Chapitre 2: la mort cellulaire

programmée ou apoptose
 OBJECTIF DU CHAPITRE

FAIRE COMPRENDRE A L’ETUDIANT DE PREMIERE ANNEE DE

MEDECINE L’IMPORTANCE ET LES MECANISMES PAR
LESQUELS DES CELLULES PEUVENT ETRE DETRUITES DE
FACON CONTROLEE AU SEIN D’UN TISSU DE L’ORGANISME
 Définition :

- Le nom apoptose fait référence à la chute

programmée des feuilles à l'automne : apo pour
éloignement, ptose pour chute.

- Notion de programme

- Implications majeures en physiologie et

enpathologi
e
L'apoptose (ou mort cellulaire programmée) est le
processus par lequel des cellules déclenchent leur
auto-destruction en réponse à un signal.
APOPTOSE

 Caractéristiques d’une cellule en

apoptose
 Condensation cellulaire
 Condensation de la chromatine
 Fragmentation de l’ADN
 « blebbing »de la membrane
 Exposition sur la membrane externe des
phosphatidylserine
 Sécrétion de cytokines qui inhibe
l’inflammation
 Ces caractéristiques sont régulés par des
signaux
Apoptose histoire

 1842 : Carl Vogt remarque la

disparition de noyaux dans certains
tissus
 1951 d »crit la mort de certaines
cellules dans les tissus embryonnaire
 1964 Première utilisation du terme
mort programmée
 1972 Kerr Wyllie et Currie utilise le
terme d’apoptose
1ère Mise en évidence de l’apoptose

Date du milieu du
XIX ème siècle puis
remis au jour dans
les années 30
pour vraiment
être caractérisé
en 1972
 AUTOPHAGIE

 Sorte de « self »cannibalisme

 Manque de nutriment
 Digestion d’organelle intracellulaire
 Réarrangement de la membrane séquestration des composants
dans des autophagosomes puis fusion avec lysozomes
(dégradation enzymatique)
Pourquoi l’apoptose

 Nombre de cellules dans l’organisme : 1014

 Durée de vie d ’une cellule
 très variable selon l ’origine
 vie post-embryonnaire 200 types de cellules
possédant toutes une durée de vie différente
 Cell. Intestinales 1 semaines
 Erythrocyte 120 jours
 Cell. Hépatiques 1 ½ an
 Cell. Osseuses 25-30 ans
 Neurones, Cell. Cardiaques, rétine, ne sont jamais
remplacées
Différenciation cellulaire
implique que toute cellule soit au bon
endroit au bon moment

Toutes cellules en trop doit disparaître

Période et vie cellulaire

cellule en G0
importance du réveil
Importance de l’apoptose

Homéostasie cellulaire,
développement embryonaire, synapse
système immunitaire …
Trop d’apoptose : maladie
dégénératives
Trop peu d’apoptose Cancer,
maladies autoimmunes
MECANISMES GENERAUX

Très conservés des espèces les plus

élémentaires aux mammifères
Premières études chez
Caenorhabditis elegans
2 gènes ced-3 ced-4 «killer gene»
1 gènes ced-9 «survival gene»
Caenorhabditis elegans

1090 cellules somatiques

131 meurent par apoptose
116 de ces 131 appartiennent
au système nerveux et à
l’ectoderme
959 se développent en tissus
 Situation de l ’apoptose par rapport à la
physiopathologie cellulaire
Renouvellement cellulaire
État différencié

Vv

Maladies dégénératives Cancer

 Importance physiologique

 Développement
 Formation des membres
 Neurones du systèmes nerveux
 Contrôle des populations cellulaires
 Nombre
 Types
 Elimination de cellules trop endommagées
 Radiations ionisantes
 Produits toxiques
 Infection virale
Apoptose vs nécrose
 Apoptose vs nécrose

Apoptose Nécrose

Processus Controlé "spontané"

Relargage des Détruites ou intactes

enzymes inactives

Dommages + Non (vésicules Oui (relargage

Inflammation avec membranes) direct)
Description générale

 Affaiblissement des membranes

 Rétrécissement du cytoplasme
 Bris du cytosquelette
 Condensation du noyau et fragmentation de l'ADN
 Dégradation des protéines structurales et autres:
caspases (protéases à cys lysant à des résidus asp)
 Bullage des membranes ("blebbing")
 Détachement de vésicules (corps apoptotiques)
 Etape finale: phagocytose des vésicules
Description morphologie de l'apoptose

- A la différence de la nécrose, l'apoptose affecte

en général des cellules isolées, aboutissant à un
processus de condensation et de fragmentation.

- Les premières manifestations morphologiques

se caractérisent par une compaction et une
marginalisation de la chromatine nucléaire, une
convolution des membranes nucléaire et
cytoplasmique, une condensation du cytoplasme.
- Le noyau se fragmente ensuite, chaque
fragment entouré d'une double enveloppe.

- Des corps apoptotiques (éléments

cytoplasmiques et nucléaires) sont ensuite
relargués, et vont être phagocytés par les
cellules voisines, sans aucune réaction
inflammatoire.
Phases cellulaires de
l'apoptose
Bullage
Fragmentation de l'ADN
Non fragmenté

Etalons
Stage final: phagocytose

Phagocytose

Phosphatidylsérine
à la surface
externe des
membranes des
vésicules

Pas d'inflammation
Régulation moléculaire:
généralités
 Phénomène très régulé et complexe
 Effecteurs pro-apoptotiques
 Effecteurs anti-apoptotiques
 Caspases: protéases à cys qui agissent en cascade
régulatoire et de dégradation
 Régulation
 Intrinsèque: signaux internes (voie mitochondriale)
 Extrinsèque: signaux externes (transduction directe ou
voie signalétique)
 Induite par AIF (sans caspase)
Principe de base

 Normalement équilibre entre facteurs

 Anti-apoptotiques (Bcl-2 et Bcl-xL)
 Homodimères (surface des mitochondries)
 Membrane mitochondriale stable
 Pro-apoptotiques (BAD, BAX, BID, BAK)
 si homodimères => membrane miochondriale externe
est instable et se perfore => fuite de protéines de EIM
 Surplus d'anti => pro ne se dimérisent pas
 Induction de l'apoptose
Stress
Stress Voies de
régulation de
l'apoptose

Facteurs
trophiques
Facteurs pro-
apoptotiques
(BAD, BAX, Facteurs anti-
caspases) apoptotiques
(Bcl-2, IAPS)
Apoptose
Différence entre les voies
récepteur et mitochondriale
 Mitochondriale
 Médié par le stress
 Synthèse de proteïnes
 12-24 heures
 Récepteur
 Pas de synthèse de prot
 Très rapide qqs heures
Les grandes familles de proteines
impliquées dans l’apoptose : bcl-2

 Homologue de ced-9
 famille conservée, séquence homologue
 BH domains (dimèrization pour activation)
 Famille contenant des gènes pro et
anti- apoptotiques
 Homo et hétérodimère (balance entre
mort et survie cellulaire)
Les grandes familles de proteines impliquées
dans l’apoptose : Bcl-2
Association de proteines
Activation des caspases
Les Caspase

 Cystéine protéase (17 membres) sont synthétisée à l’état

de précurseur (QACXG)
 Comment les caspases tuent la cellule
 Destruction de protéines indispensable a la vie de la cellule
 Régulation des caspases : activation en cascade, IAP
inhibiteur de caspase
Voie mitochondriale

 Cellule normale: Bcl-2

 Famille de facteurs pro/anti-apoptique
 Normalement présente
 transmembranaire de la membrane mitochondriale
externe
 inhibe apoptose
 Normalement
 surplus de facteurs anti-apop => dimères
 Déficit de facteurs pro-apop => monomères
Voie mitochondriale:
déclenchement
 Dommage interne à la cellule: Bad et Bax
Choc thermique

Stress oxydatif

Etc

 Migrent à la surface mitochondrie

 Lient Bcl2: perd son effet protecteur
 Causent des perforations à la surface de la
mitochondrie: protéines de l'EIM -> cytoplasme
 Cyt C
 SMAC
Voie mitochondriale:
apoptosome
 Cyt C se lie sur Apaf-1 ("apoptotic protease activating
factor-1")
 Complexes Cyt C- Apaf-1 forment des aggrégats
structurés (avec dATP) de 7 unités
 = apoptosomes
 activent procaspase 9-> caspase-9
Formation de l’apoptosome
Voie mitochondriale:
caspases
 Apoptosomes
 procaspase-9 (inactive)=> caspase-9 (active)
 Caspase-9 hydrolyse et activent caspase-3 et -7
 Caspases -3 et 7:
 protéines "exécutrices"
 hydrolysent protéines
 Cascade d'activités protéolytiques (caspases et autres)
 Dégradation du csq + autres structures cellulaires

 Nucléolyse (fragmentation ADN)

Voie mitochondriale: SMAC

 SMACs: "second mitochondria-derived activator of

caspases")
 Normalement mitochondriale (EIM)
 Diffusent dans cytoplasme par pores (MAC)
 Lient IAPs ("inhibitor of apoptosis proteins")
 IAPs => inactives
 Cesse d'inhiber caspase-9,-7 et -3
Voie signalétique

 Récepteurs TNFR à la surface des cellules

 TNFR ("tumour necrosis factor receptor")
 Lient TNF (cytokine, libérée par macrophages)
 Signal externe (facteur

 Récepteurs FAS à la surface des cellules

 FAS
 Lient FASL (FAS ligand)
Récepteur TNRF1 : active des facteurs de transcription
(gènes inflammation, immunologie) induit l’apoptose si
synthèse protéique bloqué

Ligand -TNF

Receptor TNFR1
TNFR associated death
domain, TRADD Death domain, DD
Receptor interacting Fas-associated death
protein, RIP domain, FADD
TNFR-associated JNKK Caspase 8
IKK
factor 2, TRAF2 JNK
Effector caspases
NFkB c-Jun
Apoptosis
Voie signalétique TNF

 TNF lie TNFR1

 Complexe TNF-TNFR1 active TRADD
 TRADD active FADD
 FADD active pro-caspase-8 -> caspase 8
 Caspase 8 active les protéassses apoptotiques
 Voie signalétique FAS

 FASL (CD95L) se
lie à FAS (CD95)

 FAS active
FADD
 FADD active
caspase-8
 Caspase-8
induit la
cascade
protéolytique
de l'apoptose
Voie sans caspase

 AIF ("Apoptosis incuding factor")

 Normalement espace intermembranaire
mitochondries
 Signal de déclenchement d'apoptose
 AIF libéré dans le cytoplasme -> noyau -> lie ADN
 Induit la destruction de l'ADN (et mort cellulaire)

 Surtout neurones
 Voie de mort : la voie mitochondriale
et la voie des recepteurs

TNFa Fas L Cell stress: oxidants

TNFR1 Fas/CD95
Mitochondrion
Death domains
Cyt c
MPT
Caspase-8 Bid / tBid Bax/BcL2
Apaf-1 Cyt c
Procaspase-9 Apoptosome
Caspase effectrice
(e.g. caspase-3) Caspase-9

APOPTOSIS
Pathologie et dérèglements
physiologiques

 Cancer

 Autoimmunité

 Infections virales (SIDA)

UN MOT SUR LA NECROSE:
MECANISMES MOLECULAIRES
 L’absence d’oxygène entraine :
 Déplétion d’ATP
 Synthèse et dégradation des phospholipides
 Fuite de calcium de la mitochondrie
 Reperfusion
 Création d’oxygène radicalaire O2- , OH-,
H2O2-
Molécules très réactive qui attaquent tous les
constituants cellulaires
Les capacités de détoxication de ces molécules
sont très limités au niveau cellulaire
 UN MOT SUR LA NECROSE:
Fonctions cellulaires altérées
 Dérégulation de la perméabilité membranaire et donc influence les
mécanismes de transport
 Réduction du métabolisme cellulaire
 Plus de synthèse protéique
 Dommage au lysosomes : fuite d’enzyme dans le cytoplasme
 Destruction des organelles cellulaires
UN MOT SUR LA NECROSE: Atteinte
cellulaire liée aux ROS

 Anion Superoxyde Formés par les P450

et détoxication par les superoxyde
dismutase
 Hydrogène peroxyde deétoxication par
: catalase et glutathion peroxydase
 Radical hydroxyl .OH initie une
peroxyadtion lipidique et les atteintes à
l’ADN