Regulacin de la expresin

gentica en plantas.

Activacin del ciclo del

glioxilato durante la
germinacin de semillas.

Objetivos
Comparar el contenido de lpidos, carbohidratos
y protenas en semillas de ajonjol germinadas y
sin germinar.
Conocer un mecanismo de modificacin de la
expresin gentica en eucariontes.
Asociar cambios fisiolgicos con cambios en la
expresin de protenas.
Integracin del metabolismo primario.
Integracin de los conocimientos adquiridos
durante el curso.

Cambios fenotpicos durante el ciclo de vida de una planta.

En la semilla se almacenan las reservas necesarias para el

desarrollo de una planta.

Carbohidratos
Almidn
Amilosa + Amilopectina
Hemicelulosas

Lpidos
Triacilgliceroles

Protenas

El contenido de molculas de reserva determina el

metabolismo primario de la semilla durante la
germinacin.

Transicin de semilla a plntula

1. Hidratacin
2. Salida de la raz
primitiva o
radcula
3. Salida de los
cotiledones o el
tallo (colptilo)
4. Enverdecimiento
de las hojas
(cloroplastos)

Una vez que la planta emerge del suelo se

vuelve fotosintticamente activa.
Heterotrfo: Metabolismo
dependiente de las reservas
de carbono, nitrgeno,
fsforo que se encuentran
en diferentes tejidos de la
semilla.

Auttrofo: La planta es
fotosintticamete activa.

Durante la etapa de hetertrofo ocurre la movilizacin

de molculas de reserva.

En el caso de la mayora de las semillas que contienen

lpidos se induce el CICLO DEL GLIOXILATO

Las clulas vegetales y las de algunos microorganismos

pueden realizar la sntesis neta de carbohidratos
a partir de grasas a travs del ciclo del glioxilato.

Fases de la degradacin de cidos grasos

Ciclo del glioxilato. Permite la movilizacin de

grasas de almacenaje a carbohidratos solubles
1. Va que se parece a
la del ciclo de Krebs
pero
2. Evita las
descarboxilaciones
(No hay prdida de C como
CO2)

3. Y tiene:
ENZIMAS
REGULATORIAS
Isocitrato liasa
Malato sintasa

Ciclo del glioxilato

Es la va metabolica por la cual 2 molculas de
acetil-CoA se convierten en 1 molcula de
succinato, teniendo como un intermediario al
glioxilato.
El succinato se convierte en oxalacetato y es usado
durante la gluconeogenesis para generar glucosa y
de ah sacarosa .
Los animales no pueden convertir los cidos grasos
en glucosa ya que no tienen las enzimas necesarias
para sintetizar oxaloacetato desde el acetil CoA.

Transicin del metabolismo

heterotrfico a uno fotoautotrfico

Heterotrfo

Fotoautotrfo

La actividad del ciclo del glioxilato durante la germinacin

y post-germinacin est regulada a nivel transcripcional
Germinacin Postgerminacin

RNAm
El ciclo del glioxilato se
inhibe una vez que la
planta es auttrofa.

Si no se encuentran las enzimas claves del ciclo del glioxilato los cidos grasos
se oxidan va el ciclo de Krebs y la fosforilacin oxidativa hasta CO 2 y H2O.

Comparacin de la frecuencia de germinacin entre la

planta WT y la planta mutante en la va de la
oxidacin (ped1-3).

CONTROL METABLICO

En la oscuridad se induce la transcripcin del

gen de la malato sintasa.

Durante la senescencia tambin se induce la malato sintasa

Transicin de tejido con capacidad autotrfica a heterotrfica

Sacarosa reprime la induccin de las

enzimas del ciclo del glioxilato

La prctica.
Semillas de
ajonjol (Sesamum
indicum)

Germinacin
por 0 y 3 das

Extraccin de
protenas

Determinacin de
protenas:
Bradford

Medicin de
actividad
enzimtica:
Malato sintasa

Extraccin de
lpidos

Extraccin de
carbohidratos

Separacin por
cromatografa en
placa fina

Cuantificacin
colorimtrica:
Mtodo fenolsulfrico

Ejercicios

Se utilizaron enzimas de restriccin para la digestin completa del plsmido pBR32.

Cmo ser el corrimiento electrfortico en los siguientes casos?
Sin digerir
Restriccin con Enzima BamHI
Restriccin con BamHI y ScaI

Se quiere clonar el gen que codifica para una quitinasa en el plsmido pBR322,
Se sabe que este gen tiene en sus extremos 5 y 3 sitios de reconocimiento
para Pstl. La cepa en la que se realizar la transformacin es susceptible a tetraciclina
y a ampicilina. Cmo ser el fenotipo de la bacteria transformada?