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do nutriente Pipetta calibrata a 0,1 ml Soluzione Ringer Piastre di Petri Terreno BD Baird-Parker Agar Terreno Agar nutrient Brodo Nutritivo: Estratto di carne 3 g Peptone 5 g Acqua distillata 1000 mL pH 6,80,2
Finalit: Analisi microbiologica dei campioni alimentari acquistati in gastronomia. Attraverso questa esperienza vogliamo andare a controllare la carica batterica totale di questi alimenti, e se vi la presenza di Staphylococcus aureus. Per questo utilizzeremo due terreni diversi. BD Baird-Parker Agar Formula per litro di acqua purificata Tryptone 10,0 g Estratto di carne bovina 5,0 g Estratto di lievito 1,0 g Cloruro di litio 5,0 g Glicina 12,0 g Piruvato di sodio 10,0 g Tellurito di potassio 0,1 g Agar 20,0 g Emulsione di tuorlo duovo 50,0 mL pH 6,8 0,3 Risultati (teorici) Gli stafilococchi coagulasi-positivi (Staphylococcus aureus) formano colonie convesse, lucide, da grigio scure a nere, con margini integri e zone chiare, eventualmente circondate da una zona opaca. Gli stafilococchi coagulasi-negativi formano colonie grigio-nere con crescita scarsa o assente, in genere senza zone chiare od opache. Spesso sono inibiti organismi diversi dagli stafilococchi. Se presente crescita, le colonie possono essere da marroni a grigie o incolori, senza zone chiare od opache. Confermare con ulteriori test l'identificazione presuntiva ottenuta su questo terreno.
Terreno Agar nutriente per verifica carica totale Estratto di carne 3 g Peptone 5g Agar 15g Acqua distillata 1000 mL pH 6,80,2
Alimento
Carica batterica
Coliformi / gr.
Salmonella / 25 gr.
1.000.000
5.000
5.000
100
10
assente
50.000
500
50
500
assente
Procedimento: Inizialmente abbiamo preso un campione di ogni alimento e lo abbiamo messo in delle bottiglie di vetro contenenti brodo nutriente. Abbiamo lasciato queste bottiglie a temperatura ambiente per un paio di giorni di modo che potessero svilupparvisi allinterno i vari microrganismi. In seguito abbiamo effettuato delle diluizioni seriali da 10-2 fino a 10-5 inserendo nelle provette 9 ml di soluzione Ringer, e prelevando di volta in volta dalle provette 1ml di soluzione. Dopo aver effettuato le nostre diluizioni abbiamo effettuato delle semine per spatolamento in superficie in piastre contenenti terreno BD Baird-Parker Agar e Agar nutriente, nelle quali abbiamo inserito 0,1 ml delle diluizioni finali di ogni campione. Infine abbiamo messo le piastre a incubare a 35C. Risultati: