Practica 2.

Factores fisicoquímicos
que afectan los procesos de
extracción y separación en
cromatografía en capa fina.

VARIABLES NIVEL
Pesar 50g de planta
fresca (cortada o molida Grueso 1cm2
Tamaño de partícula
según el caso) e Fino Molido
introducirlos en un matraz 2-4 ºC
balónº Temperatura 25ºC
75ºC

Construir 6
experimentos con lo
siguiente

Experimento 1 Experimento 2 Experimento 3

Temperatura: 2-4ºC Temperatura: 2-4ºC Temperatura: 2-4ºC
Tamaño de partícula: Tamaño de partícula: Tamaño de partícula:
Fino, Grueso Fino, Grueso Fino, Grueso

A cada uno de los matraces se le adiciona 250mL de

etanol de 96º y se extrae por espacio de una hr,
vigilando la temperatura para el caso 1 y 2, agitando
esporádicamente y en el 3 se extrae por reflujo.

Al finalizar el tiempo
Dejar evaporar el disolvente
se filtra y se toma una
y desarrolar el
muestra con capilar
cromatograma, en camaras
para aplicar en el
saturadas con metanol,
cromatofolio a una
hexano y mezcla de acetato
distancia de 0.7cm del
de etilo: metanol: agua 8:1:1
borde inferior .

Una vez que disolvente Seca la placa se revela bajo

haya ascendido a 0.7cm
antes del borde superior,
sacarlas de las cámaras,
marcar el frende del
disolvente y dejar evaporar
a temperatura ambiente.
luz UV, marcar las manchas
que aparezcan luego revelar
asperjando sulfato cérico o
ác. sulfúrico, calentar en una
parrilla hasta que aparezcan
las manchas y sacar el Rf.

Oleandrina 0.9 rojo

Adinerina 0.8 violeta

La presencia de glicósidos
cardiotónicos presentes Oleasido A 0.75 rojo
aparecen como:
Nerigósido 0.7 rojo

Oderósido H 0.55 café

El líqudo se concentra por El residuo se pasa a una

destilación hasta un cápsula previamente pesada
volumen de 25mL. con cuerpos de ebullición

El extracto etanólico que se

encuentra en la cápsula se Dejar enfriar y pesar para
concentra a sequedad sacar rendimiento.
cuidando de que no se
proyecte y no se queme.

REACTIVOS
- Etanol: Disolvente también es empleado en la extracción de taninos, fitoesteroles, flavonoides, entre otros componentes.1
- Metanol, Hexano y Acetato de etilo: Disolventes empleados solos o en mezcla para formar la fase móvil. Se seleccionan
con base en su polaridad con el fin de optimizar la separación de los componentes de la muestra en la columna.2
De forma orientativa se puede establecer el siguiente orden de polaridades para los disolventes usados con mayor
asiduidad: Éter de petróleo < tetracloruro de carbono < ciclohexano < éter etílico < acetona < benceno < acetato de etilo <
cloroformo < etanol < metanol < agua < piridina < ácido acético. 3
- H2SO4: Revelador de cromatofolios, generalmente se utiliza junto con calor para acelerar la reacción de oxidación y
formar la coloración. 4
REFERENCIAS
1. Velavan, S. (2015). Phytochemical Techniques - A Review. Journal of Science and Research. 1(2). p.p. 80-91. Retrieved from:
https://www.researchgate.net/publication/303898318
2. Repositorio Institucional de la Universidad de Alicante (n.d.). TEMA 2. CROMATOGRAFÍA: PRINCIPIOS GENERALES
Consultado en: https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8246/7/T2cromagraf.pdf Fecha de consulta: 19/08/21
3. Universidad Pablo de Olavide, de Sevilla. (2019). PRÁCTICA 10: CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ADSORCIÓN EN COLUMNA (CC)
Y CAPA FINA (TLC) 1. INTRODUCCIÓN. Consultado en:
https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/curso0405/practica10.pdf
4. Skoog, Douglas A (2008) ?Principios de análisis instrumental?. Cengage learning. Ciudad de México, México. p. 765 - 768