FISIOLOGIA MICROBIANA

Nutrición, crecimiento y Metabolismo de

los microorganismos

Jorge Turpo Calcina

 OBJETIVOS
• Conocer los requerimientos nutricionales de
las bacterias.
• Captación de los nutrientes.
• Cultivo de los microorganismos.
• Conocer el crecimiento bacteriano.
• Fases de crecimiento bacteriano.
• Factores ambientales para el crecimiento.
• Sustancias antimicrobianas.
• Metabolismo microbiano.
 FISIOLOGÍA BACTERIANA
 La fisiología bacteriana comprende el estudio de
las funciones realizadas por estas (BACTERIAS).
 Las bacterias son muy eficientes fisiológicamente,
sintetizan en forma muy rápida sus componentes
celulares, en su la mayoría son autosuficientes, a pesar
de su simpleza estructural.
 En la bacteria se desencadenan una serie de
procesos químicos, que en conjunto constituyen
EXIGENCIAS NUTRITIVAS DE LAS
BACTERIAS
 Bacterias que viven exclusivamente en el
hombre
 Bacterias exigentes
 Han perdido rutas metabólicas y dependen del
hospedero para su aporte, “autótrofas”
 Bacterias que pueden crecer en el hombre ó en
el ambiente
 Bacterias poco exigentes
 Pueden sintetizar todos sus macromoléculas
Nutrientes que se emplean en la
biosíntesis y producción de energía

 H2 O
 Macroelementos
 Microelementos
 Hierro
 Factores de crecimiento
 Macroelementos
 Constituyen > 95% del peso en base seco celular
 C, H, O, N, P, S, Ca++, Mg++, K+, Fe++
 C, H, O, N, P, S: son componentes de CHOs, proteínas,
lípidos, ácidos nucleicos
 K+ : actividad de algunas enzimas
 Ca++: termo resistencia de esporas
 Mg++: Cofactor de enzimas, forma complejos con el
ATP, estabiliza ribosomas y membrana plasmática
 Fe++ y Fe+++: forma parte de los citocromos y es
cofactor de enzimas y proteínas transportadoras de
electrones
 Microelementos
 Se denominan también micronutrientes
 Mn, Zn, Co, Cu, Mo, Ni
 Forman parte de enzimas y cofactores y facilitan
la catálisis de las reacciones y el mantenimiento
de la estructura de las proteínas, Ej
 Zn: centro activo de algunas enzimas
 Mn: facilita la transferencia de grupos fosfato
 Co: componente de la vitamina B12
Fuentes de Carbono
 Dióxido de Carbono (CO2)
 No aporta Hidrógeno ni energía.
 Los organismos pueden agruparse dependiendo de la
fuente de carbono en:

AUTÓTROFOS
Usan el CO2 como ORGANISMOS
fuente de energía FOTOSINTÉTICOS.

Usan nutrientes
Orgánicos como
HETERÓTROFOS Fuente de carbono y
energía
 Clasificación de las Bacterias
según fuentes de carbono
Carbono

Autótrofas
Obtienen C de
substratos simples.
• CO2
Heterótrofas
• CH4 Obtienen C de compuestos
más complejos.
• Aminoácidos
• H de Carbono
• Lípidos
Tipos nutricionales
 Los microorganismos pueden clasificarse dependiendo
de la fuente de Hidrógeno o electrones:

Obtienen electrones o
LITÓTROFOS hidrógeno de Compuestos
inorgánicos.

Utilizan sustancias
orgánicas como Fuente de
ORGANÓTROFOS
Electrones.
 Tipos nutricionales
El metabolismo es realizado mediante la utilización de
dos fuentes de energía: energía libre de las oxidaciones
químicas y radiación.

QUIMIÓTROFOS FOTÓTROFOS
 TIPOS NUTRICIONALES
QUIMIÓTROFOS
FOTÓTROFOS
ORGANÓTROFOS
HETERÓTROFOS LITÓTROFOS
AUTÓTROFOS
Protozoos, hongos, Bacterias
no fotosintéticas Algas, bacterias púrpuras y
(mayoría de microorganisms verdes del azufre,
Patógenos) Cianobacterias.

QUIMIÓTROFOS FOTÓTROFOS

LITÓTROFOS ORGANÓTROFOS
AUTÓTROFOS

Bacterias oxidantes del azufre, Bacterias púrpuras y

Hidrógeno, nitrificantes, verdes no sulfúreas
Oxidantes del hierro.
 Tipos Nutricionales
Tipo BACTERIA Fuente de Fuente de carbono Ejemplos
energía

Fotoautotrofas Luz CO2 Algas y

cianobacterias

Fotoheterotrofas Luz Compuestos Algas y bacterias

orgánicos fotosintéticas

Quimioautotrofas o Química Compuesto Pocas bacterias

Litotrofas inorgánicos: H2,
NH3, NO2, H2S,
CO2

Quimioheterotrofas o Química Compuesto La mayoría de

Heterotrofas orgánicos: glucosa bacterias
 Requerimientos de N, P, S
 Pueden ser obtenidos a partir de fuentes
orgánicas e inorgánicas

 N: purinas y pirimidinas, aminoácidos, etc.

 Aminoácidos
 Reducción asimiladora del nitrato (NO3-NH4)
 P: ácidos nucleicos, fosfolípidos, proteínas, etc. Fuente
inorgánica en la forma de fosfato
 S: cisteína, metionina, biotina, tiamina, etc.
 La mayoría efectúa reducción asimiladora de sulfato
 Algunos requieren cisteína
 Factores de crecimiento
 Compuestos orgánicos que la bacteria no puede
sintetizar por pérdida de enzimas de rutas metabólicas
 Aminoácidos: Síntesis de proteínas.
 Ej. Cisteína en N. gonorrhoeae
 Purinas y pirimidinas: Síntesis de ácidos nucleicos.
 Ej. Mycoplasmas
 Vitaminas: Cofactores enzimáticos
 Ej. Vitamina K en bacilos Gram(-) anaerobios
 Otros: Haemophilus
 NAD
 Heme
Captación de Nutrientes
Sistemas de transporte
 Difusión pasiva
 De mayor a menor concentración.
 Ej.. H2O, O2 y CO2

 Difusión facilitada
 De mayor a menor concentración
 Proteínas transportadoras de la
membrana (permeasas)
 Poco empleada en procariotes
Ej.glicerol
 Transporte activo
 Translocación de grupo
Difusión Difusión
simple facilitada

Transporte pasivo Transporte activo

 Transporte pasivo
Difusión simple Difusión facilitada

Portadores Portadores

Transporte activo

Gradiente de concentración
Membrana

Portadores Energía
 Medios de Cultivo
• Sustancias nutritivas que permiten el desarrollo
de microorganismos en el laboratorio
• Cultivo: brindar condiciones óptimas de
crecimiento
• Fáciles de preparar
• Baratos
• Permitir el desarrollo de gran variedad de
gérmenes
• Aportar nutrientes adecuados (aminoácidos,
nucleótidos, factores de crecimiento, glucosa,
iones inorgánicos)
 Medios de Cultivo
• Optimo contenido de H2O y correcto pH
• Requerimientos de O2
• Estéril, evitar contaminaciones
• Incubación: temperatura óptima en estufas
 Clasificación de los medios de
cultivo
• Naturales: solo usados
para enriquecer medios
(leche, suero, papa)
• Artificiales se preparan
en el laboratorio
• Líquidos: caldos
• Sólidos: caldos
adicionados de
substancias capaces de
solidificar (Agar-agar)
 Clasificación de los medios de
cultivo
• Medios selectivos:
permiten crecer un
solo tipo de
microorganismo
(sustancias
inhibidoras)
 Clasificación de los medios de
cultivo
• Medios diferenciales
o indicadores:
evidencia alguna
actividad metabólica
por cambio de estado
o color propia de un
tipo determinado de
microorganismo
 Clasificación de los medios de
cultivo
• Medios de
Transporte: traslado
de muestras
biológicas
manteniendo las
bacterias viables
 Crecimiento Bacteriano
• Aumento de número (no de
tamaño)
• Multiplicación bacteriana:
fisión simple o binaria
• Elongación
• Auto duplicación de ADN
cromosómico
• Tabicado central
• Invaginación membrana
celular
• Síntesis de pared
CRECIMIENTO BACTERIANO:
FISIÓN BINARIA
Cromosoma

Membrana
Pared

División nuclear

Septación

Separación
 Crecimiento Bacteriano
• El tiempo necesario para que una bacteria se
duplique es el
– TIEMPO DE GENERACION
• Distintiva de cada especie
• Bacteria en medio adecuado
• Puede influirse por factores estimulantes
• Varían de 20 minutos (Escherichia coli) hasta 24
horas
• En todas se identifican cuatro etapas
Curva de Crecimiento
Bacteriano

•Fase exponencial o logarítmica
(log): aumento regular de la
población que se duplica a
intervalos regulares de tiempo (G).
•Los Bllactamicos actuan en esta fase
Fase estacionaria: cese del
crecimiento por agotamiento de
nutrientes, por acumulación de Fase de declinación o muerte: el
productos tóxicos, etc.
número de células que mueren es
N|°cel.nuevas=n°cel.que mueren mayor que el número de células que
se dividen.↓cel. viables

•Fase de latencia: período de adaptación

, gran actividad metabólica, células no se
dividen (min-horas )

Las propiedades de un microorganismo dependerán de la fase de la curva en que se

encuentren (la producción de antibióticos se lleva a cabo en la fase estacionaria).
 Medición del crecimiento
bacteriano
 Medición del número celular
 Recuento directo (Cámara de Petroff-Hauser)
 Recuento del Nº de colonias en cultivo
 Ej. Un ml de una dilución de 1x10-6 produce 150
colonias la muestra original contiene 1.5x108 ufc/ml
 Crecimiento en filtro
 Medición de la masa celular
 Mide la capacidad de dispersar la luz, que es
proporcional al Nº
 Un aumento del Nº, aumenta la turbidez y disminuye
luz transmitida
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Nutrientes
Temperatura

pH Tiempo

Disponibilidad
de agua Oxígeno
Temperatura
mínima óptima máxima
Psicrófilos 0º C 15º C 20º C Bacterias
oceánicas

Psicrótofos 0º C 20 – 30º C 35º C Bacterias

deterioro de
alim. Refrig.

Mesófilos 15 -20º C 20 – 45º C 45º C Mayoría de

bacterias
patógenas

Termófilos 45º C 55 – 65º C sup. a 65º C Bacterias,

hongos y algas

Hipertermófilos 55º C 80 – 113º C 113º C Bacterias

aisladas del
suelo marino
Temperatura
 pH

pH neutro
6.5-7.5

Acidófilo
Lactobacillus sp.:
pH<5
 Concentración de oxígeno
 Aerobios organismo que necesita O2 para crecer.
 Anaerobio organismo que puede crecer en
ausencia de O2.
 Anaerobio facultativo no requieren O2 para
crecer, pero lo hacen mejor en su presencia.
 Anaerobio aerotolerante pueden crecer con
presencia o ausencia de O2.
 Anaerobio estricto no crecen en presencia de O2
 Microaerófilos necesitan niveles de O2 bajos (2-
10%)
 Presencia de O2

Aerobios Anaerobios Microaerofilos

(ausenciaO2 Requiere(1-
) 15%)

Facultativos
No requieren
crecen mejor
en presencia de
O2 Aerotolerantes
Extrictos, obligados
Obligados No requieren
O%, letal
O2(21%) crecen peor en
O2
Concentración de oxígeno

Anaerobio Anaerobio Microaerófilo Anaerobio

Aerobio
estricto facultativo aerotolerante
 CRECIMIENTO BACTERIANO
ANAEROBIO AEROTOLERANTE

 Respira anaerobicamente
 No muere en presencia de oxigeno

ANAEROBIO FACULTATIVO
• Fermentación
• Respiración anaerobico
• sobrevive en presencia de oxigeno

MICROAEROFILA
• Crecimiento
–Baja concentración de oxigeno
•Muere
–Alta concentración de oxigeno
 Metabolismo y conversión de la
energía.
• Para sobrevivir, todas las células necesitan ATP.
• Se obtiene por degradación de sustratos
orgánicos.(carbohidratos, lípidos y proteínas).
• CATABOLISMO
• La energía así obtenida se emplea en síntesis
de los componentes celulares.
ANABOLISMO.
Metabolismo y conversión de la
energía
• Los metabolitos se transforman en un producto
intermedio universal llamado ACIDO PIRÚVICO.

• A partir del ACIDO PIRÚVICO los carbonos se

pueden destinar a la producción de energía o
síntesis de nuevos carbohidratos, aminoácidos,
lípidos y ácidos nucleicos.
Metabolismo y conversión de la
energía
• La UTILIZACIÓN DE LA ENERGÍA de los
nutrientes se da por OXIDO-
REDUCCIÓN.

– Oxidación= pérdida de electrones

– Reducción= ganancia de electrones
 Metabolismo y conversión de la
energía
• Oxido- Reducción:
– hay sustancias que ceden electrones= dadoras
– y otras que aceptan = aceptaras.
• Gracias a este sistema las bacterias transforman la
energía química de nutrientes en forma
biológicamente útil incluye FERMENTACIÓN Y
RESPIRACIÓN
Metabolismo y conversión de
la energía
• En FERMENTACIÓN, molécula dadora y
aceptara de electrones son COMPUESTOS
ORGÁNICOS.
Metabolismo y conversión de
la energía
• • En RESPIRACIÓN, hay un aceptar final,
EXOGENO.
• CUANDO ES:
– OXÍGENO: respiración aerobia.
– COMPUESTO INORGANICO: respiracion
anaerobio
 Metabolismo Microbiano
• Conjunto de procesos por los cuales un
microorganismo obtiene la energía y los nutrientes
que necesita para vivir y reproducirse Los
procesos básicos de transformaciones químicas en
las células:
– Anabolismo: síntesis o bioformación de
moléculas con requerimiento de energía.
– Catabolismo: transformación de moléculas orgánicas o
biomoléculas y almacenamiento de energía en forma de
ATP.
 Metabolismo microbiano
• Pueden utilizar como fuente de energía:
– Luz
– Compuestos orgánicos
– Compuestos inorgánicos.
• El metabolismo implica que cientos de enzimas deben
de producirse y actuar de manera coordinada.
• Las características metabólicas específicas de un
microorganismo constituyen el principal criterio para
determinar:
– Papel ecológico
– Responsabilidad en los ciclos biogeoquímicos
– Utilidad en los procesos industriales
– Identificación microbiana.
 Tipos de metabolismo microbiano
1. La forma como el organismo obtiene el carbono
para la construcción de la masa celular:
 Autótrofo: El carbono se obtiene del dióxido de carbono (CO2).
 Heterótrofo: El carbono se obtiene de compuestos orgánicos.
 Mixótrofo: El carbono se obtiene tanto de compuestos orgánicos
como fijando el dióxido de carbono.
2. La forma en la que el organismo obtiene los
equivalentes reductores para la conservación de
energía o en las reacciones biosintéticas:
 Litotrofo: Los equivalentes reductores se obtienen de
compuestos inorgánicos.
 Organotrofo: Los equivalentes reductores se obtienen
de compuestos orgánicos.
 Tipos de metabolismo
microbiano
3. La forma en la que el organismo obtiene
la energía para vivir y recer:
– Quimiotrofo: La energía se obtiene de
compuestos químicos externos.
– Fototrofo: La energía se obtiene de la luz.
• Fotoautotrofos: Vegetales, algas,
bacterias fotosintéticas.
• Fotoheterotrofos: Bacterias
• Quimioautotrofos: Bacterias
• Quimioheterotrofos: Animales, Protozoos,
bacterias.
Tipos de energía que captan los MO y los
correspondientes tipos de metabolismos
energéticos
• Si la energía procede de radiaciones (en
los cuantos de una determinada longitud
de onda de la luz visible): bacterias
fototrofas, que a su vez pueden ser:
– Fotolitotrofas: captan energía lumínica en
presencia de sustancias inorgánicas.
– Fotoorganotrofas: captan energía lumínica
con requerimiento de sustancias orgánicas.
Tipos de energía que captan los MO y los
correspondientes tipos de metabolismos
energéticos
• Si la energía se desprende a partir de
moléculas químicas en reacciones
biológicas de óxido-reducción: bacterias
quimiotrofas, que a su vez pueden ser:
– Quimiolitotrofas: captación de energía
química a partir de sustancias inorgánicas.
– Quimiorganotrofas: captación de energía
química a partir de sustancias orgánicas.
 Métodos para generar ATP
• Fosforilación a nivel de sustrato (en las
fermentaciones).
• Fosforilación oxidativa (en las
respiraciones).
• Fotofosforilación (durante la fotosíntesis).
 CATABOLISMO

Conjunto de reacciones bioquímicas que conducen

a la producción de ENERGIA y PODER
REDUCTOR para la biosíntesis.

ANABOLISMO

Suma total de todas las reacciones biosintéticas de

la célula.
Rangos de temperatura para el crecimiento microbiano
Medición de la masa bacteriana (en vivo
+ muerto) en cultivo liquido

Turbidez
(opacidad)
Medición de bacterias viables
Unidades formadoras de colonias

colonias
 PRINCIPALES VÍAS DE FERMENTACIÓN

Fementación
propiónica

BACT.
PROPIÓNICAS

Hidrogenolasa
fórmica
enterobacterias

Fementación
ácido mixta

Fementación
láctica

Fementación BACTERIAS LÁCTICAS

alcohólica
Fementación
LEVADURAS acetoínica Fementación
butírica
ENTEROBACTERIAS
ANAEROBIOS
Fermentación
láctica