Aluna: Gssica Carvalho

CROMATOGRAFIA PLANAR

Cromatografia Planar

Porto Seguro / BA Dez / 2011

Cromatografia planar
Tcnica simples e econmica; Aplicao qualitativa e quantitativa; Est baseada nas diferentes solubilidades relativas dos componentes da amostra.

Vantagens
Simples e econmica;

Utiliza pequena quantidade de amostra;

Boa capacidade de resoluo; Praticidade

Fase mvel e Fase estacionria

A celulose do papel constituda por 2000 ou mais unidades de glicose anidra. Os solventes mais utilizados so: n- pentano, ciclohexano, tetracloreto de carbono, benzeno, tricloroetileno, clorofrmio, eter etlico, acetato de etila, peridina, amnia, acetona, etanol, metanol, acetonitrila e gua.

Aplicao da amostra
A amostra deve preferencialmente ser dissolvida num solvente voltil, aplicada com um capilar, num volume em L. As quantidades de amostras variam de 1 a 100 mg, e a mancha no papel deve ter um dimetro mximo de 0,5 cm.

Deteco da mancha
Mtodos qumicos;

Mtodos Fsicos.

Anlise qualitativa
Quando existe padro

aconselhvel, quando se realiza a anlise qualitativa e quantitativa de uma substncia ou mistura de substncias, trabalhar com padro e amostra em condies mais prximas possveis, evitando-se, dessa maneira os erros de anlise devido ao papel, fase mvel, temperatura e etc. Portanto deve-e executar a anlise cromatogrfica com amostra e padres colocados sempre na mesma folha de papel.

 Quando no existe padro Eluir a mancha do papel com um solvente e identificar por outras tcnicas analticas.

Anlise Quantitativa
Diretamente no papel
Densitmetro; Comparao da intensidade das cores da mancha; Pela rea das manchas.

Com extrao da mancha do papel

Tipos de desenvolvimentos
Ascendente Marca-se com um lpis o ponto de partida da amostra, a uns 2 cm de uma das bordas do papel, e marca-se a linha de chegada da fase mvel; possvel colocar vrias manchas do padro ou da amostra; No caso de misturas de substncias de componentes coloridos ou de misturas ou substncias incolores. Descendente Horizontal ( circular) Bidimensional

Confirmao da identidade
Identificao no conclusiva; Aplicao de outras tcnicas para confirmao da identidade. Co- cromatografia Recromatografar

Reaes especficas
Retirar a mancha do papel

Aplicaes
Aminocidos, peptdeos e protenas; Carboidratos; Vitaminas; cidos orgnicos,; Alcois Antocianinas; Compostos fenlicos; Flavorizantes naturais e artificiais; Corantes naturais e artificiais; Conservadores; Antioxidantes; Estabilizantes e emulsificantes; Resduos e pesticidas; Adulterantes em geral.

Cromatografia em camada delgada

A cromatografia em camada delgada considerada uma cromatografia em coluna modificada para o plano, pois ela consiste na separao dos componentes de uma mistura por migrao diferencial sobre uma camada delgada de adsorvente preso sobre uma superfcie plana.

Vantagens
Fcil execuo; Rapidez; Versatilidade; Grande reprodutibilidade; Baixo custo

Tcnicas analticas
Processo de separao O processo que ocorre a adsoro, pois o soluto separado entre uma fase estacionria slida e uma fase mvel lquida. As tcnicas analticas utilizadas na separao em camada delgada so semelhantes s da cromatografia em papel.

Tipos de Fm e FE
Os adsorventes mais utilizados so: Slica, almina, celulose e poliamida
Na escolha da fase mvel deve-se considerar a natureza qumica da substancias a serem separadas e a polaridade da fase mvel.

Aplicao

Cromatografia em camada delgada de alta eficincia

Comparao entre Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e Cromatografia em Camada Delgada de Alta Eficincia Parmetros
Tamanho usual da placa Volume aplicado de cada amostra

CCD
20 cm x 20 cm

CCDAE
10 cm x 10 cm

1 L 5 L 7 10

0,1 L 0,2 L 10 - 20

Nmero de amostra por placa

Dimetro da mancha Distncia de migrao do solvente

Tempo de corrida Dimetro mdio da partida de slica gel Limites de deteco: por absoro de luz Por fluorescncia

3 mm 6 mm 10 cm 15 cm
30 min 200 min 20 m ~ 5 ng ~ 0,1 ng

1 mm 3 cm 6 cm
3 min 20 min 5 m ~ 0,5 ng ~ 0,01 ng

Obrigada !!!