Marqueurs biochimiques et

Valeurs de référence
Dr Souleymane THIAM
LBBM-FMPOS

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I. Généralités
La perturbation des paramètres biochimiques
• Maladies métaboliques évidentes (Diabète, dysthyroïdie)
• Conséquences de l’état pathologique lui-même (IR, les
malabsorptions)

Les marqueurs biochimiques sont appliqués:

• Diagnostic (hypoglycémie – urgence vitale)

• Pronostic
• Dosage de la créatinine au cours d’une IR
• Bilan lipidique pour le risque cardiovasculaire

NB: le risque est calculé à partir de données épidémiologiques générales et ne

constitue pas une prédiction précise au niveau individuel.
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I. Généralités

Les marqueurs biochimiques sont appliqués:

• Suivi
• Indicateur important de l’évolution de la maladie et de
l’efficacité du traitement
• HBA1CDiabète
• Ionogramme sanguin avec une hypokaliémie avec les diurétiques
• Essais cliniques pour l’efficacité thérapeutique

• Dépistage
• Stade infraclinique des maladies
• Test de Guthrie au cours de la phénycétonurie
• Hypoglycémie néonatale chez les macrosomes

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II. Les marqueurs biochimiques

Définition
 Composé présent dans les fluides biologiques des malades
mais absent de ceux des sujets sains.

 Différence quantitative (C. normale et C. malade)

 Composé biochimique dont les teneurs chez un ensemble

homogène de malades, sont statistiquement très éloignées de
celles d’un ensemble de sujets sains, donnant un caractère
discriminant à sa mesure

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 Sains Malades

Distribution des résultats d’un paramètre X

en fonction d’une population d’étude

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II.1 Origine des marqueurs biochimiques

Nombreux mécanismes peuvent faire varier une constante

biologique
 Excès de synthèse ou de catabolisme d’un métabolite
• Corps cétoniques au cours de l’acidocétose diabétique

 Anomalie d’un transporteur membranaire

• Glucose  insuline

 Altération de l’activité enzymatique (acquise ou héréditaire) 

accumulation de métabolite non utilisé
• Utilisation de voies accessoires ou mineures entrainant l’apparition de
métabolites rares (Phénylcétonurie)

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II.1 Origine des marqueurs biochimiques

 Pour les marqueurs protéiques

• Anomalie de synthèse: expression génique
• Anomalies de maturation
• Modifications sous l’action de l’action de métabolites réactifs
(glycation de l’Hb)
• Accélération de leur dégradation par le protéasome

Remarque:
L’augmentation plasmatique de certaines protéines est secondaire
à une cytolyse (physiologique ou pathologique)
Les variations de l’osmolarité (hydratation, déshydratation)
Présence de marqueurs biochimiques dans d’autres liquides
biologiques que le sang: Urines, le LCR, la salive…

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II.2 Les différents type de marqueurs
 Les marqueurs de risque
• Recherche de la cause des maladies
• Apparaissent au début de la maladie
• Études épidémiologiques

 Les marqueurs d’exposition

• Suivre l’exposition à des xénobiotiques (alcool, tabac…)
• Mesure directe du composé (benzène) ou de ses produits métabolites
(cotidine  Tabac, GGT  Alccol)

 Les marqueurs des systèmes de défense

• Capacité à se défendre contre les agents infectieux ou à éliminer un agent
toxique
• Dosages des immunoglobulines
• Caractérisation des lymphocytes

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II.2 Les différents type de marqueurs
 Les marqueurs de statut nutritionnel
• Statut: teneur globale du corps en un composé (nutriment), dont la mesure
reflétera le statut carencé, normal ou excédentaire.
• Marqueurs directs : dosage du nutriment dans le sang
• CRP, Préalbumine
• Marqueurs indirectes: dosage des métabolites ou activités enzymatiques
dépendant étroitement du taux de ce nutriment
• Vitamine B12, Vitamine B9

 Les marqueurs de polymorphisme génétique

• Génétique humaine
• Distingue les polymorphismes nucléotidiques
• Distingue l’homozygotie de l’hétérozygotie: Hémoglobinose S
• Recherche de nouvelle cible thérapeutique:
• Cétuximab : Inefficace chez les patients présentant une mutation du gène KRAS
(CCR)

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II.2 Les différents type de marqueurs

 Les marqueurs prédictifs

• Leur mesure est censée indiquer le risque de développer une maladie
• Facteurs de risque d’une maladie (Risque relatif ou le Odds-ratio)
• Ne sont pas suffisant pour le développement de la maladie

 Les marqueurs diagnostiques

• Aident le clinicien à établir son diagnostic
• Marqueur de syndrome et non de maladie: variation physiopathologique
• Évolution du marqueurs
• Marqueurs rapides (aigus) : dès le début de la maladie
• Marqueurs lents (chroniques): persistent plusieurs semaines après le début de la
maladie.

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II.2 Les différents type de marqueurs

 Les marqueurs de suivi thérapeutique

• Il est parfois utile de suivre l’efficacité d’un traitement
par des dosages biologiques
• Dosage de marqueurs liés au mécanisme d’action du médicament
• Dosage du médicament ou de ses métabolites

 Les marqueurs de pronostic

• Permettent
• D’établir un score de gravité
• De Prédire la rapidité d’évolution
• De Prédire les chances de guérison
• Très utiles pour choisir l’acte thérapeutique en pesant le
rapport bénéfice/risque.

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II.3 Critères et évaluation des marqueurs
biologiques
Un bon marqueur doit non seulement varier au cours des maladies,
mais le faire de manière rapide, spécifique et sensible.

 Spécificité (Sp)
 La probabilité qu'un test réalisé sur une personne saine se révèle négatif;
autrement dit, que le test soit négatif sachant que la personne n'est pas
malade.

 Sensibilité (Se)
 La probabilité qu'un test réalisé sur une personne malade se révèle positif;
autrement dit, que le test soit positif sachant que la personne est malade.

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1

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II.3 Critères et évaluation des marqueurs
biologiques

Spécificité
• Mesure incidence résultats négatifs chez sujets indemnes
pathologie donnée, vrais négatifs « VN »
• Spécificité = (VN/VN+FP) x 100

Sensibilité
• Mesure incidence résultats positifs chez patients présentant la
pathologie, vrai positifs « VP »
• Sensibilité = (VP/VP+FN) x 100

Valeur diagnostic idéale

• Spécificité 100% et Sensibilité 100%.
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1

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III.4 Les limites des marqueurs biologiques

Plusieurs facteurs limites l’utilisation des marqueurs

biologiques

 Facteurs liés à la méthode d’analyse (manque de Se et de

Sp)

 Facteurs biologiques (+++)

• Variations du compartiment intracellulaire
• Difficulté de dosage dans les organites cellulaires (mitochondrie,
lysosome, noyau…)
• Variabilité intra-individuelle, interindividuelle

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II.5 Les perspectives

L’avancée de la technologie de détection et de séparation

des composés: les Omics
 Génomique
 Transcriptomique
 Protéomique
 Lipidome
 Métabolomique

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II.6 Interprétations des variation des
marqueurs biologiques
Devant le résultat d’un paramètre biologique, on doit
se poser les questions suivantes
Le résultat est-il normal
 Se trouve dans un « intervalle de référence »

Le résultat est-il significativement différent des résultats

précédents
 Vérification avec des résultats antérieurs

Est-il compatible avec les données cliniques

 Conforte le diagnostic évoqué
 Dans le cas contraire????

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III. Les valeurs de référence

 Le concept de valeurs de référence quoique s'appliquant à

toutes les catégories de sujets est généralement utilisé pour les
sujets sains.
 La notion de «valeurs de référence» vise donc à standardiser, à
harmoniser, et à rendre plus rigoureuse la présentation des
résultats, la comparaison des résultats d'un laboratoire à l'autre,
d'une technique à une autre, donc d'améliorer l'interprétation
des résultats de laboratoire par le clinicien.

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III.1 Quelle valeur doit-on utiliser ?

 Valeurs normales
 ce sont des valeurs mesurées sur un sous ensemble bien représentatif de la
population d'individus tout venant, non triés, n'ayant pas modifié leurs
conditions habituelles de vie

 Valeurs usuelles
 Ce sont des valeurs obtenues sur des populations hétérogènes c'est-à-dire des
populations pour lesquelles plusieurs facteurs de variations n'ont pas été
suffisamment contrôlés.
 Ce terme s'applique par exemple à des populations hétérogènes souvent
rassemblées pour des raisons de facilité (groupe d'étudiants en médecine,
donneurs de sang etc

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III.1 Quelle valeur doit-on utiliser ?

Valeurs de référence
 les valeurs obtenues par l’observation ou la mesure d’une quantité
définie sur un individu de référence (population de référence).

 Intervalles de référence +++

 l’intervalle entre deux limites de référence (celles-ci incluses) par
exemple l’intervalle à 95 % d’hommes apparemment en bonne
santé.

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III.2 Transférabilité Valeurs de référence
et Limites de référence
 Changement méthode => Changement valeurs de référence ?
Validation de technique

 Changement de laboratoire couvrant les « mêmes » populations.

 Changement de pays
 Questions métrologiques
 Spécificités génétiques +++

 Pas de transfert (littérature) sans validation.

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 III.3 Variabilité des grandeurs biologiques

Variations pré-métrologiques et métrologiques

Variations intra-individuelles
 Alimentation
 Croissance
 Etat physiologique (émotion, grossesse…)

Variations interindividuelles.

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III.3 Variabilité des grandeurs biologiques

Facteurs Examens affectés

Age PAL
Sexe Stéroïdes sexuels
Grossesse Béta -HCG
Position Protéines
Exercice CK ou CPK
Stress Adrénaline
Alimentation Glucose
Heure prélèvement Cortisol

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III.4 Variabilité Biologique/Variabilité Analytique

Variabilité analytique : ET caractéristiques pour

des mesures répétées d’un sérum de contrôle
correspondant aux valeurs physiologiques
Variabilité biologique : Moyenne des écarts types
pour des mesures répétées réalisées à une semaine
d’intervalle dans un groupe de sujets sains sur une
période de 10 semaines.

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Variabilité analytique/Biologique

Paramètre Variabilité Variabilité

analytique biologique
Phosphates 0,04 mmol/l 0,11 mmol/l
Potassium 0,1 mmol/l 0,19 mmol/l
Sodium 1,1 mmol/l 2,0 mmol/l
Créatinine 5,0 nmol/l 4,1 nmol/l
ASAT 6,0 U/l 8,0 U/l
PAL 4,0 U/l 15,0 U/l

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IV. Applications

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IV. Applications

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IV. Applications

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Signification clinique
des Examens de laboratoire (Courbes
ROC)

A : Sensibilité faible
Spécificité faible
B : Spécifique
C : Sensible
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