Tephrosia (leguminosa) como tratamiento antiinflamatorio alternativo en un modelo de ratones

Bajo la Direccin y Asesoria de:

Dr. Federico Gmez Garibay M.C. Maurilio Flores Pimentel L-313 Campus II FES-Zaragoza UNAM

Inflamacin

Es un proceso inmunolgico que ocurre luego del dao a un tejido. Presenta movimiento de fluido, protenas plasmticas y leucocitos. Su propsito es contener o destruir el dao y retirar del tejido los desechos. Presenta calor, rubor, edema, dolor y prdida de la funcin celular. Las etapas son aguda o crnica

Fases del proceso inflamatorio

1)
2)

3)
4)

5)

Silenciosa: liberacin de los primeros mediadores inflamatorios. Vascular : vasodilatacin e incremento de permeabilidad vascular. Celular: comprende dos fenmenos llamados leucocitosis y migracin celular. Regulacin: se generan una serie de mecanismos inhibores tendientes a finalizar el proceso. Reparacin: hay restitucin parcial o total del tejido daado.

Inflamacin crnica
Inflamacin

prolongada (ms de 12 hrs) Aumento de macrfagos, linfocitos, clulas plasmticas y eosinfilos

Farmacos antiinflamatorios
(AIE) No esteroides (AINE) Los AINE se subdividen en inhibidores de la prostaglandina sintetasa (IPS) y no inhibidores de la prostaglandina sintetasa (no-IPS).
Esteroides

Efectos secundarios y toxicidad de los AINE

Nivel

grastrointestinal Nivel no gastrointestinal: Renal. Reacciones alrgicas Hematolgicos Otros efectos

Medicina alternativa
Desde

tiempos remotos el hombre ha recurrido al uso de plantas para curar y aliviar dolores. La flora en Mxico es sin duda una de sus principales riquezas. Son varias las propiedades que se le atribuyen a las plantas mexicanas, tal es el caso de las leguminosas.

Las leguminosas integran una de las familias de plantas ms diversificadas en la naturaleza. Estn clasificadas en 3 familias: Caelpinoideae, Mimosoideae y Papilinoideae. En sta ltima familia se encuentran los gneros:Derris, Lonchocarpus,Tephrosia y Mundulea Al gnero Tephrosia, cuya amplia importancia econmica ha sido descrita desde hace mucho tiempo se le atribuyen propiedades medicinales empleadas en el Caribe, Amrica y Asia.

Distribucin geogrfica de Tephrosia

En el mbito mundial este gnero comprende ms de 400 especies en todos los continentes exceptuando Europa.
En Mxico se encuentra distribuido en regiones tropicales: Baja California Sur, Sinaloa, Nayarit, Jalisco, Guerrero, Oaxaca, parte de Chiapas y Nuevo Len.

Compuestos aislados de Trephrosia Mexicanas

El estudio fitoqumico demuestra la presencia de numerosos compuestos entre los que se encuentran principalmente: flavonoides, rotenoides, pterocarpanos, esteroides y triterpenos. Los flavonoides presentan variados efectos biolgicos tales como: anticancergeno, espermaticida, antiviral, bactericida, edulcorante, fungisttico, antiinflamatorio, antioxidante entre otros.

Estudio qumico de Teprhosia crassifolia

Material vegetal Extraccin

Crassifolina Hilgartol A Tephromicrocarpanona Metil Glabranina Metil Hilgartol Caracterizacin

Planteamiento del problema

La inflamacin es una respuesta defensiva contra toda lesin. Para los casos en los que el dao es severo el tratamiento de eleccin son los antiinflamatorios no esteroides, los cuales causan irritacin gastrca.
En Mxico el uso de la herbolaria ha crecido, por lo que se pretende evaluar como tratamiento antiinflamatorio el uso de sustancias extradas a partir de plantas del gnero Tephrosia.

Objetivo general

Evaluar el efecto antiinflamatorio de las sustancias extradas apartir de las plantas del gnero Tephrosia (DTmR, MTmH y Crassifolina) en un modelo de ratones.

Objetivos particulares
Evaluar la disminucin de la inflamacin al tratar a los ratones con los extractos de Thephrosia

Al finalizar el estudio comparar, por medio de un modelo estadstico, la inhibicin de la inflamacin en las orejas de los ratones tratados

Hiptesis
Es conocido que dentro del gnero Tephrosia hay metabolitos que presentan actividad biolgica, tal como insecticida, piscicida, espermaticida y ultimamente se ha encontrado que tambin antiinflamatoria, por lo que en el presente trabajo se estudian algunos metabolitos de T. Madrenensis y T crassifolia (DTmR, MTmH y crassifolina respectivamente) como terapa alternativa para procesos inflamatorios en un modelo de ratones.

Mtodo
Modelo de induccin del edema en la oreja del ratn Los reactivos se disolvieron en una solucin de acetona-agua. El aceite de crotn es el agente que induce el edema y se coloc en todas las soluciones con una concentracin de 80g.En un volumen total de 20L. Los reactivos (1), (2) y (3) se manejaron como las sustancias en prueba. Reactivo (1) aceite de crotn y 1mg de Crassifolina.

Reactivo (2) aceite de crotn y 1mg del extracto DTmR Reactivo (3) aceite de crotn y 1mg del extracto MTmH Reactivo (4) aceite de crotn y 45 g de indometacina, esta mezcla se emple como el testigo positivo con actividad antiinflamatoria. El reactivo (5) fue una solucin de aceite de crotn y se manejo como el testigo negativo.

Posteriormente los ratones se agruparon al azar en 5 grupos y se administr va tpica en la oreja derecha de cada ratn los reactivos (1,2,3 y 4). En la oreja izquierda slo se administr la solucin de crotn (5).
Despus de 6 horas se sacrificaron los ratones y se les perforaron las orejas usando un perforador cuyo dimetro es de 5 mm ( la zona que tuvo contacto con las sustancias), se pesaron las orejas y se analizaron los resultados comparando los pesos de los testigos (negativo y positivo) con los de las sustancias en prueba (Crassifolina, DTmR y MTmH).

Resultados

Fig. 1 Control negativo (Ratn tratado con aceite de crotn).

Fig. 2 Control positivo (Ratn tratado con Indometacina).

Fig. 3 Ratn tratado con Crassifolina.

Fig. 4 Ratn tratado con el extracto MTmH.

Fig. 5 Ratn tratado con el extracto DTmR

Tabla 1. Efecto antiinflamatorio de Teprhosia

Grafica1.Inhibicin del edema (%) con P<0.05 y 95% de confianza utilizando el modelo estadstico de Wilcoxon.

Conclusiones
Los extractos DTmR y MTmH aislados de Tephrosia madrensis , as como tambin la Crassifolina aislada de Tephrosia crassifolia pueden ser usados como tratamiento antiinflamatorio en el modelo biolgico empleado (ratones CD1) ya que se observ una disminucin de la inflamacin de hasta un 46%

Recomendaciones
Realizar un estudio clnico completo para determinar la actividad farmacolgica de cada uno de los extractos aislados de las leguminosas del gnero tephrosia con la finalidad de obtener una forma farmacutica, va de administracin y dosificacin adecuada y as presentar un medicamento cuyos efectos secundarios sean menores a los causados por los antiinflamatorios actualmente usados.