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Impacto de Hongos y Micotoxinas en la Produccin Animal

Douglas Zaviezo
Special Nutrients

Seminario Micotoxinas Micotoxicosis Myco-Ad A-Z Indukern 12 mayo 2005 Barcelona

Hongos y Micotoxinas
Los hongos y las micotoxinas estn ampliamente difundidos en la naturaleza. Los hongos proliferan en cualquier lugar donde exista una mnima cantidad de materia orgnica, oxigeno, temperatura y humedad. Las micotoxinas son metabolitos secundarios de los hongos muy dainas para los animales
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10/4/2005

Hongos y Micotoxinas
Los hongos pueden contaminar las tierras cultivables y las plantas en cualquier etapa de su desarrollo y producir micotoxinas
300 TIPOS MICOTOXINAS

7 CONOCIDAS POR
SU TOXICIDAD
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Hongos
Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus Penicillium sp. Aspergillus ochraceus Fusarium roseum Fusarium tricinctum Fusarium moniliforme Fusarium graminearum
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Micotoxinas

Aflatoxinas Ocratoxinas Tricoticenos


Toxina T-2 DAS diacetoxiscirpenol DON dioxinivalenol

Zearalenona Fumonisina
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Hongos y Micotoxinas
en el campo la cosecha el transporte el almacenaje el procesamiento el suministro del alimento a los animales.
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Maz contaminado con Fusarium spp. Probable contaminacin con micotoxinas

10/4/2005

Incremento de la presencia de micotoxinas del grano al alimento


Presencia de aflatoxina
Lugar de Muestra Maz Alimento terminado en la fbrica Alimento terminado en los comederos Muestras Positivas 30 % 52 % 91 %

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Tiempo del alimento en la granja y presencia de micotoxinas


Presencia de aflatoxina
Alimento
edad en dias

Muestras

Aflatoxina
ppb

Aflatoxina
% positiva

1a5 6 a 10 11 a 15 16 a 20
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132 64 20 6

7.9 8.0 10.7 27.9

20.5 23.4 30.0 66.7


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Anlisis de micotoxinas
Mtodos Qumicos de Alta Precisin
Cromatografa Lquida de Alta Resolucin HPLC (estndar) Cromatografa de Capa Fina TLC HPLC con Espectrometra de Masa MS Cromatografa Gaseosa con MS

Mtodos Rpidos Inmunoensayo ELISA


Anticuerpos Policlonales Anticuerpos Monoclonales con Fluorometra

Mtodos Sensitivos y Rpidos


NIR correlacin >0.9 con HPLC y demora 1-5 minutos
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Anlisis de micotoxinas
HPLC
Preciso Especifico Mnimos detectables bajos Mtodo oficial Costosos Lentos No permite multideteccin No analiza simultneamente

ELISA
Rpido Menor costo Anlisis simultaneo Mnimos detectables adecuados
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Purificacin de extractos Riesgos de falsos positivos Menos preciso Orientativo


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Anlisis de micotoxinas
Problemas con Resultados de Anlisis
Errores de los anlisis: 92.7 % error de muestreo 7.2 % error de submuestra 0.1 % error de anlisis Distribucin de las micotoxinas y adecuada toma de muestras Muestras con material en movimiento y molido en intervalos de tiempo preestablecidos Fabricacin de 100 ton/dia muestra mnima 45 kg y preparacin de submuestra de 1 kg para anlisis
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Hongos - Micotoxinas y Nutricin

Los hongos que producen las micotoxinas y crecen en los ingredientes disminuyen el valor nutritivo de la materia prima

Las micotoxinas disminuyen consumo de alimento e interfieren con la utilizacin de ciertos nutrientes Las micotoxinas provocan alteraciones y daos fisiolgicos que pueden aminorarse con el incremento de ciertos nutrientes y aditivos
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Crecimiento de hongos y uso de nutrientes


Los hongos normalmente prefieren el germen de los granos para crecer por su riqueza en nutrientes
Aceites Carbohidratos Vitaminas

El crecimiento de hongos en granos almacenados esta correlacionado con una disminucin de carbohidratos, lpidos y vitaminas
Vitamina B1 (Tiamina) y caroteno ( Pro-vitamina A )
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Crecimiento de hongos y uso de nutrientes


Los hongos usan a los granos como fuente de energa 25 % menos aceite en maz almacenado 2 meses con 18% humedad 20 % menos de lpidos en maz debido a crecimiento de hongos El uso de los lpidos del germen reduce la densidad del grano.
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Crecimiento de hongos y uso de nutrientes


Relacin entre densidad del grano y su valor energtico
Maz Almacenado 1 dia EE
%

30 dias EE
%

60 dias EE
%

Dens.
kg/m3

Dens.
kg/m3

Dens.
kg/m3

14 % humedad 18% humedad

5.6 5.6

810 810

5.2a 4.5b

804a 723b

5.3a 4.0b

810 715b

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Crecimiento de hongos y uso de nutrientes


Pobre desempeo de pollos de engorde con maz contaminado con hongos y sin micotoxinas
Reduccin de carbohidratos y lpidos disminuyen la energa metabolizable del maz en un 4 a 5 % EM = 3350 - 150 14.02 - 0.63 EM = 3200 kcal / kg 13.39 MJ / kg

Los hongos usan nutrientes altamente digestibles

No existe una clara correlacin con cambios en el contenido de protena o aminocidos en el grano
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Crecimiento de hongos y uso de nutrientes


Relacin entre densidad del grano y su valor energtico
Granza de maz Densidad 35-40 lb./bu Humedad % TMEn kcal/kg 11.62 3240 b 45-50 lb./bu 14.10 3366 a

Todava no se ha desarrollado una relacin prctica entre densidad del grano y su valor energtico
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Los hongos que contaminan los ingredientes les extraen nutrientes empobreciendo su calidad nutritiva

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Aspergillus flavus

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Daos por micotoxinas y nutricin


1. Hgado - Rin
Hgado graso

2. Epitelios - Mucosas
Lesiones orales Integridad de las clulas de las vellosidades intestinales

3. Absorcin y metabolismo deficiente de nutrientes


Susceptibilidad a la aparicin de hematomas Problemas de calcificacin Pobre pigmentacin de yema y piel
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Efecto de aflatoxina sobre la actividad de enzimas digestivas

DIETA

ACTIVIDAD DIGESTIVA (unidades / g peso seco)

Aflatoxina 0 ppm 2.5 ppm

Amilasa Tripsina 281 179 46.2 35.8

Lipasa 292 191

Enzimas digestivas afectadas


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Efecto de aflatoxina sobre volumen y concentracin biliar


AFLATOXINA EN LA DIETA VOLUMEN CONCENTRACION

ml

OD @ 625 nm

0 ppm 2.5 ppm

0.38 0.61

0.336 0.149

Aumenta cantidad y disminuye calidad de la bilis Bilis muy diluida carente de funcin emulsificadora
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Micotoxinas y Nutricin
Vitaminas
A - D3 - E - K C - B1 - B2 - B6 - Ac. Flico - B12 - Colina

Minerales
Calcio - Selenio

Protena y Amino Acidos Aditivos


Antioxidantes - Pigmentos - Anticoccidiales
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Minerales y Micotoxicosis
Los problemas de calcificacin debido a micotoxinas estn relacionados con la absorcin y metabolismo de la Vitamina D3 que con el calcio propiamente tal. Niveles de 0.3 g de Selenio por tonelada de alimento protegen contra los efectos nocivos de aflatoxina B1 Fuente de Selenio es importante: Selenito de Sodio - Selenio Orgnico
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Protena y Micotoxicosis
Un efecto importante de la aflatoxicosis es la disminucin en la sntesis de enzimas pancreticas resultando en una digestin proteica deficiente.

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Niveles de protena y aflatoxicosis

PROTEINA DIETA %

DIETA CONTROL Peso g

AFLATOXINA B1 5 ppm Peso g

RELACION CONTROL %

10 20 30
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180 318 389

137 254 368

76.1 79.9 94.6

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Aflatoxina y niveles de aminocidos azufrados

TOTAL AA AZUFRADOS

PESO CORPORAL (g)

4 semanas
AFLATOXINA

0 ppm 66 NRC (0.61 %) 100 NRC (0.93 %) 134 NRC (1.25 %)


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1.25 ppm 411 d 573 b 627 a


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500 c 660 a 653 a

Aditivos y Micotoxicosis
Anticoccidiales
Contaminaciones de aflatoxina B1 y toxina T-2 aumentan la susceptibilidad a coccidiosis.

Antioxidantes
El uso permanente de antioxidantes eficaces en la dieta protegen contra los efectos nocivos de la aflatoxina B1.

Pigmentos
Deficiente absorcin debido a aflatoxina B1 y tricoticenos Deficiente depsito debido a aflatoxina B1. Evaluar rentabilidad de adicionar niveles mas altos.
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Anticoccidiales y micotoxinas
Toxina T- 2
2 a 4 ppm en alimento de pollos reducen significativamente la eficacia de monensina de sodio 1.25 a 6 ppm en alimento de aves jvenes reducen significativamente la eficacia de lasalocida de sodio 1 a 4 ppm en alimento de pollos disminuyen la LD 50 para narasina; pasando de 176 mg/kg de peso vivo a 102 mg/kg de peso vivo No existen estudios con otros anticoccidiales. Es muy probable que lo anterior ocurra con todos los ionforos y es debido a que se afecta la respuesta inmune
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Recomendaciones Curativas
Uso por 2 a 4 semanas de una premezcla adicional especial para aves afectadas por micotoxicosis : Vitamina D3 3000 Vitamina E 50 Vitamina K 3 Vitamina C 100 Vitamina B2 5 Vitamina B12 10 Ac. Flico 1 Colina 500 Metionina 1000
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UI / kg UI / kg mg / kg mg / kg ? mg / kg mcg / kg mg / kg mg / kg mg / kg

Es recomendable usar 25 OH D3 como fuente de Vitamina D3 Se puede usar Se para un aporte de 0.3 mg por kg de dieta
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AFLATOXINA MYCOTOXINA (B1, B2, G1, G2, M1)

DON (Vomitoxina)

FUMONISINA (B1, B2, B3)

OCRATOXINA (A)

ZEARALENONA

T2

Alimentos Susceptible Conta minar

Maiz Trigo Avena Cebada Arroz Mani H. Algodon H. Pescado Leche

Maiz Trigo Cebada Cebada Malteada Barley Avena Arroz Soya

Maiz Arroz otros Cereales

Maiz Trigo Avena Cebada Sorgo Cafe

Maiz Trigo Avena Cebada Sorgo Soya

Maiz Trigo Avena Cebada Arroz Sorgo

Dao al Dao al Higado y Cancer Disminuye Produccion de Leche y Produccion de Huevos Hemorragias internas Inmuno Supresion
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Cancer en ratas Dao Cerebral en Caballos Congestion Pulmonar en Cerdos Aumenta incidencia de PRRS Mortalidad Subita Inmuno Supresion Dao al Rion y Cancer Interferencia con Ovulacion Concepcion Implantacion Inmuno Supresion Desarrollo Fetal

Problemas Neurales Alteraciones de Emplume Necrosis de la Boca y Lengua Hemorragias Intestinales

Tracto Digestivo Medula Osea Bazo Organos Reproductivos Perdidad de Peso Vomito Rechazo del Alimento Inmuno Supresion

Efectos

Regresion de la Condicion de los Bolsa de Fabricius recien nacidos y Timus Inmuno Supresion
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Micotoxicosis
Tipo de micotoxinas Cantidad de micotoxinas Combinacin de micotoxinas Edad del animal Especie de animal Tiempo de exposicin a las micotoxinas Interacciones directas Interacciones indirectas
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Dao de las micotoxinas


1. Hgado - Rin 2. Epitelios - Mucosas 3. Clulas nerviosas 4. Disminucin consumo de alimento, hemorragias intestinales, vmitos, digestin deficiente nutrientes 5. Efecto perjudicial al aparato respiratorio (pulmones) 6. Efecto perjudicial al aparato reproductivo 7. Deficiencias en funcionalidad del tejido linfoide con respuesta inmunolgica deficiente
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Micotoxinas e Inmunosupresin
AVES Aflatoxinas Ocratoxinas Tricoticenos CERDOS Aflatoxinas Tricoticenos Vomitoxina (DON) Fumonisina
Ocratoxina - Zearalenona
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Tolerancia de Micotoxinas
Micotoxinas Regulaciones Recomendaciones UE y USA < 20 ppb Niveles Problemticos de campo 5 ppb 50 ppb 100 ppb 1000 ppb 200 ppb 5 ppb
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Aflatoxina Zearalenona Toxina T-2 Fumonisina

< 500 ppb < 500 ppb < 5000 ppb

Vomitoxina (DON) < 1000 ppb Ocratoxina


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<

20 ppb

Tolerancia de Micotoxinas
Niveles en Regulaciones
Basados en una sola micotoxina sinttica Basados en condiciones experimentales

Organismos reguladores no consideraron


Sinergismo de las micotoxinas Interactuantes directos oxidacin y/o contaminacin bacterial Interactuantes indirectos estrs por vacunas - calor - cambio de alimento
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Interacciones de micotoxinas
Aflatoxina + Ocratoxina Aflatoxina + DON Aflatoxina + T2 Aflatoxina + Diacetoxiscirpenol Toxina T-2 + DON Toxina T-2 + Zearalenona Toxina T-2 + Fumonisina + DON Ocratoxina + Diacetoxiscirpenol Ocratoxina + Fumonisina + DAS Ocratoxina + DON Ocratoxina + Toxina T-2 DON + Zearalenona DON + Fumonisina
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Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico Sinrgico
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BAJO

NIVEL DE MICOTOXINAS

INMUNOSUPRESION

Aumenta reaccin a las vacunas

Pobre respuesta a la vacunacin Ttulos Bajos

Exceso de uso de antibiticos a nivel de granja

Crecimiento desuniforme
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Pobre desempeo
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ALTO

NIVEL DE MICOTOXINAS INMUNOSUPRESION

Aumenta reaccin a las vacunas

Pobre respuesta a la vacunacin Ttulos Bajos

Exceso de uso de antibiticos a nivel de granja

Crecimiento desuniforme
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SINTOMAS VISIBLES

Pobre desempeo
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AVICULTURA

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Lesiones de aflatoxina en hgado

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Lesiones de fragilidad capilar con hemorragia subcutnea de la aflatoxina

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Lesiones de ocratoxina en rin

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Lesiones orales de la toxina T-2

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10/4/2005

Lesiones epiteliales de la toxina T-2

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Efectos ocultos de las micotoxinas


A Nivel de Granja - Ineficacia de las vacunas - Uso excesivo de antibiticos A Nivel de Matadero - Rendimiento en carne para la venta - Incremento de rechazos o descartes - Incremento de magulladuras o contusiones
Hess, J.B. and S.F.Bilgili 1997. Mycotoxins:hidden culprit in bruising. Broiler Ind. 11:20-21
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Micotoxinas e Inmunosupresin
Micotoxinas con mayor incidencia en el sistema inmune de las aves: aflatoxinas, ocratoxinas y tricoticenos Aumentan la susceptibilidad de las aves a una variedad de agentes infecciosos, incluyendo bacterias y virus Afectan la resistencia a las enfermedades a travs de una alteracin de los mecanismos de defensa Comprometen la capacidad protectora de los programas de vacunacion ( IBD ND IB )

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Sistema linfoide primario de las aves

Mdula sea

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Dao al sistema inmune de las aves aflatoxina, tricoticenos y ocratoxina


Inhibicin y/o reduccin de la sntesis proteica con disminucin de la produccin de anticuerpos Atrofia crnica o aguda de la bursa Disminucin de la poblacin celular en la corteza del timo Destruccin y/o disminucin de los linfocitos Hipoplasia de la mdula sea Atrofia del timo
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Evaluacin del sistema inmune


La inmunosupresin causada por micotoxinas se puede confundir con la causada por varios agentes patgenos Histopatologa Relacin peso de la bursa : peso corporal Relacin bursa : bazo El tamao de la bursa debiera ser 2 a 2.5 veces mayor que el tamao del bazo durante el desarrollo de la bursa hasta los 28 - 30 dias de edad
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Sistema Inmune Normal en pollos broilers de 21 dias de edad

Sistema Inmune Afectado en pollos broilers de 25 dias de edad

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Ttulo promedio log10 de Newcastle en ponedoras comerciales vacunadas contra ND


Grupo control sin aflatoxina
8 7 6 5 4 3 2 1 0 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40

SEMANAS

8 7 6 5 4 3 2 1 0

Alimentadas con 200 ppb de aflatoxina a partir de las 18 semanas de edad

18

20

22

24

26

28

30

32

34

36

38

40

SEMANAS

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Adaptado de Azzam y Gabal. Avian Pathology (1998) 27: 570-577


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PORCINOS

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Efecto perjudicial de las micotoxinas en los cerdos


Signo Muerte sbita Anorexia Crecimiento Dao heptico Dao renal Vmito Aborto Infertilidad Vulvovaginitis Edema pulmonar Inmunosupresin
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AFB1 + + +++ +++

OCRA + + + + +++ +

DON +++ +

T-T2 +++ +

FB1 +++ + + ++ +

ZEA

+++

+++

+ + ++ +++ +++ +++

+++

++

++

+++

+
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Aflatoxina

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Aflatoxina
Hgado Graso y Vescula Biliar afectada

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Aflatoxina

Hepatomegalia (incremento del tamao del Hgado).

Esplecnomegalia (incremento del tamao del Bazo).


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La leche el alimento ptimo


La aflatoxina B1 en el alimento consumido por la madre es eliminada por la leche como aflatoxina M1 afectando a la progenie

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Ocratoxina

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+ 600 ppb

Fumonisina

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+ 600 ppb Fumonisina

Bazo: cncer debido a fumonisina y aflatoxina. Estos animales tambin tenan edema pulmonar debido a fumonisina.
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+ 100 ppb Toxina T-2 / DAS

Necrosis de lengua

Lesin oral Necrosis de esfago


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Ulceraciones estomacales provocadas por Toxina T-2 / DAS

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Hemorragia intestinal provocada por Toxina T-2 / DAS

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Toxina T-2 / DAS


Lesiones a la piel

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T-2 o DAS con Fumonisina

Necrosis de Oreja debido a T-2 Estos animales tambin tenan edema pulmonar debido a fumonisina.

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Necrosis de cola debido a T-2 Estos animales tambin tenan edema pulmonar debido a fumonisina.
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Toxina T-2 / Fumonisina

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DON - Vomitoxina

Lesin del estmago del lechoncito

Estmago del lechn Leche coagulada con sangre en la mucosa del estmago
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Efecto estrognico de la zearalenona en el crecimiento del tero

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Zearalenona + 100 ppb

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Vulvovaginitis por contaminacin con zearalenona en animales jvenes

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10/4/2005

Zearalenona + 100 ppb

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Parmetros crticos afectados por niveles bajos de micotoxinas


Fumonisina 500 a 1000 ppb
Alta susceptibilidad a PMWS y PRRS

Zearalenona 50 a 100 ppb


Uniformidad de los cerditos al nacer Peso al destete Numero de madres que presentan celo 7 das despus de terminada la lactancia Intervalo entre fin de lactancia y primer servicio Nmero de marranas que regresan al ciclo estral Nmero de abortos
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Micotoxinas e inmunodepresin
Aflatoxinas
- Afectan la respuesta inmune - Demora en la respuesta inmune - Formacin inadecuada de anticuerpos - Supresin de la formacin de anticuerpos - La aflatoxina B1 se transfiere de las madres a la progenie a travs de la leche como aflatoxina M1 provocando inmunosupresin en los cerditos

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Micotoxinas e Inmunodepresin
Toxina T-2 y DAS
- Afecta la produccin de anticuerpos - Destruccin de linfocitos B y T

DON - Vomitoxina
- Afecta produccin de inmunoglobulinas

Fumonisina
- Reduccin de la formacin de linfocitos

Zearalenona
- Afecta la produccin de linfocitos, demorando la respuesta inmune
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Micotoxinas y Post-weaning Multisystemic Wasting Syndrome


1.

Las micotoxinas son co-factores claves en la manifestacin clnica de las enfermedad PMWS en cerdos. Circo Virus Si el sistema inmune esta afectado debido a la presencia de micotoxinas, entonces es altamente probable que se manifiesten las enfermedad PMWS en cerdos. Circo Virus
Dr. F. Madec AFSSA - France Dr. J. Waddilove Eastgate Veterinary Group -England
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2.

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VACAS LECHERAS

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+ 100 ppb ZEARALENONE

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+ 200 ppb TRICHOTHECENES

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Parmetros crticos afectados por micotoxinas en Vacas Lecheras


Produccin y calidad de leche
Consumo de alimento

Aflatoxina M1 in leche Tiempo para retornar al ciclo estral % de vacas que retornan al ciclo estral Vacas con laceraciones vaginales Porcentaje de abortos
Ovarios csticos
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Recomendaciones Preventivas
Inhibidores de hongos
Acidos orgnicos o sus sales (cido propinico)
Tratamiento del grano o del alimento Alimento de gallinas: dosis mayor por alto nivel Ca Corrosivos

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Recomendaciones Preventivas
Secuestrante efectivo de micotoxinas
Anlisis de ingredientes y alimento Problemas de campo - Histopatologa

Amplio Espectro
Pruebas in vitro y pruebas in vivo con niveles de micotoxinas y dosis de secuestrante utilizados

Dosis Correcta
Dosis efectiva probada en los ensayos cientficos
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Impacto de Hongos y Micotoxinas en la Produccin Animal

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Seminario Micotoxinas Micotoxicosis Myco-Ad A-Z Indukern 12 mayo 2005 Barcelona