HPLC Alliance System

Gastón Yávar Bardavid

Ing. de Servicio Waters
 Objetivos:
 Reconocer las partes y funcionalidades del equipo
 Sistema cromatográfico
 Sistema no cromatográfico
 Sistema de apoyo
 Interpretar los parámetros del equipo
 Conocer el circuito de fase móvil y muestra, purga, lavado
de sellos de pistón.
 Troubleshooting de problemas comunes
 Problemas instrumentales
 Problemas no instrumentales (procedimiento, purga,
ambientación, sistema cromatográfico)
 Consumibles y procedimientos de reemplazo
 Mantenimiento y cuidados del equipo
 Mantenimiento diario
 Mantenimiento semanal
 Especificaciones
 Capacidad para 120 viales
 Precisión de la inyección:
 RSD<1% de 5 a 80 µL, Jeringa de 250 µL para fenonas a
254 nm.
 Lavado de aguja integrado programable
 Exactitud ±1 µL para 50 µL de muestra, 6 inyecciones de
muestra
 Rango de volumen de Inyección: 0.1 a 100 µL con
estándar, opcionales loop de 25 µL o loop 2000 µL
 Linealidad del inyector: 0.999 (1 a 100 µL)
HPLC Alliance e2695
Desgasificador

“Degasser h/w fault”

Válvula de gradiente

• Mezcla la fase móvil a bajas presiones

• Curvas de gradiente

“Problemas de flujo o composición”

 Bomba

“Lost Prime”

“Problemas de %RSD en tiempo” “Plunger Homing Over Pressure”

 Inyector

“Viales y carruseles mojados”

“Problemas de %RSD en área”

 Configuración
Standard: Opcional: • Loop 25 µL
• Loop de 100 µL • Jeringa de 25 µL • Loop 250 µL
• Jeringa de 250 µL • Jeringa de 2500µL • Loop 500 µL

“Problemas de %RSD en área”

 Autosampler

“Missing Vial”

“Wrong carousel in position”

Opcional:
• Heating/Cooling: 4°C a 40°C
 Horno Columna
• Horno para 2 columnas de hasta 30
cm

• Heating: 20°C a 65°C (5°C por

sobre la temperatura ambiente)

• Heating/Cooling: 4°C a 65°C

Opcional:
• 2 Position Regeneration
“Column temp h/w fault (7)” • 3 Position Selection
• 6 Position Selection
 Cuidados del Equipo
• Lavar el equipo una vez terminado el análisis

• Uso de Buffer: La concentración de Buffer en la fase móvil no debe ser

excesiva.

• Mantenimiento diario de cambiar el agua todos los días y revisar el estado de

los otros solventes. No haya presencia de partículas en las botellas.

• Monitorear la presión de trabajo del equipo. Puede tenerse la referencia del

equipo a un flujo determinado solo con agua, por ejemplo.

• Utilizar siempre solvente de lavado de pistones para evitar daño por sales en
los pistones o en los sellos de pistón, el cual provoca altos valores para el delta
de presión

• Si el equipo no va usarse en largos periodos dejarlo en Agua/Metanol, por

todos sus canales
 Contaminación de las
líneas de solvente
• Cambiar el agua del equipo a diario.

• Lavar conscientemente el equipo luego de utilizarlo.

• Si el equipo no va ser utilizado por un tiempo, dejarlo en

Agua/Orgánico.
Problemas de GPV
Problemas en la
bomba
“Solvent delivery h/W fault”
 Pistones dañados
• Siempre procurar tener solvente de lavado de sellos en la
bomba.

• Moderar la cantidad de sales en la fase móvil.

• Lavar conscientemente el equipo

Obstrucción del
Filtro de Línea

• El filtro de línea es un
consumible del equipo

• Se puede limpiar el filtro

sonicandolo con
MeOH/Agua o alguna
solución ácida.
Daño por sales en las
válvulas de Inyección
• Moderar el uso de sales
en la fase móvil

• Lavar conscientemente el
equipo luego de utilizarlo
Daño por en el Loop
• Moderar el uso de sales
en la fase móvil

• Lavar conscientemente el
equipo luego de utilizarlo
Contaminación de la
Jeringa
• Luego de lavar el equipo realizar
la purga del inyector para lavar la
Jeringa
Problemas de
Inyector