PRACTICA #2 Extraccl6n de cidos nucleicos de Eucariotas (ADN y ARN); tratamientos RNasa/DNasa y Electroforesis La Solucién de TE para todos los protocolos corresponde a: 10 mM de Tris, pH 8.0 ‘mM de EDTA Preparacion deWfoml. de Grinding Butter para el primer método de extraccién: o.4MNacl 4 mi de Naci Smt O'5M Sucrosa TEST de Sucrose 0,1M Tis pH8.0 S ml Tris 1M, ph8.0 50mM EDTA Sime ead Su 05% sos “TEE sos 10% Protocolo 1: Extraccién de ADN genémico de tejido de camarén 2 a 4 5 & is e o 10. Date. P Macere el telido en 125 jl de grinding buffer y luego lavar el macerador con 125 il adicionales de ‘grinding butter, Incube a 65°C durante 30 min. Afiada 35 ul de acetato de potasio 8M (concentracién final 392M) mientras los tubos estan tibios, mezclar, ‘Mantenga en hiolo durante 30 min. Microcentrifugue 15 min. a Vmax y transfiera 260 pL del sobrenadante a un tubo nulevo. (Afiada 600 jl de etanol 100% helado, mezcio e incube a temperatura ambiente (TART) 5 min. Microcentritugue 15 min., luego remueva el etanol ‘Afiada tml. de etanol 70% para lavar el sedimento, microcentiifugue 2 min; elimine el etanol y deje socar, Resuspenda el ADN en 40 il de TE. Guardar a - 20°C. Trate ol ADN con tpl de solucién de Rnasa A 20 mg/ml. e incuba 10 min. a 68°C. grawles * ~Valma Race Neiys - leo Racine: Geren —Taudaggo Someze Wiles ¢ = Zoubiane Kero Genesis ~ Lidtago Nillasicenao. Yo 2 ~ \era Bravo. Korey