Professional Documents
Culture Documents
BACILOS GRAMNEGATIVOS NO
FERMENTADORES
Robledo, G.V., García, G.FM., Villalobos, Z.GY., Peña, C.MC., Bautista, A.A. Y Maravilla, F.E.
Oxidasa
_ +
Oxidasa
_ +
Cocobacilo Bacilos - +
Producción de pigmento
+ -
Difusible en MH*
*Müller Hinton
NOTA: Para la ID de cualquier BGNNF los resultados se compararán con la tabla general (TG):
TGa: MORFOLOGÍA COLONIAL
TGb: CARACTERISTICAS COLONIALES, MICROSCOPICAS Y BIOFISICAS
TGc: PRUEBAS PRESUNTIVAS Y BIOQUÍMICAS
TGd: UTILIZACION DE FUENTES DE CARBONO, CARBOHIDRATOS Y PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD
ALGORITMO DE IDENTIFICACION PARA BGNNF FASTIDIOSOS
Catalasa
- +
NOTA: Consultar Manual of Clinical Microbiology, Patrick R. Murray, pag. 564, Tabla 1.
TABLA 1 BATERIA DE PRUEBAS PARA IDENTFICACION DE
BGNNF
UTILIZACIÓN DE
a f
PRESUNTIVAS MICROBIOLOGICAS BIOFÍSICAS BIOQUIMICAS ENZIMATICAS FUENTES DE SUSCEPTIBILIDADL
CARBONO Y
CARBOHIDRATOS
ELEVACIÓN: plana, convexa, cóncava, umbilicada; CONSISTENCIA: mantequillosa, mucos o seca, ASPECTO, rugosa o lisa.
dProducción de pigmento: insoluble (fluoresceína, pioverdina, piomelanina, piorrubina y piocianina); insoluble (flexirrubinas)
eMovilidad: preparar medio de SIM al 1.5% (15g de base de SIM para un litro de agua destilada) en placa, ya que se observa y se interpreta mejor
fObservar desde un principio si el BGNNF desarrollo óptimamente en condiciones aeróbicas y a 37°C, en caso de no haber buen desarrollo observarlo a temperatura ambiente, probando simultáneamente
microaerofilia y anaerobiosis.
gRevelar con: -naftilamina, ácido sulfanílico y granalla de zinc, esperar 30 minutos para dar un resultado confiable.
h,kRevelar con: cloruro férrico al 40%, esperar 5 minutos para su interpretación.
iPara su interpretación incubarlas 15 minutos en refrigeración (4°C), si inmediatamente al invertir el tubo la gelatina esta licuada y cae se considerará positivo.
j Inocular una placa con agar ADNasa sin indicador, revelar con azul de O-toluidina.
*Preparación: Solución salina 0.85% 3.6 ml + 0.2 ml de BHI + 0.4 ml del azúcar a utilizar + 0.1ml de la suspensión bacteriana al 4.0 de Mc Farlan ; revelar la mitad de estos al 3 er día ,en caso de dar
positivos desecharlos, los negativos se confirmarán a los 7 días. El resto de los sustratos bioquímicos se revelarán a los 7 días.
LPOLIMIXINA B Un halo > de 12 mm se considera Sensible, y menor de 8 mm Resistente; PENICILINA cualquier halo de inhibición alrededor del disco se considerara Sensible.
Tabla General (TG)a. CARACTERISTICAS
DE MORFOLOGIA COLONIAL PARA
BGNNF
GERMEN n BORDE ELEVACION CONSISTENCIA ASPECTO OLOR SCOL
P. aeruginosa 9 56 44 0 11 89 89 11 0 100 0 44 0 22 0 0 0 0 33 44
P. fluorescens 2 100 0 0 50 50 100 0 0 100 0 0 50 0 0 0 0 0 50 50
P. putida 7 100 0 0 86 14 86 14 0 100 0 14 29 0 0 0 0 0 57 29
P. pseudoalcaligenes 3 67 33 0 33 67 100 0 0 100 0 0 67 0 0 0 0 0 33 0
P. stutzeri Vb3 2 0 0 100 100 0 0 0 100 0 100 0 50 0 0 0 0 0 50 0
P. oryzihabitans 2 0 0 100 100 0 0 0 100 0 100 50 0 0 0 0 0 0 50 0
C. acidovorans 1 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100
S. paucimobilis 2 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0
R. pickettii Vb3 1 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 100 0 0 0
S. maltophilia 6 100 0 0 17 83 100 0 0 100 0 16 33 50 0 0 0 0 0 100
A. xylosoxidans ss xyl 2 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 50 0 50 0
A. xylosoxidans ss den. 2 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0
A. piechaudii 4 100 0 0 75 25 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100
A. baumannii 7 100 0 0 100 0 86 14 0 100 0 0 29 0 0 29 0 0 43 100
A. junii 4 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100
A. lwoffii 1 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100
O. anthropi 2 100 0 0 100 0 0 100 0 100 0 0 0 0 0 0 0 50 50 100
C. meningosepticum 1 100 0 0 100 0 0 100 0 100 0 0 0 0 0 0 100 0 0 0
CDC Gpo. EO2b 1 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 100 0 0
CDC Gpo. DF 1 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 100 0 0 0 0 100
DCD Gpo. DF3L 1 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100
Capnocytophaga sp. 1 100 0 0 100 0 100 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100
C, completo; L, lobulado; I, irregular; X, convexa; P, plana; Mq, mantequillosa; Mu, mucosa; S, seca; Li, lisa; R, rugosa; H/P, hierba
picante; A/E , agua estancada; SCOL, solubilidad colonial.
TGb. CARACTERISTICAS MICROBIOLOGICAS
PARA BGNNF
GERMEN n PIG COLOR DE PIGMENTO S/PIG MC GSC HEMOLISIS MORFOLOGIA MOV 42°C NaCl ATMOSFER
MICROSCOPICA 6.5%
A A/V S Paja café Beta Alfa Bacilo Bp Cb Aest. Cap
A, amarillo; A/V, amarillo y verde; S, salmón; S/PIG, solubilidad del pigmento; Bp, bacilo pleomórfico; Cb, cocobacilo; MOV, movilidad;
Aest, aerobio estricto; Cap, capnofílico.
TGc. PRUEBAS PRESUNTIVAS Y BIOQUIMICAS
PARA BGNNF
GERMEN n OXI IR CAT O/F NO2 GAS H2S UREA E G DNAsa LDC ODC ADH FDA
Ox I A
OXI, oxidasa; IR, indol rapido; CAT, catalasa; O/F, oxidación/fermentación; Ox, oxidativo; I, inerte; A, alcalino; E, esculina; G,
gelatina; LDC, lisina descarboxilasa; ODC, ornitina descarboxilasa; ADH, arginina deshidrolasa; FDA, fenilalanina desaminasa.
TGd. UTILIZACION DE FUENTES DE CARBONO,
CARBOHIDRATOS Y PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD
PARA BGNNF
GERMEN n CITRATO MALONATO GLUCOSA MALTOSA MANITOL SACAROSA XYLOSA P. B P
% resistencia % resistencia
* 1,2,3,23,24
Pseudomonas stutzeri
* 1,2,3,23,24
Pseudomonas stutzeri
* 1,2,3,23,24
Pseudomonas oryzihabitans
FIGURA 12. Fotomicrografia. Tinción de Gram.
Bacilos gramnegativos, pleomórficos (rectos o
ligeramente curvos, bacilos cortos, medianos y
cocobacilos muy pequeños ), miden de 0.5 a 0.9 µ de
ancho por 0.9 a 1.6 µ (100x).*
*1,2,3,6,7,23
Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas fluorescens
Pseudomonas putida
Pseudomonas pseudoalcaligenes
*1,2,3,23,24
Sphingomonas paucimobilis
*1,2,3,8,9,23
Stenotrophomonas maltophilia
* 1,2,3,23
Ralstonia pickettii
* 1,2,3,23,24
Comamonas acidovorans
FIGURA 27.
Fotografía en estereoscopio. La
morfología en MC es semejante a la de A.junii. En
GSC las colonias son opacas.*
*1,2,3,16,23,24
Acinetobacter junii
Acinetobacter junii
Achromobacter xylosoxidans ss xylosoxidans/denitrificans
* 1,2,3,5,23
Achromobacter piechaudii
* 1,2,3,13, 23
Ochrobactrum anthropi
*1,2,3,12,23,24
Chryseobacterium meningosepticum
FIGURA 36. Microfotografía. Tinción de Gram. Bacilos gramnegativos ligeramente curvos que
oscilan entre 0.5 µ de diámetro y de 1 a 3 µ de largo (100x). Morfología colonial: no desarrollan
en MC aunque en ocasiones pueden presentar un crecimiento escaso. En GSC se observan
colonias de aspecto liso, elevación convexa, consistencia mantequillosa, de 1 a 2 mm,
translúcidas; colonias con pigmento amarillo insoluble. No presentan hemólisis.1,2,3,23,24
CDC Gpo EO2b
FIGURA 37. Fotomicrografía. Tinción de Gram. Bacilos gramnegativos pleomórficos que miden de
0.4 a 0.7 µ de ancho por 0.9 a 3.0 de largo, que van de cocobacilos muy pequeños, bacilos cortos y
medianos hasta bacilos redondos, estos últimos adquieren forma de “O” ya que se tiñen
periféricamente debido a que forman grandes vacuolas internas (100x).1,2,3,14,
CDC GPO EO2B
FIGURA 38 Fotografía en estereoscopio. Morfología colonial
en GSC. pequeñas, elevación convexa, aspecto liso,
consistencia mantequillosa, de borde completo, presentan un
pigmento amarillo paja no difusible en agar MH y despiden un
olor a rosas.*
* 1,2,3,17
CDC Gpo DF3-Like
FIGURA 42. Microfotografía. Tinción de Gram. Bacilos largos que miden de 4.3 a 7.7 µ de largo y 0.25 µ de
ancho. Son filamentos delgados con un movimiento característico “deslizante”. Pueden formar
conglomerados. Capnófilicos. No desarrollan en MC en GSC se observan colonias puntiformes difíciles de
diferenciar de borde completo, elevación convexa o planas, extendidas y se adhieren al agar. En caso de
presentar pigmento este puede ser rosa tenue o amarillo pálido. No presentan hemólisis. Las especies
acuáticas desarrollan mejor a temperatura ambiente y después de tres días las colonias crecen hasta alcanzar
un diámetro de 2 a 3 mm.1,2,3,18,22,23
BIBLIOGRAFIA
1.- Patrick R. Murray, 7th edition 1999, Manual of Clinical Microbiology, American Society for 19.- Naomi E. Aronson and Christine J. Zbick. Oct. 1988. Dysgonic Fermenter 3 Bacteremia in a Neutropenic
Microbiology, Washinton D. C. Patient with Acute Lymphocytic Leukemia. Journal of Clinical Microbiology Vol. 26, No. 10. p. 2213-2215.
2.- Alber Balows, Fifth edition, 1991, Manual of Clinical Microbiology American Society for Microbiology, 20.- Raymond N. Blum, Carol D. Berry, et. al.. Feb. 1992, Clinical Illnesses Associated with Isolation of
Washington, D.C. Dysgonic Fermenter 3 from Stool Samples.. Vol. 30, No. 2, p. 396-400.
21.- P. Lynn Wallace, Dannie G. Hollis, et. al.. Apr. 1989, Characterization of CDC Group DF-3 by Cellular
3.- Edwin Lennette, Albert Balows.1985, Manual of Clinical Microbiology. American Society for Fatty Acid Analysis. Journal of Clinical Microbiology. Vol 27, No. 4, p. 735-737.
Microbiology, Washington, D.C.
22.- Don J. Brenner, Dannie G. Hollis, et. al.. Feb. 1989, Capnocytophaga canimorsus sp. Nov. (Formerly
4.- William F. Mandell, Glenda J. Garvey and Harold C. Neu. 1987, Achromobacter sylosoxidans Bacteremia. CDC Group DF-2) a Cause of Septicemia following Dog Bite, and C. cynodegmi sp. Nov., a Cause of
Clinical Infectious Diseases. Vol 9, No. 5, p.10001-1005 Localized Wound Infection following Dog Bite. Journal of Clinical Microbiology. Vol. 27, No. 2, p. 231-235.
23.- Elmer W. Koneman, 1997. Fifth edition. Diagnostic Microbiology.
5.- David P. Speert, Susan W. Farmer, et. al.. Feb. 1990, Conversion of Pseudomonas aeruginosa to the
Phenotype Characteristic of Strains from Patients with Cystic Fibrosis. Journal of Clinical Microbiology, Vol. 24. By Robert S. Breet e.g.d. Murray and Nathan R. Bergy´s Manual of determinative bacteriology.
28, No. 2, p. 188-194 25.- Jean F. Mac Faddin, Biochemical Tests for Identification of Medical Bacteria, Third edition 1999
6.- Kentaro Kodama, Nokio Kimura and Kazuo Komagata. Oct. 1985, Two New Species of Pseudomonas: P.
oryzihabitans Isolated from Rice Paddy and Clinical Specimens and P. luteola Isolated from Clinical
Specimens. International Journal of Systematic Bacteriology. Vol. 35, No. 4, p. 467-474
7.- Rong-Dih Lin, Po-Ren Hsuch, et. al.. 1997, Flavimonas oryzihabitans Bacteremia: Clinical Features and
Microbiological Characteristics of Isolates. Clinical Infectious Diseases, Vol. 24, p. 867-873
8.-Eiko Yabuuchi, IkuyaYano, et. al.. 1990, Proposals of Sphingomonas paucimobilis gen. nov. and comb.
Nov., Sphingomonas parapaucimobilis sp. nov., Sphingomonas yanoikuyae sp. nov., Sphingomonas
adhaesiva sp. Nov., Sphingomonas capsulata comb. Nov., and Two Genospecies of the Genus Sphingomonas.
Microbiology Immunology. Vol. 34, No. 2, p. 99-119
9.-B. Holmes, R. J. Oxen, Andrea Evans, et. al.. 1977, Pseudomonas paucimobilis, a New Species Isolated
from Human Clinical Specimens, the Hospital Environment, and Other Sources. International Journal of
Systematic Bacteriology. Vol. 27, No. 2, p. 133-146
10.- A. Willems, B. Pot, et. al.. 1991, Polyphasic Taxonomic Study of the Emended Genus Comamonas:
Relationship to Aquaticum, El Falsen Group 10, and Other Clinical Isolates., International Journal of
Systematic Bacteriology., Vol. 41, No. 3, p. 427-444
11.- A. Willems, J. de Ley, et. al.. 1991, Comamonadaceas, a New Family Encompassing the Acidovorans
rRNA Complex, Including Variovorax paradoxus gen. Nov., comb. Nov., for Alcaligenes paradoxus (Davis
1969). International Journal of Systematic Bacteriology. Vol. 41, No. 3, p. 445-450
12.- B. Holmes, M. Popoff, et. al.. 1988, Ochrobactrum anthropi gen. nov., from Human Clinical Specimens
and Previously Known as Group Vd. International Journal of Systematic Bacteriology. Vol. 38, No. 4, p.
406-416
13.- M. Kiredjian. B. Holmes. et. al.. 1986, Alcaligenes piechaudii, a New Species from Human Clinical
Specimens and the Environment. International Journal of Systematic Bacteriology. Vol. 36, No. 2, p. 282-
287
14.- M.M. Peel, A. J: Hibberd. et. al.. 1988, Alcaligenes piechaudii from Chronic Ear Discharge. Journal
Clinical Microbiology. Vol. 26, No. 8, p. 1580-1581