teroksidasi dengan adanya kafein azopigmen dengan reaksi yang sama tapi dengan tidak adanya kafein dapat dihitung bilirubin secara langsung. Serum atau plasma bebas dari hemolisis . serum bilirubin akan berkurang 50% dalam waktu 1 jam jika disimpan pada temperatur kamar (kurang dari 25°C) dan pada sinar matahari langsung. Sebaliknya, ketika sampel disimpan dalam gelap atau pada 2 – 8°C akan stabil hingga 3 hari. Prosedur BL SA ml ml Asam salisilat 0,2 0,1 Natruim nitrit - 1 tetes Kafein 0,2 0,2 campur dan dan biarkan 10 menit pada temperatur kamar Tatrat 1,0 1,0 campur dan biarkan 5 menit pada temperatur kamar Panjang gelombang : 578 nm Blangko : bahan BL Kuvet : 1 cm jalan cahaya Stabilitas warna : minimal 1 jam Perhitungan O.D.SA x 10,8 = jumlah bilirubin mg/dl S.I unit (mg/dl) x 17,1 = µmol/L Nilai normal Dewasa lebih dari 1,1 mg/dl pigmen empedu yang telah diambil oleh hati dan di konyugasikan menjadi bilirubin diglukoroid yang larut dalam air ml ml Asam sulfanilat 0.2 0,1 Natrium nitrit - 1 tetes Saline 2,0 2,0 Sampel 0,2 0,2
campur dan biarkan pada temperatur
kamar, baca kira – kira setelah 5 menit. Panjang gelombang : 546 nm Blangko : bahan BL Kuvet : 1 cm jalan cahaya Perhitungan O.D.SA x 14,4 = jumlah bilirubin mg/dl S.I unit (mg/dl) x 17,1 = µmol/L Nilai normal Dewasa lebih dari 0,25 mg/dl Metode linear ini lebih dari 25 mg/dl konsentrasi yang lebih tinggi dari 15 mg/dl dapat menghasilkan nilai absorbansi (O.D > 1500) yang dapat sulit dibaca pada fotometer nondigital. Hal ini direkomendasikan pada beberapa kasus untuk perkalian diambil pengenceran 1/10 dari sampel dengan saine, (NaCl 0,9%) dan kemudian kalikan hasil akhirnya dengan 10. Untuk menghindari nilai error, sangat penting ketika pengujian untuk bilirubin langsung, untuk menyamakan absorbsi kira – kira 5 menit setelah pereaksi ditambahkan Seriscan normal (kontrol serum normal) (Ref. 99 41 48) dan Seriscan anormal / kontrol serum anormal (Ref. 99 46 85)