CURSO de ANLISIS

INSTRUMENTAL I

DR. SALVADOR MUOZ BARRIOS

QUMICA ANALTICA
Comprende la metodologa para
determinar la composicin
qumica de la materia

Clasificacin de los mtodos

analticos
Clsicos, Separacin de componentes
de inters (analitos) por:

Precipitacin

Destilacin

Extraccin

Para realizar ANLISIS CUALITATIVOS

de componentes ya separados:
-reactivos que producen cambios de color
-puntos de ebullicin o de fusin
-solubilidades en una serie de disolventes
-sus actividades pticas
-sus ndices de refraccin
-sus olores

Para ANLISIS CUANTITATIVOS de

Analitos ya separados:
-Mediciones gravimtricas: (masa analito)
-Mediciones volumtricas: volumen o
masa de un reactivo estndar necesario
para reaccionar completamente con el
analito

MTODOS INSTRUMENTALES
Alrededor de 1930 atencin a fenmenos
distintos, mediciones de las propiedades
fsicas de los analitos, entre ellas:
- Conductividad
- Potencial de electrodo
- Absorcin o emisin de la luz
- Razn masa/carga
- Fluorescencia

Algunas tcnicas de separacin cromatogrficas empezaron a desplazar a la

extraccin, destilacin y precipitacin
Para la separacin de mezclas complejas,
previo a su determinacin cualitativa o
cuantitativa. A estos mtodos recientes
para separar y determinar especies
qumicas, se les conoce en conjunto como
MTODOS INSTRUMENTALES DE
ANLISIS

Los fenmenos en que se basan los

mtodos mencionados, se conocan con
anterioridad, sin embargo su aplicacin
fue postergada por falta de la invencin
de instrumentos adecuados y fiables
El desarrollo de los modernos mtodos
instrumentales de anlisis ha sido
paralelo al desarrollo de la electrnica
y de la industria de la computacin

Propiedades Qumicas y Fsicas en las que se

basan los mtodos instrumentales

Emisin de radiacin

Dispersin de la radiacin

Espectroscopa de emisin (rayos X, UV, VIS,de electrones,Auger);

Fluorescencia, fosforescencia y luminiscencia (rayos X, UV y
VIS
Espectrometra y fotometra (rayos X, UV, VIS,IR);espectroscopa
fotoacstica, RMN y Espectroscopa de resonancia de spin
electrnico
Turbidimetra, nefelometra; espectroscopa Raman.

Refraccin de la radiacin

Refractometra, interferometra

Difraccin de radiacin

Mtodos de Rayos-X y difraccin electrnica

Rotacin de radiacin

Polarimetra, dispersin rotatoria ptica, dicrosmo circular

Potencial elctrico

Potenciometra, cronopotenciometra

Carga elctrica

Coulombimetra

Resistencia elctrica

Conductometra

Masa

Gravimetra (microbalanza de cristal de cuarzo)

Razn masa/carga

Espectrometra de masas

Velocidad de reaccin

Mtodos cinticos

Caractersticas trmicas

Gravimetra trmica y titulometra; calorimetra de barrido

diferencial; anlisis trmicos diferenciales; mtodos
conductimtricos trmicos
Mtodos de activacin y dilucin de istopos

Absorcin de radiacin

Radiactividad

Tabla tomada de Principios de Anlisis Instrumental de Skoog, Holler y Cruch. 6 Ed., 2008

COMENTARIOS TABLA
Las 1eras. 6 propiedades: interacciones del
analito con la radiacin electromagntica.
Las siguientes 4 son propiedades elctricas
y las 5 restantes son diversas.
. Adems de la gran cantidad de mtodos
mencionados en la tabla, existe un grupo de
procedimientos instrumentales que resuelven
y separan compuestos estrechamente
relacionados: Cromatografa, electroforesis
y extraccin con disolventes.

INSTRUMENTOS PARA
ANLISIS QUMICO
Convierten la informacin de las caractersticas fsicas o qumicas de un analito en datos que se pueden interpretar

Estmulo

Fuente de
energa

Sistema en
estudio

Respuesta

Informacin
analtica

Para obtener informacin del analito es

necesario proveerlo de un estmulo, que
generalmente estar en forma de energa
elctrica, electromagntica, mecnica o
nuclear. El estmulo sobre el sistema bajo
estudio generar una respuesta que
aportar la informacin analtica esperada.

Un instrumento analtico se puede considerar como un dispositivo de

comunicacin entre el sistema motivo de estudio y el investigador.
El objetivo principal de una medicin analtica es obtener un resultado
numrico final que sea proporcional a la caracterstica fsica o qumica
que se buscaba.
La informacin se puede representar (codificar), particularmente
Por medio de seales elctricas, como la corriente, el voltaje y la
carga. Los modos de codificar la informacin se llaman dominios de
los datos: DOMINIOS ELCTRICOS y DOMINIOS NO ELCTRICOS.
Un instrumento de lectura es un transductor que transforma la
informacin de un dominio elctrico en una forma que puede entender
un ser humano. Los instrumentos modernos estn conectados a uno
o ms dispositivos electrnicos complejos y a convertidores del
dominio de los datos (amplificadores operacionales, circuitos integrados, convertidores de datos analgicos en digitales y viceversa,
Contadores, microprocesadores y computadoras).

COMPONENTES BSICOS DE LOS

INSTRUMENTOS ANALTICOS

Generador de seales
Transductor de entrada o detector
Procesador de seales
Transductor de salida o generador de
seales

COMPONENTES DE UN
INSTRUMENTO

ESTANDARIZACIN DE
MTODOS INSTRUMENTALES
La estandarizacin determina la relacin
entre la respuesta analtica y la
concentracin del analito. Se lleva a cabo
por medio de normas qumicas:
1. Comparacin con estndares
a) Comparacin directa b) Titulaciones
2. Estandarizacin con patrn externo
3. Mtodos de adicin de estndar
4. Mtodo del patrn interno

ELECCIN DE UN MTODO
ANALTICO
Definir el problema analtico:
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Exactitud que se requiere?

Cunta muestra se tiene?
Intervalo de [ ] del analito?
Componentes de la matriz que interfieren?
Propiedades fsicas y qumicas de matriz?
Cuntas muestras se analizarn?

CRITERIOS CUALITATIVOS
a
b
c
d
e

Velocidad
Conveniencia y facilidad
Habilidad del operador
Costo y disponibilidad del equipo
Costo por muestra

CRITERIOS DE DESEMPEO
CUANTITATIVOS
(PARMETROS DE CALIDAD)

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Precisin
Sesgo
Sensibilidad
Lmite de deteccin
Intervalo de cuantificacin LOQ-LOL
Selectividad

PRECISIN
Es el grado de concordancia entre los datos
que se obtuvieron de la misma manera. La
precisin proporciona una medida del error
aleatorio o indeterminado de un anlisis.
Entre los parmetros de la precisin, se
encuentran: la desviacin estndar absoluta
(S), la desviacin estndar relativa (RSD),
El error estndar de la media (Sm), el coeficiente de variacin (CV) y la varianza (S)

DEFINICIN DE PARMETROS
DE CALIDAD DE LA PRECISIN

SESGO
Es una medida del error sistemtico o determinado del mtodo analtico. Se define
mediante la ecuacin = - , donde es
La media de la poblacin para la concentratracin de un analito en una muestra y es
El valor verdadero. Para determinar el sesgo
Se deben analizar uno o ms MATERIALES
DE REFERENCIA ESTNDAR, cuya concentracin de analito sea conocida. Los resultados

de dichos anlisis contendrn errores tanto

sistemticos como aleatorios, pero si se repiten las
mediciones una cantidad suficiente de veces, se
puede determinar el valor medio con cierto grado de
confianza. El promedio de 20 o 30 anlisis repetidos
se puede tomar como un buen clculo de la media de
la poblacin (de anlisis efectuados) de la ecuacin
anterior. Cualquier diferencia entre este promedio y
la concentracin conocida del analito del material
estndar de referencia, se puede atribuir al sesgo.
Generalmente al aplicar un mtodo analtico se
pretende identificar el origen del sesgo y eliminarlo
o corregirlo mediante el uso de blancos y de la
calibracin de los instrumentos.

SENSIBILIDAD
En general, se ha acordado que la sensibilidad
de un instrumento o de un mtodo es una medida
de su aptitud para discriminar entre pequeas
diferencias de concentracin del analito. Est
limitada por dos factores:
- La pendiente de la recta de calibracin y
- La reproducibilidad o precisin del dispositivo
de medicin.

Entre dos mtodos que poseen igual precisin,

el que tenga la recta de calibracin con mayor
pendiente, ser el ms sensible!
Si dos mtodos presentan rectas de calibracin con
pendientes iguales, el que muestre mejor precisin,
ser el ms sensible.

La definicin cuantitativa aceptada por la

IUPAQ para la Sensibilidad de la Calibracin,
indica que es la pendiente de la recta de
calibracin en la concentracin de inters.

La mayora de las rectas de calibracin que se usan

en qumica analtica son lineales y se pueden
representar por medio de la ecuacin:

S = mc + Sbl
S

= la seal medida

= la concentracin del analito

Sbl = la seal del instrumento para un blanco

m = la pendiente de la recta

Entonces, la Sensibilidad de calibracin: Pendiente de

la recta de calibracin, a la concentracin de inters

S = mc + Sbl
S = seal de la medida
m = pendiente de la lnea recta
c = concentracin del analito
bl = seal instrumental para el blanco

Pero, la sensibilidad de calibracin tiene

el inconveniente de no tomar en cuenta la
precisin. Por ello, Mandel y Estiehler
proponen la sensibilidad analtica
=
m/Ss
En la que m es de nuevo la pendiente
de la recta de calibracin y Ss es la
desviacin estndar de las seales

LMITE DE DETECCIN
Es la concentracin o el peso mnimo de
analito que puede detectarse para un nivel
de confianza dado.
Cuando el limite de deteccin se aproxima,
su seal analtica se aproxima a la seal
del blanco Sbl.
La mnima seal analtica distinguible Sm se
toma como la suma de la seal media del
blanco Sbl, ms un mltiplo k de la desviacin
estndar del mismo

Sm = Sbl + ksbl

Sustituyendo en las ecuaciones: Cm es por

definicin de lmite de deteccin
Cm= Sm Sbl
m

Selectividad
Denota el grado de ausencia de
interferencias debidas a otras especies
contenidas en la matriz de la muestra
Considerando una muestra que tiene un
analito A asi como dos especias
intereferentes B y C

Entonces:
S = maCa + mbCb + mcCc + Sbl
Donde:
C = concentracin de cada analito
m = sensibilidad de calibracin

Por lo tanto, el coeficiente de selecividad de B con respecto a

A, se define como:
kb,a = mb
ma
Lo mismo para C con respecto a A
Sustituyendo:
S = ma(Ca + kb,aCc + kc,aCc) + Sbl

CALIBRACIN METODOLGICA:
Operacin que permite relacionar la
seal analtica con la
concentracin/composicin de la
sustancia/s que se est analizando
MTODOS DE CALIBRADO:
Calibrado completo
Calibrado simplificado
Calibrado con escalas auxiliares

Mtodos de calibrado completo:

Implican la obtencin de una funcin de calibrado

que define la respuesta equivalente a concentraciones
conocidas del componente analizado. Una vez conocida
esta funcin, se utiliza su inversa (Funcin analtica)
para determinar la concentracin a partir de la seal
instrumental obtenida.

Pueden ser:
DIRECTO o
INTERPOLACIN
ADICIN DE PATRN
PATRN INTERNO

Funcin de calibrado
x

CALIBRADO DIRECTO:

Sa

CONCENTRACIN

MTODO DE ADICIN DE
PATRN

CALIBRADO POR ADICIN DE PATRN

Sa

Necesario cuando hay

interferencia debida a los
constituyentes de la matriz:
EFECTO MATRIZ

CONCENTRACIN

CALIBRADO CON PATRN INTERNO:

Sa/SP.I.

+ Patrn interno
+ Patrn interno

+ Patrn interno
+ Patrn interno
+ Patrn interno

til cuando la seal analtica flucta debido a

las caractersticas de la tcnica de medida
El PATRN INTERNO debe tener un
comportamiento y una estructura similares a la
del analito

CONCENTRACIN

Mtodos de calibracin
simplificada:
Se utilizan cuando no es necesario conocer los
contenidos verdaderos, sino simplemente
establecer si estn includos dentro de unos
mrgenes predeterminados

Calibrado de banda ancha. Con este tipo de calibrado, en vez

de obtener una funcin de calibracin, se obtiene un margen o
banda dentro de la cual puede estar o no incluido el analito; es
muy til y caracterstico del anlisis clnico.

Mtodos de calibrado con

escalas auxiliares:
Se utilizan cuando el resultado del anlisis no se
puede expresar en unidades del Sistema
Internacional (SI), ya sea porque:
No se conozca la densidad, peso molecular, etc.
La muestra a analizar no se haya podido aislar
en estado puro
Interese conocer alguna propiedad muy
caracterstica de la especie que se analiza

Con uso de unidades convencionales

Con escala tcnica

PARAMETROS DE CALIDAD DEL MTODO ANALTICO.

BASICOS
A) Precisin
B) Veracidad
C) Sensibilidad
D) Lmite de deteccin y lmite de cuantificacin
E) Intervalo de concentracin aplicable
F) Selectividad
G) Robustez

COMPLEMENTARIOS
Rapidez
Coste
Factores personales

INTERVALO TIL DE UN MTODO

ANALTICO

LL

LQ

Intervalo til

Concentracin

SELECTIVIDAD

Capacidad de un mtodo analtico para

originar resultados que dependan de
forma exclusiva del analito (o analitos)
para su identificacin o cuantificacin
INTERFERENCIAS
Perturbaciones que alteran alguna, varias
o todas las etapas del proceso analtico
y que por tanto afecta a los resultados
que se vern afectados por errores
sistemticos

TIPOS DE
INTERFERENCIAS

TIPO DE INTERFERENCIA
CAUSA

ORIGEN

MECANISMO

SIGNO

EFECTO

Color vino

QUIMICO

MD

EXCESO

ADITIVO

Iones Cu
(II)

QUIMICO

MM

EXCESO

ADITIVO

MM

DEFECTO

PROPORCIONAL

Iones
Fluoruro

QUIMICO

RELACIN DE TOLERANCIA
Es la relacin de concentraciones de
interferente y analito que causa un
error tal en el resultado que este se
encuentra en el lmite superior o inferior
del intervalo en que se encuentra el
resultado de determinar el analito
aislado
RT= C(int) / C(anal)

ROBUSTEZ
Es la cualidad de un mtodo analtico que mide su
capacidad para resistir pequeos cambios en las
condiciones operatorias sin que su funcionamiento se
vea alterado. Deben considerarse como pequeos
cambios en las condiciones operatorias aquellos que
pueden derivarse de la transferencia de los mtodos
entre laboratorios , operadores, equipos, etc.

COSTES

INSTRUMENTO ANALITICO
Dispositivo de comunicacin entre el sistema en
estudio y el analista, ya que, convierte la seal
analtica que no suele ser detectable ni
comprensible directamente por el ser humano en una
forma que si lo es

MATERIALIZACIN DE UNA TCNICA

ANALTICA

CLASIFICACIN DE LOS
INSTRUMENTOS

COMPONENTES
FUNDAMENTALES

La Calibracin Instrumental
Se refiere al aseguramiento de que un instrumento y/o aparato funciona correctamente,
es decir, segn lo que se espera de l. Su objetivo es corregir la respuesta
instrumental hasta alcanzar el valor considerado como verdadero que lleva implcito el
estndar utilizado. Para esta calibracin se emplean MR o MRC que no contienen al
analito. (Ej. Pesas de transferencia para la balanza, filtro de holmio para un
espectrofotmetro de absorcin molecular UV-VIS.

La frecuencia del calibrado va a depender de:

* La naturaleza del instrumento
* Su robustez
* La frecuencia con que se use
* Su entorno (vibraciones, suciedad, etc.)
* La exigencia de la metodologa analtica empleada.

PROCEDIMIENTO PARA EL CALIBRADO DE UNA BALANZA

La balanza es uno de los instrumentos que tiene que tiene un rango de
aplicacin ms amplio, que generalmente cubre cuatro o cinco rdenes de
magnitud, y por ello, la incertidumbre de las medidas vara a lo largo del
intervalo de trabajo del equipo. Por esta razn se estima la incertidumbre en
varios puntos de dicho intervalo, en funcin de las pesas certificadas
disponibles y de las exigencias con respecto al valor estimado.
En este caso vamos a calibrar una balanza de tres cifras, que permite un peso
mximo de 100 g, y a partir de dicha calibracin se estimar la incertidumbre
asociada a cuatro intervalos de masas: (I), menos de 0.1 g; (II), entre 0.1 g y 1 g;
(III) entre 1 g y 10 g; y (IV), entre 10 g y 100 g.
PROCEDIMIENTO

1. Colocar la primera pesa patrn en el platillo de la balanza

2. Activar la balanza y realizar la pesada
3. Desactivar la balanza, retirar la pesa y colocar la siguiente
4. Repetir el proceso de modo que se realicen al menos cuatro
medidas por cada
pesa
Observacin: Se procurar que en las diferentes pesadas con cada pesa
cubran todas las posiciones en el platillo (centro, adelanta, atrs, izquierda y
derecha).

CALIBRACIN DE EQUIPOS VOLUMTRICOS

PROCEDIMIENTO PARA EL CALIBRADO DE UN MATRAZ AFORADO
1.

Pesar el matraz vaco, perfectamente limpio y seco

2. Llenar el matraz con agua desionizada, de densidad conocida,

hasta
la marca
3.

Pesar nuevamente el matraz lleno de agua

4.

Vaciar el matraz y dejarlo secar a temperatura ambiente

5.

Repetir el proceso al menos 5 veces

Observaciones: Utilizar unas pinzas metlicas para manipular el

matraz. (Si se toca con los dedos o se mancha o moja por fuera,
iniciar el proceso nuevamente)