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Necropsia diagnéstica y recoleccién de tejidos vs
clence Education Database, Lab
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Fuente: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidad
‘COPY CITATION
de Notre Dame, en
‘muchos experimentos con animales se basan en puntos de tempo de recogida de
datos que se obtienen dela recoleccin y anlisis de érganos y todos. El uso de
rmétodes adecuados pata la recoleccién de érganos y teidos puede afectar la calidad
de las muestras y e anlisis de los datos recogidos para el andlsis de los tejidos. El
método de a eutanasia del animal también puede afectar a la calidad de las muestras,
Este manuscrito deseriten técnicas de necropsia adecuada para las ratas
Principles
1 método de eutanasia més comanmente utlizado para ratones y ratas es una
sobredosis de gas didxido de carbono (CO ;). Acuerdo con la americana veterinaria,
médica Asoclacién (AVMA), el uso de CO 2 es aceptable con las condiciones que
Feduzcan al minimo la aversién y la angustia, "los animales quedan en su jaula de
‘casa, que se coloca en una cémara. CO 2 se introduce gradualmente en la cémara @
Una velocidad de desplazamiento del 10% al 30% de la cémara volumen/min, que
causa alos animales a perder el conocimiento antes dela percepeién del dolor
‘asociada con la activacién del nociceptor por écido carbénico. El jo se mantiene en
la cémara una vez que se ha producido detencién respiratoria asegurar que el animal
cesté muerto. Una sobredosis de una anestesia inhalante también es aceptable,
especialmente para proyectos que requieren el uso de teide pulmonar, como CO »
ncn Oana nse agin aoa °
registro exacto de todos los resuttados es esencial durante una autopsia. Debe
Iniciarse un formulario que registra una historia completa del animal, incluyendo la
Identincacién de los animales, género, condiciones de vivienda, fecha de nacimiento,
fecha dela muerte, nimero de nimero/protocola de estudio y el nombre del
Investigador de principio. Se lleva @ cabo un examen intemo bruto como las cavidades
del cuerpo son expuestas para revelar los érganos internos. Sefalar cualquier anomalia
evidente.?
cosecha de necropsia y el ted debe iniclarse inmediatamente después dela
ceutanasia del animal, como la salida bacteriana desde el tracto intestinal puede
ccontundir algunos enayos. Comenzando en a cavidad abdominal y hacia la cavidad
tordcica, se deben observar los 6rganos internos. Antes de retirar las muestras de
telido, es importante observar los érganos in situ. ? cosecha de érganos y telidos para
‘examen histol6gico requiere que los telidos estén correctamente preparados. Las
rmuestras de tejido para histologia deben ser 0.5-1 cm de espesor para permitirla
suficiente penetracion de la solucion fjadora. Fijacién preserva tejidos biolégicos,
prevencién de la caries, autslisis y putrefaccién, También se detiene cualquier curse
reacciones bioquimicas y puede aumentar la resistencia mecénica oa estabilidad ce
los tejidos tratados. El objetivo general de fjacién de tejdo es preservar las células y
dos componentes para permitr a preparacién de finas, secciones manchadas. A
‘menos que se especifique lo contrario, el fjador més utlizado es el formal neutro
tamponado al 10%. Formal tamponado neutro al listo para usar 10% esta
‘comercialmente disponible en principales proveedares. °
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{figura 1. Organos abdominales y torécicos de rata hembra.
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Gall Bladder
Mesentery sae 1938 agente Ney nt Tams na Racer |Lab al asa [ee
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figura 2. Organos abdominales y tordcicos de rata macho.
Procedure
1. examen externo del
debe realizarse un examen macroscépico externo del cuerpo, que incluye una
inspeccién visual del cuerpo de las lesiones y masas, como el paso inicial en
una necropsia. La capa de pelo debe examinarse para las areas de pérdida de
cabello. Los dientes y las ufias son evaluados por un crecimiento excesivo 0
desgaste. Cabe sefialar una tincién de la piel en la boca, fosas nasales, ojos,
anales y las aberturas genitales. Pruebas de cinta, raspado de la
ypellejo
examenes deben realizarse para detectar pardsitos externos (ver
procedimientos)
1. Prueba de cinta
1. equipo necesario para una prueba de la cinta inclaye guantes, una tra de
cinta de celofan transparente, un portaobjetos de vidrio y tras.
2, Siempre guantes al manipular la cinta, como el pegamento se levante los
aceites y las células de os dedos, a pel ocultando resultados o causar
ncn Optra nse ar gineat roa °
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mas corto que lalongitud de la diapositiva del microscopio.
4. Con cuidado, presione el lado pegajoso de la cinta en el ano yel area
circundante y quitarrapidamente it
5, Usando el extremo opuesto de la cinta, presione entre los oméplatos y
guitar répidamente it
6, Aplique Ia cinta en el portaobjetos.
7. La prueba cella cinta es preparada para la examinacién microscépica,
Huevos del pardsito son visibles en 4 aumentos pero luego debe ser
‘examinados con 10 aumentos para identificar correctamente las especies,
8. Es importante evitar tocar el lado achesivo de la cinta. La cinta serd levantar
la suciedad de las manos enguantadas y hacer de a lectura de la
diapositva dificil
2, Raspado de piel
1. el examen de raspado de piel se realiza en las dreas de alopecia, esiones
de piel o excoriacén.
2, Elequipo necesario para elraspado de plel es un portaobjetos de vidrio
limpio, aceite mineral yuna hoja de una espétula o bisturi metal
3, Coloque unas pocas gotas de aceite mineral sobre el portaobjetos
4. Pelizcar la piel un pliegue en el borde de la lesién 0 érea de interés.
5. Colocar una pequeta cantidad de aceite mineral sobre lapel
6. Coloque el borde de la hoja de una espatula o bisturi en la pel y raspar
contra la direccién del crecimiento del cabello. °
8, Colocar el pelo ye tejido raspado dela superficie de lapel en el aceite en ef
portaobjetos, Sies necesario, difundir el material que se dstribuye
Lniformemente en el aceite.
9, La dlapositva esté ahora lista para ser examinada bajo el microscopio. Silo
desea, puede aplicarse un cubreobjetos ala gota de aceite en la diapositiva,
Examinar la diapositiva en 4 X y 10 aumentos.
‘amen de pieles
1. el examen de la pie! es el ultimo examen externo realizado; sin embargo, se
hace realidad después de completa el examen interno,
2. Elanimal se coloca en un vaso o plato de Petri de plastico después de que
‘se han recogido todas las muestras de érganos internos.
3. Elplato se coloca en el reftigerador durante 15 minutos.
4, Después de 15 minutos, el plato se coloca bajo un microscopio de
diseccién y la piel se examina para parésitos externos. La mayoria de los
‘caros de piel se moverd alos extremos de las pelos y se observan
{éelImente.
2. La examinacién gruesa interna de la cavidad abdominal
1. extipando la pie!
1. se hace una pequefa incisién justo anterior ala pelvis en las hembras y por
encima del prepucio en los machos,
2.Elcorte de piel se extiende ala barbilla
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alas extremidades delanteras. Debe tener cuidado de no romper los vasos
ssanguineos en la zona axiar.
Diseccién Roma de la utiizacion de
5, para exponer la zona cervical ytérax. Debe tener culdado extra para evitar la
ruptura de los vasos carétidos en el cuelloy yugular
2. Gléndulas mamarias,
1. en las hembras, examinar el tejido mamario para buscar masas,
decoloracién o anormalidades,
2, Hembras amamantando o embarazadas habré aumentado el volumen de
tejido mamario,y a leche puede estar presente.
3. Tejido mamario se encuentra entre la parte superior del estemén en el
‘manubrio y la apertura genital en la superficie ventral y se extiende
lateralmente @ ambos lados tocando casi en la superficie dorsal en las
ccaderas ylos hombros.
4, La cupresién de las glindulas mamarias requiere agarrando el borde de la
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