Exploration du métabolisme

lipidique
Pr. Layachi Chabraoui

Ce diaporama est un support de cours qui doit

être complété par les notes prises pendant le
cours magistral

Cours de 2ème année de Médecine 2016-2017

1- Lipides et lipoprotéines
Lipides plasmatiques:
◦ Cholestérol,
Insolubles dans l’eau
◦ Triglycérides
◦ Phospholipides
Apoprotéines: AI, AII, B48, B100, CI, CII, CIII….
Les Apo s’associent aux lipides

LIPOPROTEINES
Les Apo et les Phospholipides permettent la
solubilisation des TG et du CT
1-1- Structure des lipoprotéines
Phospholipides CE: Cholestérol estérifié
P TG: Triglycérides
Cholestérol
libre ( CL)

CE

TG

P
1-2-Classification des lipoprotéines
Ultracentrifugation:
Densité Lipides Protéines
Chylo < 0,99 98% (TG 90%) Apo B48,A,C
VLDL 0,99 -1,006 90% (TG 60%) Apo B, D, E
LDL 1,019-1,063 75% (CT 50%) Apo B100
HDL 1,063- 1,21 55% (CT 45%) Apo AI, (AII)

Electrophorèse:
Dépôt β
lipoprotéines
- +
Chylomicrons Pré β α
lipoprotéines lipoprotéines
Composition des lipoprotéines
Chylomicrons VLDL

TG

TG Phospho
Apo
CL
Phospho CE

Apo
CL
CE

HDL

LDL
Composition des LDL

38%
10%

8% 18%

23%
1-3- Métabolisme des lipoprotéines
Les Chylomicrons
◦ Transport des triglycérides exogènes

◦ formés dans l’entérocyte à partir des produits de la

digestion des lipides (AG, monoglycéries,
lysophospholipides).

◦ → circulation lymphatique puis sanguine:Action de la

LPL (muscle et tissu adipeux) → AG + remnants
1-3- Métabolisme des lipoprotéines
Les VLDL
Transport des TG endogènes (foie) →
circulation sanguine: action de la LPL et de la
LCAT → AG + IDL (densité 1,006 - 1,019)

Les IDL (remnants) → captation (récepteurs)

et dégradation par le foie
→ transformation en LDL
(lipase hépatique)
1-3- Métabolisme des lipoprotéines
Les LDL
Se forment à partir des IDL qui proviennent
des VLDL.
Riches en cholestérol (transport du CT vers
les tissus utilisateurs)
Récepteurs LDL (ApoB/E): foie et autres tissus
LDL oxydés: Récepteurs éboueurs (scavenger)
des macrophages
1-3- Métabolisme des lipoprotéines
Les HDL Transport "reverse"
du cholestérol
Chylomicrons
VLDL
LPL LPL AG + IDL

AG Cholestérol
+
Remnants HDL Cholestérol
discoïdes LCAT
AI
HDL3 LCAT

Foie HDL2

Récepteurs
hépatiques
Cholestérol Ester Phospholipides
2-Exploration du métabolisme lipidique

Prélèvement
sujet à jeun depuis 12 heures+++
Sérum ou plasma hépariné

Aspect du sérum
Jaune citrin clair(Normal)
Lactescent ou opalescent (Anormal)
(Réexamen après une nuit à 4°C)
2-Exploration du métabolisme lipidique
Dosage des Triglycérides
TG AG + Glycérol
1 Lipase ATP
Glycérol 2
Kinase
ADP

3 Glycérol P DH
P di OH Acétone Glycérol P

NADH+ NAD+
↑DO à 340 nm
2- Exploration du métabolisme lipidique
Dosage du Cholestérol

CE CL Cholesténone
Chol. Estérase Chol. Oxydase
+
H2O2
Formazan réduit
incolore (PAP) Peroxydase

Formazan oxydé
coloré (PAP) H2O
↑DO à 500 nm
PAP= Phénol + AminoPhénazone
2- Exploration du métabolisme lipidique
Dosage du Cholestérol HDL
Méthode indirecte
Précipitation des LDL et VLDL (lipoprotéines contenant
l’ApoB) par le sulfate de dextran de haut PM ou par le
phosphotungstate de sodium + MgCl2
Centrifugation
Dosage du C-HDL dans le surnageant
Méthodes directes
Il y a plusieurs méthodes dont la plupart consistent à
complexer (chimique ou immunologique) les
chylomicrons,VLDL et LDL puis doser le C-HDL
2- Exploration du métabolisme lipidique
Le Cholestérol LDL
• Calcul par la formule de Friedewald:
C-LDL = CT – (C-HDL + TG/5) en g/l
Condition de validité: TG < 3,5 g/l
• Dosage direct: plusieurs méthodes sont
validées. Elles sont relativement chères mais
nécessaires dans certaines situations (TG>3.5g/l)
Principe: Masquage des autres lipoprotéines puis
solubilisation et dosage enzymatique du C-LDL
2- Exploration du métabolisme lipidique

Valeurs usuelles
CT: 1,40 à 2 g/l
TG: 0,50 à 1,50 g/l
C-HDL: 0,40 à 0,65 g/l
C-LDL: 0,70 à 1,60 g/l
Cependant valeurs à interpréter en fonction
des facteurs de risque
2- Exploration du métabolisme lipidique
Electrophorèse des lipoprotéines
(Lipidogramme)
De moins en moins étudié
Electrophorèse en milieu alcalin qui sépare les
différentes lipoprotéines:

Dépôt β lipoprotéines
50 à 60%
- +
Chylomicrons Pré β α lipoprotéines
lipoprotéines 30 à 35%
10 à 15%
2- Exploration du métabolisme lipidique

Dosage des Apoprotéines

Méthodes immunologiques: (Anticorps)
Immunoprécipitation en milieu liquide ou sur
gel:
ApoAI (HDL): 0,70 à 2 g/l
ApoB (LDL): 0,50 à 1,30 g/l
Lp (a) (LDL): < 0,30 g/l
2- Exploration du métabolisme lipidique

Appréciation du risque athérogène

Rapports:
C-LDL / C-HDL < 3,5
ApoB / ApoAI < 3,5
C-LDL et seuils d’intervention
1,9 g/l si aucun facteur de risque
1,6 g/l si un facteur de risque
1,3 g/l si deux facteurs de risque
1 g/l si pathologie coronarienne
3- Classification des hyperlipoprotéinémies

↑ des TG et /ou du CT
↑ du Cholestérol surtout le C-LDL car
athérogène +++
Hyperlipoprotéinémies secondaires
Hyperlipoprotéinémies familiales (primaires)
Hyperlipoprotéinémies secondaires
Types selon
CT TG
Fredrickson
Pathologies métaboliques IV ou IIb N ou + +
Diabète
Insuffisance rénale
Hyperuricémies
Syndrome néphrotique IIb ou IV + +
Pathologie Hormonale N ou
IIa ou IIb ++
Hypothyroïdies ++
HyperLipoprotéinemies
iatrogènes
Contraceptifs stéroïdiens IIb ou IV N ou + +
Beta-Bloquants IV N +
Diurétiques thiazidiques IIb + +
Corticoïdes IV ou IIb N ou + +
 Hyperlipoprotéinémies primaires
Classification
Aspect du
Internationale Fréquence CT TG Lipoprot
sérum
(Fredrickson)
IIa fréquent Clair +++ N LDL

IIb fréquent opalescent ++ + LDL,VLDL

III rare opalescent ++ ++ Broad β

I très rare lactescent N ou + +++ Chylo

IV fréquent opalescent N ou + ++ VLDL

V rare lactescent N ou + +++ VLDL Chylo

Classification selon De Gennes Fred
Hypercholestérolémies essentielles CT/TG > 2,5 IIa
1 ) Forme mineure : expression biologique permanente,
manifestations cardiovasculaires occasionnelles
2) Forme majeure : xanthomatose tendineuse
hypercholestérolémique familiale (XTHF)
3) Forme monstrueuse de XTHF
Hyperlipidémies mixtes CT/TG ≤ 2,5 TG/CT ≤ 2,5
1) Forme mineure: expression biologique permanente, IIb
quelques manifestations cardiovasculaires
2) Forme majeure avec ou sans xanthomatose III

Hypertriglycéridémies majeures TG/CT > 2,5

• Formes exogènes dépendantes des graisses (activité LPL↓) I
• Formes endogènes indépendantes des graisses ( glucido- IV
dépendantes ou éthanolodépendantes, activité LPL normale)
• Formes exogènes et endogènes V
 Hypolipoprotéinémies

Secondaires
Hyperthyroïdies
Malnutrition
Insuffisance hépatocellulaires
Primaires
Maladie de Tangier: absence des α lipo (HDL)
Maladie de Bassen Kornzweig: Abétalipo
Sphingolipidoses
Anomalies héréditaires du métabolisme des
sphingolipides qui sont des lipides complexes
tissulaires: système nerveux
Structure de base = sphingosine: alcool
aminé à 18 atomes de carbone
La fixation sur la fonction amine en 2 d’un AG
en C18 à 26 → Céramide
La fixation d’autres molécules sur la fonction
alcool en 1 donne 4 types de composés:
1. Sphingomyélines:
Céramide lié au phosphorylcholine
2. Cérébrosides:
Céramide + Oligosaccharide
3. Sulfatides:
Cérébrosides sulfatés
4. Gangliosides:
Cérébrosides + molécules d’acide
sialique

Sphingolipides catabolisés par des enzymes spécifiques

Déficit enzymatique l’accumulation du sphingolipide
non dégradé et détermine une sphingolipidose
Sphingolipidose Enzyme déficient Sphingolipide
accumulé
GM1 Gangliosidose β Galactosidase GM1 ganglioside
GM2 Gangliosidose
Tay-Sachs Hexosaminidase A GM2 ganglioside
Sandhof Hases A et B
Maladie de Fabry α Galactosidase A Globotriaosylcéramide
Maladie de Gaucher Glucocérébrosidase Glucosylcéramide
Maladie de Farber Céramidase acide Céramide
Leucodystrophie Arylsulfatase A Sulfatide
métachromatique
Maladie de Krabe Galactosylcéramidase Galactosylcéramide
Maladie de Sphingomyélinase Sphingomyéline
Niemann-Pick