Professional Documents
Culture Documents
Xi. Enzim
Xi. Enzim
XI. ENZIM
Proses Konversi Pada Bahan Yang
Memanfaatkan Enzim Sebagai
Katalis
• Secara molekuler :
http://science.howstuffworks.com/environmental/life/cellular-microscopic/cell2.htm
Reaksi Enzimatis
Definisi:
‘Satu unit merupakan sejumlah enzim yang akan
mengkonversi satu mikro mol substrat per menit pada
kondisi pH dan suhu tertentu’.
Laju reaksi
pH optimum suhu optimum
pH suhu
a. Pengaruh pH b. Pengaruh suhu
Enzim1 aktivator
Laju. reaksi
Pembentu
Laju maksimum
Vm
Produk
enzim
kan
Vm
2 Km
Waktu
[substrat] d. Pengaruh aktivator
Vm: Laju Reaksi maksimum
Km: konstanta Michaelis enzim
Pembentu
Waktu
d. Pengaruh inhibitor
Pengaruh Substrat
K1 K2
E+S K--1
ES E+P
Vmaks S
V
K m S Persamaan Michaelis-Menten
Vmaks
½ Vmaks
Km →[S]
Line Weaver-Burk 1 K m . 1 1
V Vmaks S Vmaks
a b
1
V Km
Slope
Vmaks
1
Vmaks
1
1 S
Km
1. Oksidoreduktase
2. Transferase
3. Hidrolase
4. Liase
5. Isomerase
6. Ligase
1. Oksidoreduktase :
mengkatalisis reaksi oksidasi-reduksi
- Bekerja pada gugus tertentu dari substrat (e.g gugus
CH-OH , gugus aldehida, gugus alkana CH-CH, gugus
amina CH-NH2, gugus sulfur dll)
- Contoh Oksidoreduktase:
* etanol dehidrogenase mengkatalisis reaksi oksidasi
etanol menjadi asetaldehida dgn bantuan kofaktor NAD
Contoh Oksidoreduktase :
* glukosa oksidase memindahkan sepasang elektron dari
substrat β-D-glukosa ke oksigen β–glukono-δ-lakton +
H2O2
(Konversi glukosa menjadi glukono lakton dapat
dilakukan secara enzimatik atau fermentasi oleh mikroba
tertentu)
2. Transferase
mengkatalisis reaksi pemindahan (transfer) gugus
fungsional (gugus metil, amino, asil, fosfat, glikosil dll)
Contoh :
* Aminotransferase (pemindahan gugus amino) :
Asam glutamat + asam oksaloasetat asam α-keto
glutarat + asam aspartat
ATP ADP
3. Hidrolase
mengkatalisis pemecahan (hidrolisis) ikatan
C-O, C-N, O-P dan C-S
Contoh :
molekul polimer pati, selulosa, pektin, protein, lipida
dll menjadi molekul lebih sederhana (penting
pada industri !) . Contoh : protease, lipase,
esterase, glikosidase dll.
- Bekerja pada ikatan peptida, ikatan glikosidik, ikatan
ester, ikatan eter, ikatan hidrogen-fosfat dll
- Spesifitas beragam, dari terbatas (contoh tripsin
memecah ikatan peptida pada sisi karboksil lisin &
arginin) sd luas (selulase memecah ikatan
glikosidik β-1,4 secara acak)
4. Liase
mengkatalisis reaksi pemindahan gugus H2O,
amonia atau CO2 dari substrat
Contoh : aldolase, dekarboksilase, dehidratase
pektinase
Histidin dekarboksilase :
(memindahkan gugus CO2 dari histidin yang
penting pada metabolisme asam amino)
Histidin Histamin + CO2
D - Glukosa D - Fruktosa
HO
H H CH2OH
H O O
H H OH
HO OH
HO H H OH
OH
HO H
H
D - Xilosa D - Xilulosa
6. Ligase
mengkatalisis reaksi sintesis dgn penggabungan
dua mol substrat dgn bantuan ATP = Sintetase
(dengan membentuk ikatan C-O, C-S, C-N, C-C dll)
- Contoh :
Amino asil tRNA sintetase, glutamin sintetase, piruvat
karboksilase dll
Glutamat + NH3 + ATP Glutamin + ADP + Pi
glutamin sintetase
Karakteristik Beberapa Enzim Penting
- α-Amilase
- Amiloglukosidase (AMG)
- Selulase
- Protease
- Lipase
α-Amilase (1,4-α-glukan-glukanohidrolase)
Enzim -amilase yang dibuat oleh Novo Industri A/S antara lain
adalah Termamyl yang memiliki ketahanan terhadap suhu sekitar
95 – 110oC
Dosis enzim yang digunakan sekitar 0,5 – 0,6 kg/ton pati atau
1500 U/kg substrat kering (baca brosur/label kemasan)
Hidrolisis amilosa oleh α-amilase terjadi melalui dua
tahap :
amilosa
amilopektin
β-Amilase
Dextranase
Endo-β-1,4-
glukanase
β-1,4- glukan
β -1,4- glukanase
selobiohidrolase
Ekso-β-1,4-
Selulase glukanase β-1,4- glukan
glukohidrolase
β -1,4- glukosidase
Selulosa :
berasosiasi dgn lignin & hemiselulosa = holoselulosa/
lignoselulosa
Homopolimer glukosa dengan ikatan β-1,4 glikosidik
β -1,4- glukanase :
Menghidrolisis ikatan β -1,4 glikosidik secara acak terutama pada
daerah amorf serat selulosa
Tidak menyerang selobiosa, tapi menghidrolisis selodekstrin dan
selulosa yg telah dilunakkan dgn asam fosfat & selulosa yg telah
disubstitusi (e.g CMC)
β -1,4- glukosidase :
Menghidrolisis selobiosa dan selo-oligosakarida glukosa
(tidak menyerang selulosa/selodekstrin)
Cx Cl C
Selulosa Selulosa reaktif Selobiosa Glukosa
Cx : glukanase ; Cl : selobiohidrolase ; C : β-glukosidase
Produksi Bioetanol dari bagas dgn hidrolisis selulase, α-amilase & AMG
Lactase
Protease alkali :
- Stabil terhadap suhu tinggi, pH 9-11, chelating agent
- Mikroba penghasil : Bacillus licheniformis, B.
amyloliquefaciens, B.megaterium, B.pumilus -
Streptococcus griceus, S. fradiae, S.rectus - Aspergillus
niger, A. sojae, A.oryzae, A. flavus
Protease Netral :
- Relatif tidak stabil thd pH, suhu & dpt diinaktivasi oleh
protease alkali
- Aplikasi : industri kulit & industri makanan (crackers, roti
dll)
Protease Asam
- Aktif pada suasana asam, contoh : rennin & pepsin
(pH opt 2-3)
- Aplikasi :- Protease dari Aspergillus untuk memecah
gluten pada pemanggangan
Rennin
- Menggumpalkan kasein susu pada pembuatan keju
- Mikroba penghasil : S. lactis, S. cremoris, S. thermophilus,
Lactobacillus bulgaricus, L. helveticus
Lipase (Gliserol ester hydrolase)
Mikroba penghasil :
Kapang : Aspergillus, Mucor, Rhizopus,
Khamir : Candida
Aplikasi :
- farmasi : enzim pencernaan (suplemen lipase pankreas)
- Industri susu (pematangan keju)
- dll
APLIKASI ENZIM
Important Applications of α-Amylase
Suspensi pati Produksi Sirup Glukosa &
Gelatinasi Sirup Fruktosa
Pati α-Amilase bakteri
(95-105 0C) (pH 6.0-6.6, 105oC, 5 mnt atau 95oC 1-2 jam
Sakarifikasi
Maltodekstrin
Sirup Glukosa
α-Amilase kapang
Sakarifikasi + glukoamilase
pH 5.0, 55oC, 42
Glukoamilase atau jam
Glukoamilase+ Sakarifikasi
Pululanase Amilase kapang atau
pH 4.0-4.5, 60oC, β-amilase
48-72 jam pH 5.5, 55oC, 42 jam
Sirup Glukosa
http://www.indogulfgroup.com/AE%20-%20Enzymes%20-%20Glucose%20Oxidase.asp
Glucono delta-lactone (GDL) :
http://www.gmo-compass.org/eng/database/e-numbers/294.glucono_delta_lactone.html
Glucono delta-lactone
(GDL)
Curing Accelerator in Meat Products
http://www.tastydays.com/drinks/juice/apple-juice
Pulp and Paper Industry
http ://enzymes.me.uk
However, it has become more common in recent years to
include a mixed of enzyme activities including lipases
and amylases.
• Formulasi :
enkapsulasi agar debu tak beterbangan, partikel larut
cepat, tak menghasilkan bau & warna, daya simpan lebih
baik, melindungi thd komponen lain e.g bleaching agent
*Proses Enkapsulasi Protease metode NOVO
• Formulasi :
enzim powder dicampur aditif etoxylated-C18-fatty alcohol
“prill tower” bentuk bola dilapis agar tidak berdebu selama
penanganan (pelapis (minyak parafin atau PEG)
merk : Maxatase dan Maxacal (pH opt ≥10)
Komposisi Deterjen Enzim
INDUSTRI KEJU
Rennet
Milk contains proteins, specifically caseins, that maintain its
liquid form. Proteases are enzymes that are added to milk
during cheese production, to hydrolyze caseins, specifically
kappa casein, which stabilizes micelle formation preventing
coagulation. The most common enzyme isolated from
rennet is chymosin., which can be obtained from several
other animal, microbial or vegetable sources, but
indigenous microbial chymosin (from fungi or bacteria) is
ineffective for making cheddar and other hard cheeses.
http://enzymes.me.uk/enzyme/enzymes-in-industry
PRODUKSI KEJU
Lipases
Lipases are used to break down milk fats and give
characteristic flavours to cheeses. Stronger flavoured
cheeses, for example, the italian cheese, Romano, are
prepared using lipases. The flavour comes from the free
fatty acids produced when milk fats are hydrolyzed. Animal
lipases are obtained from kid, calf and lamb, while microbial
lipase is derived by fermentation with the fungal species
Mucor meihei. Although microbial lipases are available for
cheese-making, they are less specific in what fats they
hydrolyze, while the animal enzymes are more partial to
short and medium-length fats. Hydrolysis of the shorter fats
is preferred because it results in the desirable taste of many
cheeses. Hydrolysis of the longer chain fatty acids can
result in either soapiness, or no flavour at all.
Milk contains a number of different types of proteins, in
addition to the caseins. Cow milk also contains whey
proteins such as lactalbumin and lactoglobulin. The
denaturing of these whey proteins, using proteases, results
in a creamier yogurt product. Destruction of whey proteins is
also essential for cheese production.
1. Endonuklease Restriksi
memotong DNA
2. DNA Ligase
untuk proses replikasi & menyambung fragmen DNA dg
fragmen lain atau kloning membentuk DNA Rekombinan
3. Nuklease
menguraikan komponen nukleotida dari DNA (berperan
pd proses replikasi)
4. RNA Polimerase
berperan pada proses transkripsi DNA mRNA
Enzymes in molecular biology
Bacterial and yeasts cells can be used for any protein and
peptide biosynthesis. Some of these bacterial enzymes
can be used in vitro to perform the same biological
processes, from which are most important enzymes for
DNA/RNA manipulation.
http ://enzymes.me.uk
Therapeutic Enzymes