HISTORIA

1960 Rosalyn Yellow y Salomon Berson, desarrollaron el RIA.

Deteccin de Ab y Ab marcados con radioistopos.
El EIA, se desarrollo independientemente por Stratis Avrameas y
Pierce.
Usa la unin de Abs a los Ags para identificar y medir sustancias, por
colorimetra

 El nombre enzyme-linked immunosorbent assay, fue acuado por

Eva Engvall y Peter Perlmann, describieron el procedimiento en 1971.
Las aplicaciones ms interesantes se iniciaron en el campo de la
microbiologa y parasitologa.
Voller y Bidwell introdujeron el uso de microplacas de 96 pocillos.

 El analito puede ser un Ab o un Ag.

Los Ab poseen una alta especificidad y afinidad para un Ag
especifico.
o Es esta unin especfica la que permite la deteccin de analitos
por medio de una variedad de tecnicas de inmunoensayo.

DEFINICIN E.L.I.S.A.
Mtodo analitico que depende de la reaccin Ag-Ab.
Determinacin de la [Ag] o un [Ab], mediante el uso de uno de ellos
inmovilizado en la fase slida y el otro en la solucin.
Se pueden emplear Ags. haptenos o Abs marcados con una enzima
para revelar: Ags, Abs, hormonas o farmacos presentes en los fluidos
corporales.
El producto de la reaccin, puede ser detectado y cuantificado
mediante un marcador enzimtico con un sustrato apropiado.

PRINCIPIO BSICO

La reaccin consiste: Al suero problema se le agrega un conjugado que

son Abs dirigidos contra Abs humanos o Ag, los cuales se unirn a una
enzima.
Las enzimas modifican al sustrato en presencia de un cromogeno,
produciendo un producto coloreado que es detectado visualmente o por
un espectrofotmetro.

CLASIFICACIN

DETECCIN
DIRECTO: Se utiliza para la deteccin de Ags.
Se detecta mediante un Ab anti-Ag marcado.
INDIRECTO: Utilizado para la deteccin de Abs.
Se utiliza un Ab primario anti-Ag y uno secundario anti primario
marcado.
Permite la amplificacin de la seal al poderse unir uno o ms
Abs secundarios a cada Ab primario.

E.L.I.S.A. INDIRECTO

SOPORTES

Heterogneos u homogenos segn requieran o no la separacin

de las fracciones libes y ligada antes de realizar la medida de la
actividad enzimtica.
HOMOGNEO: Se usan para detectar pequeos analitos:
Hormonas, medicamentos, drogas de abuso.

 No requieren la separacin de la unin Ab-Ab* del Ag* libre.

Son ms fciles y ms rpidas de realizar
HETEROGNEO: Se desarrolla sobre soporte slido.
Se usa en Dx de enfermedadas infecciosas.
Requiere de separacin entre la fraccin libre y ligada.

DISEO

COMPETITIVO: Con reactivo limitante.

Para dosificar partculas pequeas con relativa pureza en una
muestra.
Pueden ser marcados con una enzima.
Detectan Abs especficos independientemente de su isotopo.

 NO COMPETITIVO: Tambin llamado inmunomtrico.

Con reactivo en exceso, son los ms utilizados en inmunopatologa
de las enfermedades infecciosas.
Diseados para detectar tanto Ags como Abs.