Transcription By Ismael A. Khatab Head of Genetics Department Faculty of Agriculture Kafrelsheikh University Ismael.khatab@yahoo.com http://kfs.academia.edu/khatab Replication Transcription Translation Dupilcation DNA RNA Protein تضاغف نسخ عكسى
وظيفة الـ mRNAتكمن في نقل أو نسخ مجاميع الشفرات الوراثية من
أحد خيطي الـ ، DNAثم ينفصل هذا الـ mRNAوينتقل إلي السيتوبالزم في حقيقيات النواة. )transfer RNA (tRNA وهو جزئ صغير نسبيا يحتوي علي 80 - 75نيوكليوتيدة وهو له بناء معقد ناتج عن روابط هيدروجينية تربط بين عدد من قواعده ،ويمتاز بوجود عدد من القواعد الغير عادية وهي مشتقات مثيلية من الجوانين واليوراسيل وغيرها ،فتوجد مجموعة أو أكثر من مجموعة الميثيل ، CH3وترجع أهمية مشتقات القواعد هذه إلي أنها تمنع تكوين أزواج القواعد وبالتالي فهي تؤثر في تكوين شكل الجزئ ليصبج قريب في الشبه من ورقة البرسيم لها ثالثة أو أربعة فصوص ولذلك يطلق عليه نموذج ورقة البرسيم Clover Leaf .Modelولجزيئات الـ tRNAخصائص مشتركة عديدة فالطرف ' 3يحمل في نهايته تتابع القواعد CCAكما يحمل الجزئ أيضا تتابع ثالثي آخر بعرف بالكودون المضاد anticodonيسمح باإلرتباط المؤقت مع تتابعات قواعد الكودون الموجود علي جزئ mRNA ويتكون جزئ الـ tRNAفي النواة علي قالب .DNAوفي البكتريا E. coliيكون الـ tRNAحوالي %15من مجموع RNAفي الخلية .ويبين الشكل التالي تركيب . tRNA tRNA in cytoplasm has a codon attached to an amino acid
• 3-base code (triplet) is an “anticodon”
• 3” Attached amino acid that is carried from cytoplasm t-RNAي ب أن يحتوى على عدد من الخصائص وهى :ـ .1ي ب أن يكون قاد ا ً على ييز إ زيم Loop 3 Loop 1 Aminoacyl t-RNA Synthetaseال خصص له والذى يضيف له الح ض األ ي ى ال طلوب
.2ي ب أن يح وى t-RNAعلى كان
يع ل ك وقع ربط للحمض األمينى .
.3ي ب أن يح وى أيضا على الـ
Loop 2 (Anticodonالـ Anticodon هو ال عاقب ال ك ل وال خصص للقواعد ال ى وف بط بالـ m RNAال ك ل لها ) -3حامض ر.ن.ا .الريبوسومي )Ribosomal RNA (rRNA اتضح دور الريبوسومات في تصنيع البروتين في الخمسينيات من القرن العشرين ،وتتواجد الريبوسومات في سيتوبالزم الخلية وهي تتكون من بروتين و ، rRNAويتركب الريبوسوم من وحدتين غير متساويتين في الوزن ويمكن التفرقة بينهما عن طريق سرعة الترسيب S ( Sتعني Svedberg unitوهي مقياس لمعدل الترسيب . )sedimentation
ويطلق علي ريبوسوم E. coliاسم ، 70S ribosomeوهي تعني مقياس
سرعة الريبوسوم في الترسيب بإستخدام آلة الطرد المركزي .centrifuge وهو يتكون من وحدتين 30Sو ،50Sوتتركب كال الوحدتين من اآلتي :
-2وحدة 34 + 23S rRNA + 5S rRNA : 50Sبروتينات ريبوسومية. وتتجمع الريبوسومات الداخلة في تصنيع سالسل البروتين في مجاميع تسمي ، polysomesويربط بينها حامض . mRNA Ribosomal RNAهو أحد أنواع ال RNAوهو المكون الرئيس للريبوسوم .يخلق ال RNAالريبوسومي داخل النوية. ويحتوي على تحت وحدة كبيرة وتحت وحدة صغيرة حيث يتكون معقد ذو وزن جزيئي كبير .وتربط تحت الوحدة الصغيرة في الريبوسوم بالربط بين ال RNAالرسول وال RNAالناقل ،في حين تقوم تحت الوحدة الكبيرة بالمساعدة في تكوين الرابطة الببتدية بين األحماض األمينية في سلسلة متعدد الببتيد. 34 Transcription RNA تخليق جزيئات الـ DNA encoding gene messenger RNA ويتم تخليق جزيئات الـ RNAبإستخدام جزء من أحد خيطي الـ DNAكقالب في تفاعل متعدد ويتم تحفيزه بواسطة انزيمات تسمي ) (RNA polymerasesانزيمات بلمرة الـ ، RNAوعملية تكوين جزيئات حامض الـ RNAيطلق عليها النسخ او .Transcription وتتم عملية نسخ المادة الوراثية علي ثالثة مراحل : -1البداية initiation - 2اإلستطالة elongation -3النهاية termination ويجب األخذ في االعتبار مالحظتين هامتين لعملية النسخ وهما : -1االنزيمات الداخلة في عملية النسخ -2اإلشارات التي تحدد اين تبدأ وأين تنتهي عملية النسخ وذلك علي خيط الـ . DNA Initiation of transcription Transcription begins at the 5’ end of the gene in a region called the promoter. The promoter recruits TATA protein, a DNA binding protein, which in turn recruits other proteins. TATA binding protein Promoter Gene sequence to be transcribed
DNA GG TATA CCC
TATA box Transcription begins
Transcription factor
When a complete transcription complex is formed
RNA polymerase binds and transcription begins. • األجزاء البادئة في تخليق الـ RNAهي األربع نيكليوتيدات من النوع الريبوزي أو )ribonucleoside 5'-triphosphates (NTPs
خالل تفاعل البلمرة ،polymerization reactionتتفاعل مجموعة الهيدروكسيل من الناحية •
OH) -'3 ( '3الموجودة علي احدي النيوكليوتيدات مع مجموعة ثالثي الفوسفات من الناحية ( '5 triphosphate) -'5الموجودة علي نيوكليوتيدة اخري ،ثم يخرج ثنائي الفوسفات pyrophosphate • يتم تحديد تتابع النيوكليوتيدات في جزئ الـ RNAبواسطة تتابع النيوكليوتيدات في حامض الـ DNA .وتضاف كل نيوكليوتيدة جديدة إلي النهاية النامية لسلسة الـ ،RNAوتختار هذه النيوكليوتيدة حسب توافقها مع النيوكليوتيدة المقابلة الموجودة علي شريط الـ DNAوحسب قدرتها علي اقامة رابطة ثنائية base-pairمع القاعدة.الموجودة علي شريط الـ DNA ، '3أي أن النيكليوتيدات الجديدة • تنمو سلسلة RNAالجديدة في اإلتجاه'5 تُضاف فقط إلي النهاية OH -'3في سلسة RNAالنامية ،هذا االتجاه الخاص بنمو سلسة RNAالنامية هو نفس اتجاه تخليق DNA النسخ في الكائنات حقيقية النواة Trancription in eukaryotes تتشابه إلي حد كبير عملية النسخ في الكائنات بدائية النواة والكائنات حقيقية النواة ،وكذلك تركيب حامض ، mRNAولكن هناك خمس فروق هي : -1تحتوي خاليا الكائنات حقيقية النواةا علي ثالثة أنواع من انزيم RNA polymeraseوهي مسئولة عن تصنيع أحماض RNAالمختلفة وتسمي .RNA polymerase I, II, III -2تكون كال من نهايتي ' 5و' 3مختلفتين ،فيوجد تركيب معقد يُطلق عليه اسم capوهو موجود عند نهاية '5 في .mRNAوتحتوي النهاية ' 3علي تتابعات عديدة (تصل إلي 200نيوكليوتيدة) من حامض polyadenylic acidأو ) ،poly (Aوذلك في أغلب جزيئات .mRNA -3يكون جزئ mRNAوالداخل في عملية الترجمة (يعمل كقالب لتصنيع البروتين) جزءا صغيرا من الحجم األصلي للـ mRNAالذي تم نسخه من الـ ،DNAفقد وجد انه توجد تتابعات متداخلة intervening طلق عليه اسم )intronsفي جزئ الـ mRNAوذلك اثناء تكوينه ،وتلك ( sequencesأو ما أ ُ التتابعات يتم طردها من جزئ الـ mRNAثم يتم إعادة لحم المناطق الباقية .وتسمي عملية القطع واإللتحام splicingأو . processing -4وجد ان جميع جزيئات الـ mRNAتكون ناتجة من سسترون واحد monocistronicوذلك في الكائنات حقيقية النواة . -5أغلب جزيئات الـ mRNAتعيش طويال في الكائنات حقيقية النواة .أما في الكائنات بدائية النواة فيكون عمر هذه الجزيئات ال يتعدي دقائق قليلة ارتباط انزيم ال RNA polymeraseبها يودى الى فتح ال DNAويكون ما يسمى بال open promotor complex