!

Chapitre!3!
)
)
I. azote
I.1.
I.2 Absorption des nitrates
I.3
I.4 Assimilatio
I.5

II. Assimilation du Soufre

II.1 Absorption et transport des sulfates
II.2 Réduction des sulfates
II.3 Relations nutrition azotée et soufrée
II.4 Interactions nutrition soufrée et certains oligoéléments

!
Nutrition(minérale(des(plantes(((((((((((((((((((((((((((((((((((((((((((((((A.(Hafidi((a.hafidi@ucam.ac.ma)(
!

I.

ote est un élément constitutifs de

!
particulièrement pour les plantes (protéines, bases nucléotidiques, vitamines,
veloppement des plantes
est essentiellement absorbé sous deux formes minérales : nitrate (NO3-) et ammonium
(NH4+
protéines, des acides nucléiques, et autres molécules azotées. Si la teneur en azote des

: Combien exactement ?

Tableau 4 s azotés chez les plantes

Concentration
Composés
(µg/g MS)
Protéines 85 10 000 à 40 000
Acides nucléiques 5 1000 à 3000
Autres substances organiques solubles <5 1000 à 3000
Nitrate <1 10 à 5000
Ammonium <0,1 1 à 40

Tableau 5 : Concentrations en azote dans différents organes de la plante

Concentration Intervalle Optimum
Organes
en azote (% MS)

Chapitre!3!:!
Feuilles 1à6 >3
Tiges 1à4 >2
Racines 1à3 >1
Fruits 1à6 >3
Graines 1à7 >2

I.1
Dans la nature
2

ammoniacal (sous f -) et nitrique

! 26!
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!

(nitrates, NO3- : acides

es, les nitrites

rapidement oxydés en nitrates. Le nitrate est un composé thermodynamiquement stable

égative. Il est

zote!et!du!soufre!
élément peut être stocké au niveau des vacuoles. Les ions ammonium peuvent se fixer
la nutrition azotée des

? à calculer
Leurs teneurs sont également très faibles au niveau du sol et ne dépassent jamais
quelques kilogrammes par hectare. Ils sont également oxydés rapidement en nitrates
(nitrification).

Cette teneur peut

varier largement en fonction des sols et des conditions environnementales. La grande

minéralisation.

Chapitre!3!:!

Fig. 12

! 27!
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!

I.1.1
2) en azote
organique. Cette transformation est réalisée par des microorganismes du sol. on

(Azotobacter sp., Beijrinkia sp.) ou anaérobies (Clostridium sp.), des algues bleues
mbiose

!
légumineuses et bactéries du genre Rhizobium
un actinomycète du genre Frankia.

libre sont estimées entre 10 et 30 Kg/Ha/an.

Les quant
variables en fonction des conditions du milieu. Elles varient entre quelques
dizaines à quelques centaines de kilogrammes par hectare et par an.

I.1.2
Elle correspond à la dégradation de la matière organique du sol pour aboutir à des

en deux étapes
microflore très diversifiée (bactéries et
champignons). La nitrification est réalisée en deux étapes : la nitritation et la

bactéries du genre Nitrosomonas. Le nitrite est transformé en nitrate par la nitratation

réalisée par des bactéries du genre Nitrobacter.

I.1.3 Les pertes

: Chapitre!3!:!
La dénitrification

ne nécessite pas de microflore spécifique. La réduction des nitrites en azote gazeux

(N2O puis N2) se fait par des microrganismes du genre Pseudomonas et Agrobactérium
très abondant dans le sol. Ces bactéries aérobies facultatives peuvent utiliser NO2- en
<
2

(3kg.N ha-1.jour-1 !! solution = labour).

! 28!
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La volatilisation
:

NH4+ (fixé) NH4+(solution) NH3(solution) NH3(gazeux)

! Ce phénomène est variable en fonction des caractéristiques du sol (pH, CEC,

ions climatiques (précipitations, température, vitesse du

!
par temps chaud et humide.
Les pertes par les eaux : les nitrates, nitrites ne sont pas fixés par les sols et
sont entrainés par les eaux de surface par ruissellement et aussi vers la nappe
phréatique par lixiviation.

I.2 Absorption des nitrates

La plupart des espèces de plantes sont capables d'absorber et d'assimiler le nitrate,
des aminés comme sources d'azote. Toutefois, la réponse à

croissance optimale des racines de la tomate est obtenue avec un taux de nitrate et
d'ammonium de 3:1 k elle est inhibée si la concentration d'ammonium est trop élevée. En
général, la plupart des plantes cultivées préfèrent un mélange de sels d'ammonium et de

comparativement à celle présent dans la solution du sol. Les nitrates non immédiatement
réduits en ammonium sont généralement stockés dans les vacuoles. Les concentrations
dans le cytoplasme dépassent rarement 10 mM alors que dans les vacuoles ces
concentrations peuvent atteindre 100 mM. Les concentrations cytoplasmiques en
nitrates sont gardées assez constantes et restent indépendantes des concentrations du

Chapitre!3!:!
le xylème. Le mécanisme de transfert à travers le tonoplaste implique un cotransport
-
3 est transféré dans la vacuole en antiport avec un proton H+.

Dans la solution du sol, le nitrate est transporté vers la racine par le mouvement
s cellules de l'épiderme et du cortex. Une
fois dans les cellules le nitrate peut suivre différentes voies (Fig. 13).
En arrivant à la surface de la racine, l'absorption de nitrates dans les cellules demande
de l'énergie, même lorsque la concentration en NO3- extér .
NO3-, il semble
exister un important efflux passif de NO3- à travers la membrane plasmique. Toutefois,
iquées dans cet efflux.

! 29!
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!
Fig. 13 : Devenir du nitrate dans la cellule
(1) réduction, (2) (3) stockage,
(4) efflux symplasmique de cellule à cellule vers le xylème.

L'énergie nécessaire pour l'absorption des ions nitrates est fournie par le
gradient de protons, En outre, l'absorption de NO3- est associée à la dépolarisation de la
membrane plasmique (soit une augmentation de la charge positive à l'intérieur de la
cellule). En tenant compte à la fois de la dépolarisation de la membrane et du couplage
-
3 se fait

Chapitre!3!:!
+
avec 2H par un mécanisme de symport aussi bien pour les transporteurs haute et basse
affinité.

Les cellules racinaires possèdent au moins trois types de transporteurs de

(constitutive High Affinity Transport
System) qui sont caractérisés par de faibles valeurs de Km et de Vmax (6 20 µM et 0.3
0.82 µmol g-1.h-1 (Inducible High Affinity Transporter System) (iHATS)
avec un Km et Vmax plus élevés (20 100 µM et 3 8 µmol.g-1.h-1) et les transporteurs

significative à l'absorption de nitrates à des concentrations en nitrates supérieures à

250 mM.

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!
Fig. 14 : Absorption du nitrate chez Arabidopsis.

point de vue structural et génétique deux grandes familles de transporteurs

ont été caractérisés pour les nitrates (NTR1 et NTR2). Les transporteurs NTR2 sont
e
transporteurs AtNRT1.1 possédant les propriétés des deux à la fois (HATS et LATS)
(Fig. 14).

I.3
Malgré que les concentrations en ammonium dans les sols agricoles soient 10 à
100 fois inférieures à celles des nitrates, cette différence de concentration ne reflète

arativement au nitrate. Toutefois,

Chapitre!3!:!
une nutrition azotée exclusivement ammoniacale provoque une réduction de la croissance
et du développement des plantes. La croissance optimale des plantes nécessite souvent
pport en nitrate retrouve son

ion pour la translocation des cations dans le xylème.

AMT. Des transporteurs hautes et faible affinité semblent être impliqués dans

basse affinité. Ces derniers semblent être de nature constitutive. Le flux net
les cellules est la résultante entre un flux brute

! 31!
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!

être ré

transpo

t!du!soufre!
Fig. 15 : A
et son accumulation dans la vacuole.

I.4
I.4.1 Assimilation des nitrates

être stocké dans les vacuoles. Son assimilation commence par sa réduction en ammonium.

Chapitre!3!:!
La nitrate réductase et la nitrite réductase sont les deux enzymes impliquées dans
cette transformation. La nitrate réductase est une enzyme cytoplasmique qui convertit
le nitrate en nitrite. La nitrite réductase est localisée dans les chloroplastes des tissus
chlorophylliens et dans les plastes
ce niveau que le nitrite est réduit à son tour en ammonium. Le transfert de deux

NADH, NADPH. Le NADH et NADPH proviennent de la chaine respiratoire, surtout au

niveau des racines. La photosynthèse peut en être également la source dans les feuilles.

! 32!
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!

!
I.4.2 La nitrate réductase
La nitrate réductase (NR) requiert le molybdène en tant que cofacteur. Un
!
Current Opinion in Plant Biology 2009, 12:250 258

Fig. 16 !

La nitrate réductase des plantes supérieures est composée de deux sous unités
identiques contenant chacune 3 groupements prosthétiques (FAD, Heme, Complexe
pterine-Mo). La NR est la principale protéine renfermant

réductase.

nitrates. Dans les plantules de l

Chapitre!3!:!
minutes après addition des nitrates et atteignent leurs concentrations maximales après
3 heures ). La lumière et les sucres exercent
également un effet régul ctivité de la NR. La protéine
subit des modifications dont des phosphorylations. La lumière et les sucres activent une
phosphatase qui dephosphoryle plusieurs résidus sérines de la NR induisant son
activation. Dans le sens opposé, la lumière et les ions Mg++ stimulent une kinase qui

! 33!
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!

!
Fig. 17
le nitrate.

Les nitrites sont très toxiques mais hautement réactifs. Le nitrite résultant de
la réduction des nitrates est immédiatement transporté du cytoplasme vers les
chloroplastes dans les feuilles ou vers les plastes dans les racines où il est réduit en
ammonium par la nitrite réductase.

I.4.3 La nitrite réductase

Chapitre!3!:!
La réduction de nitrite en ammonium se fait par transfert de six électrons.
L
fournis par la photosynthèse. Dans les racines une protéine semblable à la ferredoxine
joue ce rôle et le pouvoir réducteur est fourni par la respiration et la glycolyse.

La proportion de nitrite réduit au niveau des racines ou au niveau des feuilles dépend

Différentes formes de NiR existent aussi bien dans les chloroplastes que dans
les plastes racinaires. Toutefois, toutes les formes consistent en un seul polypeptide
! 34!
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!

contenant deux groupements prosthétiques. Un groupe Fe4S4 et un hème spécialisé. Le

flux des électrons à travers les Fd- Fe4S4-Hème est représenté dans la figure 18.

!
Fig. 18 : Cheminement des électrons lors de la réaction de réduction des nitrites.

La nitrite réductase est codée par un gène nucléaire et pas chloroplastique. Elle
est synthétisée dans le cytoplasme avec un peptide de transit qui la transporte dans les
plastes. La lumière et le
amine) ont un effet
répresseur.

couteux pour la plante.

nitrate en ammonium. Il est estimé que
utilisée pour la réduction des nitrates.

I.4.2 A
Les plantes évitent la toxicité des ions ammonium par leur incorporation rapide à

Chapitre!3!:!
premières étapes de cette voie métabolique impliquent des réactions catalysées par la
glutamine synthetase (GS) et la glutamate synthase (GOGAT).

glutamine.

intermédiaire du cycle de krebs pour former deux glutamates. Cette dernière réaction
est catalysée par la glutamate synthase (Fig. 19).

! 35!
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!

!
Fig. 19 : La voie GS-GOG

La GS requiert des ions divalents (Mg++, Mn++ ou Co++) comme cofacteur. Il existe
deux classes de GS : une cytoplasmique et une plastidiale ou chloroplastique.
Des teneurs plastidiales élevées en glutamine activent la glutamate synthase aussi
appelée glutamine,2-oxoglutarate aminotransferase, ou GOGAT. Cette enzyme transfert
le groupe amide de la glutamine au 2-oxoglutarate produisant ainsi deux molécules de
glutamate.
Les plantes contiennent deux types de GOGAT : une qui accepte les électrons du
-GOGAT se trouve
dans les plastes des tissus non chlorophyliens (racines et jeunes feuilles) alors que la
Fd-GOGAT est localisée dans les chloroplastes.

Chapitre!3!:!

enzymes catalysant de telles réactions sont dites aminotransferases (ex : aspartate

aminotransférases) (Fig. 20).

! 36!
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