Cabrera Cazares Amanda Guadalupe

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ELECTROFORESIS DE ADN EN GEL DE

AGAROSA
Electroforesis: técnica que sirve para la separación de moléculas según la movilidad
de estas en un campo eléctrico. Se utiliza en el laboratorio para separar
macromoléculas en solución analítica.

- Los ADN / ARN Están cargados de forma negativa (esqueleto de grupos

fosfato), migraran hacia el polo positivo o ánodo.
- Fuerza eléctrica, impone una aceleración proporcional al cociente de carga
- Fuerza de rozamiento: depende del tamaño y forma de la partícula y de las
características del medio.
- La aceleración impuesta por la fuerza eléctrica es igual para cualquier
molécula de ácido nucleico.
- El gel de agarosa nos permite una mejor migración y separación.

Laboratorio virtual

1) Se prepara la solución de agarosa para hacer el gel (mayor porcentaje de

agarosa se obtiene un porcentaje de poro más chico, pero se resuelven mejor
los fragmentos más chicos). Se hace un gel 2% vol.
2) Fundir la solución y agregar bromuro de tilio (intercalante de ADN)
3) Volcar la solución en el molde
4) Colocar el gel en la cuba de electroforesis y se agrega buffer de corrida para
cubrir el gel
5) Preparar las muestras con buffer de siembra (le da densidad a la muestra)
6) Cargar la pipeta con las muestras y se descarga en el gel

Marcador de peso molecular: mezcla comercial de fragmentos de ADN que nos

permite comparar nuestras muestras en la corrida y determinar el tamaño de los
fragmentos de ADN.

7) Conectar la fuente a la cuba, con los polos opuestos y se corre a voltaje

constante
8) Los fragmentos se desplazan
9) Se colocan los fragmentos en un trans-iluminador UV