Pruebas de Potencial de Floculacin

Propsito Procedimientos
Determinar floculacin en los edulcorantes nutritivos usados en bebidas. Prueba de 10 das (Mtodo preferido) Pentacloruro de antimonio, Prueba Cualitativa y Cuantitativa, Prueba de Azul Alcin

Prueba de 10 da: Sacarosa Granular Paso a Paso

Equipo
Balanza Botella con acabado de corona de 500 ml Coronas Probeta graduada de 10 ml Vaso de laboratorio de vidrio de 100 ml Fuente luminosa de alta intensidad cido fosfrico 2N (H3PO4) Agua carbonatada (aproximadamente 4.0 volmenes) Benzoato de sodio a 0.1% peso / volumen Agua destilada 1. Disuelva 55 gramos de azcar en 60 ml de agua destilada. Si hay presencia de partculas de carbono en el azcar o si no se obtiene una solucin transparente, filtre con un filtro de papel grueso (Whatman No. 54 o equivalente) a 70-80C y utilice la solucin filtrada (lo que pasa a travs del filtro) para la prueba. 2. Agregue 5 ml de solucin de benzoato de sodio a 0.1% p/v y 4 ml de 2N H3PO4. 3. Diluya 500 ml de agua carbonatada en una botella de 500 ml y cierre con una corona. 4. Deje la botella a temperatura ambiente durante diez das. 5. Encienda una luz de alta intensidad sobre la muestra y califique de la manera siguiente: Negativo: Sin floculacin Ligero: Floculacin muy ligera Moderado: Floculacin ligera que se distingue fcilmente bajo la luz Severo: Floculacin que se pueden ver sin la luz

Reactivos

Prueba

Prueba de 10 Das: Sacarosa Lquida y Otros Edulcorantes

Equipo
Fuente luminosa de alta intensidad Medidor de pH (o papel indicador de pH) Bureta (capacidad aproximada de 25 ml) Recipiente de vidrio de 1 litro con tapa
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Prueba
1. Prepare 1 litro de solucin de 54 Brix de acuerdo con el procedimiento de Dilucin de Jarabes Edulcorantes Acidificados, SM-PR-770. 2. Tape el recipiente y djelo a temperatura ambiente durante diez das. 3. Encienda una luz de alta intensidad sobre la muestra y califique de la manera siguiente: Negativo: Sin floculacin Ligero: Floculacin muy ligera Moderado: Floculacin ligera que se distingue fcilmente bajo la luz Severo: Floculacin que se pueden ver sin la luz

Pentacloruro de Antimonio: Prueba Cualitativa

1. Prepare la muestra de azcar de remolacha de la manera siguiente: En el caso de Sacarosa granular Sacarosa lquida Debe Disolver 100 gramos de azcar en 200 ml de 0.01N HCl Disolver 150 gramos de azcar en 200 ml de 0.01N HCl

2. Filtre la solucin de azcar con una membrana de 1.2 m y enjuague con 100 ml de 0.01N HCl. 3. Seque la membrana en un horno a 105C durante aproximadamente 5 minutos. 4. Repita los Pasos 1 al 3 con una segunda muestra de azcar de remolacha que se utilizar como medida de control. De ser posible, el azcar de control estar completamente libre de saponinas. 5. Utilice un tubo capilar para aplicar una gota del reactivo de pentacloruro de antimonio a ambas membranas. 6. Compare los colores rosas que se desarrollan a temperatura ambiente. Si la membrana de muestra tiene un color rosa ms oscuro que la membrana de control, quiere decir que contiene saponina. Un color ms oscuro significa un nivel ms alto de saponina, lo que puede causar floculacin en las bebidas.

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NOTA: Un alto nivel de humedad relativa puede hacer ms lenta la reaccin de la saponina y el pentacloruro de antimonio a temperatura ambiente. Mejore esta reaccin elevando lentamente la temperatura a cerca de 105C. Si el color sigue sin desarrollarse bien, aplique ms pentacloruro de antimonio a las reas sin utilizar de ambos filtros y repita la evaluacin.

Pentacloruro de Antimonio: Prueba Cuantitativa

1. Prepare una solucin de saponina disolviendo 100 Mg de saponina en 1 litro de metanol. 2. Prepare muestras utilizando el azcar de control conforme a los pasos 1-3 de la prueba cualitativa antes descrita. 3. Utilice un tubo capilar para aplicar 1 ml de solucin de saponina (preparada en el paso 1) a la membrana de azcar de control. Esta dosis es equivalente a 1 Mg de saponina por Kg de azcar de remolacha. 4. Compare el color rosa de la membrana de control y el color de la membrana de azcar de muestra. Agregue gotas de 1 ml de solucin de saponina a la membrana de control hasta que su color rosa coincida con el color de la muestra. 5. Calcule el contenido de saponina de la muestra multiplicando el nmero de gotas de 1 ml agregadas a la membrana de control por 1 Mg./Kg. Por ejemplo, 2 gotas = 2 Mg./Kg. de contenido de saponina. Un contenido de saponina de 1.3 Mg./Kg. o ms puede causar floculacin en las bebidas.

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Prueba de Azul Alcin (Sacarosa Granular o Lquida)
La prueba de azul alcin para determinar el potencial de floculacin en sacarosa granular o lquida utiliza tres procedimientos: si el Procedimiento A demuestra que la sacarosa tiene potencial de floculacin, utilice el Procedimiento B y el Procedimiento C para confirmar este resultado y conocer la cantidad. El Procedimiento A utiliza azul alcin para pintar los carbohidratos que no se disuelven y pueden causar floculacin en las bebidas. Esta prueba tambin emplea un tratamiento de agua caliente para disolver y eliminar substancias (principalmente dextrinas) que podran causar errores en los resultados.

Equipo

Balanza Aparato de filtro de membrana Membranas de 0.8 m Membranas de 0.45 m Vasos de laboratorio de vidrio de 1000 ml Vasos de laboratorio de vidrio de 250 ml Probeta graduada de 10 ml Probeta graduada de 100 ml Parrilla Tubos de ensayo (capacidades aproximadas de 25 ml y 50 ml) Aparato de agitacin magntica Bao helado Centrfuga Espectrofotmetro con celdas de 5 cm Cronmetro Solucin de Azul Alcin cido actico puro Isopropanol Solucin de antrona Agua tratada

Reactivos

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Procedimiento A (prueba de filtracin)
1. Prepare la muestra de azucar de caa de la manera siguiente: En el caso de Sacarosa granular Sacarosa lquida Debe... Diluir 200 gramos de azcar en 600 ml de agua tratada a temperatura ambiente Diluir 300 gramos de azcar en 600 ml de agua tratada a temperatura ambiente

2. Coloque membranas de 0.45 m (inferior) y 0.8 m (superior) en serie sobre el aparato de filtracin y filtre la solucin de azcar. Para azcares de filtracin lenta, agregue juegos de membranas. 3. Lave los filtros perfectamente con agua tratada a temperatura ambiente y colquelos dentro de un vaso de laboratorio de 250 ml. 4. Agregue 25 ml de agua tratada al vaso de laboratorio. Caliente hasta que hierva mientras revuelve para eliminar partculas de los filtros. 5. Mientras el agua del Paso 4 sigue caliente (arriba de 80C), virtala a travs de una membrana de 0.45 m. Coloque la solucin filtrada (lo que pasa a travs de la membrana) en un segundo vaso de laboratorio de 250 ml. 6. Agregue 3 ml de azul alcin al segundo vaso de laboratorio y caliente la solucin hasta que se reduzca su volumen a aproximadamente 15 ml. 7. Enfre el vaso de laboratorio mediante un bao helado. 8. Agregue 30 ml de isopropanol al vaso de laboratorio y despus coloque el vaso en un agitador magntico y agite lentamente durante 15 minutos. En caso que no aparezca precipitado (slidos), vaya al paso 11. 9. Si aparece el precipitado, centrifugue para separarlo del lquido y despus deseche el lquido y lave el precipitado con isopropanol hasta que la solucin obtenida sea transparente.

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10. Elimine el precipitado con una corriente de agua tratada a temperatura ambiente y contine agregando agua tratada hasta llegar a 25 ml de solucin. 11. Determine la absorbencia de la muestra a 620 nm utilizando un espectrofotmetro con celdas de 5 cm y una pieza. Prepare la pieza filtrando 25 ml de agua tratada caliente (80C) con una membrana de 0.45 m. 12. Si la absorbencia de la muestra es mayor que 0.120, repita esta prueba utilizando el Procedimiento B y el Procedimiento C. En caso que sea menor que 0.120, el azcar cumple con las normas y no hay probabilidad de que produzca floculacin en las bebidas. Procedimiento B (prueba de confirmacin) 1-4. Siga los Pasos 1-4 del Procedimiento A. 5. Mientras el agua del Paso 4 sigue caliente (arriba de 80C), virtala a travs de una membrana de 0.45 m. Coloque la solucin filtrada (lo que pasa a travs de la membrana) en un tubo de ensayo colocado bajo el filtro. 6. Enfre el tubo de ensayo en un bao helado durante 5 minutos. 7. Una vez que el tubo de ensayo est fro, vierta su contenido a travs de una membrana de 0.45 m. Coloque la solucin filtrada (lo que pasa a travs de la membrana) en otro tubo de ensayo y gurdela para el Procedimiento C de la prueba. 8. Lave el filtro con agua a temperatura ambiente. Despus vierta 20 ml de agua hirviendo a travs del filtro y coloque la solucin filtrada en un vaso de laboratorio de 250 ml. 9-14. Siga los Pasos 6-11 del Procedimiento A. 15. Califique el potencial de floculacin del azcar: Severo: absorbencia mayor que 0.18 Medio: absorbencia de 0.13 a 0.18 Ligero: absorbencia de 0.10 a 0.13 Ninguno: absorbencia menor que 0.10 16. Si las muestras tienen una absorbencia de 0.13 o menos, el azcar no causar floculacin en las bebidas. 1. Agregue 2 ml del filtrado proveniente del Paso 7 del Procedimiento B a un tubo de ensayo. 2. Agregue 5 ml de la solucin de antrona. 3. Coloque el tubo de ensayo en un bao de agua hirviendo durante 5 minutos. 4. Verifique el color de la solucin en el tubo de ensayo. Si es de color verde oscuro a azul, hay carbohidratos en la muestra.

Procedimiento C (confirmacin con prueba de antrona)

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Historial de Revisiones
Emisin 31-Ene-2004 31-Ago-2003 03-Jun-2001 Resumen de Cambios Propsito corregido debido a los edulcorantes agregados en la emisin previa Formato actualizado, adicin de referencia, adicin de HFSS, MIS y prueba de jarabe simple. Documento nuevo.

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