Facultad de Ciencias qumicas y farmacuticas Universidad de Chile

Ensayo Bibliogrfico: Nanoparticulas y el tratamiento de enfermedades respiratorias

Alumno: Sebastian Gallardo Q. Curso: 8vo Semestre Bioquimica Profesor: Dante Miranda W. Fecha: 22/12/2010

Introduccin La nanotecnologa ha sido descrita como el control de la materia en una escala atmica, molecular y supramolecular a dimensiones inferiores a los 100 nm. Los materiales utilizados a este nivel pueden ser metales, cermicas, polmeros o compuestos de estos mismos, que muestran propiedades nicas debido a su tamao y reas de superficie significativamente ms grandes que puede influenciar numerosas propiedades incluyendo conductividad del material, propiedades magnticas, energa de superficie, propiedades mecnicas y catalticas (1,2). La nanomedicina es la aplicacin de la nanotecnologa a la medicina, desarrollndose en la pasada dcada elementos tales como nanoparticulas, liposomas, nanoemulsiones o dendrimeros para la entrega especifica de drogas a tejidos blanco de terapias. Esto a llevado a que drogas, pptidos y cidos nucleicos de pobre estabilidad se han podido administrar para el tratamiento de enfermedades gracias a que han sido combinados con esos polmeros y lpidos para obtener sistemas de partculas muy finos que tienen una mejor capacidad de interactuar con clulas y ser internalizadas por ellas, teniendo un potencial teraputico impresionante (1,3). Las nanoparticulas, en especial, han recibido gran atencin ya que pueden ser administradas va diferentes rutas tales como la parenteral, oral, intraocular, transdermal e inhalacin pulmonar (4). Adems presentan importantes ventajas con respecto a otras formas de administracin o tratamiento tales como el gran potencial para lograr una distribucin relativa uniforme de la droga, una solubilidad mejorada de la droga que es propia de la solubilidad acuosa de estas partculas, la liberacin sostenida de drogas que a la larga reduce las frecuencia con que se administra sta, la obvia capacidad para portar molculas, la disminucin de los efectos laterales que producen normalmente las drogas y el gran potencial de internalizacin que tienen las nanoparticulas por las clulas (5,6). La va pulmonar cobra gran importancia en el uso de nanoparticulas, ya que los pulmones presentan una alta permeabilidad a solutos, una limitada actividad proteoltica en el espacio alveolar comparada a otras rutas, una extensa vascularizacin y principalmente una gran superficie de absorcin alveolar. De esta manera las drogas pueden ser liberadas localmente para actuar en los pulmones lo que permite utilizarlas de gran manera en el tratamiento de enfermedades respiratorias, tales como el asma, o la fibrosis qustica. Tambin, los pulmones pueden ser objetivos para entregar drogas a travs de

nanoparticulas a clulas especficas del pulmn, tales como los macrfagos alveolares, para tratamiento de enfermedades como la tuberculosis (5,7). Este trabajo se centra especialmente en el uso de las nanoparticulas para tratamiento de enfermedades pulmonares, la ventaja del uso estas y como son utilizadas en pro del tratamiento de enfermedades de este tipo. Antecedentes Los pulmones posiblemente son la ruta ms histrica de entrega de drogas hacia el organismo y desde la antigedad se sabe que variadas culturas utilizaban la va de la inhalacin para incorporar vapores para tratar de curar ciertas enfermedades. Sin embargo desde los principios de la medicina moderna que los medicamentos creados no estaban pensados para una administracin por va respiratoria y no fue especficamente hasta el principio del ao 1950 que se reconsidero el uso de sta, inventndose el primer inhalador con dosis medida ( MDI ), el cual fue usado para la administracin local de albuterol en el tratamiento del asma (8). Hoy en da se han hecho grandes avances principalmente en los mecanismos de entrega de la droga en el organismo, ahondando en la ingeniera de partculas con la conjunta aplicacin de la nanotecnologa para la creacin de las ya referidas nanoparticulas. Esto debido a que se han descubierto numerosas ventajas de la aplicacin de stas por sobre la aplicacin de partculas ms grandes, tales como el aumento del rea superficial de interaccin al utilizar nanoparticulas y el consiguiente incremento en la velocidad de disolucin de estas luego de interactuar con el pulmn. Adems al suspender las drogas como nanoparticulas se ha descubierto que se puede alcanzar una dosis que es mucho mayor que la alcanzable en solucin, que es termodinmicamente limitada por la solubilidad acuosa de la droga (9). Estudios posteriores se centraron en el mejoramiento de las propiedades de transferencia de masa ofrecida por las nanoparticulas demostrndose que estas se unen y son internalizadas por varios tipos celulares convirtindolas en un posible vehiculo importante para el tratamiento de enfermedades (9). Adems se logro identificar que clulas endoteliales y epiteliales internalizan rpidamente a las nanoparticulas (10). Esto junto a otros estudios tales como los relacionados con la distribucin de las nanoparticulas en el cuerpo luego de una inyeccin intravenosa que mostraron que stas se acumulan principalmente en los rganos del sistema retculo endotelial tales como el hgado, el bazo

y el pulmn, en especial este ultimo, termin por sugerir que las nanoparticulas serian una va importante para el mejoramiento de las formas de tratamiento de enfermedades especialmente pulmonares (7). Ciertas enfermedades pulmonares tales como la tuberculosis causada por la bacteria Mycobacterium tuberculosis, con el paso del tiempo se hicieron gradualmente mas severas debido a que se hicieron resistentes primero al tratamiento con antibiticos como la isozianida o la rifampicina y luego al tratamiento con drogas como la pirazinamida o el etambutol mezclados con los primeros antibiticos. Esto ocurri debido a que eran tratamientos de larga duracin para que el paciente se curara lo que terminaba en mala administracin del tratamiento por parte del paciente o procesos inconclusos. Lo mismo ocurri con la administracin de otras drogas, por lo que se comenz a estudiar nuevos mecanismos o sistemas, de portacin y entrega de las drogas contra la tuberculosis enfocndose principalmente en el uso de nanoparticulas como nuevos tratamientos para esta enfermedad, al conocerse al mismo tiempo, los antecedentes entregados en los prrafos anteriores (11). Por otro lado el uso de sistemas de nanoparticulas no virales ha ganado un creciente inters en el mbito teraputico, debido a su baja toxicidad en comparacin con sistemas virales, siendo buenos candidatos para marcar tejidos y clulas con diferentes compuestos (3). Se han reportado aplicaciones de estas nanoparticulas en terapias de cncer y su diagnostico, terapia gnica y actividad inmunomodulatoria en tumores alojados en el pulmn, hgado y corazn (12). La principal ventaja de usar nanoparticulas reside en la posibilidad de conjugarlos con ligandos especficos para dirigirlos a clulas determinadas. Es por esto que tambin se ha visto que, por ejemplo, pueden ser usados para actuar sobre los macrfagos que son clulas muy importantes en el tratamiento de enfermedades ya que actan como clulas hospederas de muchos parsitos y bacterias siendo la causa de varias enfermedades conocidas. Con relacin a esto se han obtenido resultados in-vitro e in-vivo muy efectivos a la hora de controlar las infecciones y mejorar la eficacia teraputica, utilizando nanoparticulas de polibutilcianocrilato cargadas con rifampicina contra Staphylococcus aureus y Mycobacterium avium que infectaban macrfagos alveolares (13). Las nanoparticulas tambin han recibido gran atencin al servir como vectores para portar RNAs de interferencia, que permiten degradar un mRNA en especfico. Su uso ha sido considerado para dirigirse a los pulmones en ratones con el fin de modular la

infeccin por el virus respiratorio sincicial (RSV) obteniendo excelentes resultados al disminuir la carga viral y la inflamacin (12, 14). Entonces con todos estos antecedentes y muchos ms disponibles en la bibliografa es posible disponer de una base para afirmar la importancia y el por qu del uso de las nanoparticulas para el tratamiento de enfermedades pulmonares procediendo a centrarse en las aplicaciones que se estn empleando en la actualidad para la terapia de estas enfermedades. Nanoparticulas en el tratamiento de enfermedades pulmonares La aplicacin de la nanotecnologa a problemas mdicos ha permitido desarrollar nuevas soluciones para el tratamiento de enfermedades respiratorias, principalmente a travs de las nanoparticulas como sistemas portadores de drogas, tratndose enfermedades tales como las pulmonares obstructivas, desordenes genticos que afectan las vas areas, enfermedades infecciosas incluyendo la tuberculosis, y el cncer pulmonar(9). El uso de estas nanoparticulas permite tratar localmente estas enfermedades, lo que es muy ventajoso gracias a que la droga evita el metabolismo de primera etapa y se deposita directamente en el sitio de la enfermedad. Adems este tipo de aplicacin de la droga al epitelio pulmonar elimina los potenciales efectos laterales causados por la alta concentracin sistmica, tpica de los mtodos de distribucin convencionales utilizados, y puede reducir costos ya que no es necesario utilizar grandes dosis de las drogas para obtener el resultado deseado (15). La enfermedad pulmonar obstructiva crnica (COPD) y el asma bronquial representan una de las principales causas de discapacidad y muerte en el mundo. A pesar de que estas dos enfermedades son muy distintas en el mecanismo que las subyace, tienen en comn que la principal va de administracin de drogas anti-asma y anti-COPD es la ruta aerosolica, lo que permitira la aplicacin de nanoparticulas para el tratamiento de estas (16). En el caso del asma bronquial, se descubri una potente nanoparticula llamada antagonista de P-selectina, con fuertes efectos anti-inflamatorios comprobados de manera in-vitro e in-vivo en un modelo de asma alrgica, con una significante reduccin en la inflamacin peribronquial inducida por alergenos y disminucin de la hiperreactividad presente en las vas areas (17). Junto con esto tambin se demostr que otra nanoparticula puede ser utilizada para el tratamiento del asma bronquial, la cual se conoce como nanoparticula pDNA (IFN)- chitosan/interfern y que es capaz de disminuir la

respuesta hiperreactiva por parte de las vas areas en procedimientos experimentales de esta enfermedad (18). La tuberculosis tambin es una enfermedad respiratoria muy importante para la salud del ser humano y por supuesto se han creado nuevas terapias basadas en el uso de nanoparticulas. La Mycobacterium tuberculosis invade y comienza su replicacin en los macrfagos alveolares antes de que se propague, por lo que utilizar nanoparticulas para llevar drogas hacia estos, aumentando la biodisponibilidad de estas y reduciendo la frecuencia de dosage permitira mejorar la terapia resolviendo el problema antes planteado de tratamientos inconclusos (7). Investigadores administraron nanoparticulas de poli (DL-lactida-co-glicolato) (PLG) con tres drogas anti-tuberculosis de primera lnea (Rifampicina, Isozianida, Pirazinamida), encapsuladas en estas, a ratones mostrando que estas nanoparticulas cargadas con drogas resultaron en un conteo bacterial indetectable en el pulmn luego de la administracin de ellas y que finalmente estas presentaban una mejor eficacia quimioterapeutica comparada con un tratamiento con drogas diario (19). Junto con esto ha sido demostrado que al utilizar nanoparticulas, la permanencia de la droga en el organismo aumenta mucho mas que al administrar drogas libres (20), concluyndose que la terapia anti-tuberculosis basada en nanoparticulas puede reducir la frecuencia con que se entrega la dosis, disminuir efectos laterales y a la vez obtener un mejor resultado en la terapia. Entonces con la disponibilidad de varios polmeros biodegradables, naturales y sintticos, aprobados para el uso humano se han podido encapsular en nanoparticulas nuevas molculas y tambin las drogas corrientes anti-tuberculosis, permitiendo la mejora en la eficacia del tratamiento de esta enfermedad. Gracias a esto, ensayos clnicos de Fase I han sido iniciados en el Postgraduate Institute of Medical Education and Research (PGIMER) de la India, usando nanoparticulas de poli (DL-lactida-coglicolato) (PLG) encapsulando drogas de primera lnea anti-tuberculosis. El PLG ha sido aprobado para el uso humano pero podra generar efectos laterales indeseados, por lo que polmeros solubles en agua podran ser preferidos, y nanoparticulas de alginato han sido tambin utilizadas en contra de la tuberculosis a travs de administracin oral y aerosol (11). Tambin se han desarrollado sistemas de entrega de nanoparticulas para una nueva generacin de vacunas contra la tuberculosis, usando protenas, pptidos o DNA que son protegidos por encapsulacin en las partculas, para poder ser administradas por diferentes

rutas mucosas y sistmicas. Este proceso tambin podra servir como un depsito para la lenta liberacin de anfgenos, permitiendo una respuesta inmune prolongada (11). Diferentes protenas o petidos de M.tuberculosis han sido evaluados en modelos animales usando PGL como sistema portador a travs de la ruta parenteral (inyeccin) o respiratoria, induciendo estas vacunas una fuerte respuesta por parte de clulas T y B (21). As mismo, una aproximacin alternativa fue desarrollada usando genes de inters cargados dentro de nanoparticulas que son ancladas a la superficie de una bacteria atenuada. Esta aproximacin podra, tericamente, ser usada para marcar granulomas en tuberculosis (22). El cncer de pulmn es otra enfermedad muy comn en adultos, llegando a estimarse que en Estados Unidos en el 2005 se detectaron 170000 nuevos casos de cncer de pulmn o bronquios y se producieron mas de 160000 muertes debido a esta enfermedad, mientras que en Europa 370000 nuevos casos son diagnosticados cada ao y la mayora sin poder curarse. Muchos de esos pacientes tenan cncer pulmonar de clulas no pequeas (NSCLC) que tpicamente es categorizado como avanzado o metasttasico (23,24). Es por esto que para esta enfermedad tambin se ha comenzado hace algunos aos a utilizar tratamientos basados en nanoparticulas con el fin de aprovechar sus propiedades para una terapia mejorada. Un ensayo clnico en fase II mostr que una nanoparticula de paclitaxel, que por si sola juega un papel importante en el tratamiento de cncer al pulmn, enlazada a albmina y conocida como Abraxane, obtena mejores resultados en lo que respecta a la eficacia y seguridad en pacientes con cncer pulmonar de clulas no pequeas, ya que el uso de esta droga por si sola es limitado por su pobre solubilidad y por la toxicidad asociada al solvente utilizado como vehiculo para esta droga (CremophorEL). Se pudo ver una respuesta significante del tumor y un control prolongado de la enfermedad en 43 pacientes, demostrndose que las nanoparticulas tienen un gran potencial como portadores de quimioterapeuticos para tratar tumores y cncer de pulmn en particular (23). Adems tendra la ventaja el uso de esta nanoparticula ya que el paclitaxel requiere un largo periodo de infusin, necesita de premedicacin con esteroides e antihistaminas para minimizar el riesgo de reacciones hipersensibles, mientras que el Abraxane es una nanoparticula inyectable que va en una suspensin de partculas de albmina en sal, obviando la necesidad de prolongada infusin y eliminando la toxicidad relacionada con el solvente sin uso de esteroides ni antihistamina (23)

Por otro lado se ha avanzado tambin en la terapia del cncer, a travs , de nuevos conceptos de tratamientos basados en la inhibicin de protenas que son sobreexpresadas en tumores y pueden ser criticas para la invasin y motilidad de las clulas tumorales o para la proliferacin del tumor. Recientemente ha sido demostrado que los siRNAs permitiran un eficiente y especifico proceso de knockdown, pero su eficiencia dependera en gran medida de cmo son transportados y entregados en el organismo, principalmente cuando son dirigidos al pulmn porque presentan un gran inestabilidad y pobre entrega dirigida hacia tejidos blancos (24). Es por esto que se han utilizado sistemas de nanoparticulas sintticas conocidas como Polietilaminas, que son capaces de formar complejos no covalentes con los siRNAs, permitiendo su proteccin de la degradacin y la eficiente captacin celular por endocitosis y posterior liberacin (24). Entonces el uso de estas nanoparticulas incrementara la biodisponibilidad de los siRNA colocando esta terapia dentro de las ms atractivas en los ltimos aos no solo para el tratamiento del cncer de pulmn sino que tambin para el tratamiento de variadas enfermedades pulmonares que podran ser tratadas especficamente y con menos efectos laterales indeseados. Conclusiones y visin futura El desarrollo de nanoparticulas ha comenzado a ser cada vez ms importante y desde la ultima dcada que se han hecho grandes avances con el fin de ampliar y mejorar la gama de terapias existentes para el tratamiento de enfermedades pulmonares, y si bien muchas veces la brecha existente entre el estudio in-vitro o en modelos animales y la aplicacin al ser humano es muy grande, se puede ver que en este mbito los avances son ao a ao mas definitivos y se ha llegado incluso a aplicarse estudios clnicos en humanos para ofrecer medicamentos a base de nanoparticulas al mercado, que por lo investigado en el desarrollo de este ensayo, tendran bastantes ventajas frente a otros tratamientos. Como expuse antes utilizar nanoparticulas otorga numerosas ventajas, tales como, permitir un incremento en el rea de superficie que permite mejorar la tasa de disolucin de las drogas, as como la distribucin uniforme de la dosis de droga en los alvolos. Adems el uso de nanoparticulas tambin permite alcanzar una dosis aplicable ms especfica, sin perder grandes concentraciones de drogas para conseguir el mismo efecto, lo que conlleva a abaratar costos en tratamientos que generan un gran gasto para el ser humano. Por otro lado tambin hemos visto que las nanoparticulas permiten una

liberacin sostenida de la droga en el tejido pulmonar resultando en que no sea necesario estar constantemente aplicando dosis de drogas en enfermedades de tratamiento largo tales como la tuberculosis o el cncer de pulmn y que muchas veces desgastan al paciente que termina por abandonar o mal llevar los tratamientos. Tambin se ha comprobado que el uso de esta tecnologa disminuye mucho los efectos laterales en el tratamiento de enfermedades pulmonares ya que, es posible la aplicacin mucho mas localizada sin afectar el organismo completo. Otra ventaja apreciable luego del desarrollo de este trabajo es que las nanoparticulas ofrecen la posibilidad de administracin por variadas vas que si es bien pensado seria una gran ventaja para otro tipo de enfermedades que requieren tratamientos muy invasivos. Por estas y otras ventajas creo que el uso de nanoparticulas en el mbito de la medicina ser una base para el desarrollo de nuevas terapias efectivas. Al recapitular, tambin se pude concluir que la combinacin de conocimientos aplicados al uso de nanoparticulas abre un gran horizonte en el tratamiento de enfermedades, porque si nos damos cuenta los siRNA ya se sabia su utilidad en el tratamiento de enfermedades pero al utilizar nanoparticulas para su portacin la eficacia de esta terapia se incrementa mucho ms y perfectamente podra ser considerado para fusionar su uso con otras terapias innovadoras que sufren ciertas desventajas como la inestabilidad de las partculas al entregarlas al organismo, la falta de especificidad, o la necesidad de dosis constantes. A mi juicio es esperable que a corto plazo las nanoparticulas y su aplicacin en el tratamiento de enfermedades pulmonares vaya ganando mucho mas campo porque son innumerables los trabajos que reafirman las ventajas de su uso y los estudios realizados en humanos ya han tenido muy buenos resultados. Adems me atrevo a decir que las estrategias de vacunacin basadas en nanoparticulas para el tratamiento de enfermedades tales como la tuberculosis u otras enfermedades pulmonares infecciosas tomaran gran importancia en el futuro y que la terapia gnica mezclada con el uso de nanoparticulas ser un desafo importante para los investigadores.

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