ASAM PIRUVAT OLEH KOENZIM MEMBENTUK ASETIL KOENZIM A DALAM METABOLISME KARBOHIDRAT DEKARBOLISASI OKSIDATIF
Pelepasan atau pemecahan
gugus karboksilat pada molekul alami ke medium dalam bentuk karbon dioksida. ASAM PIRUVAT
Asam-asam keto , terutama gugus keto α atau
β dari gugus karboksil merupakan zat perantara yang penting dalam reduksi biologi Dua karbon dari piruvat bergabung menjadi asetil Ko-A, dan satu molekul NAD+ direduksi menjadi NADH dan karbon dioksida, Reaksi nya adalah ENZIM DAN KOENZIM
Enzim adalah adalah suatu protein yang
mempunyai suatu protein yang mampu mengkatalisis reaksi biologik (aktivitis biokatalik). Keseluruhan enzim punya dua bagian yakni Prostetik (mengaktivasi agar reaksi cepat) VITAMIN a. Tiamin (Vitamin B1) Mengandung dua cincin, satu pirimidin dan tiazol yang dihubungkan oleh jembatan metilen VITAMIN
Asam Pantotenat (Vitamin B5)
Yakni Vitamin pembentuk koenzim A. Gugus aktif koenzim A adalah –S-H. VITAMIN Niasin (Vitamin B3) Yakni bahan dasar dari koenzim nikotinamida adenin dinukleotida (NAD+) VITAMIN Riboflavin (Vitamin B2) Adalah unsur penting pembentuk flavin andenin dinukleotida (FAD) KOENZIM Tiamin Pirofosfat (TPP) Tiamin pirofosfat berperan sebagai koenzim dalam reaksi-reaksi a. Dekarbolisasi nonksidatif α keto, yaitu dekarbolisasi yang terjadi pada mikroorganisme yang tidak memerlukan oksigen (udara) KOENZIM Tiamin Pirofosfat (TPP) b. Dekarbolisasi oksidatif asam α keto, yaitu dekarbolisasi yang terjadi karena bantuan oksigen (udara) atau karena adanya proses oksidasi KOENZIM Asam Lipoat Asam Lipoat berfungsi sebagai pengoksidasi dan pembawa gugus asil dalam dekarbolisasi oksidatif asam- asam α keto. Dalam hal ini lipoat menerima sebuah aldehid antara dari TPP dan mengoksidasinya menjadi gugus asil. Koenzim A Koenzim A / Ko-A, juga disingkat HSKoA adalah pembawa gugus asil (R-CO) yang umum. Gugus-gugus asil yang terikat pada KoA melalui ikatan tioester, yang berenergi tinggi. Asam pantotenat (B5) merupakan komponen KoA.
FAD dan 𝑁𝐴𝐷 +
Flavin adenin dinukleotida (FAD) adalah turunan dari vitamin riboflavin B2 . FAD adalah koenzim pembawa elektron seperti 𝑁𝐴𝐷 + . Tidak seperti 𝑁𝐴𝐷 + . FAD selalu menjadi gugus prostetik, tidak pernah berdiri sendiri. FAD berikatan dengan protein yang disebut flavo protein (FP). Juga tidak seperti 𝑁𝐴𝐷 + , FAD menerima 2 elektron dan juga ion-ion hidrogen dalam sebuah reaksi oksidasi tertentu. Pembentukan Asetil Koenzim A Pembentukan asetil koenzim-A dari glukosa terjadi dalam dua tahap sebagai berikut: 1) Perubahan glukosa menjadi asam piruvat melalui reaksi glikolisis Reaksi tahap pertama: perubahan glukosa menjadi triosa fosfat Reaksi tahap kedua: pembentukan asam piruvat dari gliseraldehida-3-fosfat
2) Dekarboksilasi asam piruvat menjadi asetil koenzim-A
Secara garis besar reaksi yang terjadi secara berurutan dalam jalur EMP( embden-meyerhof-parnas) untuk nengkonversi glukosa menjadi piruvat terdapat dalam dua tahap yaitu: Reaksi yang dikatalis oleh kompleks piruvat dehidrogenase dalam matriks mitokondria melibatkan tiga macam enzim ( piruvat dehidrogenase, dihidrolipoil transasetilase, dan dihidrolipoil dehidrogenase, lima macam koenzim (TPP, asam lipoat, koenzim-A, FAD, dan 𝑁𝐴𝐷+ ), dan berlangsung dalam lima tahap reaksi. METABOLISME KARBOHIDRAT
Metabolisme meliputi proses sintesis dan proses penguraian
senyawa atau komponen dalam sel hidup. Karbohidrat merupakan sumber energi utama bagi organisme hidup. Manusia menggunakan pati sebagai nutrien utama, pati yang dapat berasal dari beras, jagung, gandum, singkong, sagu dan lain-lain. Pada hewan dan manusia, karbohidrat dihidrolisis oleh enzim amilase menjadi glukosa melalui glikolisis, glukosa dirubah menjadi asam piruvat, asam piruvat di dekarboksilasi menjadi asetil koenzim A yang akan masuk kedalam siklus krebs (TCA) untuk menghasilkan energi ATP. Tiamin dalam reaksi kimia yang berperan adalah koenzimnya yaitu tiamin pirofosfat (TPP) yand dalam reaksi dekarboksilasi oksidatif asam piruvat pada manusia dan hewan menjadi asetil koenzim A yang kemudian masuk dalam jalur asam trikarboksilat (siklus krebs) Bagian terpenting dari keseluruhan molekul TPP adalah cincin tiazol yang mengandung nitrogen dan sulfur. Atom H pada C posisi dua cincin tiazol dapat mudah diserang oleh pasangan elektron pada N gugus imidazol histidin yang merupakan sisi aktif enzim piruvat dekarboksilase, sehingga dihasilkan karbanion. MEKANISME REAKSI DEKARBOKSILASI ASAM PIRUVAT OLEH TPP, ASAM LIPOAT, KOENZIM A, NAD+ DAN FAD : TAHAP 1 Sisi aktif pada cincin tiazol adalah atom C-2 yang terletak antara atom N dan S. Karbanion ini akan menyerang ke atom C-α pada piruvat sehingga akan terbentuk ikatan antara TPP dan asam piruvat. Ikatan rangkap pada piruvat akan menyerang gugus hidroksil pada karboksilat yang membuat karboksilat melepaskan atom H nya sehingga terbentuk gugus hidroksil pada atom C-α piruvat. TAHAP II Setelah terbentuk gugus hidroksil pada atom C-α pada temperatur tertentu akan melepas CO2 dan terbentuk ikatan rangkap antara atom C-α dengan atom C-2 tiazol sehingga ikatan rangkap antara atom C-2 akan lepas dan menghilangkan muatan positif pada atom N menjadi netral (Elviwati,2004) TAHAP III Pasangan elektron pada N cincin tiazol membentuk ikatan rangkap dengan atom C2, kemudian ikatan rangkap pada C menyerang ke atom S dari asam lipoat, sehingga terbentuk ikatan antara tiazol piruvat dengan asam lipoat. Ikatan disulfida pada asam lipoat putus dengan menyerang H+ dari enzim. TAHAP IV Pasangan elektron yang terdapat pada enzim menyerang ke atom H gugus hidroksil dari α hidroksietil. Pasangan elektron yang ada pada O membentuk ikatan rangkap sehingga ikatan antara atom C asetaldehid lepas sehingga terbentuk lagi karbanion tiazol. TAHAP V Pasangan elektron yang terdapat pada atom S koenzim A, akan menyerang C karbonil gugus asil sehingga ikatan antara atom C gugus asil dengan S gugus lipoat akan putus terbentuk asetil koenzim A dan asam dihidrolipoat. TAHAP VI Adanya gugus ditiol yang terdapat pada gugus lipoil yang terikat pada enzim dihidrolipoil transasetilase, dioksidasi kembali menjadi bentuk disulfidanya yang terikat pada enzim dihidropoil dehidrogenase yang berikatan dengan FAD (Flavin adenin dinukleotida) TAHAP VII FADH2 (bentuk reduksi dari FAD) dioksidasi kembali oleh NAD+ membentuk FAD yang sama-sama terikat pada enzim dihidrolipoil dehidrogenase, dan NAD+ (nikotinamida adenin dinukleotida) berubah menjadi NADH (bentuk reduksi dari NAD+) dan H+. Keterangan di atas mengenai mekanisme reaksi dekarboksilasi asam piruvat menjadi asetil koenzim A, dengan bantuan koenzim TPP, asam lipoat, koenzim A, NAD+ dan FAD muncul dari penemuan bahwa kelima koenzim ini merubah asam piruvat ke asetil koenzim A yang kemudian masuk ke siklus asam sitrat (siklus krebs atau asam trikarboksilat) untuk menyediakan sumber energi bagi makhluk hidup (Pavia,1998).