UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA Centro Universitario de Ciencias Biolégicas y Agropecuarias Division de Ciencias Veterinarian INMUNOLOGIA VETERINARIA Protocolo 1- Leucograma Equipo 4 Integrantes: Aviles Ruiz Ofelia Alejandra Hemédndez Rojas Jennifer Guadalupe Kosonoy Ruiz Etzuko Hiromi Rebollo Jiménez Rodrigo Sanchez Rodriguez Jonathan David Villasefior Monica Lizzett BI 03 - 09 - 2023Introduceién El diferencial de glébulos blancos llamado también leucograma nos proporciona informacion Atil para monitorear la respuesta inmune. Los leucocitos se pueden dividir en tres grupos segiin su funcién, La primera es funcién fagocitica y antimicrobiana que esté constituida por neutréfilos y monocitos. La segunda que son células con respuesta inmunitaria, realizada por los linfocitos y finalmente la fancién en reacciones alérgicas, de hipersensibilidad que son responsabilidad de los eosinéfilos y baséfilos. Otra clasificacién es por su morfologia & incluye: Granulocitos (neutréfilos, eosin6filos y bas6filos) y agranulocitos (monoeitos y linfocitos) Con frecuencia, la verificacién de! nimero de leucocitos en la sangre es parte de la prueba de recuento sanguineo completo (RSC), se puede usar para determinar la presencia de afecciones como infecciones, inflamaciones, alergias y leucemia. Los NEUTROFILOS POLIMORFONUCLEARES (PMN) constituyen el primer nivel de defensa celular, pues fagocitan y no presentan el antigeno a los linfocitos. Generalmente se reportan en dos series: los neutrofilos segmentados y los neutréfilos en banda. En perros y gatos los neutréfilos constituyen la mayoria celular de la sangre. Una elevacién importante del niimero de neutréfilos banda se denomina bandemia o desviacién a la izquierda, mientras que la presencia de un gran niimero de neutréfilos hipersegmentados se denomina desviacién a la derecha, El aumento de neutréfilos en sangre es indicador de inflamacién, Una bandemia suele acompafiar a las inflamaciones infecciosas graves (ejemplo: piémetra de cuello cerrado). Al incremento en la cantidad de neutréfilos se le denomina neutrofilia, mientras que a su disminucién se le denomina neutropenia. Los procesos inflamatorios, el estrés y los esteroides causan neutrofilia, mientras que la mielosupresién, algunos virus como Ios del parvovirus canino y felino y la inflamacién grave producen neutropenia, Los linfocitos constituyen la célula clave para la realizacién de los procesos de respuesta inmune humoral, pues de ellos depende la produccién de los anticuerpos a partir de Tas células plasméticas. Al incremento en el nimero de leucocitos se le denomina linfocitosis, mientras que a su disminucién se le denomina linfopenia, El estrés, los esteroides y la mayoria de las infecciones virales causan linfopenia en perros y gatos. La linfocitosis se presenta en casos de tumores del tejido linfoide, vacunaciones con virus vivo modificado y forcejeo en gatitos al tomar la muestra. Los MONOCITOS constituyen la transicién entre la inmunidad celular y la humoral, pues Io fagocitado por ellos seré presentado a los linfocitos para ser procesado y eliminado por via de los linfocitos To B. Es por esto que constituyen el segundo nivel de defensa celular. Los monocitos permanecen un tiempo en la sangre y posteriormente abandonan el espacio vascular para que una ver. fuera de él se conviertan en macr6fagos de vida libre o fijos en los diversos tejidos. El incremento en su cantidad se denomina monocitosis. Son causas de monocitosis: estrés, inflamacién erénica, degradacién tisular, convalecencia, Los EOSINOFILOS reaccionan prineipalmente a la presencia de la cuticula de helmintos y regulan las reacciones de hipersensibilidad de tipo I, por lo que la EOSINOFILIA se asocia a: enfermedades inflamatorias, infiltrativas gastrointestinales 0 respiratorias, hipersensibilidad tipo I, hemoparasitosis (larvas migratorias), leucemia, tumores. Mientras que en laEOSINOPENIA los procesos que la acompafian son: estrés crénico por inflamacién aguda o enfermedad de cushing. Es raro encontrar a los BASOFILOS en los hemogramas, pero el incremento en su niimero suele ir a la vez de la eosinofilia, y puede asociarse a: hipersensibilidad, dirofilariasis Materi les y métodos. Equipo: Microscopio de luz convencional Materiales: Portaobjetos Torundas de algodén Microlancetas Tubos de ensayo 13X100 Reactivos quimicos Alcohol al 70% Metanol Kit de hemocolorantes répido EDTA Aceite de inmersion Agua destilada Muestras y especimenes biolégicos: Sangre completa Objetivo General Identificar las distintas morfologias de los leucocitos presentes en la sangre, asi como la aplicacin de la realizacién de una formula leucocitaria y su importancia en el diagnéstico de determinadas patologias Objetivos especificos Zonocer las células que conforman la sangre 2, Identificar la morfologia de cada una de los leucocitos presentes en la sangre Realizar una formula leucocitaria y conocer las distintas patologias donde hay alteracién, 4, Conocer las células que conforman la sangre Ira fase de Protocolo Dificultades que se tuvieron en la toma y transporte de la sangre Una dificultad que tuvimos fue colocar la cantidad correcta de sangre en el portaobjetos. Después de extraer sangre de nuestro sujeto, procedimos a montar una gota de sangre en el portaobjetos, sin embargo, en nuestro primer intento la cantidad de sangre fue muy pequefia y el frotis fall6, En nuestro segundo intento colocamos demasiada sangre en el portaobjetos y el frotis qued6 demasiado grucsa, Decidimos no molestar a nuestro sujeto humano por tercera vez, por lo que procedimos al paso de la fijacién y tincién del protocolo utilizando ambos portaobjetos. Evidencia FotogréficaResultados observados A partir de los frotis sanguineos obtenidos, fijados, tefiidos y observados al microscopio, pudimos identificar neutréfilos (segmentados y en banda), linfocitos, eosinéfilos y monocitos. Nuestros resultados mostraron un total de 91 leucocitos; 31 neutréfilos segmentados, 22 neutréfilos en banda, 27 linfocitos, 7 eosinéfilos y 4 monocitos. Segtin nuestros célculos los porcentajes de leucocitos en la muestra sanguinea son los siguientes: 58,3% neutréfilos, 29,7% linfocitos, 7,7% cosinéfilos y 4,4% monocitos. La presencia de baséfilos en esta muestra sanguinea fue nula, Los eritrocitos (células rojas) no fueron tomados en cuenta en las calculaciones. Evidencia fotogrifica& i8 8 Discusién General La formula leucocitaria es un andlisis de sangre de gran importancia para el diagnéstico de enfermedades infecciosas, céncer, enfermedades crénicas, alergias, hipersensibilidad, entre otros. Se utiliza para la salud general, diagndsticos o para darle seguimiento a un trastorno existente. Pueden existir varias razones por las que los resultados o valores de la formula Ieucocitaria pueden ser alterados —altos o bajos. Un valor alto de leucocitos podria indicar una infeccién, un trastorno inmunitario 0 una reaccién alérgica. Un valor bajo podria ser causado por problemas en la médula ésea, medicamentos o hasta cdncer (Tizard, 2009). De igual manera, los valores anormales podrian ser el resultado de un error antropogénico. Sin embargo, los resultados anormales no siempre indican una enfermedad que requiere tratamiento médico. Las anormalidades pueden ser causadas por el ejercicio, el consumo de alcohol y de medicamentos (Labrador et. al, 2022). Los resultados muestran un valor normal del total de neutréfilos de 58,3% pero resalta una cantidad anormal de 24,2% de neutréfilos banda. Los neutréfilos banda son células inmaduras que se encuentran en la médula ésea y en el torrente sanguineo. La aparicién de neutr6filos inmaduros se denomina como “desviacién izquierda”, y en la mayoria de los casos su presencia es indicativa de una infeccién (Labrador et. al, 2022). Sin embargo esta alteracién puede ser el resultado de una identificacién errénea por parte de nuestro equipo durante la observacién, ya que apenas estamos empezando a aprender cémo identificar dichas células. El principal papel de los eosindfilos es la proteccién frente a infecciones originadas por parisitos y por reacciones alérgicas. Los eosinéfilos representan entre el 1-5% de losIeucocitos sanguineos (Monserrat, et al., 2017 y Labrador et. al, 2022). Los resultados muestran que nuestro paciente tiene un alto valor de 7% de eosinéfilos. El valor de cosindfilos aumentan ante la presencia de pardsitos, y en paises que presentan una baja incidencia de infecciones por pardsitos helmintos, en las reacciones alérgicas (Labrador et. al, 2022). El aumento de células también puede deberse a un etror humano o a un caso de error de identidad por parte de nuestro equipo. Aunque hay mucha evidencia que respalda a la formula leucocitaria para diversos diagnésticos de enfermedades, no tomaremos nuestro estudio como una forma de diagnéstico ya que aiin no somos médicos. Conclusiones Generales Aviles Ruiz Ofelia Alejandra. El sistema inmunolégico es el encargado de defender al organismo ante agentes patégenos que tienen el potencial de generar dafios a la correcta fisiologia del mismo. El método por el cual el sistema inmune trabaja es a través de células especializadas que trabajan en conjunto para climinar al agente patégeno, primero tenemos a Jas células centinela, son las primeras en detectar la entrada de un agente extrafio, después tenemos a los macrogafos que hacen el Ilamado a células leucocitarias especializadas en reconocer partes del agente extrafio. En esta pric pertenecientes al grupo de leucocitos, cémo neutréfilos, eosinéfilos, monocitos, entre otros. También aprendimos a realizar la téenica de frotis sanguineo y tineién para observacién al microscopio, fue una experiencia interesante y de mucho aprendizaje. identificamos las diferentes células Hernandez Rojas Jennifer Guadalupe. Se realizé la practica de frotis sanguineo y logramos identificar diferentes células del grupo leucocitos gracias a la tincién que se realiz6, Aunque tuvimos algunas complicaciones logramos identificar la mayoria de células encontradas en la sangre del individuo al principio fue dificil diferenciar las eélutas ya que se colocé demasiada sangre en el portaobjetos y no se lograban diferenciar bien pero con la ayuda del microscopio Jo logramos, fue muy interesante esta prictica ya que logramos ver qué tal estaba la salud del individuo y ver que no tuviera algin agente infeccioso dentro de la sangre. Kosonoy Ruiz Etzuko Hiromi. En la prictica realizamos ftotis sanguineos para realizar la tincién, poder locatizar en el microscopio y hacer 1a suma total de cada célula que localizamos como neutréfilos, eosinéfilos, monocitos, esto ayuddndonos @ ver de forma directa a los encargados de ayudar a nuestro sistema inmunolégico en eliminar patégenos; en si me gusto mucho la prictica ya que por primera vez. hice una tincién aunque no quedé del todo bien y ver todo microscépicamente me gusto. Rebollo Jiménez Rodrigo. Desde mi perspectiva. El leucograma es un anélisis de sangre que se usa para evaluar la cantidad y el tipo de células blancas en la sangre. Esto es muy importante porque estas células tienen un papel crucial en el sistema inmunolégico, ayudando a combatir infecciones enfermedades y patégenos . El leucograma puede proporcionar informacién sobre posibles infecciones, inflamaciones, trastornos de la médula ésea y enfermedades autoinmunes. También puede ayudar a monitorear la eficacia de tratamientospara mi el leucograma es una herramienta importante para diagnosticar y monitorear enfermedades, y ayuda a los médicos a tomar decisiones informadas sobre el tratamiento de sus pacientes. Sanchez Rodriguez Jonathan David. El sistema inmune tiene como funcién primaria defender el cuerpo de agentes patégenos, es nuestro mecanismo de defensa ante alguna enfermedad, virus o bacteria, Esto lo logra gracias a las células que lo complementan, En esta prictica se realizé un frotis sanguineo, que después de un proceso de tincién, fue analizado bajo un microscopio para realizar un conteo de todas las células que se odian apreciar. Esta practica me parecié muy interesante y a su vez nos ayudé para saber identificar células y detectar anormalidades que podrian presentarse y nos podria indicar la presencia de un agente patégeno, Villasefior Monica Lizzett. El leucograma es una herramienta de gran utilidad y valor en el campo médico, ya que aporta informacién sobre el recuento absoluto de glébulos blancos para diagnosticar enfermedades ¢ hipersensibilidades. Existe evidencia de que los valores variantes de los leucocitos son ttiles para identificar la presencia de alguna infeccién, reacciones alérgicas y en sospechar una enfermedad hematolégica en nuestros pacientes. En este protocolo se pudo identificar los leucocitos: neutréfilos, monocitos, eosindfilos y linfocitos, utilizando nuestro conocimiento de sus estructuras morfolégicas. El uso adecuado del leucograma es un elemento esencial para los diagndsticos médicos y a su vez. garantizan una mejor calidad de la atencién en salud. Bibliografia Anénimo (2021). Aproximacién al Paciente Hematolégico (Valores Normales de Hematies, Hemoglobina, Leucocitos, etcétera). Elsevier Connect. hitps://www.elsevier.com/es-es/connectmedicina/edu-aproximacion-al-paciente-hema tologico-valores-normales-de-hematies-hemoglobina-leucocitos. Labrador, R., Valido, D., & Campo, M. (2022). Valor del Leucograma en el Proceso Diagnéstico del Paciente Pedidtrico, Revista de Ciencias Médicas de Pinar del Rio, 26(6), €5532 hitp://scielo.sld.cu/scielo.php?seript= ng=eséeting=es. i_arttext&epid$1561-31942022000600021 8c Monserrat, J., Gomez, A., Sosa, M., y Prieto, A. (2017). Introduccién al Sistema Inmune. Componentes Celulares del Sistema Inmune Innato. Enfermedades del Sistema Inmune y Reumatolégicas (I), Medicine, 12(24):1369-78, Tizard, 1 (2009). Introduccién a la Inmunologia Veterinaria. 8va Edicion. Elsevier. https://books google.com. mx/books?hl-esé&elr&id-Y weSSo4ml8gC&oimfnd&pe-P ‘T2&dq~inmunologia+humana+&ots=iMtIDOYauS&sig=DhL12AgIWLarDVgCBHs BADAerqk#v=onepaged&q&f=false.