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Parasitologia
Docente: Helen Rodrigues Martins Discentes: Arthur Rocha Gomes Igor Ibrahim Neiva Pedro Henrique Silva
Dezembro 2013
Introduo
At o presente momento, oito espcies de
volvus
Wuchereria bancroftiana
A filariose bancroftiana, doena exclusiva do homem, causada por um parasito intravascular conhecido como W. bancrofti, transmitido pelo Culex quinquefasciatus
Vermes adultos
Microfilrias
Leses Linfticas
Leses extralinfticas
Manzonella ozardi
Onchocerca volvulos
Diagnstico
Mtodos Sorolgicos
Mtodos Moleculares
Mtodos de Imagem
Mtodos Parasitolgicos
- Observao motilidade
- 3 lminas por paciente
-Simplicidade
-Rapidez -Permite visualizar com nitidez caractersticas morfolgicas importantes para diferenciao (gota espessa).
Concentrao de Knott - Diluir 1 parte de sangue em 10 de formalina a 2%. (1/10) - Centrifugao - Microfilrias no sedimento - Gota espessa e colorao pela Hematoxilina de Carrazzi.
*Vantagens:
baixas parasitemias.
- Formalina permite que o exame seja realizado vrios dias aps coleta.
*Desvantagens:
Membrana de policarbonato
- possvel coletar at 10ml de sangue. -Filtrao do sangue em Membrana de Policarbonato.
* Vantagens:
parasitemias.
*Desvantagens:
- Alto custo
Mtodos Sorolgicos
Pesquisa de Ac est descredenciada Risco de Reaes cruzadas com outros Helmintos
Pesquisa de Ag: ELISA e ICT
ELISA
- Utilizao de anticorpo
monoclonal bovina).
- Alto custo
- Positividade ps-cura
adultos
* Vantagens:
- Simplicidade - Rapidez (15 min) - Pode ser feito a qualquer hora do dia *Desvantagens: - Alto custo - Positividade por vrios anos
Mtodos Moleculares
PCR
Mtodos de imagem
Ultra-sonografia - Demonstrao de vermes adultos (in vivo) em segmentos de vasos linfticos. - Sinal da dana da filria
parasito.
At os anos 1980, a nica maneira direta para confirmar um diagnstico de infeco por W. bancrofti foi atravs de: Identificao de microfilrias (MF) no sangue perifrico usando contagem cmera Filtrao por membrana de policarbonato Mtodo de gota espessa Tcnica de Knott
Desvantagens destes mtodos: Baixas sensibilidades (no permite a determinao exata da verdadeira prevalncia da infeco). S identificam infeco filaria por meio de microfilaremia Inconvenientes quanto ao horrio de coleta do sangue (pico de microfilaremia ocorre entre 23:00-01:00).
Nos anos 1990, foram feitos avanos significativos no diagnstico de Filariose linftica (FL) com o surgimento de novas ferramentas de diagnstico : Utilizao de antgenos recombinantes para a deteco de anticorpos especficos. PCR para a deteco de DNA filarial. Visualizao de vermes adultos vivos (AW), utilizando ultra-som (US) Deteco de antgeno filarial circulante(CFA )
Atualmente, as ferramentas de diagnstico padro so US e deteco de CFA, que esto comercialmente disponveis na forma de kits.
Recentes avanos em vrias reas do conhecimento relacionado a FL levaram utilizao de novas abordagens para diminuir a gravidade e impacto da doena. A introduo de novas ferramentas de diagnstico para a deteco da infeco por W. bancrofti visa abrir novas possibilidades em termos de interromper a transmisso e, consequentemente, a eliminao da filariose.
Fatores importantes a serem considerados para assegurar a eficincia da triagem e vigilncia para filariose bancroftiana so: Sensibilidade Especificidade Rapidez Simplicidade Portanto, avaliar o desempenho de novos mtodos de diagnstico um passo importante para a eliminao da transmisso.
Local: na Regio Metropolitana do Recife . Amostra: pacientes do sexo masculino com microfilaremia
N: 256 pacientes
Objetivo:
Identificar quais dos mtodos o mais sensvel para o diagnstico da infeco: -Antgeno filarial circulante (CFA): Og4C3ELISA e ICT card test -Ultra-som (US)
Resultados e Discusso
As sensibilidades das duas tcnicas (Og4C3ELISA e ICT card test) para a deteco de CFA (circulao do antgeno filarial) foram semelhantes: ambos com um elevado grau de sensibilidade (96,69 %) . A percentagem de resultados positivos de ultra-sons (US) era 73,44%. Vermes adultos (AW) vivos no foram detectados em 68 (26,56%) indivduos atravs do exame de ultra-som (US).
Resultados e Discusso
O mtodo CFA (antgeno filarial circulante) foi mais sensvel do que o mtodo US (ultra-son) na identificao de indivduos infectados (Tabela I). Isso se deve provavelmente ao fato de que o verme adulto (AW) pode ser localizado em locais do corpo que no seja genitais masculinos, tais como o escroto (descrito como local preferido de AW).
Resultados e Discusso
A relao entre a densidade de MF/mL e os resultados quantitativos e qualitativos dos testes Og4C3 (unidade de ag/mL) e o carto ICT (positivo/negativo), respectivamente, mostrou um aumento significativo no nvel de antgeno em Og4C3 e na percentagem de testes positivos utilizando o carto ICT proporcional ao aumento na carga de parasitas, principalmente quando a densidade de microfilaremia foi maior do que 100 MF/mL de sangue (Tabelas II , III) . O teste do carto ICT no conseguiu detectar CFA em nove dos 78 indivduos com contagem MF menos de 100 MF/mL.
Resultados e Discusso
Resultados e Discusso
Resultados e Discusso
A comparao entre os US e a densidade de MF por mL mostrou que a percentagem de testes nos quais o sinal de movimento das filrias (FDS) poderia ser visto significativamente aumentado em proporo com o nmero de MF(Tabela IV). Nos pacientes com uma densidade de microfilria > MF 500/mL, AW pode ser visualizado por US em 82,56 % (Tabela IV).
Resultados e Discusso
Resultados e Discusso
CFA agora considerado uma ferramenta promissora para o diagnstico de FL, tanto a nvel individual e comunitrio.
Devido simplicidade e convenincia deste mtodo, sendo possvel realizar o teste utilizando amostras de sangue recolhidas em qualquer altura do dia.
Resultados e Discusso
O carto ICT, tem sido adotado como ferramenta importante para estudos da comunidade e avaliao rpida de endemicidade filarial em programas de controle da filariose bancroftiana: Devido sua simplicidade e preciso. Porm, em grandes pesquisas, pode ser difcil para examinar as placas, demora a uma demora na leitura dos resultados. Essa demora poderia contribuir para a m interpretao dos resultados e pode aumentar o nmero de falsos positivos.
Resultados e Discusso
Os autores concordam com resultados encontrados por Grove e Davis (1978), que sugerem que: - A deteco de anticorpos de microfilrias depende da liberao relativa da MF para a corrente sangunea e a produo de anticorpos contra aqueles MF.
Objetivo
Avaliar a validade do teste carto ICT em uma pesquisa realizada em uma rea endmica do Nordeste do Brasil. A especificidade do teste tambm foi avaliada em moradores de uma rea no endmica.
Resultados e Discusso
Resultados e Discusso
Resultados e Discusso
Resultados significativos: 38 (6,1%) foram positivas pela tcnica de gota espessa e 198 (31,7%) pelo teste do carto ICT (Tabela 2) Dentre 38 pessoas mf positivo pelo TBF, 2 (5,3%) foram negativas pelo teste do carto ICT, enquanto 162 (27,6%) indivduos negativos pela TBF foram positivas pelo teste do carto de TIC (Tabela 1).
Resultados e Discusso
Resultados e Discusso
No houve diferena estatisticamente significativa na prevalncia de microfilrias ou antigenemia de acordo com a faixa etria (Tabela 2). A prevalncia de microfilaremia e antigenemia foram ligeiramente maior no sexo masculino do que do sexo feminino (Tabela 2). A sensibilidade global do teste do carto ICT foi de 94,7% (36/38). Os dois falsos negativos eram do sexo feminino na faixa etria 26-39 anos (Tabela 2) .
Resultados e Discusso
Resultados e Discusso
rea no endmica : 110 moradores , 39 (35,5%) do sexo masculino e 71 (64,5%) do sexo feminino com idades entre 10 e 78 anos (mdia de 39,6 5,1 SD) foram examinados. Sendo que, 78 (70,9 %) foram negativas e 32 (29,6 %) apresentaram uma ligeira marca de rosa na linha de teste que foi interpretado como um resultado positivo, de acordo com as instrues do fabricante. Todos os soros foram testados por ELISA Og4C3 e no mostraram valores de densidade ptica (OD) acima do padro 1 e 2, confirmando o estado de infeco negativa.
Resultados e Discusso
Resultados e Discusso
A especificidade do carto ICT variou entre 72,4% e 100%, com base na prevalncia da filariose na populao (Fig. 1) Portanto, como mostrado na Figura 1, uma elevada especificidade para o teste do carto ICT obtida apenas quando se assumir uma prevalncia da filariose mais de 25%.
Resultados e Discusso
Em termos de custo, o TBF tem um preo mais baixo que o teste do carto ICT. No entanto, certas caractersticas do teste do carto ICT provou ser extremamente vantajoso: -Alta sensibilidade -Capacidade de oferecer diagnstico rpido -Sem necessidade de procedimentos laboratoriais complexos -No h necessidade de tcnicos especializados.
Resultados e Discusso
Estas caractersticas combinadas superou o preo mais baixo do TBF, tornando-se a mais uma opo global de custo-benefcio, justificando assim o seu uso como uma ferramenta de diagnstico na triagem em reas endmicas. Por outro lado, o teste no parece adequado para o acompanhamento e avaliao de programas de controle: devido um nmero considervel de indivduos infectados permanecem positivos por mais de dois anos aps o tratamento com DEC. Uma vez que a prevalncia da filariose tende a cair durante a aplicao das medidas de controle, torna-se importante utilizar testes com maior especificidade e valor preditivo , conseqentemente, maior positiva . O uso de tais mtodos permitir que as intervenes sejam direcionados para os indivduos infectados, que so responsveis pela manuteno da cadeia de transmisso em reas focais .
O mtodo da gota espessa de sangue o mais confivel, pois permite visualizar com nitidez o espao ceflico e caudal, disposio dos ncleos caudais e formato da cauda, que so caractersticas morfolgicas que diferenciam as espcies de microfilrias sanguneas que ocorrem no Amazonas.
Referncias
ROCHA, Abraham et al. Comparison of tests for the detection of circulating filarial antigen (Og4C3-ELISA and AD12-ICT) and ultrasound in diagnosis of lymphatic filariasis in individuals with microfilariae. Mem. Inst. Oswaldo Cruz [online]. De 2009, vol.104, n.4, pp 621-625. ISSN 00740276. http://dx.doi.org/10.1590/S0074-02762009000400015. BRAGA, Cynthia et al. Field Evaluation of the Whole Blood Immunochromatographic test for rapid Bancroftian Filariasis Diagnosis in the Northeast of Brazil.Rev. Inst. Med. Chem. trop. S. Paulo [online]. 2003, vol.45, n.3, pp 125-129. ISSN 00364665. http://dx.doi.org/10.1590/S0036-46652003000300002. Guia de vigilncia epidemiolgica e eliminao da filariose linftica Ministrio da Sade De Carli, GA. Parasitologia Clnica NEVES, DP e colaboradores. Parasitologia Humana