实时荧光定量 PCR (RT-qPCR)

（ Quantitative Real-time PCR ）

在 PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号 （ 1 ）荧光探针标记法
积累实时监测整个 PCR 进程，最后通过标准曲线对 DNA
模板进行定量分析的方法。 TaqMan 探针标记法：信号强度和结
合到 DNA 上的探针呈正比
荧光化学物质：荧光探针和荧光染料
TaqMan 探针的 5′ 端标记报告基团，
3′ 端标记荧光淬灭基团，探针只与模
板特异结合，结合位点在两条引物之
间。

探针完整时，报告基团的荧光能量被
淬灭基团吸收，没有荧光信号积累。

随着 PCR 反应的进行， Taq 酶将探针

酶切，导致报告基团荧光信号的产生。
每形成一条双链，就会切断一个探针，
产生一份荧光信号，信号强度代表模
板 DNA 拷贝数