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XI JORNADA DE ENSINO, PESQUISA E EXTENSO JEPEX 2011 UFRPE: Recife, 18 a 22 de outubro.

ERRADICAO DE Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum EM GUA


Tssia Camila Gonalves dos Santos1, Greecy Mirian Rodrigues Albuquerque2, Aldenir de Oliveira Alves3, Luydson Jamyson do Nascimento Souza1, Edilaine Alves de Melo2, Adriano Mrcio Freire Silva4 e Rosa de Lima Ramos Mariano5 Introduo
A podrido-mole causada por Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Jones) Hauben et al. (Pcc) fator limitante para o cultivo de muitas hortalias, principalmente da alface (Lactuca sativa L.) e couve-chinesa (Brassica campestris L. ssp. Pekinensis) em varias reas produtoras do Brasil e do mundo, inclusive no estado de Pernambuco [1]. A doena ocorre em plantas no campo ou em pscolheita, tanto no armazenamento como no transporte [2]. Os sintomas iniciam-se na base e nervura das folhas que ficam em contato com o solo quando a planta est no final do ciclo, formando a cabea [3]. A macerao dos tecidos progride rapidamente para o caule principal, resultando no colapso e morte de toda a planta [4]. Tendo em vista a sobrevivncia do patgeno em restos culturais infectados, na rizosfera de plantas cultivadas ou invasoras, no solo, na filosfera de plantas hospedeiras ou invasoras como epiftica, em insetos e na gua, o controle da doena torna-se muito difcil. Como agravante existe a limitao quanto disponibilidade de produtos qumicos eficientes para a erradicao da bactria [2,5]. Embora a qualidade da gua seja um dos fatores mais importantes na agricultura irrigada, existem poucos estudos sobre a contaminao dos recursos hdricos por fitopatgenos. A falta de fiscalizao desta importante caracterstica ocorre devido desinformao ou da falta de conscientizao sobre o problema e como conseqncia aumenta o risco de introduo e disseminao de fitopatgenos em cultivos hidropnicos e sistemas de produo protegidos ou a cu aberto [6]. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a sensibilidade de isolados de Pcc a cpricos e desinfestantes em gua, visando erradicar o patgeno de gua de irrigao e hidroponia para o controle preventivo da doena, utilizando produtos de baixa toxicidade. Departamento de Agronomia (DEPA) da Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE). A. Obteno do isolado e preparo de suspenso bacteriana de P. carotovorum subsp. carotovorum Foi utilizado o isolado de P. carotovorum subsp. carotovorum (PccA1-1) pertencente Coleo de Culturas do Laboratrio de Fitobacteriologia, obtido de plantas de alface com sintomas tpicos da podridomole, proveniente do municpio de Camocim de So Flix, Pernambuco. O isolado foi cultivado em meio de cultura Casena cido hidrolizada-peptona-glicose CPG (10g de peptona, 1g de casena hidrolizada, 10g de glicose, 18g de gar, 1000 mL de gua destilada) e incubado em Biochemistry Oxigen Demand (B.O.D.) a 28C ( 2) por 36 horas. A suspenso bacteriana foi preparada em gua destilada esterilizada (ADE) e ajustada com auxlio de fotocolormetro (Analyser) para A570 = 0,36 que corresponde a 1 x 109 UFC mL-1. B. Efeito de produtos sanitizantes e cpricos no controle de P. carotovorum subsp. carotovorum em gua Em ensaios preliminares foram testados dezesseis produtos, dos quais treze eram sanitizantes e outros trs eram fungicidas/bactericidas em diferentes concentraes (dados no apresentados). Destes produtos apenas dois inibiram o crescimento de Pcc in vitro, Sporekill (Cloreto de Dodecil Dimetil Amnio CDDA) e Agrimaicin 500 (oxitetraciclina 3% + sulfato de cobre 40%) . No presente trabalho, foram testados o Sporekill na dosagem de 2 mL L-1 e a Agrimaicin 500 nas dosagens 3 g L-1; 2,58 g L-1 e 2,24 g L-1, alquotas de 1 mL dos produtos e 1 mL da suspenso de Pcc com concentrao de 105 UFC mL-1 foram adicionadas a tubos de ensaio com tampa de rosca contendo 8 mL de ADE, obtendo-se um volume final de 10 mL. Os tubos foram incubados em B.O.D. a 28C ( 2) por 30 min. Aps esse perodo, alquotas de 0,1 mL das suspenses dos respectivos tratamentos foram

Material e mtodos
O trabalho foi realizado no Laboratrio de Fitobacteriologia da rea de Fitossanidade,

________________ 1. Estudantes do Curso de Agronomia, Bolsistas de Iniciao Cientfica PIBIC/CNPq da Universidade Federal Rural de Pernambuco. Rua Dom Manuel de Medeiros, S/N, Recife, PE, CEP 52171-900. Email: tassiavida@hotmail.com 2. Estudantes do Mestrado em Fitopatologia, Departamento de Agronomia, da Universidade Federal Rural de Pernambuco. 3. Estudante do Doutorado em Fitopatologia, Departamento de Agronomia, da Universidade Federal Rural de Pernambuco. 4. Bolsista de Ps-Doutorado PNPD/CNPq, Laboratrio de Fitobacteriologia, Departamento de Agronomia, da Universidade Federal Rural de Pernambuco 5. Bolsista de Produtividade do CNPq, Professor do PPGF, Departamento de Agronomia, rea de Fitossanidade, UFRPE. Email: rrmbac@gmail.com Apoio financeiro: FACEPE-APQ 0583-5.01/08, CNPq e UFRPE.

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plaqueadas em meio CPG, utilizando-se o mtodo de espalhamento com ala de Drigalski. Para cada tratamento foram feitas quatro repeties (tubos) e de cada tubo foram preparadas trs placas, as quais foram incubadas em B.O.D. por 24-48 h. A avaliao foi realizada pela contagem do nmero de colnias, determinando-se a populao bacteriana em UFC mL-1. C. Delineamento experimental e anlise dos dados O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e quatro repeties por tratamento, cada uma consistindo de um tubo de ensaio, do qual trs alquotas foram plaqueadas. As anlises estatsticas foram realizadas com auxlio do programa Statistix 9 . Os dados foram submetidos anlise de varincia e as mdias comparadas pelo Teste de Tukey ao nvel de 5% de probabilidade.

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Resultados e Discusso
O isolado Pcc A1-1 na concentrao 105 UFC mL-1 foi altamente sensvel s duas maiores dosagens de Agrimaicin 500 (oxitetraciclina 3% + sulfato de cobre 40%) (2,58 e 3,00 g L-1) no havendo crescimento de nenhuma colnia, enquanto que na dosagem 2,24 g L-1, embora no apresentasse diferena significativa entre tratamentos (P0,05), houve crescimento de colnias. O Agrimaicin 500 um dos poucos agroqumicos contendo antibiticos de uso agrcola registrado para doenas bacterianas em hortalias. No entanto, no existem produtos registrados para podrido mole em alface e couve-chinesa [7]. O Sporekill (Cloreto de Dodecil Dimetil Amnio CDDA) na concentrao utilizada (2 mL L-1 ) foi muito eficiente inibindo totalmente a formao de colnias de PccA1-1. O CDDA alm de ser bastante utilizado como detergente na limpeza de frutas e hortalias, ainda utilizado em associao com fungicidas justamente por reduzir o desenvolvimento de patgenos na pr e pscolheita [8] Dessa forma, pode-se concluir que os produtos Agrimaicin 500 (3g L-1 e 2,58g L-1) e o Sporekill (2 mL-1) inibem eficientemente o crescimento de Pcc em gua em concentraes at 105 UFC mL-1, e que portanto podem ser utilizados no manejo da gua de irrigao e hidroponia. A erradicao de uma bactria fitopatognica muito agressiva, como a Pcc, do habitat gua pela utilizao de um antibitico de uso agrcola e de um cprico mais uma alternativa para o controle preventivo da doena e tambm uma soluo para os problemas causados pela podrido mole em cultivos protegidos e hidropnicos.

da intensidade da podrido-mole em alface e couve-chinesa em Pernambuco. Caatinga, 20:84-93. PROMBELON, M.C.M. & KELMAN, A. Ecology of the soft rot Erwinias. Annual Review of Phytopathology, 18:361-387. 1980. KIKUMOTO, T. 2000. Ecology and biocontrol of soft rot of Chinese cabbage. Journal of General Plant Pathology, 66: 275-277. REN, J.; PETZOLDT, R. & DICKSON, M. H. 2001. Genetics and population improvement resistance to bacterial soft rot chinese cabbage. Euphytica, 117:197-207. MEW, T.W.; HO, W.C. & CHU, L. 1976. Infectivity and survival of soft-rot bacteria in Chinese cabbage. Phytopathology, 66:1325-1327. CARLOS, R.M.E., NASSER, L.C.B., LAMY, A.C.M. & FREITAS,M.A. Influncia da qualidade de sementes e da gua de irrigao nosistema de produo de mudas de espcies florferas no DistritoFederal. Anais, 19 Encontro Nacional de Arborizao Urbana, Braslia, DF.CD Rom. 2001. MELLO, M.R.F; SILVEIRA, E.B.; VIANA, I.O.; GUERRA, M.L. & MARIANO, R.L.R. 2011. Uso de antibiticos e leveduras para controle da podrido-mole em couve-chinesa. Horticultura Brasileira, 29:78-83. SANTOS, L.O. 2008. Conservao ps-colheita de mangasproduzidas na regio de Jaboticabal-SP. Dissertao de Mestrado, Curso de Ps-Graduao em Cincias Agrrias e Veterinrias, Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal

REFERNCIAS
[1] SILVA, A.M.F.; MARIANO, R.L.R.; MICHEREFF, S.J.; SILVEIRA, E.B. & MEDEIROS, F.H.V. 2007. Levantamento

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Tabela 1. Efeito de produto sanitizante e fungicida/bactericida sobre o crescimento de Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum em gua, avaliado por contagem de unidades formadoras de colnias (UFC ml-1) em meio de cultura CPG, Julho, 2011, UFRPE, Recife, PE. TRATAMENTO Agrimaicin (2,24g L-1) Agrimaicin (2,58g L-1) Agrimaicin (3,00g L ) Sporekill - Cloreto de Dodecil Dimetil Amnio (2 ml L ) Testemunha (Pcc + ADE) C.V.
1

Log(UFC/mL) 1,921 b 0,00 b 0,00 b


-1

-1

0,00 b 8,27 a 38,07

Mdias de 4 repeties. Mdias seguidas pela mesma letra no diferem significativamente pelo teste de Tukey ao nvel de 5% de probabilidade.