VARIACION GENTICA: La Mutacin, Origen y deteccin

Dr. Csar A. Guzmn Vigo

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA - UDCH

Origen de la mutacin gnica

Concepto de mutacin: Proceso mediante el cual un gen sufre un cambio estructural. En la mayora de los casos, el trmino se refiere a un cambio fenotpico causado por un gen modificado

Tipos de mutaciones:
Por sustitucion de un par de bases: m.puntualesT
Bases pricas Bases pirimdicas

m.por transicin m. por transversin

Different types of radiation can lead to different types of chromosomal aberrations and damage. Beta, gamma, and X rays (low LET) can cause damage to base pairs or can cause single or double strand breaks, as shown in the top drawing of a DNA strand. Alpha and neutron radiation (high LET) can cause double strand breaks, as shown in the bottom drawing. Several Station experiments are dedicated to quantifying the dose rate of both low and high LET radiation the crew receive during their stay as part of the ongoing effort to improve shielding. [U. of Essen]

Tipos de mutaciones:
Sustituciones: 1) Silenciosas o silentes: Los cambios no alteran la secuencia de amincidos, debido a la redundancia del cdigo: AGG---CGG (Arg) 2) Con cambio de sentido, provocan un cambio en un nico amniocido: Sinomimia (aminocidos quimicamnte similares AAA---AGA Lys bsica x Arg bsica) No sinonimia (aminocidos quimicamente diferentes UUU --- UCU Fen hidrofbica x Ser polar) 3) Mutaciones sin sentido: Producen uno de los tres codones de terminacin en el RNAm: UAA, UAG, UGA

Tipos de mutaciones:
Adicin o Deleccin 1. de un nico par de nucletidos: Mutacin de cambio de fase 2. De varios a muchos pares de nucletidos: Cualquier insercin o deleccin de pares de bases que no sea mltiplo de tres cambia la fase de lectura en segmentos de DNA que determinan protena; como resultado, a partir del sitio de cambio de fase se sintetizan aa diferentes y con frecuencia aparecen codones de terminacin: UAA, UAG, UGA

REVERSIN EQUIVALENTE mutacin reversin AAA (Lys) ------- GAA (Glu) ------- AAA ( Lys) Silvestre Mutante Silvestre mutacin reversin UCC (Ser) ------- UGC (Cys) ------- AGA ( Ser) Silvestre Mutante Silvestre mutacin reversin CGC (Arg bsica) ------- CCC (Pro no bsica) ------- CAC ( His bsica) Silvestre Mutante Silvestre

Tipos de mutaciones:
Reversin equivalente La probabilidad de que un sitio mutante regrese a un estado allico previo a travs de una mutacin es mucho menor que la probabilidad de que vaya a sufrir una nueva mutacin hacia otro estado allico. La reversin requiere un cambio hacia una base especfica (A, T, G C) mientras que un nuevo estado allico lo puede causar un cambio hacia cualquiera de las cuatro bases.

Tipos de mutaciones:
M. de regulacin de la transcripcin o traduccin. Cualquier mutacon del promotor puede reducir la afinidad de la RNA polimerasa, y por lo tanto reduccin en la produccin del RNAm (reduccin de una protena determinada). M. en lugares de corte y unin Se producen en los lmites intrn-exn, alterando la seal necesaria para la escisin apropiada de un intrn. Ello ocurreen la secuencia GT que siempre define el locus donante 5 o en la secuencia AG que define el locus receptor 3

Otros Tipos de mutaciones:

M. por trasposones(un tipo de DNA capaz de propagar copias de si mismas) o elementos mviles. Provocan mutaciones de cambio de pauta de lectura. Insercin de elementos mviles ocasiona casos aislados de neurofibromatosis I y hemofilia A M. de DNA repetido en tandem Los individuos patolgicos tienen cientos o incluso miles, nmero que aumenta durante la meiosis o durante el inicio del desarrollo fetal ( repeticiones expandidas)

Clasificacin de mutaciones:
Mutaciones inducidas: aquellas que surgen despus de un tratamiento planeado con mutgenos, agentes ambientales que aumentan la tasa de mutacin Mutaciones espontneas: aquellas que surgen en ausencia de un tratameinto con un mutgeno. Corresponden a la <tasa de mutacin basal> y, presumiblemente son la fuente natural de variacin gentica observada en las poblaciones. (105 a 108)

Mecanismos de induccion de mutaciones:

Mecanismos de accin: Reemplazar una base, alterar una base de modo que empareje erroneamente con otra, o daar una base, de modo que no pueda emparejar con ninguna. Sustitucin de bases: anlogos de bases ( Tendencia natural de las bases a adoptar formas diferentes Tautomerizacin Formas ceto enol) Errorres de emparejamiento por ionizacin: El 5-BrU anlago a la timina. La Timina empareja con la A, pero el 5BrU lo hace con la G. El BrU provoca transiciones G.C --A.T A.T G.C Otro anlogo: 2-AP, anlogo a la adenina, que empareja con la Timina, pero que en forma errnea lo hace con la C. Provoca transiciones A.T ---G.C

Mecanismos de induccion de mutaciones:

Modificacin de bases: 1) Agentes alquilantes: Etilmetanosulfonato (EMS) y la nitrosoguanidina (NG). Aaden grupos alquilo: etilo en el caso de la EMS y metilo en el caso de la NG.Esta ltima provoca mutaciones transicionales G.C ---A .T 2) Agentes intercalantes: Proflavina, naranja de acridina, compuestos ICR. Provocan inserciones o delecciones de un par de nucletidos. Pueden colocarse entre las bases del DNA de cadena sencilla, estabilizando las bases desemparejadas durante la formacin de un desfase por deslizamiento de la polimerasa.

Mecanismos de induccion de mutaciones:

Lesiones de bases: Elevado nmero de mutgenos, bloquean la replicacin. UV: genera variedad de fotoproductos en el DNA. La mutacin ms importante es la transicin C --- T, pudiendo producir tambin transversiones y desfases, as como duplicaciones y delecciones de mayor tamao La aflatoxina B1 (AFB1). Se une a la posicin N7 de la guanina, rompe unin entre base y azcar, produciendo sitio aprico.Provoca transversiones G.T --- T . A.

Mecanismos de mutacion espontnea

Causas: Errores en la replicacin ( la mayora transicionales), lesiones espontneas ( despurinizacin + y desaminacin ) y elementos genticos transponibles Tasas de mutacin: a nivel nucleotdico es de 10-10 c/pb /div. cel. (mutaciones que han escapado el proceso de reparacin del DNA) En cada gen: 10-4 y 10-7 /locus/div.cel. Margen de variacin: 1) Tamao del gen: somatostatina (1,480 pb), DMD (2 x 106 pb), otros: Hemofilia, Neurofibromatosis I (elevadas tasas). 2) Presencia de puntos calientes: mutacin de C x T, por metilacin de dinucletidos CG (formacin de 5-metilcitosina, que pierde su grupo amino y se transforma en T). Tasa de mutacion de CG es 12>que otras secuencias nucleotdicas. 3) Edad de padres : S. Marfan y Acondroplasia (para SM, riesgo que corre un hombre de 30 de engendrar un hijo afectado es de 5 veces ms que uno de 40.

Metilacin de la Citosina: La adicin de un grupo metil a una base citosina forma 5-metil citosina. La consiguiente prdida de un grupo Amino(desaminacin) forma timina, resultando as en una sustitucin citosina ------ timina

H
C H C

NH2

Desaminacin

CH3
C C

C Citosina N C

N
CH3 O H C C C N

H NH2

C Timina

N H

C O

5-metil Citosina

Metilacin

Efectos de la radiacin en las tasas de mutacin

Mutacin en el hombre 1/10,000 genes /generacin. Medicin directa es difcil Persona en pas desarrollado: Exposicin a Rad.Ioniz. 6-7 rem (0,01 j.de energa /Kg de tejido). En Japn: II guerra m.: personas expuestas desarrollaron cnceres y aberraciones cromosmicas ( expuestos recibieron entre 30 a 60 rem de radiacin). Efecto en clulas germinales? Estudioso recientes confirman aumentos de tasas en leucemias, cncer de tiroides, en expuestos a pruebas nucleares. Cncer al pulmn: presencia de radn, por desintegracin de uranio Evitar exposicin innecesaria de gnadas y fetos

Mecanismos biolgicos de reparacin

Valor bajo de la tasa de mutacin espontnea: eficacia de sistemas de reparacin, su eliminacin de alguno aumenta la tasa de mutacin Categoras de procesos de reparacin: prevencin de errores, reversin del dao, reparacin por escisin y reparacin postreplicativa 1. Prevencin de errores: Sistema que en dao oxidativo del DNA por presencia de radicales superxido, los cataliza en perxido, y la enzima catalasa convierte a ste en agua (Suoperxido dismutasa) 2. Reversin directa del dao: Fotodmeros de pirimidina, pueden ser reparados por Fotoliasa. Transferasas de grupos alquilo, revierten lesiones, retirando grupos alquilo aadidos a la posicin O-6 de la guanina por accin de mutgenos como la nitrosoguanidina y el etilmetanosulfonato

Mecanismos biolgicos de reparacin

3. El sistema general de reparacin por escisin, rompe un enlace fosfodister, a cada lado produciendo la escisin de un oligonucletido. El hueco, se rellena por sntesis reparadora que queda sellado por una ligasa. En procariotas se eliminan 12 a 13 nucletidos en eucariotas 27 a 29. Tambin se produce la reparacin por escisin de bases , que se lleva a cabo por glicosidasas (rompen enlaces N-glucosdicos). Ejem: Glicosidasa de uracilo, que elimina uracilo del RNA (desaminacin expontnea de citosina) si no se repara, se pueden producir transiciones C---T. 4. Reparacin postreplicativa: reconocimiento de lesiones despus que el DNA se ha replicado. Ejm: Sistema de reparacin de emparejamiento (Reconocimiento, determinacin de base incorrecta +, escisin y relleno)

Xeroderma pigmentosa: Una enfermedad por reparacin defectuosa del DNA

UV: dmeros pirimdicos, peligrosos en piel. Enzimas reparadoras en ind. normales, no en Xeroderma. Errores de replicacin, dan lugar a sustituciones Enfermedad comienza los primeros 10 aos, a la aparicin de pecas, le sigue tumores cutneos. Pueden desarrollar neoplasias malignas, que en ocasiones provoca la muerte antes de los 20. Enzimas: endonucleasa, exonucleasa, polimerasa y ligasas. Codificadas por al menos 7 genes, una mutacin en alguna provoca XP Otras enf. S de Bloom, de Cockayne, ataxia telangiectasia, anemia de Fanconi.

 Enfermedades humanas: Cambios de base, delecciones e inserciones; otras por delecciones o duplicaciones de secuencias repetidas: 1)encefalopatas mitocondriales: KearnsSayre (deficiencia del SOXFM), 2) Enfermedad de Fabry: delecciones o duplicaciones cortas, que originan mutacin del gen alfa-galactosidasa Mecanismo comn: Repeticiones de trinucletidos (CGG situado en el gen FMR-1, 29 repeticiones es la ms comn, produce una variacin del nmero de residuos de arginina Explicacin de expansiones de repeticin: emparejamiento errneo deslizado durante la replicacin La atrofia muscular espinal y bulbar ligada al X (E. De Kennedy): Repeticin CAG, ligada al gen que determina receptor de andrgenos (normales 21, afectados entre 40 y 52 Otra: Distrofia miotnica: CTG en extremo 3 del transcrito (normales 5 copias, afectados leves con 50 copias, graves ms de 1,000)

Mutaciones espontneas y las enfermedades humanas