HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE | eee UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO re | 24-06-2019 emis SECCION INMUNOLOGIA Exicion: 2 Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE. vigencia:_| 24-05-2028 ucmenseince ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | pagina t de 14 1. OBJETIVO Documentar el procedimiento para la determinaci6n cualitativa de anticuerpos anti ENA-S de tipo IgG. anticuerpos anti Trypanosoma cruzi (enfermedad de Chagas) de tipo IgG, y anticuerpos anti Hantavirus de tipo IgM; y para la determinacién cuantitativa de anticuerpos anti ENA-Pro y anticuerpos anti CCP de tipo IgG. 2. CAMPO DE APLICACION Y ALCANCE Muestras de suero de pacientes adultos y pedidtricos provenientes de los Servicios Clinicos y Policlinicos de! HGGB y de Establecimientos de la Red del Servicio Salud Concepcién y Arauco, 3. FUNDAMENTO La tecnica ELISA en fase sdlida permite la deteccién cualitativa o cuantitativa de anticuerpos especificos. Las muestras de suero diluidas se incuban en una microplaca que contiene los antigenos especificos de cada estudio altamente inmunogénicos adheridos en su superficie. Si los anticuerpos estn presentes en las muestras de los pacientes, se uniran al antigeno y formaran un complejo antigeno-anticuerpo estable. Durante la incubacién con el conjugado, los anticuerpos anti IgG o IgM humana marcados con peroxidasa se uniran al complejo formado. En la etapa de adicion del sustrato cromogénico, la peroxidasa unida al complejo producira una coloracién que permitiré detectar las muestras reactivas. La reaccién enzimética se detendra por la adicién de Acido sulfarico, midiéndose luego la intensidad del color en un lector colorimétrico para placas de ELISA. 4, REFERENCIAS NORMATIVAS 4.1. Gula de Diagnéstico, Tratamiento y Prevencion de la Enfermedad de Chagas (Febrero 2011). Ministerio de Salud Publica, Departamento de Enfermedades Transmisibles, p 19 - 22. 4.2, Gula Clinica de Prevencién, Diagnéstico y Manejo de Sindrome Cardiopulmonar por Hantavirus Resolucion exenta N° 881. 2013, 4.3. Vigilancia y control de la infeccién por Hantavirus. Circular B51/24, 10 de Julio 2012, 4.4, Transferencia técnica de ELISA para virus Hanta en HGGB. Ordinario ISP. N° 868 del 14 de Febrero de 2012, 5. TERMINOS Y DEFINICIONES 5.1. U/mL: Unidades arbitrarias por milltro de muestra. 52. CCP: Péptidos Ciclicos Citrulinados, 5.3. .0.: Densidad optica 5.4. ELISA: Ensayo por Inmunoadsorcién Ligado a Enzimas, 5.5. ENA: Antigenos Nucleares Extraibles 86. ENA-S: ENA Screening. Deteccién simultanea de a Encargada Bioseguricad Laboratorio Cinico Lebpratonid inico HOGS. Fecha: 26.05.2019 Fecha: 2008-2019 Fecha: 24.06-2019 JHOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE Chaos" | APLERAY O08. UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Focha | 2405-2018 SECCION INMUNOLOGIA meal Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigenea: | 2405-2028 noes ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | pagina 20 14 5.12, 5.13. ENA-Pro: ENA Perfil, Deteccién diferencial de anticuerpos Ro, La, Sm, Rap, Jo-1 y Scl-70. Inmunoglobulina G. IgM: Inmunoglobulina M. NaCl: Cloruro de Sodio. Te: Temperatura ‘TMB: 3,3',5,5'-Tetrametilbencidina 6. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS: 61 62 63. MATERIALES, 6.1.1. Bidones plasticos de soluciones, 6.1.2. Frascos plasticos de reactivos 6.1.3, Placa de microtitulacién con antigenos especificos 6.1.4. Pocillos de microtitulacién lavados. 6.1.5. Porta placas, 6.1.6. Puntas para reactivo (Equipo Triturus) 6.1.7. Soporte de micropiacas. 6.1.8. Tubos de Kahn plasticos de 5 ml. REACTIVOS 6.2.1. Agua destilada. 6.2.2. Calibrador (excepto para Chagas). 6.2.3. Control Negativo. 6.2.4. Control Positivo, 6.2.5. Conjugado. 626. Diluyente de muestra. 627. Solucién buffer de lavado. 6.2.8. Solucion de detencién (HzSOs 3N) 6.2.9. Sustrato (TMB/perdxido de hidrégeno). 6.2.10. Suero fisioligico (NaCI 0,9%) Nota: Los reactivos (a excepcién del Agua destilada y e! Suero fisiolégico) deben estar almacenados 2-8 °C y deben ser puestos a temperatura ambiente para su uso. EQuiPos 6.3.1. Equipo automatizado Triturus, 7. DESARROLLO 7A. 72. 73. El proceso debe cumplir con los requerimientos de bioseguridad del laboratorio, indicados en el Manual de Bioseguridad (APL-MB-DT-02). Los requerimientos de la muestra estan especificados en el Manual de Toma de Muestra (MA-APL-HGGB- va). ETAPA PRE-ANALITICA, 7.3.1. Las muestras son recepcionadas, preparadas y registradas en la Planilla de Trabajo Diario (APL- RG-IN-001) segun lo indicado en instructivo APL-IT-IN-001 7.3.2. Encender el autoanalizador Triturus con el interruptor ubicado en la cara derecha del equipo. Debe estar encendida la luz ON" de la parte frontal del equipo. 7.3.3. Abrirel software del autoanalizador Triturus ubicado en el computador correspondiente del equipo. 7.3.4. Realizar mantencién diaria al equipo segun APL-IT-IN-002.rT HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE Side | ees UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO rere a. | 2405-2010 SECCION INMUNOLOGIA. eee Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE | vigencia:_| 2408-2024 ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | pagina se 14 74, 78, 7.35 Seleccionar las muestras de la Planilla de Trabajo Diario segun la(s) prueba(s) a realizar. Nota: Para ENA-Pro se puede cargar un minimo de 4 muestras y un maximo de 8. CARGA DE LISTA DE TRABAJO PARA CCP, CHAGAS, ENA-S Y HANTA. 74 7.42 7.43 744. TAS. 7.46 747. 74a ‘Abrir la “Interfaz Triturus” ubicada en el computador correspondiente, En la ventana de la interfaz hacer clic en el icono “Limpiar Pantalla’. Hacer clic en la pestatia ‘Pacientes" y Iuego en el recuadro que dice "Numero" Ingresar los codigos de barra de las muestras a analizar ayudandose con la pistola léser conectada al computador. Verificar que todas las muestras estén ingresadas y que se encuentren seleccionadas (fondo verde). De no ser asi, hacer clic en el icono "Seleccionar Todos’ Si la muestra no se ingresa al pistolear, se debe proceder de acuerdo al ANEXO 1 Iniciar una nueva "Hoja de Trabajo” en el software del autoanalizador Triturus haciendo clic en el primer icono del sector superior izquierdo de la pantalla (el detalle de los botones e iconos se puede visualizar en el ANEXO 2), En la nueva ventana hacer clic en “Host” para transmitr las pruebas a procesar. Se abriré una nueva ventana con el nombre *Calibradores y Controles’. Veriicar que los valores de referencia de cada prueba sean los correspondientes (APL-IT-IN-009). Hacer clic en “Aceptar’ Verificar que el numero de muestras cargadas sea el mismo que las muestras pistoleadas y que las pruebas seleccionadas correspondan con cada muestra. Si alguna prueba que se haya cargado no se va realizar, hacer clic con el botén derecho del mause y seleccionar ‘Eliminer’ Nota: * Enel caso de Hanta se cargan les pruebas HANTA y HANTA-P de forma automatica al transmitir con la Interfaz Triturus. La prueba HANTA-P se debe eliminar. * Enel caso de Chagas se debe cargar adicionalmente un control de tercera opinion de ‘acuerdo a lo sefialado en APL-IT-IN-009 Luego hacer clic en “Siguiente CARGA DE LISTA DE TRABAJO PARA ENA-PRO. TSA 78.2. 7.53. 754. 755. 756. 7.87. 758. ‘Abrir la “Interfaz Triturus” ubicada en el computador correspondiente Seleccionar el icono Triturus. Hacer clic en el icono Hoja de Trabajo (sector superior izquierdo de la pantalla) En el mensaje desplegado, seleccionar la opcién Manual. Digitar el total de muestras a analizar. En el sector de Identificacion de muestras, aparecerd a la izquierda el numero 1 y en el espacio a la derecha, debe digitar el numero interno asociado a la primera muestra. A continuacién apretar ‘el botén Enter y seguir digitando las muestras una a una. Una vez que haya digitado la Ultima muestra, presionar Aceptar, en la misma ventana de dialogo Desde el Ment de técnicas y perfiles, situado a la izquierda de la pantalla seleccionar una prueba Por muestra en orden numérico partiendo de la “01 A ENA-Pro”. Si se cargan mas de cuatro muestras, la quinta muestra corresponderé a la prueba “01 A ENA-Pro"; la sexta, a la prueba “02 B ENA-Pro”; y asi sucesivamente hasta la octava muestra, Cada prueba corresponde a un calibradorHOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE coe een eee UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Eaieen: | 2405-2019 SECCION INMUNOLOGIA, eaaeerila Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigencia: | 2405-2026 swaeanes | ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | pagina 4e 14 Nombre prueba | Calibrador O1AENAPro Cala 02 B ENAPro Cale, 03. C ENA-Pro Calc 04 D ENA-Pro Calb 7.8.9, Seleccionar la prueba arrastrandola con el Mouse hacia la hoja de trabajo, debejo de la frase Introduccion de Muestras. Apretar Aceptar. 7.6.10. En la hoja de trabajo seleccione un casillero destinado @ cada muestra con la prueba respectiva. La configuracién por defecto del equipo para ENA-Pro realiza un analisis en sextuplicado de cada muestra. Ne Muestras 7.5.11. Dar clic en “Siguiente” y continuar en el punto 7.6 7.8. CARGA DE REACTIVOS Y MUESTRAS. 7.6.1 7.8.2. 763. 78.4. 785. 786. Sacar los reactivos a utilizar almacenados @ 2-8 °C con unos 10 minutos de anticipacién para ‘asegurarse de que alcancen temperatura ambiente. ‘Abrir la puerta izquierda del equipo presionando el botn correspondiente en la parte frontal CCargar frasco de diluyente y tubos controles requeridos en la zona interna del carrusel principal. Para faciltr la carga, seguir el esquema en la pantalla del software del autoanalizador Triturus que indica con colores la cistribucién correcta para cada reactivo (ANEXO 3) Verificar que los volimenes de cada solucién cumplan con el requerimiento indicado, De ser necesario, preparar soluciones de acuerdo a ANEXO 4. Cargar los tubos de pre-diucion en zona media y las muestras en zona externa del carrusel principal. Verificar en pantalla el nuimero y posicion de cada tubo, Abril Cajon de Reactves ubicado en la parte frontal presionando el botén correspondiente.HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE Se eee UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Fee | 24062019 p emision SECCION INMUNOLOGIA Esicisn: | 2 Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigencia:_| #052024 wscwemens | ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | pagina 5014 7.6.7. Cargar los frascos de conjugado, sustrato y solucién de detencién, en la parte central del Cajon de 788 768, 7.6.10, 76.11 76.12 7.6.13, 76.14, 76.15, Reactivos. Verificar la posicion de cada reactivo en pantalla y que los volmenes cumplan el requerimiento que se indica, de no ser asi rellenar los frascos con las soluciones correspondientes, ‘Asegurarse que todas las puntas de reactivos estén colocadas en la primera seccion del Cajon de Reactivos. Cerrar el cajén. En una microplaca vacia colocar la cantidad de pocillos indicados en el software. Si faltan pocillos ara completar la columna, se deben agregar pocillos limpios previamente utlizados que se encuentran en el cajén de insumos Triturus. Los pocillos se llenan comenzando por la posicién A1 y se continda hacia abajo hasta completar la columna (A1, B1, C1....}1). Insertar la microplaca en el soporte en el lado correspondiente: MIGROPLACA ‘© Pocillos sensibilizados con el antigeno. ‘© Pocillos limpios para completar columna. ‘SOPORTE MICROPLACA Colocar el soporte con la microplaca en la bandeja ubicada sobre el carrusel principal a mano derecha. Asegurarse que la posicién A1 se encuentre al extremo superior derecho de la bandeja, Cerrar la puerta izquierda, Comprobar que los bidones de soluciones estén limpios, llenar con las soluciones correspondientes y asegurarse de que cumplan con el volumen indicado. De ser necesario, preparar soluciones de ‘acuerdo a ANEXO 4. Asegurarse de que los bidones estén correctamente ubicados en la parte inferior del equipo, y que estén bien cerrados y conectados a las mangueras correspondientes, Vaciar el bidén de desechos y volver a conectarlo al equipo. Hacer clic en “Iniciar” Una vez iniciada la serie programada, aparecera la ventana "Hoja de Estado"HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE Sa ee UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Fecna | 24-06-2019 SECCION INMUNOLOGIA cae ie | = a Fecha | 24.05.2024 PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE wgena |_ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | pagina sae 14 7.7. VALIDACION DE RESULTADOS DE CCP, CHAGAS, ENA-S Y HANTA. 774 772 773, 774 775 776 777. Una vez finalizado el proceso, dar clic en el boton de la parte derecha para acceder a la “Hoja de Resultados’. Hacer clic en Parametros de cada técnica Hacer clic en imprimir El equipo preguntara si esta seguro de imprimir, hacer clic no, Validar los controles de acuerdo a lo sefialado en el APL-IT-IN-009, Cerrar la ventana del documento y dar clic en “Validar” para transmitir los resultados al LIS. Los resultados cualitativos (Chagas, ENA-S y Hanta) son transmitidos como “Positivo’ o "Negative", mientras que los resultados cuantitativos (CCP) son transmitides con su valor correspondiente en AUrmL. Validar en LIS de acuerdo a lo sefialado en el ANEXO 5, 7.8. VALIDACION DE RESULTADOS DE ENA-PRO. 78.1 7.82 783. 784, 785. 7.86. Una vez finalizado el proceso, dar clic en el botén de la parte derecha para acceder a k Resultados’ Hacer clic en Editar D.O.. Se abrira una nueva ventana con los valores de las D.O. de cada pocillo, Imprimir documento, Los valores de las D.O. se deben registrar en el APL-RG-IN-002 como se indica en el ANEXO 6, Comparar los resultados con los histéricos de los pacientes y cuando se requiera comparar resultados con los anticuerpos antinucleocitoplasmaticos (ANA). Validar en LIS de acuerdo a lo sefialado en el ANEXO 5. Hoja de 7.9. FIN DEL TRABAJO DIARIO 7.9.4 7.92 7.93 7.9.4 795 796 Descargar controles, calibradores y reactivos del equipo. Almacenarlos a 2-8 °C en sus cajas segiin corresponda Eliminar placa con muestras procesadas ubicada en la puerta derecha del equipo, Retirar bidon de solucién buffer de lavado correspondiente, Vaciar solucion en frasco correspondiente y lavar bidén con agua destilada. Hacer clic en Otros y seleccionar la Lavado del Circuito Hidraulico. Una vez finalizado el praceso, retirar y vaciar el bidén de residuos. Volver a colocar el residuo en su lugar. Cerrar la el software del autoanalizador Triturus y apagar el equipo. 8. RESPONSABLES DE SU APLICACION. 8.1. Profesional bioquimico quien realiza la actividad y la validacién de los examenes. 9. RESPONSABLES DE LA SUPERVISION. 9.1. Profesional bioquimico encargado de Seccién de Inmunologia 9.2. Encargada de Calidad y Bioseguridad 10.DISTRIBUCION 10.1. Seccién Inmunologia 10.2. Director técnico del Laboratorio Clinico.HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE. oe _| Mere | UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Fechs | 205200 | SECCION INMUNOLOGIA mae Te | — Fecna PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigencia:_| #4062024 wsouteanss | ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | picina 70e 14 11,DOCUMENTOS ASOCIADOS N° Registro Identificacion Ubicacion | yng Pe onto APL-MB-DT-02 Manual de Bioseguridad Laboratorio Clinico 5 afios MA-APL-HGGB-V3 Manual de Toma de Muestra Laboratorio Ciinico 8 afos Instructivo de Recepcisn, Registro y APLAT-IN-001 Preparacion de Muestras para ExAmenes Inmunologia 5 afios | de Inmunologia APL TAN? Tnsiructivo Mantencion Autoanalizador inane eas Triturus Instructivo Control de Calidad Interno para APL-IT-IN-008 | la Deteccién de Anticuerpos por ELISA Inmunologia 8 afios Triturus APL-RG-IN-001 Pianilla de Trabajo Diario Inmunologia 8 afos 12.TABLAS DE MODIFICACIONES Nv Pag. Nombre Edicion Modificada Motive de cambio, Responsable Fecha 1 Todas ‘Actualizacion documento BQ. Roberto Vega | 23-05-2016 Actualizacién por incorporacién de 2 Todas ‘Ac. Anti CGP por cambio de BQ. Manuel Cari6n | 24-05-2019 | meiodologia. 13.ANEXOS- 13.1. ANEXO 1: Diagrama para el ingreso de muestras en Interfaz Triturus 13.2. ANEXO 2: loonos y botones del Autoanalizador Triturus 13.3. ANEXO 3: Esquema de carga de muestras y reactivos. 13.4, ANEXO 4: Preparacién de soluciones para pruebas realizadas en Autoanalizador Triturus. 13.5. ANEXO 5: Diagrams para la validacion de resultados del Autoanalizador Triturus. 136. ANEXO 6: Calculo de concentraciones de ENA-Pro para su validacion,HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE, ee ee UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO reere | 24052019 SECCION INMUNOLOGIA eiaecla ae Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigenci: | 4052008 | sasstsaass | ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | pigina eae 14 ANEXO 1: DIAGRAMA PARA EL INGRESO DE MUESTRAS EN INTERFAZ TRITURUS. Pistolear muestra en Interfaz Triturus Continuar con la siguiente muestra Lingresada en lista GE! paciente ya esta de trabajo? Ingresado en interfaz? Procesar muestra ya Ingresada st Gl examen esta Ingresar examen Ingresado en LabCore? correspondiente Posible error en la interfaz. Informar a encargado & Ingresar manualmente las muestras, Trackear muestra en julo TrackingHOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE — eee UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO 24-05-2019, SECCION INMUNOLOGIA aaa Edicin [2 Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigencia:_| 24-06-2004 eoarenocuveo ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS pagina 9 ue 14 ANEXO 2: ICONOS Y BOTONES DEL AUTOANALIZADOR TRITURUS. Icono/Botén | Indicador de encendido. Abrir la Puerta Izquierda ubicada en la parte frontal del equipo. Abrir el Cajén de Reactivos ubicado en la parte frontal del equipo. Introducci6n de muestra Hoja de Trabajo: Para la introduccion de una nueva serie de trabajo, Programacién de técnicas y perfile. Hoja de resultados: Para visualizar resultados de series anteriores. Control de Calidad: Para acceder a los informes de Control de Calidad Botén de parada Dilucién de muestra (Hoja de estado) Dispensacion de muestra (Hoja de estado), Incubacién (Hoja de estado). Lavado de los pocillos (Hoja de estado). | Dispensacién de conjugado, substrato o solucién stop (Hoja de estado). | Lectura de la placa (Hoja de estado) 8/4/4e/e \|\\ OR eS OS BER ‘Acceso a la Hoja de Resultados (Hoja de estado),HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE Se) eee UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Farge: | 2405-2018 SECCION INMUNOLOGIA Eden: [2 Fede 24-08-2024 PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigencia: E. acme ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | Pagina 10 de 14 ANEXO 3: ESQUEMA DE CARGA DE MUESTRAS Y REACTIVOS. CCarruso interior: Diuyente, controes y caibradores Carnusel medio: Tubos de pre-diucién Carrusel exterior: tubes de muesiras, Pits a unizar | © (cobreados) ° rrrryyrrs Prey yy TTF eoccocoom TTT ITT Tubos de aiuoian Indicadores de voluen de bufers ‘Amato indica lumen roquerce baj. Cayin de reactves (eonjugedo, Substrate y scucién stop)HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE eee ee UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Faiten: | 2406-20109 SECCION INMUNOLOGIA. Evicion; | 2 Feone PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigenea: | 2405-2024 anon nee ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS pagina 11 de 14 ANEXO 4: PREPARACION DE SOLUCIONES PARA PRUEBAS REALIZADAS EN AUTOANALIZADOR TRITURUS. cop 20 mL WB Aesku 20 mL SB ENAS + * ENAP 980 mL agua destilada 80 mL agua destilada 40 mL WB Chagas cass “3 No aplica 960 ml agua destilada Calentar WB Hanta a 37 °C por 15 minutos antes de divir HANTA Bye Wetuce No aplica + 450 mL agua destilada‘SECCION INMUNOLOGIA or Eicon: [2 Fecna HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE, Gixtge: | PL Pruteoos UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Fecna | 24.05.2019 | 4. PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigenca:_| 24952004 ena aie ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS Pagina 12.0 14 ANEXO 5: DIAGRAMA PARA LA VALIDACION DE RESULTADOS DEL AUTOANALIZADOR TRITURUS. Tipe de resultado? Galtatve Lf i L i Co) (amo (eas) (Gon) c=) (ares) fren) (Remine) (Creative) (Repo) (Cratno) (Rezane roi iran Vera PER Warn Weller on btsHOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE —_| 92899._| APL-PR:N-G05 UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO ceian: | 2405-2019 SECCION INMUNOLOGIA. cals Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE pee ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS | pagina 13 4214 ‘ANEXO 6: CALCULO DE CONCENTRACIONES DE ENA-PRO PARA SU VALIDACION. 1. Eldocumento impreso tendré el formato de placa como el siguiente: Notas: Gheaes [Ganahe [scare [uonAre [CARA [Gear [wenn [WDRARE A 2 ao . 6 7 © aL 20%, Goin | Bon | 008 | 00am | 00a | 80m & | 002, 00% | 00%» | 00% | 00% | 00% | OO [Rom Rois | Ru [POs | Am | Rw | Row os Wo us os aw Yaw a ry Sis [SMe [Ss | Saw |My | 7 | SMA SNP | SWAP | SAAN | SAURNPa | SHIRWF i [SURO sev, SEL us [SEE [SEM | SEEM | SFO | SETI * Lu Wo [Om [10m | Om | in 10 * Elnimero de columnas (1 a 8) dependerd del ntimero de muestra que se hayan procesado. * Los valores DO sefialados en las filas A y B corresponden a los DO calculados para los calibradores correspondientes. * Los valores DO seffalados en las filas C a H corresponden a los DO calculados para las muestras correspondientes (M1 a M8). 2. Los valores obtenidos se deben registrar en el documento APL-RG-IN-002 REGISTRO CALCULO ENA PERFIL, ubicado en la ventana Escritorio del computador de la seccién de inmunologia, como se indica a continuacién: a. Enla primera tabla se deben registrar los valores obtenidos para los calibradores de acuerdo a las posiciones que se indican a continuacién: CONE CAL ‘BO3___B64 PROM o Al 61 A585 PO 10 2 82 AB BPI 30 Cn a a ee) foo As bs P00 cAaL30_cAL100 PENDIENTE 730 ‘100 IMTERCEPTO 30 100, ». Los promedios (PROM) de los calibradores (PO, P10, P30 y P00), se calculan de forma automatica aliringresando los valores de las DO correspondientes. ©. Con los valores ingresados se obtienen dos ecuaciones de la recta con el iiltimo y peniitimo calibrador respectivamente (CAL30 y CAL100). Donde m30 y m100 corresponden a las pendientes; y donde y30 e y100 corresponden a los interceptos.HOSPITAL GUILLERMO GRANT BENAVENTE i etal Nona tecs UNIDAD DE LABORATORIO CLINICO Cain: | 2406-2018 SECCION INMUNOLOGIA mame |e 7 Fecha PROCEDIMIENTO PARA DETECCION DE vigencia:_| 24-05-2024 ANTICUERPOS POR ELISA EN EQUIPO TRITURUS _| picina 14 e 14 d Enla siguiente tabla se deben registrar los valores de las DO obtenidas para cada antigeno especifico (RO, LA, SM, SIM/RNP, SCL-70 y JO) de acuerdo a las muestras correspondientes como se indica a oH a 1. ae PERAL DOT CONC [OO] CONC | DO] CONS [BO] conc RO ct [RO [cz [Oke | C3 | tome | C4 | TROk ta Di tas foe | ae | 03 | tae [04 [tas st Et | tet | €2 | iSite | €3 [tsi | €4 | Sts SWURNP 1 [ISWANPhal F2_[ISWANPha| —F2_[ISWRNPhal Fé _[ISWRNPHa SCL.70 Gt | ISCL-7O}.4] G2 |{SCL-70he| G3 _|{SCL-7Ons] G4 | [SCL-7Oh [so Ht | Woh [He | woke [Ha | Boke [He | Wok Rue TRAP TRAP TRAP RNP TS Te oe PERAL DOT CONS [DOT CONC [DO BO_[_CONE. [Ro 5 | tROws [C5 | IROke | C7 8 | [Oke La. 0s | wake [08 | Was | 07 Da] Ab sue 5 | (SMe | €6 | (Ske | €7 | (Suhr | €8 | (Sts [sum FS |ISWRNPha| FS [ISWRNPhe|_F7_[ISWRNPIo| FO _[ISWRNPH| [ScL70 G5 | {SCL-7Ohs] GB | ISCL70n6] G7 [ISCL-TOkn| G2] [SCL-7Oh| sO HS | Won [He | woke [OH7 | Whe [He | Woke [ene RNP RNP i TRiPhe En la columna CONC se calcula de forma automatica los valores de las concentraciones obtenidos para cada antigeno de acuerdo a la siguiente formula: D.0.~ y30 D.0.— y100 CSC) CONE (2) con m0 Nota: Sel valor de la D.O. obtenida en las lecturas se encuentra por debajo del promedio obtenido para el calibrador 100 (D.0. < P100) se debe utilizar la primera ecuacién, de lo contario se debe ocupar la segunda ecuacién para el célculo de las concentraciones correspondientes. El valor de la concentracién del antigeno RNP se calcula restando la concentracién de SM a la concentracién calculada para SM/RNP (RNP] = [SM/RNP} — [SM] 3. Las concentraciones calculadas para cada antigeno se deben traspasar de forma manual al LabCore. 4. Seguir con el punto 7.8.6.