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Reporte P1. Eq4-5.
Reporte P1. Eq4-5.
REPORTE
PRÁCTICA N# 1
ANALISIS FITOQUÍMICO
PRELIMINAR
PLANTA DE ESTUDIO: CUACHALALATE
ELABORADO POR_
EQUIPO 4
• Balbuena Cortes Jessica
• Lara Ortiz Luis Felipe
• López González Mónica
• Ramirez Montiel Gicel Alejandra
EQUIPO 5
• De Jesús Flores Brenda Yamilet
• Flores González Vianey
• Ruiz Ramirez Mario Alejandro
GRUPO 7FM2
México a 16 de febrero de 2022
INTRODUCCIÓN
Para determinar la composición química de las plantas medicinales y conocer sus
constituyentes biológicamente activos pueden seguirse metodologías que van desde un
análisis fitoquímico preliminar hasta estudios químicos sistemáticos bioguiados. El objetivo
de un estudio fitoquímico preliminar es determinar la presencia o ausencia de los principales
grupos de metabolitos en una especie vegetal, a saber: alcaloides, antraquinonas y
naftoquinonas, esteroides y triterpenos, flavonoides, taninos, saponinas, cumarinas,
lactonas terpénicas y cardiotónicos. Dado que cada uno de estos grupos de compuestos
está relacionado con actividades biológicas específicas, partiendo de los resultados
obtenidos en el estudio fitoquímico preliminar es posible orientar investigaciones posteriores
para determinar la actividad biológica de las especies en cuestión y los principios activos
involucrados (Carvajal, L. (2009)).
En esta ocasión nuestro objetivo es realizar un análisis fitoquimico de el cuachalalate
(Amphiterygium adstringens) ; El cuachalalate de la familia Anacardiaceae (Julianaceae) es
un árbil cioico que llega a medir hasta 10 m de altura; La corteza es gruesa compacta y
dura, ornamentada de aspecto áspero, de color café rojizo a café oscuro y con lenticelas;
las hojas son obovadas, sésiles y con el borde aserrado;Las flores masculinas forman
panículas y las flores femeninas se encuentran solitarias en las axilas de las hojas;Los frutos
alados de 2.5 a 5 cm, de color moreno amarillentos o moreno rojizas, con una fina
nervadura; contienen de una a dos semillas muy aplanadas de cinco mm de largo.
El cuachalalate es una especie dominante de la selva baja caducifolia, que se distribuye en
el centro y sur de México, en donde predomina el clima cálido y cálido subhúmedo, crece
en bosque tropical caducifolio y subcaducifolio, de matorral xerófilo, bosque espinoso,
mesófilo de montaña y pino-encino, se distribuye de la vertiente del Pacifico desde Nayarit
hasta Oaxaca, incluyendo la cuenca del Balsas que la constituyen Puebla, Guerrero y
Morelos.
En la medicina tradicional principalmente se utiliza la corteza en cocimiento, como
cicatrizante de heridas y quemaduras; para enfermedades gastrointestinales como
desinflamación, gastritis y ulceras en el estómago; en problemas bucales como ulceras y
fuegos de la boca; en el sistema circulatorio ayuda a purificar la sangre, a curar várices y
úlceras varicosas; sana golpes internos y externos, gangrena, ayuda a desintegrar cálculos
renales y biliares; reduce el colesterol, ayuda a regular los niveles de glucosa en la sangre,
en el sistema renal ayuda en las infecciones en los riñones y para problemas de la piel.
(INAH. (s. f.)).
La corteza contiene un compuesto triterpénico denominado ácido masticadienónico, al cual
le atribuyen propiedades anticancerígenas, anticolinérgicas y para destruir cálculos
biliares;El ácido 3-α-hidroxi masticadienoico, β-sitosterol y el ácido 3-epi-oleanólico son
metabolitos distribuidos en sus estructuras;tambien se han encontrado otros metabolitos
secundarios como el ácido instipolináico y el ácido cuachalálico.
Figura 1. Principales Metabolitos secundarios del cuachalalate.
FUNDAMENTO
Se realizaron varias reacciones en la práctica para identificar diferentes compuestos que
pudieran encontrarse en la planta de interés.
Extracto ácido
Se realiza rutinariamente después de realizar síntesis químicas y por el aislamiento de
compuestos y productos naturales como alcaloides a partir de extractos. El producto
resultante está libre de impurezas neutras, ácidas o básicas. Extraer alcaloides, que son
especies químicas básicas, al protonarlas son más solubles en agua, es por eso son
obtenidos comúnmente con solventes ácidos (Harborne,1998).
Reacción de Dragendorff.
Este reactivo contiene yoduro de bismuto potasio, donde al reaccionar Bi(NO3)3 con el
ácido (HCl) y con yoduro de potasio, forma complejos de color naranja, tal como se muestra
en la Figura 4 (Orantes, 2008) (Ardila, 2014).
Reacción de Sonnenschain
Este ácido reacciona para formar un precipitado café naranja. Se prepara a partir de una
solución saturada de molibdato de amonio se mezcla con una solución saturada de fosfato
monoácido de sodio a 40°C.la detección se cumple con la aparición de manchas amarillas
sobre papel humedecido con el reactivo y la recuperación de los alcaloides precipitados se
hace descomponiendo el complejo de hidróxido de amonio. (Marcano, 2018)
Extracto etanólico
El etanol debido a su polaridad media permite disolver componentes tanto como volaris
como no polares y formar esferas de solvatación compuestos orgánicos de bajo peso (Fehli,
2017)
Reacción de Shinoda.
Es la reacción del magnesio en medio ácido, que reduce el flavonoide generando un
producto coloreado que va del rojo anaranjado al violeta, presentándose la siguiente
reacción química (Delporte, 2010).
Fluorescencia.
Las cumarinas on compuestos derivados de la α-benzopirona, en su estructura presentan
un gran número de insaturaciones. También presentan un espectro UV característico,
influido fuertemente por la naturaleza y posición de los sustituyentes, que se modifica
profundamente en medio alcalino.
A la luz ultravioleta, las cumarinas presentan fluorescencia variable, de azul a amarillo y a
púrpura, exaltada en presencia de amoniaco.(Ochoa L, 2018)
Reacción de Erlich
En la identificacion de cumarinas se genera una lactonización del ácido cis-O-
hidroxicinámico o ácido cumarínico, determinándose la presencia de grupo furano, la
muestra se disuelve en etanol y se agrega una solución de p-dimetilaminobenzaldehído, en
etanol y después cloruro de hidrógeno gaseoso, formándose una coloración naranja.
(Herrera, Sorroza, 2017)
Reacción de Rosenthaler
La vainillina se condensa con la saponina y el ácido sulfúrico actúa como catalizador, esto
permite que se observe la coloración violeta (Ardoino,2013).
Prueba de Kedde.
En primer lugar, se forma un anión cardenólido, que se convierte en un anión púrpura violeta
mediante la adición de ácido 3,5-dinitrobenzoico (reactivo de Kedde). Debido a la hidrólisis
de la anillo de lactona, el color desaparece en unos minutos. La reacción funciona con los
anillos lactónicos de los glucísidos cardiotónicos que reaccionan con los compuestos
aromáticos nitrados, y se basa en la disociación de protones catalizada por álcalis (Yadav,
et. al., 2010).
Figura 13. Prueba de Kedde
Prueba Legal.
La prueba de Legal ocurre debido a la capacidad del anillo de lactona de los glucósidos
cardíacos para ser oxidados por compuestos poliméricos en medio alcalino (Kyiv, 2019). La
piridina permite que se desprotone el compuesto de interés permitiendo que el nitroprusato
de sodio y el hidróxido de potasio reaccionen y se pueda generar un complejo de hierro con
el glucósido (Carranza, 2009).
Prueba de Baljet.
Se basa en la formación de un complejo formado entre el ácido pícrico y la lactona α, β y γ
insaturada. El producto coloreado se forma por la conexión del anión cardenólido y una
molécula que contiene un grupo nitro (LIPRONAT, 2005).
Reacción de Börntraguer.
Permite la hidrólisis de enlaces glicosídicos y la oxidación de antronas y antranoles hasta
antraquinonas (Carvajal, 2009).
Extracto acuoso
Prueba de la altura y estabilidad de la espuma
Las saponinas se caracterizan por su capacidad, cuando se agita cualquier solución acuosa
que los contenga, para producir una espuma estable. La espuma se forma debido a que las
saponinas disminuyen la tensión superficial del agua, es decir, son tensioactivos naturales
(López, 2001).
Reacción de Fehling
La solución de Fehling se prepara combinando dos soluciones separadas: A, que es una
solución acuosa de sulfato de cobre (II), y B, que es una solución incolora de tartrato de
sodio y potasio. Estas dos soluciones, estables por separado, se combinan formando el bis
(tartrato) complejo de Cu2+, que sirve como agente oxidante.
El complejo de bistartratocuprato (II) oxida el aldehído a un carboxilato anión, y en el
proceso los iones de cobre (II) del complejo se reducen a iones de cobre (I). Luego, el óxido
de cobre rojo (I) precipita, lo que indica un resultado positivo (Fehling, 1849).
Reactivo de gelatina.
Los taninos tienen la propiedad de reaccionar con los grupos amino libres de las gelatinas,
a través de una reacción de adición de Michael, modificando el sistema aromático que
presentan en los anillos polifenólicos, uniéndose así a la gelatina y precipitándola (Thomas
& Frieden, 1923; J. Guo et al., 2018)
Reacción de Gignard.
Son compuestos que están formados por una parte orgánica y otra metálica, se preparan a
partir de un halogenuro de alquilo y magnesio en éter o tetrahidrofurano (THF) como
disolvente. La adición de un reactivo de grignard a un nitrilo produce una cetona asimétrica
a través de un intermedio de metaloimina (Herrera, 2003).
RESULTADOS
Tabla 1. Resultados de pruebas fitoquimicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
ALCALOIDES
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR TEÓRICO PRECIPITADO O COLOR
EXPERIMENTAL
Reactivo Dragendorff Precipitado marrón -
Reactivo de Mayer Precipitado blanco o amarillento -
Reactivo de ácido Precipitado blanco amarillento -
Silicotungstico
Reactivo de Sonnenschain Precipitado amarillo o azul verde -
Reactivo de Wagner Precipitado café naranja -
(-) Significa que la prueba dio negativo
Tabla 2. Resultados de pruebas fitoquimicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
FLAVONOIDES
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR TEÓRICO PRECIPITADO O COLOR
EXPERIMENTAL
Reacción de Shinoda
Auronas o chalconas Color rojo -
Adición de Mg flavonas Naranja a rojo -
Flavonoles Coloración roja -
Flavononas Coloración magenta -
Reacción de hidróxido de
sodio al 10%
Xantonas y flavonas Coloración amarillo - rojo -
Flavonoles Coloración café – naranja -
Chalconas Coloración púrpura – rojizo -
Antocianinas Coloración azul -
(-) Significa que la prueba dio negativo
Tabla 3. Resultados de pruebas fitoquímicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
CUMARINAS
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR TEÓRICO PRECIPOTADOO COLOR
EXPERIMENTAL
Reactivo de Erlich Coloracion naranja -
Reacción con hidróxido de Fluorescencia azul-violeta +
amonio
(-) Significa que la prueba dio negativo, (+) significa que la prueba dio positivo
Tabla 4. Resultados de pruebas fitoquímicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
SAPONINAS
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR PRECIPITADO O COLOR
TEÓRICO EXPERIMENTAL
Reacción de Liebermann Buchard
Saponinas esteroidales Coloración azul – verde en la -
interfase
Saponinas triterpenoides Coloración rosa, rojo, -
magenta o violeta
Reacción de Rosenthaler
Saponinas triterpenoide Coloración rosa a violeta +
(-) Significa que la prueba dio negativo, (+) significa que la prueba dio positivo
Tabla 5. Resultados de pruebas fitoquimicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
GLICÓSIDOS CARDIOTÓNICOS
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR PRECIPITADO O COLOR
TEÓRICO EXPERIMENTAL
Prueba de Kedde Coloración azul a violeta -
Prueba de Legal Coloración roja poco estable +
Prueba de Baljet Coloración que varía del -
naranja a rojo oscuro
(-) Significa que la prueba dio negativo, (+) significa que la prueba dio positivo
Tabla 6. Resultados de pruebas fitoquímicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
QUINONAS
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR PRECIPITADO O COLOR
TEÓRICO EXPERIMENTAL
Reacción Hidróxido de amonio
Reacción ácido sulfúrico Coloración roja -
Antraquinonas Coloración roja +
Reacción de Börntraguer
Benzoquinonas Coloración roja +
Derivados de antraquinonas Amarillo-verdosa, adicionar 1 -
gota de peróxido de hidrógeno
al 6% si la coloración pasa a roja
(-) Significa que la prueba dio negativo, (+) significa que la prueba dio positivo
Tabla 7. Resultados de pruebas fitoquímicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
SESQUITERPENLACTONAS
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR PRECIPITADO O COLOR
TEÓRICO EXPERIMENTAL
Reacción de Hidroximato férrico Coloración rojo, violeta o -
rosa se considera positiva
(-) Significa que la prueba dio negativo, (+) significa que la prueba dio positivo
Tabla 8. Resultados de pruebas fitoquimicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
AZÚCARES REDUCTORES
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR PRECIPITADO O COLOR
TEÓRICO EXPERIMENTAL
Prueba de Fehling Coloración naranja a rojo +
ladrillo
Reactivo de Benedict Coloración naranja a rojo +
ladrillo
(+) significa que la prueba dio positivo
Tabla 9. Resultados de pruebas fitoquimicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
TANINOS
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR PRECIPITADO O COLOR
TEÓRICO EXPERIMENTAL
Reactivo de gelatina Precipitado blanco -
Reactivo de cloruro férrico al 1% Azul de Prusia verde -
K3 Fe (CN)4 al 1 % Adicionarle una gota de -
ferricianuro
de potasio al 1%. La
formación de una
coloración azul-verde Verde
fuerte
Compuestos fenólicos
(-) Significa que la prueba dio negativo
Tabla 10. Resultados de pruebas fitoquímicas preliminares con extracto de partes aéreas de cuachalalate.
GLUCOSIDOS CIANOGENÉTICOS
REACTIVO PRECIPITADO O COLOR PRECIPITADO O COLOR
TEÓRICO EXPERIMENTAL
Reacción de Grignard Mancha rosa -
(-) Significa que la prueba dio negativo
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Los alcaloides son sustancias orgánicas nitrogenadas con carácter básico, con una
estructura química compleja que ejercen acciones farmacológicas diversas en pequeñas
dosis y poseen, en general, una marcada toxicidad por lo que su rango terapéutico es muy
estrecho. Los compuestos alcaloides generalmente se encuentran en las plantas en forma
de sales que son solubles en agua o en forma alcalina,por lo que los alcaloides se pueden
extraer utilizando disolventes de agua en condiciones ácidas. (Fransina, E. G.,2019). Los
alcaloides contenidos en el extracto ácido, tienen la capacidad de combinarse con el yodo
y metales pesados como el bismuto , mercurio y tugsteno , para asi formar precipitados
como es el caso de reactivos como el yoduro –yoduro(Reactivo de Wagner), mercurio
tretayoduro de potasio (Reactivo de Mayer) y tretayodo bismuto de potasio (Reactivo de
Dragendorff). (Rodríguez at col, 2016)
De acuerdo a la bibliografia consultada, la Amphiterygium adstringens no tiene presencia
de alcaloides. (Rodriguez,2015). Por tal motivo la pruebas de Dragendorff, Mayer,
Sonnenschain, Wagner y ácido silicotungstico dan negativo, lo cual coincide con lo
reportado en el laboratorio.
Los flavonoides son un grupo de sustancias naturales con estructuras fenólicas variables.,
de estas se atribuye a sus propiedades antioxidantes, antiinflamatorias, anti mutagénicas y
anticancerígenas, junto con su capacidad para modular la función de enzimas celulares
clave. (Panche, 2016). De acuerdo a los resultado proporcionados podemos observar en la
tabla 2, que las pruebas para flavonoides dieron negativo para el extracto de
Amphiterygium adstringen, sin embargo la bibliografía consultada podemos encontrar que
en la prueba de la reacción de Shinoda y Hidróxido de sodio al 10% si dieron positivo.
(Rodríguez, 2015), también se encontró reportado el estudio de flavonoides presentes en
Cuachalalate utilizando el método Dowd que necesita una solución de tricloruro de aluminio
(AlCl3) al 2% en metanol de grado HPLC. Para la identificación de Flavonoides se realizaron
2 pruebas, reacción de shinoda y la reaccion de NaOH al 10% dando ambas negativas, lo
cual refiere la ausencia de estos sin embargo deacuerdo a la bibliografia la Amphiterygium
adstringen presenta flavonoides con prueba de Shinoda muestra presencia de flavonas
(flavonoides). (Rodríguez at col, 2016) y con NaOH 10% xantonas y flavonas realizando
esto por medio de un cromatograma y espectrofotómetro. Las flavonas y flavonoles, forman
complejos coloridos estables (Fig. 00) con el AlCl3, presentan un máximo de absorbancia a
510 nm , por lo que se puede analizar mediante espectrofotometria UV (Martinez Flores ,
Gonzalez Gallego , Culebraas & Tuñón,2002) El que exista una discrepancia entre lo obtenido
en la bibliografía y lo reportado en el laboratorio, puede que esté relacionado a las diferentes
condiciones en la que ambos experimentos se llevaron a cabo, cabe mencionar que en
nuestro caso se ocuparon las partes aéreas de la planta, otro factor a considerar será la
zona geográfica y la estación en la que se cultivo nuestra muestra.
CONCLUSIONES