Mtodos de identificacin de AMILOIDE

ROJO CONGO ALCALINO

FUNDAMENTO

La molcula de Rojo Congo, dado a su tamao de 21 amstrong, tiene un tamao similar al de la protena amiloide, el cual es de 19 amstrong, el componente glcido (asociado a la sustancia P). Por lo tanto, ambas estructuras se unirn a travs de puentes de hidrgeno, entre los grupos Carboxilos (COOH) de la protena amiloide y el grupo Amino (NH2) que se encuentra en el colorante. La segunda teora estudiada, nos dice que la molcula de Rojo Congo se intercala entre protenas adyacentes, las cuales normalmente estaran unidas por puentes de hidrgeno. La molcula de colorante interrumpira estas uniones, creando nuevas uniones de puente de hidrgeno entre el colorante y la protena, estabilizndose de esta forma. La distancia aparente entre protenas adyacentes sera de 4,8 amstrong.

AMILOIDE
Depsito hialino y trasparente que no es normal. Formado en enfermedades diversas Llamado por Romanosky (1842) enfermedad Landacea. Virchow en 1854 tie de azul con una mezcla de iodo y ac. sulfrico

Es deposito proteico patolgico en espacios extracelulares de tejidos y rganos del cuerpo. Naturaleza Fsica del amiloide -Fibrillas no ramificadas. - Componente P.

Constitucin Qumica - Protenas.- fibrilares (91%) AL AA -Glicoproteinas - Glucosaminoglicanos cidos

Alcohol 80% Hidrxido de potasio 1% Cloruro de sodio Rojo congo Hematoxilina

REACTIVOS

PROTOCOLO

Desparafinar hasta agua destilada. Teir con hematoxilina 10 min. Lavar en 3 baos de agua destilada. Alcohol alcalino 20 min.

Rojo Congo alcalina 20 min

Alcohol 80 saturado con cloruro de sodio 50 ml. Hidrxido de potasio 1% 0.5 ml Alcohol 80 saturado con cloruro de sodio y luego saturado con Rojo Congo. Solucin de trabajo

Deshidratar rpidamente en 3 baos de alcohol absoluto, aclarar en xilol.

Solucin madre 50 ml Hidrxido Potasio 1% 0.5 ml

COLORACION METODO DE ROJO CONGO BENNHOLD I.- OBJETIVO: DEMOSTRACION de AMILOIDE en

CORTES DE TEJIDOS HISTOLOGICOS.

II.- RESULTADOS:
AMILOIDE PRIMARIO.......AMARILLO AMILOIDE SECUNDARIOROJO O NARANJA AL MICROSCOPIO DE POLARIZACION..VERDE ESMERALDA