princpios bsicos de biologia molecular

biologia molecular
X
biologia molecular aplicada

Biologia Molecular
termo genrico que abrange o estudo da codificao e fluxo
da informao gentica atravs do DNA e RNA e sua
manipulao em laboratrio

estudo das interaes entre as molculas em nvel intra e
inter-celulares
1 - princpios bsicos de biologia molecular
2 - PCR
3 - marcadores moleculares
4 - reao de sequenciamento
marcador molecular todo
e qualquer fentipo
molecular oriundo de um
gene expresso (como em
isoenzimas) ou de um
segmento especfico de
DNA (expresso ou no)
princpios bsicos de biologia molecular
os componentes dos cidos nuclicos
base
nitrogenada
pentose
grupamento
fosfato
princpios bsicos de biologia molecular
os componentes dos cidos nuclicos
anis heterocclicos
princpios bsicos de biologia molecular
os componentes dos cidos nuclicos
princpios bsicos de biologia molecular
os componentes dos cidos nuclicos
timina
2desoxi-ribose
nucleosdeo
adenosina
guanosina
citidina
timidina
uridina
princpios bsicos de biologia molecular
os componentes dos cidos nuclicos
base
nitrogenada
desoxi-ribose
desoxitimidina trifosfatada
2-desoxinucleosdeo 5trifosfato
princpios bsicos de biologia molecular
princpios bsicos de biologia molecular
a estabilidade da dupla fita: as pontes de hidrognio
base bioqumica da
especificidade das
reaes moleculares
5
3
5
3
princpios bsicos de biologia molecular
a estabilidade da dupla fita: as pontes de hidrognio
C=G
base grande base pequena
princpios bsicos de biologia molecular
a estabilidade da dupla fita: as pontes de hidrognio
A=T
princpios bsicos de biologia molecular
a estabilidade da dupla fita: as pontes de hidrognio
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P P
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
princpios bsicos de biologia molecular
replicao do DNA

DNA polimerase
degradao do DNA

exonucleases: a atividade proofreading (3 - 5)
a atividade 5 - 3
endonucleases: as enzimas de restrio (origem bacteriana)
princpios bsicos de biologia molecular
por que conhecer a replicao dos cidos
nuclicos?

muitos testes moleculares envolvem replicao in vitro de
cidos nuclicos

sntese de sondas marcadas
reao em cadeia pela polimerase - PCR
princpios bsicos de biologia molecular
replicao do DNA

DNA polimerase
degradao do DNA

exonucleases: a atividade proofreading (3 - 5)
a atividade 5 - 3
endonucleases: as enzimas de restrio (origem bacteriana)
princpios bsicos de biologia molecular
princpios bsicos de biologia molecular
cortes raros
corte freqentes
blunt-end
extremidades coesivas
princpios bsicos de biologia molecular
A A G C G A G T C A T T
princpios bsicos de biologia molecular
A A G C G A G T C A T T
T T C G G T C A G T A A
princpios bsicos de biologia molecular
hibridizao
princpios bsicos de biologia molecular
hibridizao
princpios bsicos de biologia molecular
hibridizao
princpios bsicos de biologia molecular
princpios bsicos de biologia molecular
extrao e purificao de cidos nuclicos


proteinase K/SDS/CTAB + solvente orgnicos

Isotiocianato de Guanidina e adsoro em slica

precipitao de cidos nuclicos