MICROBIOLOGIE INDUSTRIELLE

Chapitre 4: LES BIOREACTEURS

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 LES BIOREACTEURS
• BIOREACTEUR = Installation mettant en œuvre des
transformations de la matière par des catalyseurs biologiques que
sont les microorganismes ou les enzymes.
• Principaux groupes de bioréacteurs
Il Existe de 2 groupes de réacteurs biologiques:
 LES FERMENTEURS ( microorganismes)
 LES RÉACTEURS ENZYMATIQUES (enzymes)
Seuls les fermenteurs seront examinés dans ce cours
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CARACTERISTIQUES D’UN FERMENTEUR
• Forme: Cuve cylindrique fermée, ayant un rapport
hauteur/diamètre compris entre 2 et 5
• Matériau de construction:
Verre pyrex pour fermenteurs de laboratoire
Acier inoxydable pour fermenteur industriel
• Dispositifs
Extérieur: Tuyauterie diverse, appareils de contrôle et de
régulation, regards, double paroi, groupe moto-réducteur
Intérieur: Turbine d’agitation, contre pâles, dispositif
d’aération, serpentin interne
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DISPOSITIFS D’UN FERMENTEUR

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 LE DISPOSITIF D’AERATION

Intérêt: Apport de l’oxygène au milieu de culture

L’Oxygène: Un facteur limitant de la fermentation
l’oxygène utilisable par les microorganismes: Oxygène dissout
dans le milieu
L’Oxygène: Gaz peu soluble dans l’eau et couteux
Conséquence: Faible réserve d’oxygène dans le milieu et
nécessité d’une aération continue du milieu pour fournir au
microorganismes l’O2 nécessaire à leur croissance

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Dispositifs d’aération
• Couronne circulaire ou
disque munis de trous à la
partie supérieure
• Aérateur munis d’un seul
trou

Schéma d’un fermenteur muni d’un

disque perforé à la partie supérieure
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 L’AERATION: Le Transfert D’Oxygène
• Besoins en Oxygène (QO2)
Quantité d’oxygène consommée par une quantité de
microorganismes par heure.(mmoles O2/l/mg cel/h)
Si X est la concentration cellulaire d’une culture
Demande d’oxygène de la culture = QO2.X (mmole O2/l/h)
1- Les Facteurs influençant QO2
• La nature du microorganisme
• L’âge de la culture
• L’état physiologique de la cellule
• La composition du milieu de culture
• La concentration cellulaire
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 Mécanisme de transfert
L’absorption d’ l’O2 par un microorganisme est un
phénomène complexe
Barrières à franchir par l’O2 de la bulle d’air à l’enzyme du
microorganisme dans le milieu de culture
• Film ou couche gazeuse Entre la bulle d’air et l’interface gaz-liquide
• Film liquide entre l’interface gaz-liquide et le milieu de culture
• La résistance du milieu de culture (Diffusion vers la cellule)
• Film liquide entre la membrane cellulaire et le milieu de culture
• La membrane cellulaire
• Diffusion dans le cytoplasme (eucaryotes)
• Membrane mitochondriale (Eucaryotes)

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 Vitesse de transfert de l’O2

Avec :
C* : Concentration en gaz dissous en équilibre avec la pression
partielle en gaz dans la phase gazeuse ( mmole/litre)
(i.e : concentration en gaz à saturation dans le liquide)
CL : Concentration en gaz dissous dans le liquide à l’instant t (
mmole/l)
KL : Coefficient de transfert (cm/h) (du gaz par rapport au liquide)
a : Surface de l’interface de la dissolution(cm2/cm3 )
(ou surface spécifique d’échange)

KL a: Coefficient volumétrique de transfert (h-1)

Expression de l’efficacité du transfert d’ O2 d’un dispositif d’aération
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L’O2 Transférer aux microorganismes
Rappel: Si X est la concentration cellulaire d’une culture
Demande d’oxygène de la culture = QO2.X (mmole O2/l/h)

Vitesse de transfert de l’O2 =

Transfert global de l’O2 dans la culture

QO2 = - QO2.X

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 DISPOSITIF D’AGITATION
1- But De l’agitation
• Assurer l’homogénéité de la suspension
• Accélérer la vitesse des échanges entre les phases en contact dans le
réacteur
• Favoriser les échanges thermiques entre les dispositifs de
thermorégulation et le milieu
2- Types d’agitation
• Agitation mécanique: réalisée à partir d’une pièce d’agitation ( pâles,
hélice)
• Agitation hydraulique réalisée par pompage
• Agitation pneumatique: crée par injection d’air ou dégagement de gaz
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AGITATION PNEUMATIQUE AGITATION MECANIQUE

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 L’agitation Mécanique:
Mobiles d’agitation et écoulement du fluide

A- Constitution des agitateurs

• Arbre disposé dans l’axe du fermentateur , supportant
plusieurs turbines d’agitation et animé d’un mouvement de
rotation
• Formes des turbines (pièces en mouvement) variables (pâles
droites, hélices, roues à aubes)

Conséquences: Mouvement de fluide variable

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 Ecoulements du Fluide
Schéma d’écoulement du milieu avec un
moteur d’agitation au sommet de la cuve

• Écoulement axial: Fluide

sortant verticalement de la pièce
d’agitation, mouvement parallèle à
l’axe d’agitation

• Écoulement Radial:
Fluide sortant de la pièce
d’agitation de façon tangentielle
(mouvement centrifuge
Schéma d’écoulement du milieu avec un
UE: BIOS 366_2020 - Pr J.J. ESSIA NGANG moteur d’agitation au bas de la cuve
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Comparaison des 2 types d’agitation

Agitation Axiale Agitation Radiale

Meilleur transfert d’oxygène
Faible transfert d’oxygène
Mobiles d’agitation : Mobiles d’agitation :
Hélices Pâles perpendiculaires
à l’axe du réacteur
Meilleur circulation du Phénomène de vortex important :
liquide nécessité des contre pâles
Effet de pompage Effet de cisaillement important
Plus adaptés aux Plus adaptés aux liquides de faible
liquides visqueux viscosité

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 Rapport entre l’agitateur et le Réacteur
• Meilleur agitation: Equilibre entre la taille des pales de
l’agitateur et celle du fermenteur
• dc : Diamètre de la cuve
• da : Diamètre de l’agitateur
• hl : hauteur du liquide à fermentée ou milieu de
culture
• Chicane = contre pâle
• Largeur de la contre pâle = dc/10
• Distance entre le fond de la cuve et la première
turbine d’agitation= dc/3
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Comparaison des positions de
l’arbre d’agitation
Arbre d’Agitation Introduit
par le Haut
Arbre d’agitation
Grande taille :
- Risques de torsion et de rupture
Nécessité de mise en place d’un système
de guidage de l’arbre pour le maintient
de l’axe
Partie supérieur du réacteur
 Encombrement important
Solidité du support indispensable
Contamination
- Difficultés de Nettoyage de l’arbre
(source de contaminants)
- Risques de contamination à l’endroit
où passe l’arbre d’agitation :
contrôle réguliers indispensable
Circulation du fluide
Entravée par le système de guidage
Structure plus complexe nécessitant
de nombreuses précautions.
Arbre d’Agitation
Introduit par le Bas
Arbre d’agitation
Petite taille court
Partie supérieur du réacteur
 Faible encombrement
Possibilité d’installation des
dispositifs de contrôle
Contamination
- Facilité de Nettoyage de l’arbre
(limitation des contaminants)
- Facilité de contrôle de
l’étanchéité aux contaminants
Circulation du fluide
Sans obstacle
Structure plus légère et plus
avantageuse
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 L’agitation Pneumatique
• Caractéristique:
Agitation crée par le
déplacement des bulles
d’un gaz dans le réacteur
• Avantage:
Absence de cisaillement
(responsable du traumatisme des
microorganismes)
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 LE DISPOSITIF DE CHAUFFAGE

Intérêt: Maintien de la température du milieu de

culture à la température optimale de l’activité du
microorganisme
Température: Un facteur limitant de la croissance microbienne et de la
production des métabolites

Dispositifs:
• Double calotte externe dans laquelle circule un liquide caloporteur
• Serpentin interne dans lequel circule un liquide caloporteur

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Schéma d’un fermenteur muni d’une
calotte externe dans lequel circule un
liquide caloporteur (l’eau de chauffage Schéma d’un fermenteur de 100m3 muni d’un serpentin externe dans lequel circule un
ou de refroidissement) liquide caloporteur (l’eau de chauffage ou de refroidissement) et d’une couronne d’aération

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 Variantes des Bioréacteurs
Les réacteurs biologiques présentent plusieurs variantes selon:
• Leur mode de mise en Œuvre (nature des échanges des
constituants avec le milieu extérieur)
• La nature des phases en jeu
• Le nombre de réacteurs en fonction

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 Variante liée à la Mise en Œuvre
• Réacteur Discontinue ou Réacteur en BATCH

Spécificité: Réactifs et catalyseurs sont initialement introduits

dans le réacteur . De même les produits et les catalyseur y
sont retirés ensemble après une durée donnée de la réaction:
Réacteur fermé

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 Variante liée à la Mise en Œuvre
• Réacteur Discontinue Alimenté : Fed BATCH
Spécificité: Un ou plusieurs réactifs sont introduits de manière
continue ou intermittente sans soutirage du milieu réactionnel
du réacteur . (les produits et les catalyseur y sont retirés
ensemble après une durée donnée de la réaction): Réacteur
Semi-fermé

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Schéma d’un fermenteur fonctionnant en
batch ou réacteur fermé: pas d’entrée et
pas de sortie du réacteur après la mise en
contact du microorganisme avec le milieu
de culture

FED-BATCH
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 Variante liée à la Mise en Œuvre
• Réacteur Continue
• Spécificité: Réactifs et éventuellement catalyseurs sont
introduits de manière permanente au système tandis que les
produits et parfois le catalyseur sont continuellement
soutirés du milieu réactionnel :Réacteur Ouvert

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 Schéma d’un fermenteur fonctionnant en
continue ou réacteur ouvert: SE, Substrat entrant
S: substrat sortant; Qin débit d’injection du milieu de culture,
Qout, débit de soutirage du milieu de culture, V volume de milieu
réactionnel

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 Variante liée à la Nature des phases

• Réacteurs Homogènes
Réacteurs dans lesquels les 3 phases du réacteur (solide,
liquide et gaz) se confondent à une seule phase qui est la
phase liquide
• Réacteurs Hétérogènes
Réacteurs présentant une phase supplémentaire(solide) à
l’interface de laquelle s’effectue la réaction: cas des
réacteur à cellules ou à enzymes immobilisées
Schéma d’un réacteur hétérogène
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 Variante liée au Nombre de Réacteurs
• Réacteurs Mono-étagés: Réacteurs constitués d’une seule cuve

• Réacteurs Multi-étagés:
Réacteurs composés de plusieurs
cuves en cascade

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 LA REGULATION
Constat:
Modifications du milieu de culture observées au cours de
l’activité métabolique du microorganisme:
•L’accumulation des métabolites
•Augmentation de la température
•La réduction de la teneur en oxygène dissous
•La baisse du pH
Problèmes
Croissance cellulaire et production des métabolites
fortement influencées par les Modifications du
milieu
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 Régulation
Objectif industriel: Obtention des rendements maximums

Urgence:
Contrôle et maintient des facteurs environnementaux à des
valeurs constantes et optimales.

Ceci implique :
• La mesure du paramètre réalisée à l’aide d’un Capteur
(dispositif sensible aux variations du paramètre à mesurer)
• La régulation du paramètre mesurée i.e le maintien de ce
paramètre à des valeurs tel que l’écart entre la valeur
mesurée et la valeur optimale retenue soit minime ou nulle
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 ELEMENTS DE LA REGULATION

Trois éléments concourent au maintien de la stabilité d’un paramètre

de l’environnement. Il s’agit de :
• Le Capteur ou sonde qui saisit l’information et la transmet à un
indicateur

• L’évaluateur qui compare la valeur transmise à la valeur souhaitée

mise en consigne puis transmet le signal à un correcteur

• Le Déclencheur de correction, qui active ou désactive (selon que la

différence est positive ou négative) le système devant corriger la
valeur de l’information saisie et la rapprocher de la valeur consignée.
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 PRINCIPAUX DISPOSITIFS DE REGULATION
PRINCIPAUX PARAMETRES REGULES DANS LES REACTEURS
Température pH Oxygène Mousse
Importance Facteur limitant Second facteur Indispensable Prévention des
de la croissance limitant la pour les germes débordements des
croissance aérobies réacteurs
microbienne Réduction des
contaminations
Outils de mesure Variables : Electrodes ou Sonde à oxygène Electrode anti
Ou de détection Thermomètre à sondes à pH Mousse
mercure, sondes
de platine
Activateur de Thermomètres de Enregistreur de pH Vérification de la Fermeture du
correction contact saturation en circuit électrique
oxygène dissous
Outils de Circulation d’eau Vanne - Augmentation - Mise en route
correction chaude ou froide électromagnétique du débit d’air d’une brise
dans une double commandant - Ajustement de mousse
paroi ou dans un l’introduction d’un la vitesse - Injection de
serpentin interne acide ou d’une base d’agitation substances anti
mousse
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Fermenteurs de laboratoire
munis des dispositifs de
régulation

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 Photo d’un fermenteur traditionnel de production
Photo montrant la tuyauterie de boisson alcoolique ouvert à la partie supérieure
d’alimentation des fermenteurs
industriels

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