Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.
com
hewan
Artikel
Pengaruh Waktu Penyimpanan dan Metode Thawing pada Nutrisi
Terpilih pada Ikan Utuh untuk Nutrisi Hewan Kebun Binatang
Angela Gimel1, Katrin Baumgartner2, Sandra Backert3, Anja Tschudin3, Barbara Lang4, Anna Hein4, Sandra
Marcordes5, Fabia Wyss6, Christian Wenker6dan Annette Liesegang1,*
Kutipan:Gimmel, A.; Baumgartner, K.;
Bäckert, S.; Tschudin, A.; Lang, B.; Hein,
A.; Marcordes, S.; Wyss, F.; Wenker, C.;
Liesegang, A. Pengaruh Waktu
Penyimpanan dan Metode Thawing
terhadap Nutrisi Terpilih pada Ikan Utuh
untuk Nutrisi Hewan Kebun Binatang.
Hewan 2022,12, 2847. https://doi.org/
10.3390/ani12202847
Editor Akademik: Francisco G. Vé
liz-Deras, Evaristo Carrillo
Castellanos dan Javier MorAn
MartSayanez
Diterima: 18 Agustus 2022
Diterima: 18 Oktober 2022
Diterbitkan: 19 Oktober 2022
Catatan Penerbit:MDPI tetap netral
sehubungan dengan klaim yurisdiksi
dalam peta yang diterbitkan dan afiliasi
kelembagaan.
Hak cipta:© 2022 oleh penulis.
Penerima Lisensi MDPI, Basel, Swiss.
Artikel ini adalah artikel akses terbuka
yang didistribusikan berdasarkan
syarat dan ketentuan lisensi Creative
Commons Attribution (CC BY) (https://
creativecommons.org/licenses/by/
4.0/).
Animasi al2022,12, 2847. https://doi.org/10.3390/ani12202847
1 Institut Nutrisi dan Diet Hewan, Fakultas Vetsuisse, Universitas Zurich, 8057 Zurich, Kebun Binatang Swiss
2 Nuremberg, 90480 Nürnberg, Jerman
3 Granovit AG, 4303 Kaiseraugst, Swiss
4 Zoologischer Stadtgarten Karlsruhe, 76137 Karlsruhe, Jerman
5 Zoo Duisburg, 47058 Duisburg, Jerman
6 Kebun Binatang Basel, 4054 Basel, Swiss
* Korespondensi: aliese@nutrivet.uzh.ch ; Tel.: +41-44-635-88-23; Faks: +41-44-635-89-39
Ringkasan Sederhana:Hewan pemakan ikan dalam perawatan manusia menerima ikan utuh yang dibekukan,
disimpan, dan dicairkan sebelum diberi makan. Kehilangan nutrisi telah didokumentasikan, tetapi perubahan
pastinya tidak diketahui. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi apakah ikan beku kehilangan
vitamin dan mineral selama penyimpanan, dan jika metode pencairan yang berbeda mempengaruhi tingkat
kehilangan ini. Seluruh herring, mackerel, dan capelin dianalisis pada empat titik waktu dalam periode
penyimpanan enam bulan−20◦C. Setiap kali, tiga metode pencairan diuji: kulkas, suhu ruangan, dan air
mengalir. Nutrisi berikut dianalisis: vitamin A, B1, D3 dan E, besi, tembaga, seng, dan selenium. Tembaga
berada di bawah batas deteksi pada semua sampel, vitamin B1 pada sebagian besar sampel herring (44/48) dan
capelin (25/36), dan vitamin D3 pada setengah sampel capelin (18/36). Penurunan konsentrasi vitamin A, D3 dan
E yang signifikan diamati selama periode penyimpanan enam bulan. Mencairkan ikan dengan metode yang
berbeda menghasilkan perubahan konsentrasi vitamin A yang signifikan. Penting untuk melengkapi vitamin B1
dan E dalam makanan yang mengandung ikan utuh, dan tidak boleh disimpan lebih dari 6 bulan, karena
menipisnya vitamin A, D3 dan E.
Abstrak:Piscivora dalam perawatan manusia menerima ikan utuh yang dibekukan, disimpan, dan dicairkan sebelum
diberi makan. Kehilangan nutrisi telah didokumentasikan, tetapi perubahan yang tepat selama penyimpanan dan
dengan metode pencairan yang berbeda tidak diketahui. Terutama, dihipotesiskan bahwa ikan beku kehilangan
berbagai vitamin dan mineral selama masa penyimpanan enam bulan. Kedua, metode pencairan yang berbeda memiliki
pengaruh yang signifikan terhadap tingkat kehilangan vitamin. Tiga jenis ikan yaitu herring (Clupeus harengus),
mackerel (Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus) dianalisis pada empat titik waktu penyimpanan selama 6
bulan pada−20◦C. Pada setiap titik waktu, tiga metode pencairan diterapkan: pencairan dalam lemari es (R), pencairan
pada suhu kamar (RT), dan pencairan di bawah air mengalir (RW). Nutrisi berikut dianalisis: vitamin A, B1, D3 dan E, besi
(Fe), tembaga (Cu), seng (Zn) dan selenium (Se). Metode statistik yang digunakan adalah model efek campuran linier. Cu
berada di bawah batas deteksi pada semua sampel yang dianalisis, vitamin B1 pada sebagian besar ikan haring yang
dianalisis (44/48 sampel) dan capelin (pada 25/36 sampel). Selain itu, konsentrasi vitamin D3 juga berada di bawah batas
deteksi pada separuh sampel capelin (18/36). Tidak ada perubahan konsentrasi Fe (P=0,616), Zn (P=0,686) atau Se (P=
0,148) diamati selama masa penyimpanan enam bulan, berbeda dengan penurunan yang signifikan pada vitamin A (P=
0,019), D3 (P=0,034) dan E (P=0,003) konsentrasi. Pencairan ikan dengan metode pencairan yang berbeda tidak
mengakibatkan perubahan konsentrasi Fe (P=0,821), Zn (P=0,549) atau Se (P=0,633), tetapi pada perubahan konsentrasi
vitamin A yang signifikan (P=0,002). Sangat penting untuk melengkapi vitamin B1 dan E dalam makanan yang
mengandung ikan utuh untuk menghindari kekurangan spesies piscivorous, dan harus berhati-hati untuk tidak
menyimpan ikan lebih dari enam bulan, karena menipisnya vitamin A, D3 dan E.
Kata kunci:analisis ikan utuh; ikan haring (Clupeus harengus); makarel (Scomber scombrus); capelin (
Mallotus villosus); retinol; kolekalsiferol; tokoferol; thiamin
https://www.mdpi.com/journal/animals
Hewan2022,12, 2847 2 dari 11

1. Perkenalan
Makanan ikan utuh adalah makanan pokok untuk berbagai spesies hewan dalam perawatan
manusia, mencakup semua kelas vertebrata dan termasuk ikan bertulang rawan, ikan bertulang,
amfibi, reptil, burung, dan mamalia [1]. Semua spesies ini dapat diringkas sebagai piscivora, yang
mengacu pada perilaku makan ikan, termasuk, dalam arti luas, berbagai invertebrata air tawar dan
air asin.1]. Mangsa utuh segar mewakili diet lengkap dan seimbang untuk piscivora ini, dan
memenuhi kebutuhan nutrisinya [1]. Dalam perawatan manusia, mayoritas spesies piscivorous
menerima ikan utuh yang ditangkap, dibekukan, dikirim ke fasilitas penyimpanan berikutnya,
disimpan sampai dipesan, dikirim ke pembeli, disimpan lagi dan akhirnya dicairkan sebelum diberi
makan [2]. Oleh karena itu, status gizi piscivora pada perawatan manusia yang bergantung
sepenuhnya pada pola makan spesies ikan utuh terpilih tidak hanya bergantung pada kualitas dan
komposisi gizi ikan yang ditangkap, tetapi juga pada proses pembekuan, pengiriman,
penyimpanan. , dan pencairan berikutnya [2]. Proses pembekuan menyebabkan mikroorganisme
dicegah untuk melanjutkan penggandaannya. Namun hal ini tidak dapat dievaluasi kembali ketika
membeli ikan dari perusahaan ikan yang berbeda. Penipisan nutrisi selama penanganan dan
penyimpanan ikan telah didokumentasikan dalam banyak laporan kasus defisiensi nutrisi pada
piscivora dalam perawatan manusia [3]. Dalam bab Nutrisi dan Energi dariCRC Handbook of
Marine Mammal Medicine, tiga dari lima gangguan nutrisi utama mencakup kekurangan atau
toksisitas vitamin [4]. Studi ini mengkaji dua langkah terakhir dalam proses produksi ikan utuh
(penyimpanan di kebun binatang dan pencairan sebelum diberi makan), karena staf kebun
binatang dapat secara langsung memengaruhi langkah-langkah ini; pemeriksaan fase-fase ini
dapat memberikan informasi berharga untuk memperbaiki defisiensi nutrisi yang terkait dengan
penyimpanan ikan dan penanganan ikan.
Pada awal tahun 1955, kekurangan vitamin B1 dilaporkan dalam segel abu-abu (Halichoerus grypus
) [5] dan singa laut California (Zalophus californianus) [6]. Piscivora sangat rentan terhadap kekurangan
vitamin B1, karena dipecah oleh enzim thiaminase, yang secara alami terdapat di berbagai bagian
spesies ikan, seperti herring dan smelt [4]. Defisiensi vitamin B1 merupakan ancaman bagi kesehatan
mamalia laut dalam perawatan manusia, seperti yang diilustrasikan dalam laporan baru-baru ini tentang
kematian anjing laut di pelabuhan yang diberi makan ikan dengan kadar thiaminase tinggi [7].
Vitamin A, D, dan E yang larut dalam lemak dianggap berlimpah dalam organisme laut.3].
Sedangkan kadar vitamin A pada ikan utuh mungkin memenuhi kebutuhan vitamin A piscivora,
analisis kadar vitamin E dan banyak laporan tentang kekurangan vitamin E pada spesies piscivora
dalam perawatan manusia menunjukkan bahwa kadar vitamin E pada ikan utuh yang disimpan
dan dicairkan kemungkinan besar akan meningkat. tidak memadai [3]. Hal ini disebabkan sifat
antioksidan vitamin E, yang terkuras sekaligus menangkal peroksidasi pada ikan utuh yang tinggi
asam lemak tak jenuh ganda. [4]. Karena suplementasi vitamin A yang tinggi dapat mengganggu
penyerapan vitamin D dan vitamin E [4], vitamin berikut dinilai dalam penelitian ini: vitamin A, B1,
D3 dan E.
Tidak banyak informasi yang dapat ditemukan tentang trace mineral pada ikan utuh. Oleh karena itu,
penelitian ini mengkaji mineral besi (Fe), tembaga (Cu), seng (Zn) dan selenium (Se). Selenium bertindak sebagai
antioksidan seluler, dan sangat diminati, karena melawan peroksidasi pada ikan yang disimpan utuh, dan juga
memiliki efek hemat pada vitamin E, karena itu hubungannya dengan penipisan antioksidan dari waktu ke
waktu dalam penyimpanan.8].
Gimmel et al. menunjukkan pada tahun 2016 bahwa sebagian besar fasilitas Eropa merawat lumba-
lumba hidung botol (Tursiops truncatus) menyimpan ikan mereka untuk jangka waktu tiga hingga enam
bulan (fasilitas 10/19) dan menggunakan metode pencairan yang berbeda, termasuk pencairan dalam
lemari es (R) (fasilitas 6/19), pencairan pada suhu kamar (RT) (19/3 fasilitas), dan pencairan di bawah air
mengalir (RW) (fasilitas 1/19), serta kombinasi metode yang disebutkan di atas (fasilitas 9/19) [9]. Spesies
ikan utama yang digunakan adalah herring (Clupeus harengus)(fasilitas 16/19), capelin (Mallotus villosus)
(fasilitas 16/19), dan cumi-cumi (Ilex dan Loligo sp.) (fasilitas 16/19). Karena fokus penelitian ini terletak
secara eksklusif pada spesies ikan, makarel(Scomber scombrus) dimasukkan sebagai pengganti cumi-
cumi. Oleh karena itu, jenis ikan haring (Clupeus harengus), capelin (Mallotus villosus) dan makarel(
Scomber scombrus), masa penyimpanan enam bulan dan tiga metode pencairan yang disebutkan di
atas, diperiksa dalam penelitian ini.
Hewan2022,12, 2847 3 dari 11

Dua hipotesis berikut dikembangkan: pertama, dihipotesiskan bahwa ikan beku kehilangan
vitamin dan mineral yang berfungsi sebagai antioksidan selama masa penyimpanan enam bulan.
Kedua, metode pencairan berpengaruh pada konsentrasi vitamin ikan utuh, dan vitamin yang larut
dalam air berkurang saat air mengalir digunakan untuk mencairkan ikan utuh. Tujuan dan sasaran
dari penelitian ini adalah untuk memberikan rekomendasi tentang suplementasi yang bermanfaat
serta prosedur pencairan yang praktis.

2. Metode
Empat kebun binatang yang berbeda berpartisipasi dalam penelitian ini (Z1, Z2, Z3 dan Z4).
Setiap lembaga memesan ikan utuh dari pemasok biasanya, dan ikan dikirim dalam 20–25 kg blok
ikan utuh beku. Semua kebun binatang memesan ikan haring (Clupeus harengus), makarel (
Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus) dengan pengecualian Z4, yang hanya memesan
herring (Clupeus harengus) dan makarel (Scomber scombrus). Setiap blok ikan utuh beku terdiri
dari satu tangkapan ikan. Saat pengiriman, satu blok ikan beku per spesies disisihkan untuk
penelitian ini, dan disimpan di kebun binatang di−20◦C. Umur ikan pada saat pengiriman berkisar
antara 26–297 hari setelah penangkapan. Analisis nutrisi dilakukan pada empat titik waktu yang
berbeda selama penyimpanan: pengiriman (T1), setelah 60 hari (T2), 120 hari (T3) dan 180 hari (T4).
Metode pencairan yang diuji adalah: pencairan dalam lemari es (R, 4◦C selama 24 jam), dicairkan
pada suhu kamar (RT, 18-22◦C selama 15 jam semalam) dan dicairkan di bawah air mengalir (RW,
14◦C suhu air selama 3 jam dengan air mengalir). Pada T1 hingga T4, 1 kg ikan utuh per spesies
ikan dan metode pencairan dipisahkan dari balok beku, baik dengan gergaji rantai atau beliung,
sehingga ikan tetap beku. Jika gergaji rantai digunakan, hati-hati agar balok yang dipotong
mengandung setidaknya 1 kg ikan beku utuh. Jika beliung digunakan, berhati-hatilah agar tidak
merusak seluruh ikan. Ikan yang masih beku tersebut kemudian dikirim dengan layanan paket
beku ekspres ke laboratorium (AGROLAB LUFA GmbH, Kiel, Jerman), untuk memastikan ikan
tersebut tiba dalam keadaan beku seluruhnya. Di laboratorium, setiap kilogram ikan utuh per
spesies dicairkan dengan metode pencairan yang berbeda (R, RT, RW). Setelah dicairkan, 1 kg ikan
utuh dihomogenkan dalam blender, dan dianalisis. Air pencairan dibuang dan tidak dimasukkan
dalam analisis nutrisi. Analisis nutrisi (dua ulangan) untuk setiap metode pencairan yang berbeda
dilakukan, dan parameter berikut dianalisis: kadar air, vitamin A, vitamin B1, vitamin D3, vitamin E
serta empat trace mineral Fe (Fe), seng (Zn ), Cu (Cu), dan selenium (Se).

2.1. Analisis Nutrisi

Kadar air dianalisis dengan menambahkan pasir anhidrat dalam jumlah yang sesuai,
menurut Peraturan Komisi EC 152/2009, Lampiran III, 4.1.3. untuk pakan dalam bentuk cair
atau pasta dan pakan yang sebagian besar terdiri dari minyak dan lemak. Kadar air
dinyatakan dalam persentase bahan asli.
Vitamin A dianalisis dengan kromatografi cair kinerja tinggi fase balik (HPLC)
dengan deteksi UV dan fluoresensi, menurut Peraturan Komisi EC 152/2009, Lampiran
IV, dan termasuk semua trans-retinil alkohol dan isomer cisnya, yang ditentukan oleh
metode ini. Konsentrasi vitamin A dinyatakan dalam satuan internasional (IU) per kg.
Satu IU sesuai dengan aktivitas 0,300μg semua-trans-vitamin A alkohol, 0,344μg all-
trans-vitamin A asetat atau 0,550μg all-trans-vitamin A palmitat. Batas kuantifikasi
adalah 2000 IU vitamin A/kg bahan asli.
Vitamin B1 dianalisis dengan HPLC fase terbalik setelah derivatisasi pasca-kolom
vitamin B1 menjadi tiokrom dan deteksi fluoresensi, menurut metode DIN EN
14122:2010 (Deutsches Institut für Normung, Berlin, Jerman, 2010). Konsentrasi vitamin
B1 dinyatakan sebagai mg vitamin B1 hidroklorida per kg ikan utuh. Batas kuantifikasi
adalah 0,2 mg vitamin B1/kg bahan asal.
Vitamin D3 dianalisis dengan HPLC fase terbalik dengan deteksi UV, menurut
metode VDLUFA III, 13.8.1, modifikasi dari metode standar DIN EN 12821 (Deutsches
Institut für Normung, 2009). Konsentrasi vitamin D3 dinyatakan dalam
Hewan2022,12, 2847 4 dari 11

satuan internasional (IU) per kg. Satu IU sesuai dengan aktivitas 0,025μg kolekalsiferol.
Batas kuantifikasi adalah 300 IU vitamin D3/kg bahan asli.
Vitamin E dianalisis dengan HPLC fase terbalik dengan deteksi UV dan fluoresensi,
menurut Peraturan Komisi EC 152/2009, Lampiran IV dan konsentrasi vitamin E dinyatakan
sebagai mg DL-α-tokoferol asetat per kg. Satu mg DL-α-tokoferol asetat setara dengan 0,91
mg DL-α-tokoferol. Batas kuantifikasi adalah 2 mg vitamin E/kg bahan asal.
Fe dan Zn dianalisis dengan spektrometri emisi optik plasma yang digabungkan secara
induktif (ICP-OES), menurut metode DIN EN 15621 (Deutsches Institut für Normung, 2010),
dan konsentrasi setiap elemen jejak dinyatakan sebagai mg/kg.
Cu dan Se dianalisis dengan spektrometri massa plasma yang digabungkan secara
induktif (ICP-MS), menurut metode DIN EN ISO 17053, dan konsentrasi dinyatakan sebagai
mg/kg. Batas kuantifikasi adalah 1 mg/kg bahan asli untuk Cu.
Untuk memungkinkan perbandingan antar sampel, hasil analisis nutrisi diubah menjadi
basis bahan kering (DMB).

2.2. Analisis statistik

Untuk analisis statistik, digunakan R versi 3.5.0 (R Core Team, 2018). Untuk menguji apakah
jenis ikan haring (Clupeus harengus), makarel (Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus)
berbeda mengenai konsentrasi nutrisinya, analisis varians satu arah (ANOVA) diterapkan,
memodelkan nutrisi yang berbeda sebagai fungsi dari spesies ikan yang berbeda (contoh: aov
(Fe~spesies)). Dataset yang digunakan adalah konsentrasi nutrien ikan utuh pada T1 dengan
metode thawing R. Untuk menguji lama penyimpanan herring (Clupeus harengus), makarel (
Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus) memiliki pengaruh pada konsentrasi nutrisi
mereka, model efek campuran linier (LMER) diterapkan, di mana titik waktu dan spesies ikan
dimasukkan sebagai efek tetap, dan kumpulan ikan (termasuk spesies ikan, kebun binatang dan
titik waktu) dimasukkan sebagai efek acak (contoh: lmer(Fe~species + timepoint + (1|batch))).
Dataset yang digunakan adalah konsentrasi nutrisi ikan utuh menggunakan metode thawing R.
Untuk menguji apakah metode thawing ikan haring (Clupeus harengus), makarel (Scomber
scombrus) dan capelin (Mallotus villosus) memiliki pengaruh pada konsentrasi nutrisi mereka,
model efek campuran linier (LMER) diterapkan, di mana titik waktu, spesies ikan dan metode
pencairan dimasukkan sebagai efek tetap, dan kumpulan ikan (termasuk spesies ikan, kebun
binatang dan titik waktu) dimasukkan sebagai efek acak (contoh:
lmer(Fe~species+timepoint+thawing+(1|batch))). Kumpulan data lengkap, termasuk data yang
diambil dari semua metode pencairan dan titik waktu, digunakan dalam model ini.

3. Hasil
3.1. Analisis Nutrisi
Konsentrasi Cu dari jenis ikan haring yang diperiksa (Clupeus harengus), makarel (
Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus) berada di bawah tingkat deteksi (<1,0 mg/
kg bahan asli) di semua sampel, demikian pula konsentrasi vitamin B1 di hampir semua ikan
haring yang dianalisis (Clupeus harengus) (di bawah <0,2 mg/kg bahan asli dalam analisis
44/48) dan sebagian besar capelin yang dianalisis (Mallotus villosus) (dalam analisis 25/36).
Konsentrasi Fe, Se, vitamin B1, dan vitamin A paling tinggi pada ikan kembung (Scomber
scombrus), dan konsentrasi Zn dan vitamin E tertinggi pada capelin (Mallotus villosus),
sedangkan itu mengandung konsentrasi vitamin D3 terendah. Selain itu, konsentrasi vitamin
D3 berada di bawah tingkat deteksi (<300 IU/kg bahan asli) pada 18/36 capelin utuh (Mallotus
villosus) analisis. Namun, tidak satu pun dari perbedaan ini yang signifikan secara statistik
selain vitamin E (P=0,0015) dan vitamin A (P=0,039).

3.2. Pengaruh Waktu Penyimpanan

Tidak ada perubahan konsentrasi Fe (P=0,616), Zn (P=0,686), Se (P=0,148) atau vitamin B1 (P=
0,495) diamati selama periode penyimpanan enam bulan di seluruh herring (Clupeus harengus),
makarel (Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus). Namun, penurunan yang signifikan
dalam vitamin A (P=0,019), vitamin D3 (P=0,034) dan vitamin E (P=0,003) perhatian
Hewan2022,12, 2847 5 dari 11

trasi diamati selama enam bulan ini (Gambar1–3). Hilangnya vitamin E paling terlihat
pada capelin (Mallotus villosus).

Gambar 1.Konsentrasi vitamin A dari herring beku utuh (Clupeus harengus), mackerel (Scomber scombrus) dan capelin
(Mallotus villosus), dicairkan dalam lemari es (4◦C selama 24 jam), dan diukur pada 4 titik waktu yang berbeda. T1, hari
pengiriman, T2, 60 hari setelahnya, T3, 120 hari setelahnya, T4, 180 hari setelah pengiriman. “•” adalah pembuat garis
besar.

Gambar 2.Konsentrasi vitamin D3 dari herring beku utuh (Clupeus harengus), mackerel (Scomber scombrus)
dan capelin (Mallotus villosus), dicairkan di lemari es (4◦C selama 24 jam), diukur pada 4 titik waktu yang
berbeda. T1, hari pengiriman, T2, 60 hari setelahnya, T3, 120 hari setelahnya, T4, 180 hari setelah pengiriman. “•
” adalah pembuat garis besar.
Hewan2022,12, 2847 6 dari 11

Gambar 3.Konsentrasi vitamin E dari herring beku utuh (Clupeus harengus), mackerel (Scomber scombrus) dan
capelin (Mallotus villosus), dicairkan dalam lemari es (4◦C selama 24 jam), diukur pada 4 titik waktu yang
berbeda. T1 adalah hari pengiriman, T2, 60 hari setelah, T3, 120 hari setelah, T4, 180 hari setelah pengiriman. “•”
adalah pembuat garis besar.

3.3. Pengaruh Metode Thawing

Thawing ikan dengan metode thawing yang berbeda (R, RT, RW) tidak berpengaruh
nyata terhadap konsentrasi Fe (P=0,821), Zn (P=0,549), Se (P=0,633), vitamin D3 (P=0,551),
vitamin E (P=0,913) atau vitamin B1 (P=0,688) dalam ikan haring utuh (Clupeus harengus),
makarel (Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus). Namun dapat ditunjukkan,
bahwa konsentrasi vitamin A (P=0,002) berubah secara signifikan menggunakan metode
pencairan yang berbeda (Gambar4).
Hewan2022,12, 2847 7 dari 11

Gambar 4.Konsentrasi vitamin A dari herring beku utuh (Clupeus harengus), mackerel (Scomber scombrus) dan
capelin (Mallotus villosus), dicairkan dengan metode thawing yang berbeda. R = mencairkan dalam lemari es (4◦
C selama 24 jam), RT = pencairan pada suhu kamar (18-22◦C selama 15 jam semalam) dan RW = pencairan di
bawah air mengalir (14◦C suhu air selama 3 jam dengan air mengalir). “•” adalah pembuat garis besar.

4. Diskusi
Studi ini terutama berfokus pada bagaimana nutrisi yang dipilih, jika tidak diberikan dalam
jumlah yang tepat, dapat menyebabkan defisiensi atau suplementasi berlebihan. Dalam kasus
tiamin dan vitamin E, ini dapat menyebabkan gejala neurologis yang berbeda, sedangkan dalam
kasus vitamin A atau D, ini dapat menyebabkan deformasi tulang. Dalam penelitian ini, salah satu
hipotesis yang diuji adalah apakah lama penyimpanan ikan beku berpengaruh terhadap
mikronutrien yang berbeda. Proses pembekuan itu sendiri tidak diselidiki, karena ini akan
melampaui ruang lingkup penelitian, meskipun hal ini mungkin juga mempengaruhi kandungan
zat gizi mikro di awal.
Temuan tak terduga dari penelitian ini adalah bahwa konsentrasi Cu dari spesies ikan haring yang
diperiksa (Clupeus harengus), makarel (Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus) berada di
bawah tingkat deteksi, misalnya di bawah 1,0 mg/kg bahan asli. Bernhard et al., 2002, menunjukkan
kadar 4–6 mg/kg pada DMB untuk herring (Clupeus harengus), 5–10 mg/kg DMB untuk mackerel (
Scomber scombrus) dan 3–10 mg/kg DMB untuk capelin (Mallotus villosus) [1]. Dalam materi asli, hasil ini
sama dengan 1–1,5 mg/kg, 1,6–3,3 mg/kg, dan 0,6–2 mg/kg [1]. Singkatnya, konsentrasi Cu yang
dipublikasikan dari spesies ikan yang diperiksa seharusnya dapat dideteksi dalam penelitian ini.
Persyaratan Cu untuk piscivora tidak ditentukan dengan baik, tetapi secara kasar berkisar antara 4
hingga 10 mg/kg diet DM [10–12], yang dapat dipenuhi oleh yang diterbitkan
Hewan2022,12, 2847 8 dari 11

Tingkat Cu ikan utuh dalam Bernhard et al., 2002, tetapi kemungkinan tidak akan dipenuhi oleh
konsentrasi Cu yang dianalisis dalam penelitian ini. Pertanyaan yang muncul adalah sebagai berikut:
haruskah Cu ditambahkan jika spesies pemakan ikan di Eropa diberi makan herring (Clupeus harengus),
makarel (Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus)? Tanda-tanda klinis defisiensi Cu meliputi
anemia, depigmentasi rambut, kelainan bentuk tulang, ruptur aorta, ataksia, infertilitas, dan diare.8].
Tidak ada laporan defisiensi Cu yang tersedia untuk setiap spesies organisme air, sedangkan laporan
toksisitas Cu pada organisme air sangat banyak, terutama untuk invertebrata dan ikan [13].
Kemungkinan lain untuk konsentrasi Cu yang tidak terdeteksi mungkin pertama-tama merupakan
metode analitik yang tidak memadai. Namun, ini tidak mungkin, karena ICP-MS adalah teknik yang diakui
Badan Perlindungan Lingkungan Amerika Serikat untuk analisis elemen jejak lingkungan, dan telah
digunakan untuk analisis Cu dalam penelitian lain yang memeriksa Cu pada ikan utuh [14,15].
Kemungkinan kedua termasuk penipisan Cu antara menangkap ikan di laut dan memberi makan ikan
kepada hewan dalam perawatan manusia. Ikan tersebut tidak baru ditangkap saat tiba di kebun
binatang. Itu ditangkap, dibekukan di atas kapal penangkap ikan, dikirim ke fasilitas penyimpanan
berikutnya, dan disimpan sampai dipesan. Umur ikan saat melahirkan berkisar antara 26–297 hari
setelah penangkapan, waktu yang memungkinkan terjadinya deplesi Cu. Oleh karena itu, penelitian lebih
lanjut diperlukan di bidang ini, menentukan metode analisis yang ideal dan memeriksa penipisan Cu
antara penangkapan dan pemberian pakan ikan ke hewan.

Kehadiran thiaminase dalam ikan haring (Clupeus harengus) dan capelin (Mallotus villosus)
menjelaskan mengapa konsentrasi vitamin B1 seringkali di bawah batas deteksi 0,2 mg/kg bahan
asli pada spesies ikan ini. Ikan haring (Clupeus harengus) telah terbukti mengandung thiaminase [
4] dan mereka juga terdapat pada ikan utuh, kepala, kulit, otot, dan jeroan capelin (Mallotus
villosus) [16]. Croft et al., 2013, menunjukkan aktivitas thiaminase pada capelin utuh (Mallotus
villosus) lebih rendah daripada ikan haring (Clupeus harengus) (5.1μg tiamina yang dikonsumsi/
jam dan g ikan (berat basah) dibandingkan dengan 8,7μg, masing-masing) [8]. Hasil ini sejalan
dengan penelitian kami, karena lebih banyak vitamin B1 dapat ditemukan di capelin (Mallotus
villosus) daripada ikan haring (Clupeus harengus).
Penurunan signifikan dalam konsentrasi vitamin yang larut dalam lemak yang diuji (vitamin
A, D3 dan E) pada ikan haring utuh (Clupeus harengus), makarel (Scomber scombrus) dan capelin (
Mallotus villosus) diamati dalam periode penyimpanan enam bulan. Hilangnya vitamin E paling
terlihat pada capelin (Mallotus villosus), yang mungkin karena jenis ikan ini mengandung vitamin E
tertinggi di urutan pertama DMB. Vitamin E berfungsi sebagai antioksidan [1,4,8]. Ketika lemak
(dalam bentuk asam lemak tak jenuh ganda rantai panjang) bereaksi dengan oksigen, dihasilkan
radikal lemak bebas.8]. Setelah diproduksi, radikal ini dapat bereaksi dengan asam lemak lain,
menghasilkan reaksi berantai. Vitamin E melindungi sel dari kerusakan oksidatif, dan dengan
demikian menguras [1,4,8]. Semakin lama ikan disimpan, semakin banyak vitamin E yang terkuras.
1,4,8]. Studi ini mengkonfirmasi penipisan Vitamin E selama masa penyimpanan enam bulan, dan
oleh karena itu, vitamin E harus ditambahkan. Selain itu, penelitian ini menunjukkan bahwa
konsentrasi vitamin A dan vitamin D3 juga semakin menipis.
Vitamin A dianggap sebagai vitamin yang tidak stabil dan sensitif terhadap cahaya, panas,
dan oksigen.2]. Kebutuhan vitamin A untuk piscivora tidak ditentukan dengan baik tetapi berkisar
antara 1,1 hingga 9 IU/g DM diet [10–12]. Konsentrasi vitamin A terendah dari ikan utuh dalam
penelitian ini adalah 5,2 IU/g DM ikan utuh. Oleh karena itu, walaupun konsentrasi vitamin A
menurun, suplementasi vitamin A tampaknya tidak diperlukan jika herring utuh (Clupeus harengus
), makarel (Scomber scombrus) dan capelin (Mallotus villosus) yang disimpan selama 6 bulan di−20
◦C, diberi makan. Penulis lain juga mencapai kesimpulan yang sama [3,4,9].
Vitamin D3 juga merupakan antioksidan kuat yang memfasilitasi aktivitas mitokondria yang
seimbang, mencegah oksidasi protein terkait stres oksidatif, peroksidasi lipid, dan kerusakan DNA.
17]. Kebutuhan vitamin D3 untuk piscivora berkisar antara 0,25 hingga 0,75 IU/g DM diet [10–12].
Konsentrasi vitamin D3 terendah dari ikan utuh dalam penelitian ini adalah 2,7 IU/g DM ikan utuh.
Tampaknya, meskipun konsentrasi vitamin D3 menurun, suplementasi vitamin D3 tampaknya tidak
diperlukan jika ikan utuh yang disimpan selama 6 bulan pada suhu−20◦C diberi makan. Namun,
harus diperhatikan bahwa dalam sampel capelin 18/36,
Hewan2022,12, 2847 9 dari 11

vitamin D3 berada di bawah batas deteksi 300 IU/kg bahan asli. Juga, Gimmel et al., 2016, menunjukkan
bahwa konsentrasi darah calcidiol lumba-lumba hidung botol (Tursiops truncatus) dalam perawatan
manusia lebih rendah, dibandingkan dengan nilai dari hewan bebas, meskipun tidak ada implikasi
kesehatan negatif untuk hewan yang diuji dari konsentrasi kalsidiol serum rendah yang terdeteksi dalam
penelitian tersebut [9]. Oleh karena itu, penulis akan merekomendasikan suplementasi vitamin D3 jika
ikan disimpan lebih dari 6 bulan atau jika capelin digunakan sebagai sumber makanan utama.

Dalam studi ini, berbagai spesies mikroorganisme yang mendapatkan kembali aktivitasnya
selama proses pencairan tidak akan dibahas, karena tidak diselidiki lebih lanjut. Thawing ikan
dengan metode thawing yang berbeda (R, RT, RW) hanya berpengaruh nyata terhadap konsentrasi
vitamin A (P=0,002) dalam ikan haring utuh (Clupeus harengus), makarel (Scomber scombrus) dan
capelin (Mallotus villosus) dalam penelitian kami. Temuan ini sangat tidak terduga, karena ikan
yang dicairkan dengan RT memiliki konsentrasi vitamin A tertinggi dibandingkan dengan R dan
RW. Alasannya meliputi peningkatan kehilangan atau degenerasi vitamin A selama pencairan
dengan R atau RW, atau peningkatan konversi vitamin A dari bentuk yang tidak terdeteksi oleh
metode laboratorium yang dipilih menjadi bentuk yang terdeteksi. Vitamin A adalah vitamin yang
tidak stabil dan sensitif terhadap cahaya, panas, dan oksigen [2]. Oleh karena itu, tampaknya tidak
mungkin RT akan menyebabkan berkurangnya kehilangan vitamin A dibandingkan dengan R dan
RW, karena cahaya, panas, dan oksigen mungkin paling tinggi dengan metode pencairan RT.
Metode laboratorium yang dipilih mengukur all-trans-retinyl alcohol dan cis-isomernya. Namun,
masih banyak lagi bentuk vitamin A. Retinoid adalah golongan senyawa yang merupakan bentuk
vitamin A [18]. Mereka bisa ada dalam berbagai bentuk, termasuk retinal (bentuk aldehida dari
vitamin A), retinol (bentuk alkohol dari vitamin A), asam retinoat (bentuk karboksilat dari vitamin A),
dan retinil ester (bentuk ester dari vitamin A). A) [18]. Retinoid dapat diubah menjadi bentuk yang
sesuai (retinal, retinol, asam retinoat, atau retinil ester) dalam organ oleh enzim pengubah retinoid
selama metabolisme, sementara beberapa konversi bersifat reversibel dan beberapa tidak dapat
diubah.18]. Suhu optimal enzim pengonversi retinoid berada di kisaran 25-40◦C [18], yang paling
mendekati suhu untuk metode pencairan RT. Enzim pengubah retinoid ini dapat ditemukan pada
bakteri dan di berbagai jaringan organisme.18]. Kontaminasi bakteri ikan tertinggi dengan
pencairan di RT [2]. Oleh karena itu, mungkin saja metode pencairan itu sendiri tidak
memengaruhi konsentrasi vitamin A pada ikan utuh, tetapi mekanisme lain seperti konversi bentuk
vitamin A dan kontaminasi bakteri adalah alasannya. Oleh karena itu, penelitian lebih lanjut
diperlukan, di mana air tetes dianalisis konsentrasi vitamin A-nya menggunakan metode pencairan
yang berbeda. Untuk saat ini, pengaruh metode pencairan pada konsentrasi vitamin A ikan utuh
tidak terlalu relevan secara praktis, karena ikan utuh mungkin mengandung cukup vitamin A.
Mengenai kebersihan pakan, metode pencairan R harus digunakan, seperti yang ditunjukkan oleh
penelitian lain. [2,9,19].

Tidak ada pengaruh yang signifikan dari metode pencairan yang dapat ditunjukkan pada vitamin
B1 (P=0,688). Hal ini mungkin disebabkan oleh sedikitnya sampel ikan yang memiliki konsentrasi vitamin
B1 yang terdeteksi. Penelitian lebih lanjut perlu dilakukan sehubungan dengan vitamin yang larut dalam
air dan metode pencairan, dan kehati-hatian harus dilakukan untuk memilih spesies ikan tanpa
thiaminase, seperti mackerel.

5. Kesimpulan
Pertama, masa penyimpanan enam bulan di−20◦C mengurangi konsentrasi vitamin A,
vitamin D dan vitamin E dalam herring beku utuh (Clupeus harengus), makarel (Scomber
scombrus) dan capelin (Mallotus villosus), sedangkan itu tidak mempengaruhi konsentrasi
mineral. Kedua, metode pencairan yang diuji tidak berpengaruh pada konsentrasi vitamin D
dan vitamin E dari herring beku utuh (Clupeus harengus), makarel (Scomber scombrus) dan
capelin (Mallotus villosus). Pengaruh konsentrasi vitamin B1 tidak dapat dievaluasi dengan
baik, karena ukuran sampel yang tidak mencukupi. Pengaruh konsentrasi vitamin A sangat
signifikan, sedangkan thawing pada suhu kamar menunjukkan konsentrasi vitamin A
tertinggi pada ikan.
Hewan2022,12, 2847 10 dari 11

Untuk tujuan praktis, kami menyimpulkan sebagai berikut: iq1qt sangat penting untuk melengkapi
vitamin E dan B1 dalam makanan yang mengandung ikan utuh, terutama ikan haring (Clupeus harengus)
dan capelin (Mallotus villosus), untuk menghindari kekurangan pada spesies piscivorous. Penulis juga
merekomendasikan suplementasi vitamin D3 jika ikan disimpan lebih dari 6 bulan, atau jika capelin
digunakan sebagai sumber makanan utama. Berdasarkan studi ini, tidak ada rekomendasi yang dapat
dibuat sehubungan dengan metode pencairan nutrisi terpilih pada ikan utuh untuk nutrisi hewan kebun
binatang.

Kontribusi Penulis:AL merancang studi ini (konsepsi proyek, pengembangan rencana penelitian secara
keseluruhan, dan pengawasan studi) dengan masukan dari KB dan SB; AG melakukan pendataan; KB, BL,
AH, SM, FW, dan CW menyediakan ikan yang diperlukan untuk penelitian; AT memfasilitasi analisis
nutrisi; AG menganalisis data dan melakukan analisis statistik; AG menulis makalah; AL memiliki
tanggung jawab utama untuk konten akhir. Semua penulis telah membaca dan menyetujui versi naskah
yang diterbitkan.

Pendanaan:Granovit AG mendanai sebagian dari analisis nutrisi. Selain itu, penelitian ini didukung
oleh Wildlife Animal Health Fund, Swiss Association of Wildlife, Zoo Animal and Exotic Pet Medicine
dan oleh ZEBRA FOUNDATION.

Pernyataan Dewan Peninjau Kelembagaan:Tak dapat diterapkan.

Pernyataan Persetujuan yang Diinformasikan:Tak dapat diterapkan.

Pernyataan Ketersediaan Data:Data yang disajikan dalam penelitian ini tersedia berdasarkan
permintaan dari penulis terkait. Data tidak tersedia untuk umum karena alasan kerahasiaan.

Ucapan terima kasih:Para penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada Ines Mittner untuk bantuan laboratorium
teknis, Hubert Wehage dan Verena Gonzalez Lopez untuk keahlian laboratorium mereka, Simon Rüegg dan Andreas
Hofstetter untuk saran dan bantuan statistik mereka dalam komputasi, Jennifer Riley, DVM dan Moran Tal Gavriel, DVM,
untuk pengeditan bahasa Inggris mereka, dan staf kebun binatang yang menyediakan ikan sesuai kebutuhan.

Konflik kepentingan:SB dan AT digunakan oleh Granovit AG tetapi tidak memiliki prediksi atau hasil yang
diinginkan sehubungan dengan analisis nutrisi ikan secara keseluruhan. Penulis lain menyatakan tidak ada
konflik kepentingan (AG, AL, KB, BL, AH, SM, FW, CW).

Referensi
1. Bernard, JB; Allen, ME Memberi makan hewan piscivorous penangkaran: Aspek nutrisi ikan sebagai makanan. Di dalamBuku Panduan Kelompok Penasihat
Gizi, 2002, Lembar Fakta 005; Asosiasi Kebun Binatang dan Akuarium Amerika: Silver Spring, MD, AS, 1997.
2. Crissey, SDPenanganan Ikan yang Diberi Makan pada Hewan Pemakan Ikan: Manual Prosedur Operasi Standar; Departemen Pertanian Amerika
Serikat (USDA); Balai Penelitian Pertanian; Perpustakaan Pertanian Nasional; Layanan Inspeksi Kesehatan Hewan dan Tumbuhan: Beltsville,
MD, USA, 1998.
3. Dierenfeld, ES; Katz, N.; Pearson, J.; Murru, F.; Konsentrasi Asper, ED Retinol dan α-tocopherol pada ikan utuh yang biasa diberi makan di kebun binatang dan
akuarium.Biol Kebun Binatang.1991,10, 119–125. [CrossRef]
4. Layak, GA Nutrisi dan energi. Di dalamCRC Handbook of Marine Mammal Medicine, edisi ke-2.; Dierauf, LA, Gulland, MD, Eds.;
CRC Press: Boca Raton, FL, AS, 2001; hlm. 791–817.
5. Myers, BJ Pemeliharaan anjing laut abu-abu di penangkaran.Bisa. Bidang. Nat.1955,69, 151–153.
6. Rigdon, RH; Drager, GA Defisiensi tiamin pada singa laut (otaria californiana) yang hanya diberi makan ikan beku.Selai. Dokter hewan. Kedokteran Asosiasi1955, 127, 453–
455. [PubMed]
7. Croft, L.; Napoli, E.; Digantung, CK; Leger, JS; Gearhart, S.; Hei, K.; Wong, S.; Sakaguchi, D.; Lin, A.; Puschner, B.; et al. Evaluasi klinis dan
analisis biokimia defisiensi tiamin pada segel pelabuhan Pasifik (Phoca vitulina) dipelihara di fasilitas zoologi.Selai. Dokter hewan.
Kedokteran Asosiasi2013,243, 1179–1189. [CrossRef] [PubMed]
8. Pipi, Humas; Dierenfeld, ESPerbandingan Nutrisi dan Metabolisme Hewan; CABI: Oxfordshire, MS, AS, 2010.
9.Gimmel, AE; Baumgartner, K.; Liesegang, A. Konsentrasi vitamin darah dan suplementasi vitamin pada lumba-lumba hidung botol
(Tursiops truncatus) di fasilitas Eropa.Res Dokter Hewan BMC.2016,12, 180. [CrossRef] [PubMed]
10. Kelompok Penasihat Takson AZA Penguin.Panduan Perawatan Penguin (Spheniscidae).; Asosiasi Kebun Binatang dan Akuarium: Silver Spring, MD,
USA, 2014.
11. TAG Beruang AZA 2009.Panduan Perawatan Beruang Kutub (Ursus maritimus).; Asosiasi Kebun Binatang dan Akuarium: Silver Spring, MD, USA, 2009.
12. TAG Mamalia Laut AZA 2019.Manual Perawatan Mamalia Laut; Asosiasi Kebun Binatang dan Akuarium: Silver Spring, MD, AS, 2019.
13. Eisler, R. Bahaya Tembaga terhadap Ikan, Satwa Liar, dan Invertebrata: Tinjauan Sinoptik (No. 33). Di dalamSurvei Geologi AS;
Departemen Dalam Negeri AS: Washington, DC, AS, 1998.
Hewan2022,12, 2847 11 dari 11

14. Chamberlain, I.; Adams, K.; Le, S. ICP-MS penentuan elemen jejak pada ikan.Pada. Spektroskopi.2000,21, 118–122.
15. Subotić, S. Bioakumulasi logam berat dan elemen jejak dalam jaringan target dari empat spesies ikan yang dapat dimakan dari Sungai Danube (Serbia).
Ekotoksikol. Mengepung. Aman.2013,98, 196–202. [CrossRef] [PubMed]
16. Ceh, L.; Helgebostad, A.; Ender, F. Thiaminase di Capelin (Mallotus villosus), ikan artik dari keluarga salmonidae.Int. Z. Fur Vitam.
1964,34, 189–196.
17. Wimalawansa, SJ Kekurangan vitamin D: Efek pada stres oksidatif, epigenetik, regulasi gen, dan penuaan.Biologi2019,8, 30. [
CrossRef] [PubMed]
18. Hong, SH; Kim, KR; Oh, DK Sifat biokimia dari enzim pengonversi retinoid dan produksi bioteknologi retinoid.Aplikasi Mikrobiol.
Bioteknologi.2015,99, 7813–7826. [CrossRef] [PubMed]
19. Zhou, P.-C.; Xie, J. Pengaruh metode pencairan yang berbeda pada kualitas makarel (Pneumatophorus japonicus).Ilmu Makanan. Bioteknologi.
2021,30, 1213–1223. [CrossRef] [PubMed]