ЛЕКЦИЯ 17

НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ
 План
17.1. Строение нуклеиновых кислот
17.2. Нуклеозиды
17.3. Нуклеотиды
17.4. Первичная структура
нуклеиновых кислот
17.5. Адениндинуклеотиды
17.6. АТФ
17.1. Строение нуклеиновых кислот

Нуклеиновые кислоты играют

важную роль в переносе
генетической информации в
живых существах от одного
поколения к другому посредством
управления точным ходом
биосинтеза белков в клетках
 Открытие нуклеиновых
кислот
Принадлежит швейцарскому биохимику Ф.
Мишеру. В 1868 году он обнаружил новое
химическое соединение в лейкоцитах, которое
назвал нуклеин. Впервые нуклеиновую кислоту,
свободную от белков получил Р. Альтман в 1876
году, который и предложил термин
нуклеиновые кислоты. Впоследствии
нуклеиновые кислоты были обнаружены во
всех растительных и животных клетках,
бактериях и вирусах
 Нуклеиновые кислоты – это
высокомолекулярные органические
соединения, конечными продуктами
полного гидролиза которых
являются азотистые основания
(пуриновые или пиримидиновые)
пентоза и фосфорная кислота. В
состав нуклеиновых кислот входят:
С, О, Н, Р ≈ 8-10 %, N ≈ 15-16%.
 Нуклеиновые кислоты –
высокомолекулярные соединения,
построенные из блоков
(мономерных единиц), которыми
являются мононуклеотиды.
Принцип построения
нуклеиновых кислот был выяснен
при изучении продуктов гидролиза
 Гидролиз и компоненты НК
Нуклеиновые кислоты

олигонуклеотиды (до 20 нуклеотидов)

мононуклеотиды
(структурная единица нуклеиновых кислот)

Нуклеозиды Н3РО4

Азотистые основания Сахара (пентозы)

ДНК: А, Г, Ц, Т Дезоксирибоза
РНК: А, Г, Ц, У Рибоза
 Азотистые основания
Майорные основания
ПУРИНОВЫЕ ОСНОВАНИЯ

NH2 O
6 7 6 7
1 1 N
5 N 5
N HN
8 8
2
2 4
4 N9 H2N N N9
N H 3 H
3
ГУАНИН
АДЕНИН 2-АМИНО-6-ОКСОПУРИН
6-АМИНОПУРИН 2-АМИНО-6-ГИДРОКСИПУРИН
 Азотистые основания
Майорные основания
ПИРИМИДИНОВЫЕ ОСНОВАНИЯ
O NH2
O
4 4
3
4 H3C 5 3
5 N
3 NH
5 NH 2
2 6
6
6
2
N1 O N1 O
H H
N1 O
H
ТИМИН ЦИТОЗИН
УРАЦИЛ
5-МЕТИЛ-2,4-ДИОКСО- 4-АМИНО-2-ОКСО-
2,4-ДИОКСОПИРИМИДИН ПИРИМИДИН
ПИРИМИДИН
 Моносахариды (пентозы)

5'
HOCH2 OH OH
HOCH2
O O
4' ' '
1'
3 2

OH OH OH

 D-РИБОЗА  D-ДЕЗОКСИРИБОЗА
Гликозидный гидроксил в пентозе имеет обязательно
β – конфигурацию
 МИНОРНЫЕ ОСНОВАНИЯ
В состав нуклеиновых кислот также входят
минорные (редковстречающиеся) основания,
встречаются в структуре НК бактерий,
вирусов

N ГИПОКСАНТИН
HN

N N
H
 O

H3C N
N
1-N-МЕТИЛГУАНИН

H2N N N
H

N CH3
3-N-МЕТИЛУРАЦИЛ

N O
H
 Пиримидиновые и пуриновые
основания – ароматические
системы, имеют плоское строение,
в структуре НК азотистые
основания присутствуют в
энергетически более выгодной
форме (более устойчивой)
лактамной форме
 ЛАКТИМ-ЛАКТАМНАЯ ТАУТОМЕРИЯ

OH O
OH
H3C H3C
H H3C
N N N

N O N O N OH

H H

Тимин
Лактимная форма Лактимная форма
Лактамная форма
 ЕНАМИНО –ИМИННАЯ
ТАУТОМЕРИЯ
возможна для аминопроизводных

NH 2
NH NH
NH 2
H H
N N N N

N OH N O N O N OH

H H

енаминные иминные
формы формы
 ПРОТОТРОПНАЯ ТАУТОМЕРИЯ

NH2 NH2 H
7
N N7
N N

N N9 N9
N
H
При физиологических
условиях нуклеиновые
основания существуют
только в лактамной и
аминной формах
 Урацил, тимин и цитозин –
твердые высокоплавкие
вещества, растворимые в воде,
нерастворимые в неполярных
органических растворителях.
Для них характерно наличие
прочных межмолекулярных
водородных связей
Такого рода ассоциаты играют важную роль в
формировании структуры нуклеиновых кислот
O
H
N
NH O

O HN
N
H
O
При действии азотистой кислоты на пуриновые
основания аденин и гуанин происходит их
дезаминирование с образованием
соответственно гипоксантина и ксантина.

NH2 OH

N HNO2
N
N N
-N2, - H2O

N N N N
H H

АДЕНИН
ГИПОКСАНТИН
 OH OH

N N
N HNO2 N
-N2, - H2O
H2N N N HO N
H N H

ГУАНИН КСАНТИН
Пуриновые и пиримидиновые
основания ДНК несут
генетическую информацию,
углеводные и фосфатные
группы выполняют
структурную роль
 ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ПРЕПАРАТЫ НА
ОСНОВЕ ПИРИМИДИНОВЫХ
ОСНОВАНИЙ

O
5-ФТОРУРАЦИЛ
F
NH
Применяется в онкологии
при лечении
злокачественных опухолей
N O
H
 17.2. Нуклеозиды

Нуклеозиды – это азотистые

аналоги О-гликозидов, т.е.
N-гликозиды, образованные
гетероциклическими основа-
ниями и полуацетальным
гидроксилом пентозы
Нуклеозиды бывают двух типов –
пуриновые и пиримидиновые.
У пуриновых нуклеозидов
N-гликозидная связь осуществ-
ляется между С-1’-D-рибозы или
дезоксирибозы и N-9 азотистого
основания, а у пиримидиновых –
между С-1’-D-рибозы или
дезоксирибозы и N-1 основания.
N-гликозидная связь имеет β-
конфигурацию
Пуриновые нуклеозиды NH2

N
N

9
N N
HOCH2
O N-гликозид-
ная связь
1’

OH OH

АДЕНОЗИН
9--D-РИБОФУРАНОЗИЛАДЕНИН
Пуриновые нуклеозиды O

N
NH

9
N N NH2
HOCH2
O N-гликозид-
1’
ная связь

OH
ДЕЗОКСИГУАНОЗИН
9--D-ДЕЗОКСИРИБОФУРАНОЗИЛГУАНИН
 NH2
Пиримидиновые
нуклеозиды N

1
N O
HOCH2
O N-гликозид-
1’ ная связь

OH OH

ЦИТИДИН
1--D-РИБОФУРАНОЗИЛЦИТОЗИН
Пиримидиновые O
нуклеозиды H3C
NH

1
N O
HOCH2
O N-гликозид-
1’ ная связь

OH ТИМИДИН
1--D-ДЕЗОКСИРИБОФУРАНОЗИЛТИМИН
 N-гликозидная связь стабильна по
отношению к щелочам, но легко
подвергается гидролизу в кислой
среде. Пуриновые нуклеозиды легко
гидролизуются в кислой среде, а
пиримидиновые нуклеозиды
гидролизуются в более жестких
условиях (после продолжительной
обработки концентрированными
кислотами)
 17.3. Нуклеотиды

Нуклеотиды –
фосфорилированные нуклеозиды по
С-2’, C-3’ и С-5’
Нуклеотиды являются сильными
кислотами. При физиологических
значениях рН (7,35) фосфатная
группа ионизирована
 Нуклеотиды находятся в
ионизированном состоянии, поэтому
их называют как сложные ионы с
окончанием ат. АМФ – аденилат,
ТМФ – тимидилат и т.д. Также
сохранились и используются старые
названия : АМФ- 5’-адениловая
кислота, ТМФ - 5’-тимидиловая
кислота. Сокращения АМФ, ТМФ
 СЛОЖНОЭФИРНАЯ NH2
СВЯЗЬ
N
N
O
N N
HO P OCH2
O N-ГЛИКОЗИДНАЯ
OH СВЯЗЬ

OH OH

АДЕНОЗИН-5-МОНОФОСФАТ

АМФ
 СЛОЖНОЭФИРНАЯ
СВЯЗЬ NH2

O
N O
HO P OCH2
O N-ГЛИКОЗИДНАЯ
OH СВЯЗЬ

OH OH

ЦМФ
 Гидролизу подвергается как
N-гликозидная, так и
сложноэфирная связи, в
зависимости от этого могут
образовываться нуклеозиды или
компоненты нуклеотида –
азотистое основание, пентоза и
фосфорная кислота
 СХЕМА ГИДРОЛИЗА

ЩЕЛОЧНАЯ СЛАБОКИСЛАЯ
СРЕДА СРЕДА
АДЕНОЗИН + Н3РО4 АМФ АДЕНОЗИН + Н3РО4

КИСЛАЯ СРЕДА
рН = 1

АДЕНИН + D - РИБОЗА + Н3РО4

Нуклеотиды помимо того что входят
в состав НК, встречаются в клетке в
свободном состоянии.
Кроме фосфатов основных
нуклеозидов известны и фосфаты
минорных нуклеозидов, например,
5’-инозиновая кислота – монофосфат
инозита
 O

N
NH
O
N N
HO P OCH2
O
OH

OH OH

5-ИНОЗИНОВАЯ КИСЛОТА
 Нуклеотиды, в которых фосфорная
кислота одновременно этерифицирует
две гидроксильные группы пентозы
называют циклические нуклеотиды. Они
являются регуляторами внутриклеточ-
ных процессов. цАМФ относится к
вторичным посредникам, способствует
превращению инертных белков в фер-
менты, под действием которых проис-
ходит ряд биохимических реакций, ле-
жащих в основе проведения нервного
импульса
 NH2

N
N

5'
N N
O CH2
O

O 3'

P
HO O OH

аденозин-3‘-5‘-циклофосфат
Ц-АМФ
 17.4. Первичная структура
нуклеиновых кислот
Первичная структура нуклеиновых
кислот – это последовательность
нуклеотидных звеньев, связанных
ковалентными связями в
непрерывную цепь полинуклеотида.
Мононуклеотиды соединены
фосфодиэфирной связью 3’-5’
 NH 2

O N
N

HO P O N N А
5'
O CH2
O O

3'
NH
O
OH
HO N O
P O
5' У
O CH2
O
3'
O
O
OH N
NH
HO P O
N N NH 2
5'
O CH2 Г
O
3'

O
OH

HO P O

O
Вторичная структура ДНК – две
спиральные полинуклеотидные
цепи, закрученные вокруг общей
оси. Удерживаются две спирали
друг относительно друга
водородными связями между
пуриновыми и пиримидиновыми
основаниями противоположных
цепей
 Водородные связи возникают
между двумя парами оснований
А–Т и Г–Ц
 Дополнение аденина – тимином,
гуанина – цитозином называют
комплементарностью, за счет чего
обеспечивается одинаковое по всей
длине двойной спирали расстояние
между цепями и образование между
противоположными основаниями
максимального числа водородных
связей, что придает молекуле
одновременно устойчивость и
подвижность
 H
..................... H
O N N
7
H3C 5 8
6
4
9
5 3N H ................. N N
1 4
2 2 3
6
1 N
N O Цепь

Цепь
Т A
1,11 нм

Образование водородных связей между парами

комплементарных оснований
 H

N H O N
7
8
6 5
9
4 N
5 3N H N1 4
2 3
6
1
2 N
N O H N Цепь

H
Цепь
Ц Г
1,08 нм

Образование водородных связей между парами

комплементарных оснований
 Дж.Уотсон и
Ф. Крик в 1962
году стали
Нобелевскими
лауреатами в
области физио-
логии и медицины,
за расшифровку
структуры двойной
спирали молекулы
ДНК
 ДНК содержится в ядрах клеток, в
хромосомах, незначительное ее
количество обнаружено в митохондриях.
ДНК обладает большой молекулярной
массой. В молекуле ДНК обязательно
количество молекул аденина должно
быть равно количеству молекул тимина,
а количество молекул гуанина равно
количеству молекул цитозина, т.е. сумма
пуриновых оснований равна сумме
пиримидиновых оснований
(правила Чаргафа)
 В молекуле ДНК зафиксированы все
наследственные свойства организма.
Важнейшей особенностью ДНК
является репликация – создание себе
подобной структуры. Репликация
заключается в том, что двойная спи-
раль раскручивается и разделяется на
две части и на каждой из цепей моле-
кулы ДНК синтезируется парная ей
цепь новой ДНК. В результате
создаются две новые дочерние ДНК
РНК повсеместно распространена в
живой природе, она находится во
всех микроорганизмах,
растительных и животных клетках.
Биологическая роль РНК
обусловлена тем, что она
обеспечивает реализацию в клетке
наследственной информации,
которая передается с помощью ДНК
В клетке существуют 3 главных типа
РНК: матричная (информационная)
РНК (2-10%), рибосомная РНК (80-
90%) и транспортная РНК (15-16%).
В отличие от ДНК молекулы всех
трех типов РНК – одноцепочечные.
Содержание РНК в клетке в
пересчете на массу в 5-10- раз выше,
чем ДНК
 17.5. Адениндинуклеотиды

Адениндинуклеотиды являются
компонентами трех коферментов
(небелковая часть фермента)
НАД+, ФАД, КоА
 НАД+ и НАДФ+ - динуклеотиды, в
которых мононуклеотиды связаны
между собой через остатки фосфорной
кислоты. В состав одного из
нуклеотидов входит амид
никотиновой кислоты (Витамин РР),
другой мононуклеотид представляет
собой адениловую кислоту
 СТРОЕНИЕ НАД+

NH 2
O
C N
N
NH 2
+ O O
N N
N
CH2 - O - P - O - P - O - CH2
O
OH OH OH OH
O
OH OH

Ангидридная связь
 НАД+ и НАДФ+ участвуют в
реакциях биологического
окисления
H H

CONH 2 CONH 2

субстрат
+ + Н - субстрат - Н + H+ + окисленный
N N

R
R
 γ- положение никотинамидного
фрагмента акцептирует гидрид ион
(Н‾). В результате присоединения Н‾
происходит восстановление НАД+ и
его пиридиновое кольцо переходит в
1,4-дигидропиридиновый фрагмент
 Схема окисления молочной кислоты до ПВК
под действием фермента лактатдегидрогеназа

H H

CONH2 CONH2
ЛДГ
+ + CH3-CH-COOH + H+ + CH3-C-COOH
N N
OH O
R R

НАД+ НАД Н
 Схема окисления этилового спирта до
ацетальдегида под действием фермента
алкогольдегидрогеназа

H H

CONH 2 CONH 2
O
АДГ
+ + CH 3CH2OH + H+ + CH 3-C
N N H

R R

НАД+ НАД Н
 17.6. Аденозинтрифосфорная
кислота
АТФ выполняет роль аккумулятора
(накопителя) и передатчика энергии
в клетке, обеспечивает синтез
донора метильных групп -
S – аденозилметионина из АТФ и
метионина, участвует в переносе
фосфатных групп
 АТФ содержит богатые энергией
ангидридные макроэргические связи
O O

- P - O ~ P -

OH OH

При расщеплении этой связи выделяется

энергия ≈ 32 кДж/моль
 Процессы, связанные с
расходованием энергии,
сопровождаются расщеплением
АТФ до АДФ и Н3РО4, а затем до
АМФ. Наоборот в процессах
распада питательных веществ часть
освобождающейся энергии
расходуется на образование АТФ из
АДФ и АМФ
 NH2

N
O N

H3PO4 + HO - P - O - CH2 N
O N
OH

OH OH

АМФ
 NH2

N
O O N

HO - P ~ O - P - O - CH2 N
O N
OH OH + H3PO4

OH OH
АДФ
 O O O

HO - P ~O - P ~ O - P - O - CH2 A
O
OH OH OH

OH OH
АТФ
Нуклеозидная часть молекулы важна
для узнавания и связывания с
различными ферментами
При физиологических значениях рН
АТФ находится в ионизированном
состоянии и в клетке связывается с
Mg2+, Са2+. АТФ способна переносить
потенциальную энергию на множество
важных биологических соединений
 С участием АТФ
осуществляется активный
транспорт ионов через
биологические мембраны,
активирование аминокислот
перед их связыванием
 Схема реакции взаимодействия
АТФ с аминокислотами (SN)

O O O A

HO - P - O - P - O - P - O - CH2
O
OH OH OH + HOOC - CH - CH3

NH2
OH OH

АТФ АЛАНИН
 O O A

H3C - CH - C - O - P - O - CH2
O + H4P2O7
NH2 OH

OH OH

АЛАНИЛАДЕНИЛАТ ДИФОСФОРНАЯ
КИСЛОТА
 Благодарим
за внимание !