nasional Biologi. Fakultas Biologi
UGM. Yogyakarta. 1 (1): 492-499 hal.
Rahardjo, M. F., Sjafei, D. S., Affandi, R. dan Sulistiono. 2011. Ikhtiologi. Lubuk
Agung. Bandung. 396 hal.
Rizkiawan, A. 2017. Pengaruh Sari Buah Mengkudu Morinda citrifolia L.

terhadap Respon Fisiologi Ikan Gurami Osphronemus gouramy pada Suhu
Air Perendaman yang Berbeda. Skripsi. Universitas Airlangga. Surabaya.
116 hal.
Rochmawangi, M., Marsono, Y. dan Huriyati, E. 2013. Pengaruh Pemberian

Ekstrak Mengkudu Morinda citrifolia “Freeze Juicing” terhadap Kadar
Glukosa Darah Tikus Wistar Diabetes Mellitus. Jurnal Fakultas Kesehatan.
Universitas Gajah Mada. Yogyakarta. Hal 1-6.
Saanin, H. 1968. Taksonomi dan Kunci Identifikasi Ikan Jilid I. Bina Cipta.
Bandung. Hal. 245.
Saanin, H. 1984. Taksonomi dan Kunci Identifikasi Ikan, Jilid II. Bina Cipta.
Bandung. Hal. 508.
Salasia, S. I. O., D. Sulanjari dan A. Rahmawati. 2001. Studi Hematologi Ikan Air
Tawar. Biologi, 2 (12): 710-723 hal.
Satwadhar, P. N., H. W. Deshpande, S. I. Hashmi and K. A. Syed. 2011.

Nutritional Composition and Identification of Some of the Bioactive
Components in Morinda citrifolia Juice. International Journal of Pharmacy
and Pharmaceutical Sciences, 3 (1): 58-59 hal.
Secombes, C. J. 1988. Immune Control of Sexual Maturation in Fish in Ellis (Eds)

Fish Vaccination. Academic Press. London. 237-247 p.

47
Singh, D. R., S. Singh dan V. S. Banu. 2016. Changes in Antioxidants and

Minerals in Noni Morinda citrifolia L. Fruits during Development Process.
British Journal of Pharmaceutical Research, 10 (5): 1-11 p.
Shalan, M. N. A. A., Mustapha, N. M., Mohamed, S. 2016. Chronic toxicity

evaluation of Morinda citrifolia fruit and leaf in mice. Regulatory
Toxicology and Pharmacology, 83 (1): 46-53 p.
Sholehah, D. N. 2010. Pengukuran Kandungan Skopoletin pada Beberapa Tingkat

Kematangan Buah Mengkudu Morinda citrifolia L. dengan Metode KLT
Densitometri. Agrovigor, 3 (1): 4-9 hal.
Solomon, N. 1998. Noni: Nature’s Amazing Healer. Woodland Publishing. Utah.

101 p.
Suryowinoto, S. M. 1997. Flora Eksotika, Tanaman Peneduh. Yogyakarta:

Kanisius. 182 hal.
Wahjuningrum, D., N. Ashry dan S. Nuryati. 2008. Pemanfaatan Ekstrak Daun

Ketapang Terminalia cattapa untuk Pencegahan dan Pengobatan Ikan Patin
Pangasionodon hypophthalmus yang Terinfeksi Aeromonas hydrophila.
Jurnal Akuakultur Indonesia, 7 (1): 79–94 hal.
Wang, M. Y., West, B. J., Jensen, C. J., Nowicki, D., Chen, S., Palu, A. K., and
Anderson, G. 2002. Morinda citrifolia (Noni): A Literature Review and
Recent Advances in Noni Research. Acta Pharmacologica Sinica, 23 (13):
1127 – 1141 p.
Wedemeyer, G. A. and Yasutake. 1977. Clinical Methods for The Assessment on

The Effect of Enviromental Stress on Fish Health. Technical Paper of The
US. Departement of The Interior Fish and the Wildlife Service. pp 1-18.
Wells, R. M. G., Baldwin, J., Seymour, R. S., Christian, K., Britain, T. 2005.
Blood Cell Function and Haematology in Two Tropical Frehswater Fishes
from Australia. Comparative Biochemistry and Physiology, 141 (1): 87-93
p.
West, B. J., Jensen, C. J., and Westendorf, J. 2006. Noni juice is not hepatotoxic.
World J Gastroenterol, 12 (22): 3616-3619 p.
Zumrotul, M. 2013. Buah Mengkudu Morinda citrifolia Meningkatkan Respon

Imun Mencit Mus musculus terhadap Infeksi Bakteri Staphylococcus
aureus. Journal of Health Sciences, 6 (2): 1-2 hal.

48
LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil uji pendahuluan LC50-96 jam
Confidence Limits
95% Confidence Limits for 95% Confidence Limits for
konsentrasi log(konsentrasi)b
Lower Upper Lower Upper
Probability Estimate Bound Bound Estimate Bound Bound
PROBITa 0,01 10,594 0,299 10,42 1,025 0,114 1,103
0,05 12,374 0,687 10,85 1,093 0,165 1,117
0,1 13,443 1,276 11,14 1,128 0,204 1,129
0,15 14,215 1,374 11,56 1,153 0,245 1,132
0,2 14,861 1,456 12,49 1,172 0,291 1,144
0,25 15,438 1,573 12,69 1,189 0,313 1,149
0,3 15,975 1,683 13,24 1,203 0,359 1,151
0,35 16,49 1,864 13,96 1,217 0,385 1,158
0,4 16,993 1,964 14,53 1,23 0,418 1,162
0,45 17,495 2,078 14,89 1,243 0,435 1,169
0,5 18,004 2,193 15,23 1,255 0,474 1,175
0,55 18,527 2,238 15,68 1,268 0,504 1,181
0,6 19,074 2,374 16,01 1,28 0,536 1,186
0,65 19,657 2,489 16,46 1,294 0,589 1,193
0,7 20,29 2,598 16,85 1,307 0,617 1,195
0,75 20,996 2,611 17,25 1,322 0,648 1,202
0,8 21,812 2,753 17,46 1,339 0,693 1,217
0,85 22,802 2,894 17,83 1,358 0,743 1,233
0,9 24,113 2,964 18,28 1,382 0,791 1,258
0,95 26,195 3,964 18,47 1,418 0,852 1,274
0,99 30,597 4,364 18,97 1,486 0,964 1,296
SR mortalitas Akumulasi Akumulasi

Dosis mortalitas
(%) (%) mortalitas SR (%) Total kematian (%)
0 g/L 0 30 0 0 90 90 0
1,5 g/L 0 30 0 0 90 90 0
3 g/L 0 30 0 0 90 90 0
4,5 g/L 16 14 53 16 30 46 34
6 g/L 18 12 60 18 30 48 37
7,5 g/L 30 0 100 90 0 90 100
50%−𝑛𝑒𝑥𝑡 𝑙𝑜𝑤𝑒𝑠𝑡 50−37 13

Proportionate distance = 𝑛𝑒𝑥𝑡 ℎ𝑖𝑔ℎ𝑒𝑠𝑡 %− 𝑛𝑒𝑥𝑡 𝑙𝑜𝑤𝑒𝑠𝑡 = = 63 = 0,20
100−37
Log LD50 = (0,20 x log 10) + 18 = 18,20

49
Lampiran 2. Hasil pengukuran total eritrosit jam ke-24

Descriptives
95% Confidence
Interval for
Mean
Std. Std. Lower Upper
N Mean Deviation Error Bound Bound Minimum Maximum
eri_24 A
4 5.492 0.00896 0.00448 54.777 55.063 5.48 5.5
B
4 5.811 0.01724 0.00862 57.839 58.388 5.79 5.83
C
4 5.743 0.00922 0.00461 5.728 57.573 5.74 5.76
D
4 5.902 0.01547 0.00774 58.774 59.267 5.88 5.92
E
4 6.119 0.01699 0.00849 60.916 61.457 6.09 6.13
F
4 6.05 0.01514 0.00757 60.257 60.739 6.03 6.07
Total
24 5.853 0.21136 0.04314 57.635 5.942 5.48 6.13
Test of Homogeneity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig.

eri_24 0.345 5 18 0.88
ANOVA
Sum of Mean
Squares Df Square F Sig.
eri_24 Between
Groups 1.024 5 0.205 1.007.223 0
Within
Groups 0.004 18 0
Total 1.028 23
Eri_24
Subset for alpha = 0.05

Duncana Perlakuan N 1 2 3 4 5 6
A 4 54.920
C 4 57.427
B 4 58.113
D 4 59.021
F 4 60.498
E 4 61.187
Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000

50
Lampiran 3. Hasil pengukuran total eritrosit jam ke-96

Descriptives
95% Confidence
Interval for
Mean
eri_96 A
4 5.746 0.01101 0.00551 57.286 57.637 5.74 5.76
B 4 5.601 0.00917 0.00458 55.869 5.616 5.59 5.61
C 4 5.506 0.04028 0.02014 54.417 55.699 5.47 5.56
D 4 5.881 0.014 0.007 58.589 59.035 5.87 5.9
E 4 6.005 0.00431 0.00215 59.977 60.114 6 6.01
F 4 5.45 0.05943 0.02971 53.551 55.442 5.36 5.49
Total
24 5.698 0.20515 0.04188 56.115 57.847 5.36 6.01

eri_96 3.877 5 18 0.02
ANOVA
Sum of Mean
Squares Df Square F Sig.
eri_96 Between
Groups 0.951 5 0.19 204.774 0
Within
Groups 0.017 18 0.001
Total 0.968 23
Eri_96

Perlakuan N 1 2 3 4 5 6
Duncana
F 4 5.45
C 4 5.506
B 4 5.601
A 4 5.746
D 4 5.881
E 4 6.005
Sig. 1 1 1 1 1 1

51
Lampiran 4. Hasil pengukuran total leukosit jam ke-24
Descriptives
95% Confidence
Interval for
Mean
Leu_24 A 4 4.47 0.03978 0.01989 44.066 4.533 4.42 4.51
B 4 4.621 0.01102 0.00551 46.037 4.639 4.6 4.63
C 4 4.759 0.02793 0.01396 47.145 4.803 4.74 4.8
D 4 4.788 0.01414 0.00707 47.651 4.81 4.78 4.81
E 4 4.906 0.01578 0.00789 48.811 4.931 4.89 4.92
F 4 5.057 0.01502 0.00751 50.329 5.081 5.04 5.07
Total 24 4.767 0.19373 0.03955 4.685 4.849 4.42 5.07

Leu_24 1.773 5 18 0.17
ANOVA
Sum of Mean
Squares df Square F Sig.
Leu_24 Between
Groups 0.854 5 0.171 324.37 0
Within
Groups 0.009 18 0.001
Total 0.863 23
Leu_24
Perlakuan N 1 2 3 4 5
Duncana
A 4 4.47
B 4 4.621
C 4 4.759
D 4 4.788
E 4 4.906
F 4 5.057
Sig. 1 1 0.095 1 1

52
Lampiran 5. Hasil pengukuran total leukosit jam ke-96

Descriptives
95% Confidence
Interval for
Mean
Leu_96 A 4 4.45 0.04339 0.0217 43.808 4.519 4.39 4.49
B 4 4.708 0.00685 0.00342 46.969 4.719 4.7 4.72
C 4 4.769 0.04354 0.02177 46.997 4.838 4.71 4.81
D 4 4.87 0.00903 0.00452 48.557 4.884 4.86 4.88
E 4 5.027 0.0189 0.00945 49.971 5.057 5.01 5.05
F 4 4.956 0.03844 0.01922 4.895 5.017 4.91 5
Total 24 4.797 0.19434 0.03967 47.146 4.879 4.39 5.05

Leu_96 2.9 5 18 0.04
ANOVA
Sum of Mean
Leu_96 Between
Groups 0.851 5 0.17 177.95 0
Within
Groups 0.017 18 0.001
Total 0.869 23
Leu_96
Perlakuan N 1 2 3 4 5 6
Duncana
A 4 4.45
B 4 4.708
C 4 4.77
D 4 4.87
F 4 4.956
E 4 5.027
Sig. 1 1 1 1 1 1

53
Lampiran 6. Hasil pengukuran kadar hemoglobin jam ke-24

Descriptives
95% Confidence
Interval for Mean
Hb_24 A 4 5.5 0.39158 0.19579 48.769 61.231 5.1 6
B 4 4.7 0.88694 0.44347 32.887 61.113 3.8 5.8
C 4 5.25 0.46547 0.23274 45.093 59.907 4.7 5.8
D 4 5.1 0.6377 0.31885 40.853 61.147 4.6 6
E 4 5.2 0.62716 0.31358 4.202 6.198 4.5 6
F 4 5.025 0.60208 0.30104 4.067 5.983 4.2 5.6
Total 24 5.129 0.60324 0.12314 48.744 53.839 3.8 6

Hb_24 0.762 5 18 0.59
ANOVA
Sum of Mean
Hb_24 Between
Groups 1.412 5 0.282 0.73 0.61
Within
Groups 6.957 18 0.387
Total 8.37 23
Hb_24
Subset for alpha =

0.05
Duncana Perlakuan N 1
B 4 4.7
F 4 5.025
D 4 5.1
E 4 5.2
C 4 5.25
A 4 5.5
Sig. 0.122

54
Lampiran 7. Hasil pengukuran kadar hemoglobin jam ke-96

Descriptives
95% Confidence
Interval for Mean
Hb_96 A 4 6.225 0.9215 0.46075 47.587 76.913 5.1 7.2
B 4 4.65 0.57446 0.28723 37.359 55.641 3.9 5.3
C 4 4.85 0.42032 0.21016 41.812 55.188 4.4 5.3
D 4 5.05 0.31091 0.15546 45.553 55.447 4.6 5.3
E 4 4.475 0.83417 0.41708 31.477 58.023 3.7 5.5
F 4 4.325 0.5909 0.29545 33.847 52.653 3.7 5.1
Total 24 4.929 0.85693 0.17492 45.673 5.291 3.7 7.2

Hb_96 1.741 5 18 0.18
ANOVA
Sum of Mean
Hb_96 Between
Groups 9.397 5 1.879 4.52 0.01
Within
Groups 7.492 18 0.416
Total 16.89 23
Hb_96
Perlakuan N 1 2
Duncana F 4 4.325
E 4 4.475
B 4 4.65
C 4 4.85
D 4 5.05
A 4 6.225
Sig. 0.169 1

55
Lampiran 8. Hasil pengukuran kadar glukosa darah jam ke-24

Descriptives
95% Confidence
Interval for Mean
GD_24 A 4 57.5 12.8193 6.40963 37.1017 77.8983 42 73
B 4 58.5 6.13732 3.06866 48.7342 68.2658 54 67
C 4 62.25 7.932 3.966 49.6284 74.8716 53 72
D 4 75.25 10.1448 5.07239 59.1074 91.3.926 61 85
E 4 87.25 30.5328 15.26638 60.6656 157.834 92 155
F 4 85.5 18.2094 9.10471 74.7747 132.725 87 128
Total 24 77.75 26.1072 5.32911 66.7259 88.7741 42 155

gluko_24 2.602 5 18 0.06
ANOVA
Sum of Mean
gluko_24 Between
Groups 10781.5 5 2156.3 7.93 0
Within
Groups 4895 18 271.94
Total 15676.5 23
gluko_24
Duncana Perlakuan N 1 2
A 4 57.5
B 4 58.5
C 4 62.25
D 4 75.25
F 4 103.8
E 4 109.3
Sig. 0.178 0.643

56
Lampiran 9. Hasil pengukuran kadar glukosa darah jam ke-96

Descriptives
95% Confidence
Interval for Mean
GD_96 A 4 66.25 5.25198 2.62599 57.8929 74.6071 59 71
B 4 31.75 4.57347 2.28674 24.4726 39.0274 27 37
C 4 28.5 4.65475 2.32737 21.0933 35.9067 22 33
D 4 27.75 1.70783 0.85391 25.0325 30.4675 26 30
E 4 29.25 10.8743 5.43714 11.9466 46.5534 18 44
F 4 29.75 7.58837 3.79418 17.6752 41.8248 22 40
Total 24 355.417 15.1943 3.10153 29.1257 41.9577 18 71

gluko_96 1.18 5 18 0.36
ANOVA
Sum of Mean
gluko_96 Between
Groups 4563.21 5 912.64 22 0
Within
Groups 746.75 18 41.486
Total 5309.96 23
gluko_96

Duncana Perlakuan N 1 2
D 4 27.75
C 4 28.5
E 4 29.25
F 4 29.75
B 4 31.75
A 4 66.25
Sig. 0.439 1

57
Lampiran 10. Dokumentasi penelitian
(a) (b) (c)
(d) (e) (f)
(g) (h) (i)
Keterangan :
a. Penimbangan buah mengkudu
b. Pembuatan ekstrak buah mengkudu
c. Pengambilan sampel darah pada ikan nila
d. Pengamatan eritrosit dan leukosit pada hemositometer
e. Pengamatan hemoglobin menggunakan metode sahli
f. Pengamatan glukosa darah menggunakan alat One Touch Analyzer
g. Pengamatan pH selama penelitian menggunakan pH meter
h. Pengamatan amonia menggunakan amonia test kit
i. Pengamatan oksigen terlarut dan suhu menggunakan DO meter

Pengaruh Perendaman Ekstrak Buah Mengkud

Uploaded by

Document Information

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Pengaruh Perendaman Ekstrak Buah Mengkud

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

IR - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK BUAH MENGKUDU

THE EFFECT OF SOAKING NONI FRUIT Morinda citrifolia L.

PROGRAM S-1 AKUAKULTUR

M. TANDO RIDHO PRATAMA

FAKULTAS PERIKANAN DAN KELAUTAN

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

Yang bertanda tangan di bawah ini :

N a m a : M. Tando Ridho Pratama

Menyatakan dengan sebenarnya bahwa hasil tulisan laporan Skripsi yang

1. Dipublikasikan dalam Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan Fakultas

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK BUAH MENGKUDU

THE EFFECT OF SOAKING NONI FRUIT Morinda citrifolia L.

M. TANDO RIDHO PRATAMA

Pembimbing Utama, Pembimbing Serta,

Dr. Woro Hastuti Satyantini, Ir., M.Si. Sudarno, Ir., M.Kes.

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK BUAH MENGKUDU

THE EFFECT OF SOAKING NONI FRUIT Morinda citrifolia L.

M. Tando Ridho Pratama

Telah diujikan pada

KOMISI PENGUJI SKRIPSI

Surabaya, 28 Januari 2019

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

M. TANDO RIDHO PRATAMA. Pengaruh Perendaman Ekstrak Buah

Budidaya ikan nila Oreochromis niloticus tidak dapat dipisahkan dari

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

M. TANDO RIDHO PRATAMA. THE EFFECT OF SOAKING NONI

The cultivation of tilapia Oreochromis niloticus is an inseparable from the

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

Surabaya, November 2018

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

UCAPAN TERIMA KASIH

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

3.2 Hipotesis ....................................................................................................20

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

4.1 Desain Penelitian..............................................................................................21

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

2.1 Buah mengkudu.................................................................................................5

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

1. Uji pendahuluan LC50-96jam ............................................................................51

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

1.1 Latar Belakang

Ikan nila Oreochromis niloticus dikenal sebagai ikan yang memiliki

nila menjadi komoditas budidaya perikanan andalan di Indonesia (Putri dkk.,

citrifolia L. terbukti efektif digunakan sebagai bahan imunostimulan dalam upaya

preventif mempengaruhi respon imun tubuh melawan penyakit patogen (Chan-

Blanco et al., 2006).

Wang et al. (2002) melaporkan bahwa ekstrak buah mengkudu memiliki

kandungan bioaktif yaitu skopoletin, octoanoic acid, kalium, vitamin C, alkaloid,

antrakuinon, β-sitosterol, karoten, vitamin A, glikosida flavonoid, linoleat acid,

acid, rutin, pro-xeronine dan terpenoid. Kandungan bioaktif ekstrak buah

mengkudu menghasilkan efek terapeutik seperti analgesik, antimikrobial,

antioksidan, antikanker, antiinflamatori dan imunostimulan (Chan-Blanco et al.,

Haryani dkk. (2012) menyatakan bahwa pengobatan ikan menggunakan

metode perendaman mempermudah proses pengobatan pada benih ikan dalam

skala banyak. Ekstrak buah mengkudu sebagai imunostimulator pada kondisi

SKRIPSI PENGARUH PERENDAMAN EKSTRAK… M. TANDO RIDHO P.

merangsang dan memperbaiki fungsi sistem imun, sehingga menyebabkan

perubahan fisiologi yang mempengaruhi profil darah (Zumrotul, 2013).

Beberapa kandungan ekstrak buah mengkudu yang bermanfaat ialah