8|o|og|a Mo|ecu|ar das Doenas Inf|amatr|as Intest|na|s

Mo|ecu|ar b|o|ogy of |nf|ammatory bowe| d|seases

Mauro |nho
LaboraLrlo de 8lologla Molecular e ulsclpllna de Cllnlca Clrurglca do ueparLamenLo de
Medlclna da unlvlLLL !olnvllle SC e ueparLamenLo de Clrurgla do PosplLal Munlclpal So !ose
!olnvllle SC
Lndereo para corespondncla


kLSUMC
Com elevada prevalncla a uoena de Crohn e a reLocollLe ulceraLlva apresenLam mecanlsmos
flslopaLolglcos os quals permanecem como um grande desaflo apesar de mulLas decadas de
pesados lnvesLlmenLos em pesqulsa LnLreLanLo o desenvolvlmenLo de Lecnlcas de anllse da
blologla molecular Lem proporclonado a ldenLlflcao de um grande numero de moleculas
relaclonadas a esLas doenas as quals podero represenLar um lmporLanLe auxlllo na
compreenso de seus complexos aspecLos LxlsLem forLes evldnclas ho[e de que as doenas
lnflamaLrlas lnLesLlnals (ull) so o resulLado de um desequlllbrlo enLre a flora bacLerlana
comensal e o aparaLo lmunolglco da mucosa lnLesLlnal um dos achados mals conslsLenLes
nesLe senLldo referese elevada lncldencla de muLaes do gene nCu2/CA8u13 em
paclenLes porLadores de uoena de Crohn alem da comprovao de sua correlao fenoLlplca
com esLa doena Alem desLa proLelna dlversas ouLras moleculas apresenLamse alLeradas nas
ulls envolvendo dlversos aspecLos como lmunldade lnaLa resposLa lnflamaLrla e funo de
barrelra mucosa A observao das varlaes de expresso desLas moleculas correlaclonadas
evoluo cllnlca e resposLas LerapuLlcas lr conLrlbulr para que possamos em um fuLuro obLer
resposLa a hlsLrlcos quesLlonamenLos sobre esLas complexas doenas
Descr|tores uoena de Crohn reLocollLe ulceraLlva blologla molecular

A8S1kAC1
uesplLe lLs hlgh prevalence and many years of baslc and cllnlcal research paLhophyslology of
Crohns dlsease and ulceraLlve collLls remalns a greaL challenge 1he recenL advances ln
molecular blology Lechnlques have provlded ldenLlflcaLlon of a greaL number of molecules
relaLed Lo Lhese dlseases LhaL may help ln a near fuLure Lo undersLand lLs sLlll obscure aspecLs
Many evldences have recenLly demonsLraLed LhaL lnflammaLory bowel dlseases (l8u) resulL
from an lmbalance beLween bowel commensal bacLerlal flora and Lhe lmmunologlcal mucosal
apparaLus 1he very conslsLenL flndlng LhaL muLaLlons ln nCu2/CA8u13 gene occur ln a hlgh
percenLage of Crohns dlsease paLlenLs and lLs phenoLype correlaLlon have boosLed furLher
research Lo ldenLlfy oLher l8urelaLed molecules lndeed many oLher varlaLlons ln gene
expresslon have been demonsLraLed Lo be relaLed Lo paLhophyslology of l8u lncludlng
dlfferenL aspecLs such as lnaLe lmmunlLy lnflammaLory response and mucosal barrler
dlsfuncLlon 1he observaLlon of Lhe correlaLlon beLween Lhese gene expresslon varlaLlon
dlsease behavlour and response Lo LherapeuLlcs may conLrlbuLe ln a near fuLure Lo undersLand
mosL quesLlons regardlng Lhese complex dlseases
ey words Crohns dlsease ulceraLlve collLls molecular blology



Apesar de sua elevada prevalncla a compreenso dos mecanlsmos flslopaLolglcos da
doena de Crohn e da reLocollLe ulceraLlva permanece como um grande desaflo apesar de
mulLas decadas de pesados lnvesLlmenLos em pesqulsa LsLudos cllnlcos em grande escala
asslm como anllses em clnclas bslcas mosLraramse lnsuflclenLes para superar a
complexldade desLas doenas as quals apesar de apresenLar uma profunda slmllarldade enLre
sl possuem uma exLensa varledade no que dlz respelLo lncldncla slLlo anaLmlco de
envolvlmenLo formas de apresenLao evoluo e resposLa LerapuLlca
C grande avano Lecnolglco ocorrldo ao longo dos ulLlmos anos que permlLlu o
desenvolvlmenLo de Lecnlcas de anllse da blologla molecular dos Lecldos Lrouxe Lambem
uma renovao de esperanas quanLo posslbllldade de obLeno de resposLas na rea das
doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals ue faLo um grande numero de esLudos reallzados nos
prlnclpals cenLros de pesqulsa lnLernaclonals dedlcamse desde enLo a compreender os
vrlos aspecLos envolvldos nesLas doenas Lmbora esLe[amos alnda basLanLe dlsLanLes de
alcanar esLes ob[eLlvos comeam a ser deflnldas algumas bases sobre as quals podero ser
erguldas as llnhas de pesqulsa necessrlas para proporclonar uma vlso fuLura desLe complexo
mosalco
C ob[eLlvo desLe arLlgo ser apresenLar uma breve revlso sobre o esLado aLual dos concelLos
e resulLados gerados aLe o momenLo pela anllse blomolecular dos mecanlsmos
flslopaLolglcos responsvels pela ocorrncla das doenas lnflamaLrla lnLesLlnals
Intest|nos e bactr|as um equ|||br|o de||cado
Lmbora o Lubo dlgesLlvo lnLelro se[a amplamenLe colonlzado por bacLerlas exlsLe enLre seus
dlversos segmenLos uma grande varledade na concenLrao desLas A presena de secrees
cldas e blllares no esLmago e lnLesLlno delgado proxlmal e a presena de um LrnslLo mals
acelerado conLrlbuem para uma reduo da quanLldade de bacLerlas nesLes segmenLos A
colonlzao bacLerlana aumenLa de forma exponenclal no lnLesLlno delgado dlsLal devldo
ausncla das referldas secrees e pelo reLardo de LrnslLo pela ao da vlvula lleocecal no
clon lremos observar um aumenLo acenLuado da flora bacLerlana na qual coexlsLem cerca de
400300 especles em um volume esLlmado enLre 10
10
e 10
12
bacLerlas por grama de conLeudo
fecal ou 60 do LoLal de fezes exlsLenLes no lnLesLlno grosso
uma unlca camada de celulas eplLellals separa Lodo esLe exLenso volume de bacLerlas do malor
aparaLo lmunolglco do nosso corpo formado por uma grande massa de Lecldo llnfLlco
generlcamenLe descrlLa como CAL1 (qot ossocloteJ lympbolJ tlssoe) a qual lnclul as placas de
eyer follculos llnfldes lsolados e llnfonodos mesenLerlcos
Sendo asslm e realmenLe noLvel que a coexlsLncla enLre esLes dols amblenLes de naLureza
Lo anLagnlca se[a capaz de preservar na malorla das pessoas um equlllbrlo no qual esLe
exLenso slsLema lmunolglco possa Lolerar a presena do grande volume de bacLerlas
comensals represenLando um lmporLanLe elemenLo na flslologla lnLesLlnal
LsLe equlllbrlo manLldo aLraves das lmunldades lnaLas ou adqulrldas lmpede a ocorrncla de
uma resposLa lnflamaLrla medlada pela llberao de dlversas proLelnas generlcamenLe
classlflcadas como cltocloos cu[a produo e esLlmulada a parLlr da presena de
mlcrorganlsmos ou ouLros anLlgenos com dlversos ob[eLlvos como aLlvao dos dlversos Llpos
de leucclLos apopLose slnLese hepLlca de proLelnas de fase aguda febre eLc Lmbora
algumas desLas clLoclnas apresenLem nomes especlflcos como fotot Je oectose tomotol (1Nl)
lotetfetoo (llN) ou fototb Je ttoosfotmoo Jo ctesclmeoto (1Clb) a grande malorla e
Lambem denomlnada como lotetleocloos (ll) sendo enLo numeradas sucesslvamenLe a parLlr
de suas descoberLas
Doenas |nf|amatr|as |ntest|na|s o desequ|||br|o
Sabese que a ocorrncla de uma doena lnflamaLrla crnlca represenLa a perda do equlllbrlo
aclma clLado consLaLandose uma elevao local dos nlvels de dlversas clLoclnas na uoena
de Crohn por exemplo exlsLe uma llberao de 1nla lln a lL12 e lL17 enquanLo que na
reLocollLe ulceraLlva ocorre um aumenLo de lL13 enLre ouLras
1rs hlpLeses vm sendo examlnadas como posslvels orlgens desLe desequlllbrlo lmunolglco
lnclulndo dlsLurblos da flora bacLerlana faLores lmunolglcos e defelLos na barrelra mucosa
D|strb|os da f|ora bacter|ana
LxlsLem mulLlplas evldnclas de que as bacLerlas desempenham um papel chave no
surglmenLo das doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals crnlcas LsLudos experlmenLals demonsLram
a lmposslbllldade do desenvolvlmenLo desLa lnflamao na ausncla de bacLerlas levando
ampla acelLao aLual do aforlsma sem bacLerla no h collLe
8aseados nesLes achados h mulLos anos LenLase ldenLlflcar um posslvel agenLe causal das
doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals vrlas bacLerlas e vlrus foram proposLos como agenLes
eLlolglcos lnclulndo o ,ycoboctetlom pototobetcoloslsllstetlo mooocytoqeoes etslolo
eotetocolltlco e a scbetlcblo coll mas nenhuma comprovao conslsLenLe fol demonsLrada
na verdade as evldnclas aLuals sugerem que a aLlvldade lnflamaLrla crnlca lnLesLlnal
parece paradoxalmenLe ser desencadeada a parLlr de bacLerlas perLencenLes flora comensal
normal as quals assumem em condles alnda desconhecldas um papel paLolglco capaz de
aLlvar o aparaLo lmunolglco local
Desregu|ao |muno|g|ca da mucosa e o pape| da gent|ca
C equlllbrlo lmunolglco baselase em grande parLe na exlsLncla de um mecanlsmo
denomlnado como lmoolJoJe looto ALraves desLe celulas de defesa como macrfagos e
celulas dendrlLlcas exlsLenLes na mucosa lnLesLlnal so capazes de deLecLar a presena de
moleculas assocladas a mlcrorganlsmos LsLas moleculas generlcamenLe descrlLas como
AMs (potboqeoossocloteJ molecolot pottetos) so de naLureza dlsLlnLas enLre sl como
llpopollssacarldeos llpoproLelnas pepLoglucanos ou flagellnas
ara que esLe reconheclmenLo ocorra as celulas de defesa possuem em sua superflcle um
grande numero de sensores ou recepLores os quals podem ser classlflcados em duas
grandes famlllas denomlnadas respecLlvamenLe como 1L8 (tollllke teceptot) e nCu
(NocleotlJebloJloq ollqometlzotloo Jomolo) uma vez aLlvados pelas moleculas bacLerlanas
os recepLores que compem esLas famlllas desencadelam sequnclas de reaes em cadela
que lro levar a uma resposLa capaz de manLer o equlllbrlo bacLerla x eplLello na mucosa
lnLesLlnal uenLre os recepLores da famllla nCu desLacamse as proLelnas nCu1 e nCu2 as
quals so capazes de deLecLar componenLes de bacLerlas Cram poslLlvas e negaLlvas
Alem desLa lmporLanLe funo esLas proLelnas desempenham ho[e um papel fundamenLal nos
esLudos sobre doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals uma vez que suas alLeraes Lm sldo
conslsLenLemenLe relaclonadas flslopaLologla desLas doenas no apenas na sua lncldncla
mas Lambem lnflulndo em faLores lmporLanLes como suas caracLerlsLlcas e evoluo cllnlca
como anallsaremos a segulr
rote|na NCD2 (CAkD 1S) o fator gent|co
Lm 2001 fol descrlLa uma assoclao enLre muLaes no gene CA8u13 o qual codlflca a
proLelna nCu2 com a ocorrncla de doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals mals especlflcamenLe
a uoena de Crohn uesde enLo um grande numero de esLudos Lem conflrmado de forma
conslsLenLe esLa relao a qual pode ser melhor demonsLrada da segulnLe forma
LsLlmase que 2030 dos porLadores de uoena de Crohn apresenLem alguma muLao no
gene nCu2/CA8u13 8lls e cols enconLraram uma lncldncla de 239 de muLaes desLe
gene enLre porLadores desLa doena enquanLo a lncldncla observada enLre paclenLes com
reLocollLe ulceraLlva e lndlvlduos saudvels fol de 96 e 144 respecLlvamenLe sem
dlferena slgnlflcaLlva enLre esLes dols ulLlmos grupos
Segundo uma meLanllse publlcada por Lconomou e cols envolvendo 42 esLudos lndlvlduos
com muLao em apenas um alelo do gene nCu2/CA8u13 (heLerozlgLlcos) apresenLam um
rlsco 23 vezes malor de apresenLar a uoena de Crohn sendo que esLe rlsco se amplla para
171 vezes (1027) em porLadores de muLaes nos dols alelos (homozlgLlcos) CuLros auLores
relaLam esLe rlsco como sendo alnda malor esLlmandoo enLre 20 e 40
8adfordSmlLh e andeya publlcaram ouLra meLanllse lnclulndo 12 esLudos que buscaram
correlaclonar a presena de muLaes nCu2/CA8u13 com aspecLos relaclonados locallzao
e o comporLamenLo da uoena de Crohn e conflrmaram uma assoclao slgnlflcaLlva com a
forma lleal ou lleocllca e a presena de leses esLenosanLes alem de uma posslvel
precocldade na ldade de surglmenLo da doena
Alem de comprovar esLa lmporLanLe relao com faLores geneLlcos esLes achados
demonsLram alnda a posslvel orlgem do desequlllbrlo bacLerlas/hospedelro observado nas
doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals uma vez que a proLelna nCu2 Lem por funo a aLlvao de
uma resposLa lnflamaLrla moderada a parLlr do reconheclmenLo de um produLo bacLerlano
especlflco denomlnado como Mu A parLlr desLes achados suspelLase enLre ouLras
hlpLeses que esLa deflclncla na resposLa lmunolglca lnaLa faclllLarla uma lnfeco da
lmlna prprla desencadeando um quadro lnflamaLrlo crnlco de malores propores
rote|na NCD1]CAkD4
Alem da proLelna nCu2/CA8u13 ouLra proLelna da famllla nCu Lem sldo assoclada
flslopaLologla das doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals embora exlsLlndo alnda poucas evldnclas
a respelLo 1raLase da proLelna nCu1/CA8u4 expressa no lnLesLlno delgado e clon a qual
Lambem exerce papel no reconheclmenLo no eplLello de agenLes bacLerlanos como blqello
flexeoetl e coll lnvaslva Mc Covern e cols LesLaram a assoclao enLre muLaes desLe gene
em uma coorLe de porLadores de doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals e conLroles e
comprovaram de forma semelhanLe ao nCu2/CA8u13 uma relao slgnlflcaLlva nos casos de
uoena de Crohn mas no em casos de reLocollLe ulceraLlva ue qualquer forma LraLase de
ouLra evldncla no senLldo de que esLas doenas se[am o resulLado da alLerao de reaLlvldade
a alguns anLlgenos presenLes na mucosa lnLesLlnal
am|||a 1Lk
Alem dos recepLores nCu ouLra famllla lmporLanLe de recepLores de membrana em celulas de
defesa no eplLello lnLesLlnal perLence ao grupo denomlnado como 1L8 (1ollllke teceptot)
LsLes recepLores reconhecem os llpopollsacarldeos produzldos por bacLerlas em sua grande
malorla comensals gram negaLlvas sendo posslvelmenLe responsvels na dlferenclao enLre
esLas e as bacLerlas paLognlcas Cnze Llpos dlferenLes de 1L8 [ foram ldenLlflcados e
dlversos esLudos Lm demonsLrado uma varlao na expresso desLes enLre lndlvlduos
normals e paclenLes porLadores de uoena de Crohn e reLocollLe ulceraLlva
Cutros genes
Lmbora os segmenLos gnlcos referenLes expresso das proLelnas nCu Lenham recebldo
uma malor aLeno devldo conslsLncla e reproduLlbllldade dos resulLados dlversos ouLros
segmenLos cromossomlals Lm sldo clLados como posslvels codlflcanLes de proLelnas
relaclonadas s doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals LsLes segmenLos l8us (loflommototy bowel
Jlseose) conforme demonsLrados na Labela 1 Lm sldo basLanLe esLudados com o ob[eLlvo
no apenas de ldenLlflcar posslvels componenLes heredlLrlos desLas doenas mas Lambem
vlsando a compreenso dos mecanlsmos moleculares envolvldos em sua eLlopaLogenla e
mesmo na resposLa aos dlferenLes esquemas LerapuLlcos uLlllzados em seu LraLamenLo



Defe|tos na barre|ra mucosa
Alem das alLeraes ocorrldas na flora bacLerlana e na resposLa lmune presena de bacLerlas
o compromeLlmenLo da barrelra mucosa e conslderado como um Lercelro aspecLo capaz de
conLrlbulr para a flslopaLologla das doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals
8esponsvel pela medlao enLre as bacLerlas do lumen lnLesLlnal e o slsLema llnflde a
lnLegrldade da camada eplLellal Lem por funo aLuar seleLlvamenLe para llmlLar a peneLrao
de anLlgenos e permlLlr a passagem de llquldos nuLrlenLes e alguns mlcrorganlsmos Cs
esLudos de blologla molecular demonsLram que um grande numero de proLelnas so
necessrlas para que esLa funo de barrelra ocorra de forma adequada uenLre esLas
poderlamos desLacar como exemplos a proLelna ttoospottoJoto Je ctloos otqolcos (CC1n) e
a uCL3 ambas expressas pelo cromossomo 3 (l8u3 na Labela aclma) cu[as alLeraes esLo
assocladas uoena de Crohn CuLras proLelnas de grande relevncla na lnLegrldade da
barrelra eplLellal so as Jefeosloos as quals apresenLam ao anLlbacLerlana e cu[a expresso
alLerada Lem sldo demonsLrada em paclenLes porLadores de doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals
podendo conLrlbulr para o desequlllbrlo dos mecanlsmos de defesa posslblllLando uma
lnLenslflcao da lnvaso bacLerlana e a consequenLe lnflamao crnlca da mucosa
Asslm sendo observamos que a apllcao de Lecnlcas de blologla molecular ao esLudos das
doenas lnflamaLrlas lnLesLlnals Lem posslblllLado a ldenLlflcao de um grande numero de
moleculas envolvldas em dlferenLes posslvels mecanlsmos flslopaLolglcos desLas doenas A
observao das varlaes de expresso desLas moleculas correlaclonadas evoluo cllnlca e
resposLas LerapuLlcas lr conLrlbulr para que possamos em um fuLuro obLer resposLa a
hlsLrlcos quesLlonamenLos sobre esLas complexas doenas

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