TIEU CHUAN QUOCGIA — iO < jz TCVN 10736-21:2017 ISO 16000-21:2013 KHONG KHi TRONG NHA - PHAN 21: PHAT HIEN VA DEM NAM MOC - LAY MAU TU VAT LIEU Indoor air - Part 21: Detection and enumeration of moulds - Sampling from materials HA NOI - 2017TCVN 10736-21:2017 au Loin TCVN 10736-21:2017 hoan toan twong dyong vei ISO 16000-21:2013. TCVN 10736-21:2017 do Ban ky thuat tiéu chudn quéc gia TCVNITC 146 Chat lvong khong khi bien soan, Téng cuc Tiéu chuan Bo eng Chat lvgng dé nghi, BS Khoa hoc va Cong nghé céng bé. Bo TCVN 10736 (ISO 16000) Khéng khi trong nha gam cae phan sau: = TCVN 10736-1; 2015 (ISO 16000-1:2004) Phan 1: Cac Khia canh chung ciia ké hoach lay mau, = TCVN 10736-2:2015 (ISO 16000-2:2004) Phan 2: Ké hoach Idy mau formaldehyt, ~ TCVN 10736-3:2015 (ISO 16000-3:2011) Phan 3: Xée dinh formatdehyt va hop chat cacbony! khae trong khéng khi trong nha va khéng khi trong budéng thd’ Phuong phap jéy mau chi déng; - TCVN 10736-4:2015 (ISO 16000-4:2011) Phan 4: Xéc dinh formaldehyt ~ Phuong phép tdy mau Khuéch tén;, = TCVN 10736-5:2015 (ISO 16000-5:2007) Phan 5: Ké hoach ldy mau d6i voi hop chat hiu co bay hoi (VOC), ~ TCVN 10736-6:2016 (ISO 16000-6:2011) Phan 6: Xdc dinh hop chat haw co bay hoi trong khong Khi trong nha va trong buéng thi: bang cach Iéy mAu chi dong trén chét hép phy Tenax TA®, gidi dp nhigt va sdc ky khi si dung MS hoc MS-FID; = TCVN 10736-7:2016 (ISO 16000-7:2007) Phan 7: Chién luge lay mau dé xac dinh ndng dé soi amiang truyén trong khéng khi; ~ TCVN 10736-8:2016 (ISO 16000-8:2007) Phan 8: Xde dinh thoi gian vu trung binh tai chd cite Khdng khi trong céc tda nha dé xdc dinh dic tinh céc diéu kién thong gid; ~ TCVN 10736-9:2016 (ISO 16000-9:2006) Phén 9: Xée dinh phait thai cde hop chat niu co bay hoi tt cdc sdn phém xéy dung va dé n6i that - Phuong phap budng thi phat thai; ~ TCVN 10736-10:2016 (ISO 16000-10:2006) Phan 10: X4c dinh phat thai cia hyp chat hitu oo bay hoi tty cc san phém xdy dung va dé ngi that — Phuong phap ngan thir phét thai; ~ TCVN 10736-11:2016 (ISO 16000-11:2006) Phan 11: Xdc dinh phat thai cua hgp chat hu oo bay hoi tt» cde sn phdm xéy dung va dé ngi that— Lay mau, b3o quén mau va chudn bj mau th; ~ TCVN 10736-12:2016 (ISO 16000-12:2008) Phan 12: Chién luge lay mau d6i voi polycloro biphenyl (PCB), polycloro dibenzo-p-dioxin (PCDD), polycloro dibenzofuran (PCDF) va hydrocacbon thom da vong (PAH); ~ TCVN 10736-13:2016 (ISO 16000-13:2008) Phan 13: Xéc dinh ting (pha khi va pha hat) polycloro bipheny! giéng dioxin (PCB) va polycloro dibenzo-p-dioxin/polycioro dibenzofuran (PCDD/PCDF) - Thu th4p méu trén cai foc dua hé tro bang chat hap phu; - TCVN 10736-14:2016 (ISO 16000-14:2009) Phan 14: Xéc dinh téng (pha khi va pha hat) polycloro biphenyl giéng dioxin (PCB) va polycloro dibenzo-p-dioxin/polycloro dibenzofuran (PCDD/PCDF) ~ Chi6t, lam sach va phan tich bang sac ky khi ph&n giai cao va khéi phd. ~ TCVN 10736-15:2017 (ISO 16000-15:2008) Phdn 15: Cach thie Idy mu nito dioxit (NOz).TCVN 10736-21:2017 ‘TCVN 10736-16:2017 (ISO 16000-16:2008) Phan 16: Phat hién va dém ndm méc — Lay mau bang cach loc. TCVN 10736-17:2017 (ISO 16000-17:2008) Phan 17: Phat hién va dém ném méc - Phuong phap nudi cay. TCVN 10736-18:2017 (ISO 16000-18:2011) Phdn 18: Phat hién va ddm ndm méc - Ly mau bang phuong phép va dap. TCVN 10736-19:2017 (ISO 16000-19:2012) Phan 19: Cach thie iy mau ndm méc. TCVN 10736-20:2017 (ISO 16000-20:2014) Phan 20: Phat hién va dém ném méc — Xéc dinh sé dém bao ttrténg sd. TCVN 10736-21:2017 (ISO 16000-21:2013) Phan 21: Phat hién va dém ném méc -- Ly mau ter vat ligu. ‘TCVN 10736-23:2017 (ISO 16000-23:2009) Phdn 23: Thur tinh nang dé danh gid su gim néng a> formaldehyt do vat tiéu xdy dung hdp thu. TCVN 10736-24:2017 (ISO 16000-24:2009) Phan 24: Thib tinh nang dé danh gid sur gidm néng d6 hop chét hau co bay hoi {tri fomaldehyt) do vat ligu xay dung hdp thu, TCVN 10736-25:2017 (ISO 16000-25:201 1) Phn 25: Xac dinh phat thai cia hop chat haw co ban bay hoi ti cdc. san phdm xay dung — Phuong phép buéng thir nhé. TOVN 10736-26:2017 (|SO 16000-26:2012) Phan 26: Céch thie dy mau cacbon dioxit (CO2) TCVN 10736-27:2017 (ISO 16000-27:2014) Phan 27: Xée dinh byl soi l8ng dong irén bé mat bing inh hién vi din ti quét (SEM) (phuong phép trye tiép) TCVN 10736-28:2017 (ISO 16000-28:2012) Phén 28: Xac dinh phdt thai mai tw cdc sén phdm xdy dung sit dung buéng thik. TCVN 10736-29:2017 (ISO 16000-29:2014) Phén 29: Phuong phap this cdc thiét bi do hop chat hou co’bay hoi (VOC). TCVN 10736-30:2017 (ISO 16000-30:2014) Phan 30: Thi nghiém cam quan cia khéng khi trong nha TCVN 10736-31:2017 (ISO 16000-31:2014) Phan 31: Bo chét chéng chéy va chat tao déo trén nén hop chét phospho hau co-este axit phosphoric. TCVN 10736-32:2017 (IS016000-32:2014) Phan 32: Khdo sat 16a nha dé xéc dinh sy xudt hién cia cde chat 6 nhiém. TCVN 10736-33:2017 (ISO 16000-33:2017) Phan 33: Xac dinh phtalat bang séc ky kniskhdi phd (GCMs). 1 ‘ 1TCVN 10736-21:2017 Li gidi thigu Ndm médc la tén théng thuéng cla ném sgi tie cac nhém phan loai khac nhau (Ascomycota, Zygomycota va cdc tén goi khdc truéc day nhu Deuteromycota hode nam bat toan). Ching tao thanh soi ndm va cdc bao tv. Hau nét c&c bao ty ndm trong khoang kich thuée ti 2 pm dén 10 wm, mdt sé Jén dén 30 um va chi vai loai dén 100 pm. Bao tir cia mot sé chi ndm médc rt nhd va rat dé phat tan vvao khong khi (vi dy Aspergillus, Penicilium), trong khi ca¢ chi Khe 16n hon valhoae chim trong chat lng (vi dy Stachybotrys, Fusahum) va it di déng Céc bao ti nam méc duoc phan tan réng ri trong méi trvéng ngoai tri, do 46 xudt hién trong khéng khi trong nha voi cdc ning dé khdc nhau. Tuy nhién si phat trién nam méc trong mai trong trong nha urge coi la mét van dé vé sinh vi cdc nghién ciru dich té hoc 44 cho thdy rang 06 dm wét va/hoac nm. méc trong nha va cdc vén dé sirc khde cla cu dan cé lién quan chat ché voi nhau. Cac phyong phap hai hod déi vai viée l4y mau, phat hién va dinh lugng nam méc bao gom cdc tiéu chuan va chién luge ly mau 1a rat quan trong déi voi viée danh gid so sanh cdc van dé ndm moc trong nha. Truéc khi thyc hign phép do bat ky cdn thuc hign ké hoach do Tiéu chuan nay m6 ta cdc phuong phap l4y mau khéng khi bao tir nam méc tir céc vat ligu xy dyng. Tigu chudn nay duoc xy dung dya trén cé¢ phan ca VDI 4300 Phan 10,TIEU CHUAN QUOC GIA TCVN 10736-21:2017 Khéng khi trong nha ~ Phan 21: Phat hién va dém nam méc ~ Lay mau tir vat ligu Indoor air~ Part 21; Detection and enumeration of moulds ~ Sampling from materials 4 Pham vi ap dung Tiéu chudn nay quy éinh cdc yéu cdu dé ly mau ndm méc tir vat ligu x4y dyng. Theo c&c huéng din 4 néu, mau duoc soi bang kinh hién vi hod phat hién tiép nam méc bang cach nudi cdy theo TCVN 10736-17 (ISO 16000-17). 2. Tailigu vign din Cac tai liéu vién dn sau 1a rat can thiét cho viée 4p dung tiéu chudn. Déi cae tai ligu vign dan ghi nm céng bé thi ép dung phién ban dug néu. Béi vai cdc t3i ligu vign dn khong ghi ndm cong bé thi 4p dung phién ban mdi nhat, bao gdm ca cac siva déi, bd sung (néu c6). ‘TCVN 10736-17 (ISO 16000-17), Khdng khi trong nha - Phan 17: Phat hién va dém ndm méc - Phuong phép nudi cdy 3 Thuat ngi, dinh nghia Trong tiéu chuan nay ste dung cc thuat ng@ va dinh nghia sau: 34 Don vi hinh thanh khuan lac, cfu (colony forming unit) Don vi bigu thi sé Iuong vi sinh vat nudi cdy cd thé dém duoe. [EN 13098:2000} CHU THICH 1: Mot don vj hinh thanh khudn lac c6 thé bat ngudn tir mét vi sinh vat, ty tép hop cia nhiéu vi sinh vat cing nhu tly mgt hoa nhiéu vi sinh vat dinh vao mot hat. CHU THICH 2: $6 lugng khudn tac c6 thé phy thude vao cae diéu kign nudi cy.TCVN 10736-21:2017 32 Nudi cy (cultivation) chat lvgng khdng khi> sy phat trién cua vi sinh vat trén méi truéng nudi cdy. [Nguén:TCVN 10736-16: 2017 (ISO 1600-16: 2008), 3.6] 3.3 Nam sgi (Filamentous fungus) Nam phat trién dui dang cdc soi té bao. CHU THICH 1: Thudt ngo “ndm soi” phan biét voi soi phat trién td ndm men. [Ngudn: TCVN 10736-16: 2017 (ISO 1600-16: 2008), 3.3}. 34 Vi sinh vat (microorganism) Moi thu thé vi sinh, 04 18 bao hodc khang c6 té bao o6 thé tdi tao hode di truyén hoe cdc thre thé bj mt cde dc tinh cla ching. [Nguén: EN 13098:2000) 38 Nam méc (mould) Nam sgi tir mot val nhém phan loai zygomycete, ascomycete va deuteromycete ho&c ndm bat toan. CHU THICH 1: NAm méchinh thanh céc dang bao tir khdc nhau phy thude vao nhém phan logi clra ching, goi fa bao tir hat dinh (hat dinh), cudng tui bao ti hodic nang bao te. 3.6 Soi ndm (mycelium) ‘Mang luéi cdc soi ndm phan nhanh [Ngudn: ISO/TS 10832:2009, 3.5} 4 Nguyén tac cia phuong phap Vat ligu nhiém ndm méc duge kiém tra bang cach léy mau bé mat (xem 7.1) hoac dy mau sé lugng lon (xem 7.2), o6 nghfa la kiém tra todn bd vat liu hoe cac 1ép vat ligu phia séu bén trong. Céc phuong phép duce sir dung phy thude vo muc tiéu didu tra néu trong TCVN 10736-19 (ISO 16000-19). Cac bé mat due ly mau bang cach sir dung dia tiép xtic trye tiép (xem 7.1.2) hode ding bang dinh (xem 7.1.3) hode ding gac béng (xem 7.1.4). Sau khi dy mau, cSc bao tir nam méc c6 thé duoc phan tich bang soi kinh hién vi tne tiép (xem 7.4) hodc duge xi ly va nudi cay si dung phuong phép tao huyén phi (xem 7.5). Quy trinh nudi cdy duoc mé t& trong TCVN 10736-17 (ISO 1600-47).TCVN 10736-21:2017 5 Thiét bi va vat ligu ‘Sir dung thiét bi, dung cy cla phong thir nghiém vi sinh thong thurdng, cu thé la: 5.1 Thiét bi lay mau 5.1.4 Bia thach hodc cae dai nhya déo, chiva thach DG-18 va chat chiét malt hodc thach dextrose khoai tay (xem Diéu 6) véi mdi tru@ng nudi cdy hoi nhé & mép dia. 5.1.2. Gac bong, v6 tring, dé ly mau, 5.1.3 Hop dyng dé bao quan cac dia thach va mu vat ligu trong qué trinh van chuyén, vi du: t6i bang chat déo. 5.1.4 Chat khi tring, vi dy iso-propanol hoae etanol (70 % thé tich) dé kh? tring dung cu lay mau. 5.4.5 May khoan, 68 dugc khir tring, c6 duéng kinh it nhat 3 om, tot nhdt 1a 5 cm, dé lay cc Idi tir vat igu, 5.1.6 Hop dung cach nhiét/lam lanh, dé van chuyén cdc dia thach va mau vat ligu duei 25 °C. 5.17 Dung ey lay mau, v6 tring, 48 dy céc mu s6 lwong lén cla cdc vat ligu & cdc d6 sdu khac hau, vi dy: thia, mubng, dao, may khoan. 5.2 Dung cy dé chuan bj cac dia thach 5.2.1 Noi hap say, duy tri nhigt 46 & (121 + 3) °C va (115 +3) °C. 5.2.2. Bia Petri, vé tring, cé dudng kinh khong 9 em. 5.2.3 May do pH, c6 dd chinh xéc + 0,1. 5.3. Dung cy dé xir ly cac m4u sé lvgng ion 5.3.1. Vat chira bang nhém, dé can cdc mau vat liéu. 5.3.2 Can phan tich, voi dO chinh x4c + 0,01 g. 5.3.3. Binh thiy tinh, v6 tring, dung tich 250 mi, 5.3.4 Bia lac ngang, 200 rm. 5.3.5 May lac éng nghiém, vi du may ldc Vortex, 6 Méi trong nudi cay va thudc thir 6.1 Yéu cau chung Chi sir dung c4c thudc tht? va hoa chat 06 chét lugng dugc obng nhan “dung cho vi sinh” hoac loai tot hon. Nuc urge ding phai ld nude cét hoae nuée cé chdt leng tvong duong.TCVN 10736-21:2017 Nén siv dung cdc s4n phdm khé o6 ban san trén thi trudng, néu dap Ung cdc yéu cau 64 néu. Cac co’ chat kh duge chuan bi theo hung dn cla nha san xudt. Déi vi viée Idy mdu bé mat, co thd str dung céc dia thach hodc céc dai nhya déo 06 chira méi trudng thach c6 ban sn trén thi trrdng, 6.2 Thach dichloran 18 % glycerol (DG-18) Cac thanh phan duge liét ké trong Bang 1. Bang 1~ Thanh phan ciia thach dichlorane 18 % glycerol (DG-18) Thanh phan Lugng Pepton? ~ 5,09 Glucose 1009 —|~ Kali dihydro phosphat (KH,POs) 1,09 Magie sulfat nggim bay phan tir nude (MgSOv.7H.0) 059 Dichtoran (2,8-dichloro-4-nitroaniline) 0,2 % thé tich trong etanol (100 %) 1,0me Chioramphenicot O19 Glycerol " 220g? [thech 7 1509 Nut ct 1000 mI |? Néng 4 cudi cing trong moi trxéng Ia: 0,002 gf, |” 18 % khdi lunyng x4p xi 1 220 g khéi lugng cudi cing = khodng 220 g. |¢ Cac loa pepton Khac nhau cila céc nha sin xudt khac nhau due sir dung (vi dy: casein pepton, pepton nm}. Dieu} [nay thudng khong anh hudng dén két qua dinh lugng nhung oé thé 2nh hudng dén hinh dang bén ngoa¥ ctia khuan lac. Cac kiém chisng duang tinh d@ so snh d9 thu hd va so sénh hinh dang bén ngoai cia khudin lac la rét quan trong. Cho céc thanh phan nhé va thach vao khoang 800 ml nuéc va héa tan bang cach dun soi, Thém nude én 1000 ml va thém 220 g glycerol. Khé tring trong ndi hdp ap lure & (121 # 3) °C trong (15 £ 1) min. Sau khi khir tring, pH phdi la 5,6 + 0,2 & 25 °C. Phan phéi cdc lvang 20 ml vao cae dia Petr. Git? cdc dia thach DG-18 trong cac thi, noi & (5 £3) °C cé thé duoc mét thang. CHU THICH 1: Thach DG-18 thich hgp cho vige phat hién mét phd réng céc ndm xerophilic (tirc 18 thich kh6). Glycerol lam gidm hoat 46 nutéc, aw dén 0,95. Cloramphenicol tr ché vi khudn, dac biét la cc vi khudn gram am. Dichlorane irc ché moc lan cia c4c khuan lac ndm méc phat trién nhanh va do dé ngan ngiva sy moc lan at cla ccc khudn lac moe cham. CHU THICH 2: Tuy thuge vao hé thy vat phat trién dong théi, ma co thé sd dung cac chat khang sinh kh&c, vi du streptomycin hoae ampicillin néu ching cho thdy khong anh hudng dén két-qud thiy nghigm. Trong trueng hop 10TCVN 10736-21:2017 si dng streptomycin hoe ampicilin, thi ching nén duge thém vo thach DG-18 48 khir tring ngay truce khi phan phdi vao ia. . 6.3 Thach chat chiét malt Cac thanh phan duge ligt ké trong Bang 2. Bang 2 - Thanh phan cua thach chat chiét malt Thanh phan Lugng Chat chiét malt 30,09 [Pepton tu dau wong 309 Thach 1509 | Nube edt 1,000 mi CHU THICH 1: Cé thé can bd sung claramphenicol (0,05 gi) néu mau chira néng 46 cao cac vi khudin. CHU THICH 2: Tiy thuge vao hé thyc vat phat trién déng thoi, ma cd thé sty dung c4c khang sinh khae, vi dy streptomycin heac ampicillin néu ching cho th4y khéng anh hung dén két qua thd) nghiém. Trong trong hop: ‘stv dung streptomycin hoac ampicillin, thi ching nén dugc thém vao thach chat chiét malt 4 khir tring ngay tr@c khi phan phéi vao dia. Cho cdc thanh phan va thach vao nue va héa tan bang cach dun sdi. Khi? tring trong ndi hp Ap lure & (115 #3) °C trong (10 + 1) min. Sau khi khi tring, pH phai la 5,5 + 0,2 & 25 °C. Phan phdi cdc lugng 20 ml vao cae dia Petri Git? cac dia thach chat chiét malt trong cac tdi, noi tdi & (5 + 3) °C c6 thé duoc mét thang, CHU THICH 3: Nhibu ia thach chat chit malt véi céc thanh phan khae nhau c6 bén s&n trén thi trudng. Bidu quan trong {a phai kiém tra cde thanh phn twong ing voi céc thanh phan néu tn. 6.4 Thach dextrose khoai tay Cac thanh phan durge ligt ké trong Bang 3. Bang 3 — Thanh phan cia thach dextrose khoai tay Thanh phan Luong |Chat chiét khoai tay 4.09 JGucose 20,09 Thach 15,09 Nuwe cde —[ 1.000 mi CHU THICH 1: C6 thd cn bd sung cloramphenical (0,05 gf) néu mau chira ndng &6 cao céc vi khudn, CHU THICH 2: Tay thuge vao hé thyc vat phat trién ding thoi, ma oé thé st dung céc khang sinh Khac, vi dy streptomycin ho&c ampicillin ching cho thay khéng anh hudng dén két qua thir _nghiém. Trong trading hop sir 1TCVN 10736-21:2017 dung streptomycin hoc ampiciin, thi ching nén dug thém vao thach dextrose khoai tay d3 khi tring ngay truréc khi phan phdi vao dia. Cho cac thanh phan va thach vao nude va héa tan bang cach dun s6i. Kht? tring trong ndi hap ap lye 6 (115 3) °C trong (10 + 1) min. Sau khi khir tring, pH phai la 5,6 ¢ 0,2 & 25 °C. Phan phi cdc long 20 mi vao cc dia Petri. Gitr cc dia thach thach dextrose khoai téy trong céc tui, noi tdi 6 (5 + 3) °C 6 thé dug mét thang. 6.5 Dung dich dém pha loang Cac thanh phan durge ligt ké trong Bang 4. Dung dich dém pha long c6 chira dém phosphate 48 bi cho cac tinh trang axit hoge kiém trong mau vat ligu, Bang 4—Thanh phan cia dung dich dém pha loang Thanh phin Kal dihydro phosphat (KH:PO.) Dinatn hydro phosphal ngm hai phan tir nude (NazHPOs 2420) Natt clorua (NaCl) Tween®a 800,01 % thé tich) INuée cét > Tween 1a vi dy v8 san phim hich hyp 0b ban sin. Thang in nay dua rato thus ten cho nguei 7 dng teu chudn va khong dn inh phi sb dung ching Cho eae thanh phan trén vao khodng 900 mi nude va hoa tan. pH phai la 7,0 0.2 & 25 °C. Kiém tra pH va diéu chinh néu can. Thém nec dén 1 000 ml va phan phdi cdc long thich hop vao cdc binh va 6ng dung tich 9 ml. Khu tring trong ndi hap ap lye & (121 + 3) °C trong (15 + 1) min. 6.6 Dung dich nhugm Cac thanh phan cia dung dich nhuém dugc néu trong Bang 5. Bang 5 - Thanh phan ella dung dich nhuom Thanh phan Lugng Xenh cotton 059 Axit tactic (80 % dén 85%) 409 Glycerct 80g Nude ct 100 mi Cho cée thanh phan trong khoang 100 ml nuéc va héa tan. 12TCVN 10736-21:2017 7 Cach tién hanh Tuy thugc vao cBng vige do, co thé stv dung céc phurong phap khac nhau quy dinh trong TCVN 10736-19 (ISO 16000-19) 48 fay mau va phan tich mau vat liéu, 7A Lay mau tiv be mat TAA Yéu cdu chung ‘St dung dia tiép xc truc tiép (xem 7.1.2) va phuong phap bang dinh (xem 7.1.3) d8 ly mau bé mat cla vat liéu. Ngoai ra, c thé st dung gac v6 tring dé ay mau bé mat ma khéng thé fy bang da thach [vi dy: cc géc, cdc khe (xem 7.4)]. Cac phuong phap ly mau bé mat nay chi cung cdp két qua ban inh lvgng. Khong béo cdo két qua do la "don vi khudn lec hinh thanh (cfu) trén mot don vi dién tich" vi lop méc day dac thuéng hinh thanh trén cdc mau bé mat cia vat ligu bi nhiém va mot sé. ndm méc cd thé moc che khuat ho’c We ché cac loai canh tranh. Cach tiép cn phd hop hon la mé ta mat d6 tren méi truéng nudi cy (vi du: thuva, cao, i6p day dc). Viée nhan dang ce loai ndm médc cung cap nhi¢ théng tin hon so véi viée dinh lugng. Déi voi bé mat rdt sach (th? nghiém ve tring), thi viée dinh lveng 06 thé dug dy doan bang phuong phap dia try tiép vi khong 6 hodc co rat it cc khudn lac dy kién sé phat trién trén b& mat thach. 7.4.2. Phuong phadp dia tiép xtc tryc tip ‘Dia Petri chuyén dung {vi dy: RODAC®) hod tdi nha déo chuyén dung da dugc dé day bang chat méi trudng phat tridn hoi nhé ra trén map dia dugc dn vao vat liu cn kiém tra, Thach DG-18 va thach chat chiét malt ho&e thach dextrose khoai tay duge sl dyng ding théi lam mai trudng nudi cdy. Co thd cdn dén cdc moi trong nudi cdy khac tiy thugc vo nhu cau diéu tra, van chuyén cac dia tren dén phong thir nghiém (xem 7.3) va U rdi phan tich theo TCVN 10736-17 (ISO 1600-17). 7.1.3. Phuong phap bang dinh Phuong phap bang dinh chuyén cae ndm méc tir bé mat vat ligu sang mang phim co chat két dinh trong suét. Voi myc dich nay, dn bang dinh c&n than vao bé mat vat ligu dug l4y mu va sau dé kéo ra. Dinh bang 06 nam méc bam vao kep nhya c6 bé mat ndi hat, dat vao tui van chuyén sach va glri én phong thir nghiém 48 phan tich, Ngoai ra, dinh bang dinh vao mot vat kinh hién vi hoae tai nha sach trong sudt. CHU THICH 1: Trong truding hyp chi cé vai ném méc hode vat ligu bé mat dinh vao bang, thi vige sir yng cac vvat kinh hin vi hog tdi nhya trong suét sach Id khéng thugn tign vi nd s& rat Kho Khan dé Idy bang rama khong bj hong. Mau duge van chuyén dén cdc phong thir nghiém (xem 7.3) va phan tich bang kinh hi8n vi (xem 7.4). 13TCVN 10736-21:2017 Phuong phdp bang dinh va soi tryc tiép vat figu bang kinh hién vi cho wu diém la sv phat trién ndm méc nghi ngé trén cAc vat ligu cé thé durge khang dinh bang cach phat hién soi nm. 7.4.4 Mau gac Tay thudc vao van d8 durge diéu tra, mu thu duge tir bé mat vat liéu bang gac v6 tring khé hoac 4m va cy vach trén thach DG-18 va thach chat chiét malt ho&c thach dextrose khoai ty. Co thé cn sty dung méi truéng nudi dy khdc phy thude vao nhu cau diéu tra. Bang phuong phap nay chi thu dug cae két qua dinh tinh hodc ban dinh Iweng (néu phwong phap lay mau duge xac dinh). Khi dy kién dng 46 cao, thi mu gac ob th durgc xi ly bang cach sir dung phuong phdp tao huyén phu (xem 7.5), cho chi thi vé néng 46 ndm c6 mat trén dién tich bé mat duoc dy mau. So sanh voi phyong phap dia tiép xtc try tiép, thi quy trinh ldy mdu nay cé wu diém ld mau 06 thé duge dé dia tren cac boai thach khdc nhau déng thoi, Ngoai ra cho phép ldy mau cdc bé mat khéng thé My duoc bang phuong phdp dia thach true tiép (vi du: cde géc, khe). 7.2 Lay mau sé lweng lon Tuy thudc vao myc tiéu diéu tra, c&c mau vat ligu s6 Ivgng lén duge phan tich tir toan bé vat ligu hac tir ede lop vat ligu xéc dinh. Vat ligu can kiém tra dugc lay ra mOt cdch thich hop si dung cae dung cu a khts tring va déng géi vao hop dung hod thi v6 tring Tét nhat, 06 thé thu ldy cc mu tir cdc d6 séu khac nhau bang cach léy mau Idi khoan duréng kinh it nhat 3 cm, tét nhdt 5 em. Cac mau ly tir 66 sau xdc dinh sau d6 06 thé duge ldy ra mat cach v6 tring va dug phan tich trong phong thi nghiém, Mu dugc van chuyén dén céc phong thir nghiém (xem 7.3) va phan tich bang céch soi true tiép bang kinh hién vi (xem 7.4) hod bang céc phurong phap tao huyén phi (xem 7.4) sau 6 dugc nudi cay nhu mé t8 trong TCVN 10736-17 (ISO 1600-17). 7.3. Van chuyén va bao quan Goi cac mau vat ligu vao vat dyng hoae ti v6 tring, dat cdc dia thach od bé mat lay mau hung len trong hép kin. Bao vé mu vat lisu va dia thach khdi tac déng bén ngoai (nang, 4m hodc khé, néng va bui, v.v...) va van chuyén dén cdc phong thir nghiém ngay sau khi ldy mau xong. Nhiét do van chuyén khéng duge vot qua nhiét 6 & (25 + 3) °C. Lam mat trong khi van chuyén, néu can. Cha y khong [am Géng lanh va trénh nhiét 4 qua thép vi cé thé bi ngung tu. Ghi lai cdc didu kién trong qua trinh van chuyén (nhiét 49, thoi gian). XU ly mu tét nhdt la trong vong 24 h nhung khéng mun qua 48 h sau Khi két thuc ly mau. Mau phai dug a8 trong td lanh & (5 + 3) °C cho dén khi xi ly tip. 7.4 Soi trirc tiép bang kinh hién vi Cac mau bang dinh dug dung dé soi tryc tiép bang kinh hién vi. Cac mau vat liéu sé lugng Ién cé thé duge phan tich bang soi trvc tiép dudi kinh hign (vi du: cdc manh vat liu phan huy, cac mat cat 4TCVN 10736-21:2017 ngang). Viée phan tich dai kinh hién vi cung cdp cdc Iai thé la nm méc phat trién nghi ngd trén/trong val ligu 06 thé dug khang dinh véi su phat hién soi ndm. Cac mau 6ug¢ nhudm xanh cotton trong axit lactic (xem 6.6) va duge danh gid dudi kinh hién vi & do khuéch dai dén 1000x. Véi vat liu chtra véi (vi du: thach cao), viéc dann gia sau khi nhuém mau xanh cotton trong axit lactic thyc t& khong hop ly vi bot khi hinh thanh do két qua phan tig cia axit lactic voi cacbonat. Trong trvéng hop nay, phai sir dyng thude nhudm thay thé (vi du: xanh anilin). Khi phan tich cac mau bé mat hodc mau s6 luong lén cla val ligu, dn cha ¥ dén cc bao ti c6 mat hoac soi ndm méc, Sy co mat cua sqi ndm 1a chi thi cla nam méc phat trién trén vat ligu trong khi bao. ti cing c6 thé bat ngudn tl cdc ngudn khac. Viée danh gid bang kinh hién vi chi cung cdp két qua ban dinh lugng. Két qua duge bao cdo 1a loai (kiéu) bao tiv va manh soi ndm duge xac dinh theo tan suat xuat hién. 7.8 Tao huyén phu mau vat ligu va mau gac Phuong phap tao huyén phi chi si dung vat liéu déng nhat dug tgo huyén phi trong dung dich 48m (xem 6.5) dé gidi phéng cdc ném méc ra khoi vat ligu hodc gac bong (xem 7.1.4). Miéng gac bong dug chuyén vao éng nghiém dung mdt long xac dinh dung dich dém (xem 6.5) va tao huyén phi voi cdc buéc pha loang khdc. Sau d6, cdc lung dung dich huy&n phi: duces chuyén vao dia thach dé nuéi céy (thach DG-18 va thach chat chiét malt hodc thach dextrose khoai tay) nhu trong TCVN 10736-17 (ISO 16000-17). Mau vat ligu duoc cn, do va m6 ta 66 dm va céc dc tinh khéc. Sau 66, cdtinghin mau thanh cae miéng < 5 mm. Tuy thude vao vat liéu, chuyén 1 g dén 10 g vao binh cé vach ng&n v6 trung. Thém 50 ml dén 100 ml dung dich dém pha lodng. Dung dich dém ding dé diéu chinh d6 pH ma tai do phan ion nam méc sé it bj hy hai nhat. Tween 80® dugc st dung dé giam sc cng bé mat va tao diéu kién cho vige huyén phi. Cha y réng mau vat ligu duoc bao phi hoan toan bang dung dich dém. Ac binh & 200 r/m trong 15 min dé gidi phéng cac bao tty ra Khdi vat liéu. CHU THICH: Céc tai nhu déng da dvae chimng minh si dung thanh cong 48 gidi phong bao ti ra khéi_ cdc mau vat liu. Cac két qua ban dau tir cdc nghién eiru so sénh da cho thay 46 thu hdi hoi ego hon khi sir dyng phuong phap nay so voi phutong phap Idic mé ta trong 7.5, Dua trén huyén phu ban dau, tao mét day cdc 6 pha loang. Ngay trudéc khi pha loang, lac huyén pho. 3 lan méi [An 3 s tran may Ic éng nghiém. Chuyén 1 ml huy&n phi vao 9 ml dung dich 68m pha loang (xem 6.5), s dung pipet ding mét lan vé triing hodc pipet thy tinh nhdi bong. Trong cing mét cach, thyc hign hai buéc pha loding tiép theo go ra cée dung dich pha long 1:10; 1:100 va 1:1 000. ‘$6 long cdc bude pha lodng va cdc khoang pha loang edn thich tng voi néng do nam moc du kién va nhu cau do cy thé. Cé thé can thiét lp cae bute pha long them. Tiép theo 43 dia cdc lvgng huyén phu ban dau va cdc dung dich pha loang, sau 6 nudi céy va phan tich theo TCVN 10736-17 (ISO 16000-17). 18TCVN 10736-21:2017 8 Dam bao chat lwong Cac phdng thiy nghiém phai thc hién cac bin phép 64m bao chat long dugc lap thanh van ban va ludn c6 sn. 9 Bién ban lay mau Mau phi duge nhan biét day dil va dan nhdn tong Ung. Phai dién day du cac théng tin vao bién ban lay mau trudc khi (hodc ngay sau khi) lay mu. Bién ban lay mau il nhat phai bao gém cac théng tin sau: a) Vign dn tigu chudn nay, b) Tén va dia chi ca khéch hang, c) Nhiém vu do, d) Loai vat figu duoc ldy mau, e) Kiéu thiét bj ly mau dugc str dung 1) Ngay, gid lay mau va dia diém lay mau. 10 Dac tinh higu nang Sv phis hop cia phurong phap tao huyén phit durgc kiém tra bang cac phép do so sanh véi thach DG- 18 va thach cht chiét malt (xem Phu luc A). 16TCVN 10736-21:2017 Phy luc A (Tham khdo) Trao déi mu dé danh gid xac nhan phuong phap Tinh ph hyp cia phuong phap dy mau néu trong tiéu chudn nay dé dug thir nghiém bang cach gui cdc mau tiv mét loai vat liu ddng nhat, vat ligu hu hai do 4m één tém trong 10 phéng thi nghiém khac. nhau. MOt hoac hai phéng thir nghigm duoc yéu céu phan tich nam mau song song dé kiém tra sy phan bé cla céc logi ndm trong vat tigu. Tat cd cde phdng thir nghiém khac 64 phan tich hai mau song song. Mdt mau trao ddi dugc thurc hién ddi voi thach cao véi sau phang thir nghiém. Tang ndng d6 cia nam méc c6 thé nudi cay duge, da duge tinh theo TCVN 10736-17 (ISO 16000-17) la tong déi thdp [trung inh $02 cfulg (xem Bang A.1)]. BG khéng dém bao do déi véi nam mau song song trong mét phong thir nghiém 14 25 % va két qua cla tat c8 céc phdng thir nghigm 18 33 % Mot vai thiy nghiém méu trao déi dug tién hanh voi polystyrene va sgi khoang. Cac phéng thi nghigm duge yéu cu trinh bay céc két qua riéng déi voi thach DG-18 va thech chat chiét malt. Két qua dién hinh dugc trinh bay trong Hinh A.1 déi voi thach DG-18 va trong hinh A.2 d4i vai thach chat chiét malt. BO khéng dém bao do déi vai cae mau song song trong mot phéng thi nghiém nam trong khodng tir 10 % dén 20 % va déi v6i két qué ciia tat c cdc phéng thir nghiém Ia khodng 30 %, Bang A.1 - Két qua ctla trao ddi mau sir dung thach cao 86 cia phéng thir nghigm Néng 66 ném méc cfulg vat ligu (két qua két hop cua thach DG-18 va thach chat chiét malt theo TCVN 10736-17 (ISO 16000-17)) 1 478, 363, 360, 327, 231 360 (rung binh) SD 25 % 2 3 355 { 4 430 5 720 6 695 Trung bin ca cée phong th 502 ghiem 1 dén 6 {86 léch chudn (SD) cia phong 33% thiy nghigm 1 dén phang thir ighigm 6 7TCVN 10736-21:2017 70000 ~ 60000 50.000 40.000 ——-— 30000 20000 10000 CHO DAN X — s61veng phong thd nghiém Y don vjhinh thanh khudn lac (cfu) trén gam thach dichlorane glycerol (DG-18) Hinh Ad ~ Cac két qua ndng a6 ndm méc (cfulg DG-48) trong polystyrene trong trao déi mau (86 1 d6n 26 chi ra cac phéng thir nghiém va cac mau song song) 70000 60000 0.000 40000 30000 20000 19000 CHO DAN X sb lugng pong thir nghiém Y don vj hinh thann Kuan lac (cfu) trén gam thach chat chiét malt ( (MEA) Hinh A.2- Cac két qua ndng d6 nam méc (cfulg MEA) trong polystyrene trong trao di mau (86 1 dén 26 chira cdc phéng thir nghiém va cdc mau song song) 8a 13 TCVN 10736-21:2017 Thw myc tai ligu tham khao be~ Léy TCVN 1736-16 (ISO 1600-16), Khdng khi tong nha - Phan 16: Phat hién va dém ndm m: mau bang cach loc. VDI 4300 Part 10,Messen von Innenraumiuftverunreinigungen — Messstrategien bei der Untersuchung von Schimmelpitzen im Innenraum [Measurement of indoor air pollution — Measurement strategies for determination of mould fungi in indoor environment), EN 13098, Workplace atmospheres — Guidelines for measurement of airbome micro- organisms and endotoxin 19