Génie génétique ‘laigalle dujeotiét est une mal ladie pro aM se (ary earetanes sarees provoqute par EESEITATRCT néldu nom agrobactérium tumefaciens Re a Ea pare en forme de batonnet qui Se'développe dans le'sol ct6ri I Vinfecti eae areas une blessure du végétal pour permettre l'infection , une fois a I'intérieur , elle se fixe sur 8 la suite de ce contact cette bactérie a la capacité d'introduire ou de transférer un fragment d’ADN ( ADN — G'une partie de see ronal quan génome de la plante . elle réalise donc naturellement une transgénése x a la suite de co transfert les cellules véy etal halssance A one toenater es collules végétales se multipliont de manibre importante ot indétinte donnant ih . x les cellules de la galle libérent des opines utilisées par 'AT comme source d'azote , de carbone et d'énergie . x is i pare ee ‘ce mécanisme connu il a été donc rapidement proposé de remplacer I'ADN- T par un autre gone 4 le génie géni étique correspond 4 un ensemble de techniques qul permettent d'isoler un (ou plusieurs ) génes d'intérét et Je transférer dans une cellule receveuse (héte) pour modifier son génome (ADN) . 4 le génie génétique est un outil pour la transformation des organismes vivants . IZ: LES OUTILS DU GENIE GENETIQUE: A= les enzymes de restriction: {des ciseaux moléculaires } * ce sont des enzymes d’origine bactérienne qui permettent de couper I'ADN au niveau de certaines séquences nucléotidiques bien définies . : # suivant "enzyme de restriction , les extrémités ee: co EY ae des fragments obtenus peuvent étre formées de deux brins d'égale longueur appelés «bouts francs » ou présenter un brin plus long que l'autre dans ce cas lextrémité ost dénommée « bouts collants » : ce sont des extrémités simples brins susceptibles de s’apparier avec d’autres simples brins en suivant la regle de complémentarité des bases ce sont des, extrémités cohésives . oni B-VADN ligase : les ligases 1 a = mo Boas # un fragment découpé peut établir des liaisons TGS wt hydroganes avec la séquence de bases complémentaires d'un autre fragment . la soudure définitive des deux fragments est réalisée par une onaugse autre enzyme I'ADN ligase . on fabrique de cette fagon une nouvelle molécule qui est un ADN RE recombinant. ECCT ®> introduction: ‘ilaigalléldulcollét est une maladie provoquée par dhelba jogenaldu n robactérium tumefaciens 1 (AT) caractérisée MMS on = x(AT est une bactérie en forme de batonnet qui Seidéveloppeidansileisol’. x cette bactérie nécessite une blessure du végétal pour permettre infection , une fois a les cellules végétales , a la suite de ce contact cette bactérie a la capacité d’introduire ou de transférer un fragment d’ADN ( ADN-T ) dans le génome de Ia plante . elle réalise donc naturellement une transgénése nt de maniére importante et indéfinie donnant itérieur , elle se fixe sur d’une partie de ses génes . .DOC 1’ x a la suite de ce transfert les cellules végétales se mu naissance a une formation tumorale . x les cellules de la galle libérent des opines ut x une fois ce mécanisme connu il a été donc rapidement proposé de remplacer I'ADN- T par un autre géne ées par AT comme source d’azote , de carbone et d’énergie . dintérét . I - définition: + le génie génétique correspond 4 un ensemble de techniques qui permettent d'isoler un (ou plusieurs ) génes d'intérét et le transférer dans une cellule receveuse (héte) pour modifier son génome (ADN). # le génie génétique est un outil pour la transformation des organismes vivants . II- LES OUTILS DU GENIE GENETIQUE : A-les enzymes de restriction: (des ciseaux moléculaires.@ Gort + F: tel Hine W _, a: Haein oghilas din Buren 3 Rawits $: Pools any Lelcqueacions Wae TM 5 % A Hoa modiilus. Wpae als 4 H “ “ paran Pluenraa. ¥ Ogenene Pre Pare Q gene dateite!] nr ajo A'ebducouts (gene Pomeleur , gene \euninakes @ gone d'adrwbage pehuuctfr O fe G ReCernte clo ABuuypheo. Ae mosage gers sus. OH ed UbBSed Comme Velour Leeeled) lew Aw HOWL qu! aby me Avent ps nek . & & Vdlhode ba + ubliser cb Ulle de So wire _ah tack on Ay Lnquadty 1 Worbqane arb srldedist dons ont Seonde & on dlade Her piece afin Se Sécardalvon kleanl ask onsurk Aovghasle dows Mukzw d'4 Gob ah rosra re dovelsrre? , Ca ate ae ont pA Sle clea, va ea + woh a ANNOY Leannoe'nicuus (Goaris, PAC, mauler ; voohe), % Comened ke \ ain \- w ° y spt Pants age oe om ctrueen ayant 4 dere de weaishena 4 anki ohigus yet poavete. rep fren fe om ln a % von MSP OU? he paca pas fe die x nddome ; Un ent emble cde hs s pRohnenl’ in non Ain de ah gache se deere. é ate aah ee a A Bwer > aden Tam Adssan TYTAA SENc~ A S=/e vecteur : il permet le transfert du géne d’intérét vers la cellule héte- # ily a deux types de vecteurs Oo | x vecteur biologique | x vecteur mécanique | cucermat un transfor biologique ,its'agiten général x i] permet un transfert mécanique : Leh . | csi spams pion | Regan RDN a watt eont po. matériel génétique de certaines bactéries qui est sous | de microbilles , placées dans un ca 1 forme d'une molécule d’ADN de forme circulaire particules et qui sont projetées dans la cellule ‘et qui porte un certain nombre de génes en plus végétale . | du chromosome bactérien qui porte les autres genes . + caractéristiques du plasmide: x il permet le transfert du géne d’intérét vers la cellule iclté de s'incorporer dans des cellules hotes en traversant leur parois . | X.NB : le plasmide est ouvert gréce au méme enzyme de restriction qui a 6t6 utilisé pour couper I'ADN portant le gane d'intérét. | D — /a transcriptase inverse ou rétrotranscriptase : c'est une enzyme qui permet de convertir ARN en ADN, le brin résultant de cette réaction est appelé ADN complémentaire ADNe. II - les étapes de transfert d'un géne (cf DOC 1). IZ- exemples d’application du génie génétique . A- production d'insuline . x DOC2 | x définition de Vinsulin c’est une hormone qui est constituée de deux chaines polypeptidiques la chaine A est constituée de 21 acides aminés et la chaine B est constituée de 30 acides aminés . c’est une hormone protéique secrétée par les cellules B des ilots de langerhans dans le pancréas , elle Serva permet au glucose d’entrer dans les cellules Dees fs Noe ee du corps , c’est une hormone qui permet le maintien de l'équilibre du taux de glucose dans le sang . (c'est une hormone hypoglycémiante ) . * cence col wou nen, inteor ESESe sate x méthode de production d’insuline par g6nle génétique : cf DOC 2cy Je vect, i eur si ? il permet le transfert du gene d'intérét vers Ja cellule héte, 4 ily a deux types de vecteurs --s_h——_ — pt x vecteur biologique | % vecteur mécanique | ¢ il permet un tran: d'un plasmide . + definition du plasmide : c'est une partie du matériel génétique de certaines bactéries qui est sous forme d'une molécule d'ADN de forme circulaire et qui porte un certain nombre de génes en plus du chromosome bactérien qui porte les autres génes . * caractéristiques du plasmide: x il permet le transfert du géne d’intérét vers la cellule cible (héte) . x ila la capacité de s'incorporer dans des cellules hétes en traversant leur parois . NB : le plasmide est ouvert gréce au méme enzyme de restriction qui a été utilisé pour couper I'ADN portant le géne d'intérét. sfert biologique , il s’ lee Peat Sique , Ws'agit en général | y jy permet un transfert mécanique : les fragments d’ADN a transférer sont portés par des microbilles , placées dans un canon a particules et qui sont projetées dans la cellule végétale . D-Ja transcriptase inverse ou rétrotranscriptase :c’est une enzyme qui permet de Ill - les étapes de transfert d’un }gene (cf DOC 1).A pdurles par fan % ds E pach A‘ on Mayen oe Ae 4 \Aee Come Los a Deke th dos ViRus . JON do Cos Anusboc 1 les étapes du transfert d’un gene 80 trouve le geno A ranstéror a a ‘extraction de TAON fl ae AUirarertaton do 1AON K se snzyos do esto Banas ‘orgenisme fournissant lo ve (exemple bactérie fournissant un plasmide ) # incapacité de sécrétion par Exocylose~ obtention du tention du géne Piscustcenencane sore. ous forme purifiée Organismeé dans lequel S@ trouve le géne a transférer "4 ADN, simple brin ff sink r uh a iN fragmentation de VADN i a l'aide d'enzymes de restriction = bh H ilies ites padi a ee a 2 - Insertion du gene | dans un vecteurKUN ( ouverture du v dans un vecteur —— in vecteu organisme fournissant le vecteur (exemple bactérie fournissant un plasmide ) 4- repérage des clones transformé 5 - expressionasrldaccagrobagierium : nw Transfert naturel de genes De lagrobacterium tumefaciens 4 une plante Agrobectertumiumatactans,B= proguciun we rvinwne we erviewenen > l’hormone de croissance est produite par I'hypophyse antérieure humaine - > elle stimule la croissance et la reproduction des cellules chez les humains et les autres vertébrés . > elle est constituée d’une seule chaine polypeptidique de 191 acides aminés - > le transfert de I’hGH se fait selon les étape suivantes : x isolement de l'ARNm qui code pour 'hGH a partir des extraits hypophysaires - x transcription inverse qui permet la synthése de I'ADN complémentaire ( ADNc ) 4 partir de PARNn x synthése de I’ADN ( double brin ) du géne qui code pour I’hGH . x Vinsertion du géne de I’hGH dans un plasmide bactérien ( escherichia coli ) - x introduction du plasmide génétiquement modifié dans la bactérie . x extraction de 'hormone . C - production de protéines toxiques pour Jutter contre les insectes nuisibles_. > effets de /a pyrale sur le mais : 4 Ia pyrale du mais est un insecte dont la larve s'attaque au mais et consomme les tiges et les feuilles , mais les dégats les plus importants se font au niveau des épis . les larves peuvent entrer dans les épis et causer des dégats importants en rongeant les grains , ces épis infestésv de chenilles sont alors impropres a la vente . 4 l'utilisation des insecticides comport divers inconvénients dont 'atteinte d'autres insectes non nuisibles . > production de mais génétiquement modifié : ( DOC 3) # la bactérie bacillus thuringiensis fabrique une protéine inoffensive pour I'Homme , mais toxique pour les chenilles de la pyralo , elle est donc connue pour son activité « insecticide » contre la pyrale . 4 le géne responsable de cette propriété peut étre transféré dans les cellules de mais . ces cellules , aprés culture , produiront des plants entiers résistants a la pyrale . Iselor ot multiptior Tagine cert AON lagen ¢ADN cans nett aqua a Gore ae nsed augue pour lestnsacos cele vow are cora's Produlre ‘organo gdquement Régénérer modi Fergani sib caractéristiques des mais génétiquement modit les chenilles ayant consomé les épis de mals du systéme digestif , cessent de s’alimenter et meurent anIdentifie fea nuit Transté , Isoler et multiplier ransterer un géne d’intérét-chez \ pie fe gone diintérét.chez je géne diintérét , un organisme. donneur un:organisme-receveur / bactérle (Bacillus. thuringiensis) fragmont-d'ADN dans. gana permettaht de lequel lo.gene-a 416 Inséré produire une substance ‘oxique'pour.les Insecles - de mais Produire ganisme génétiquement Régénérer modifié lorganisme modifié : i | Sdlectionner? les cellules, tra is6r ? ey plants de mats résistants ala pyrale