ANALIZADORES HEMATOLÓGICOS

Presentado por:
Maximiliano Elizeche
Introducción
 El desarrollo de los Autoanalizadores hematológicos
comenzó en la década de los 50 con los hermanos
Wallace y Joseph Coulter, quienes inventaron en 1956 el
primer contador automático de células sanguíneas.

En 1980 se introduce el diferencial 3 Diff, además del

estudio de la serie roja con los cómputos de eritrocitos,
la determinación de la hemoglobina y el cálculo de los
índices eritrocitarios.

Todo equipo automatizado, suministra dos tipos de

resultados: un informe numérico y un informe grafico
(histogramas), y ambos poseen un software que
contiene toda la información utilizando abreviaturas en
ingles de utilidad en el informe numérico.
 Componentes del analizador
•DILUIDOR
Disminuye la concentración de la
sangre hasta el nivel adecuado para el
funcionamiento del contador.
Como líquido diluyente utiliza una
solución isotónica con capacidad
conductora.
•COMPRESOR- ASPIRADOR
Aporta la presión y el vacío
necesarios para transportar la
sangre, convenientemente
diluida, al dispositivo de
medida.
•DISPOSITIVO DE
MEDIDA
Es la cámara donde se
cuentan realmente las
células sanguíneas (cámara
de medida o de lectura).

•TRANSDUCTOR •DISCRIMINADOR
Transforma las
señales, procedentes
Diferencia los impulsos
del dispositivo de eléctricos generados por
medida, en cada uno de los tipos de
impulsos eléctricos. células sanguíneas.
Suele ser un
fotomultiplicador
•PROCESADOR
Recoge los
•REGISTRADOR
datos obtenidos,
Imprime en papel los
los procesa y los
resultados conseguidos.
proyecta en una
pantalla.
Principio de los analizadores hematológicos

IMPEDANCIA

RADIOFRECUENCIA DISPERSIÓN ÓPTICA

CITOMETRIA DE FLUJO FLUORESCENCIA

PRINCIPIO DE IMPEDANCIA
.El principio de impedancia en el conteo de células
sanguíneas se basa en el aumento de la resistencia
producida cuando una célula sanguínea con baja
conductividad pasa a través de un campo eléctrico.

El número de intermitencias indica la cifra de células sanguíneas

y la amplitud de cada intermitencia es proporcional al volumen
de la célula

Ejemplos de instrumentos con este principio son el

Contador Coulter, los instrumentos TOA Sysmex y los
instrumentos Abbot Cell-Dyn.

•Mientras que las células sanguíneas conducen mal la

electricidad, el líquido diluyente es un buen conductor de la
electricidad (posee una gran conductividad eléctrica).
•El dispositivo de medida consiste en un pequeño orificio, a través del cual se hace
pasar la sangre diluida. Tiene colocados un electrodo a su entrada y otro a su salida.
•También se hace pasar una corriente eléctrica constante a través de ese mismo
orificio.

•Si el orificio es atravesado solamente por líquido diluyente, la

resistencia eléctrica medida por los electrodos es mínima y constante,
pero cuando el orificio es atravesado por una célula sanguínea, se
produce un aumento de la resistencia eléctrica y un cambio de potencial
entre los electrodos.

El número de señales eléctricas generadas indica el número

de células presentes en la sangre y la amplitud de estas
señales es directamente proporcional al volumen celular.

De este modo es posible la identificación de las células y por tanto el

recuento
Impedancia
DISPERSIÓN ÓPTICA
Basa en las mediciones de la
dispersión de la luz obtenidas
de una sola célula sanguínea
que pasa ata través de un haz
de luz (óptico o láser Estas células crean una
Ejemplos de
dispersión hacia delante
instrumentos que atizan
y lateral las cuales se
este principio son los
detectan mediante
Technicon H System.
fotodetectores .

el lateral es una medición El grado de dispersión

de la granularidad de la hacia delante es una
célula. mediación del tamaño de
la celular
fluorescencia
 Un fluorocromo es una  molécula química que absorbe la luz a una determinada
longitud de onda (ENERGIA ) energía de excitación y emite a una longitud superior
(MENOR ENERGIA) 

Interacciona con la luz de excitación procedente de el láser. 

¿cómo es obtiene?
Fluorocromo

absorbe
Unión de energía
sitios del láser
específicos

Emisión de
•libera energía fotones a una
absorbida por : mayor
•Vibración y longitud de
disipación del calor. onda llamada 
fluorescencia
 Citometria de flujo
 Técnica de análisis celular
multiparamétrico cuyo fundamento se
basa en hacer pasar una suspensión de
partículas  (generalmente células)
alineadas y de una en una por delante
de un haz de láser focalizado.
 Es una tecnología (proceso) que permite
la medida simultánea de múltiples
características físicas de una sola célula.
 Estas medidas son realizadas mientras
las células (partículas) pasan en fila, a
una velocidad de 500 a 4000 células por
segundo, a través del aparato de medida
en una corriente de fluido.
 Sistema Hidráulico Sistema Óptico
• Controles neumático y fluidos para
• Láser (Argón con luz monocromática
establecer un flujo laminar que
de 488nm , filtros , lentes y
permita a la suspensión celular
detectores.
atravesar la cámara de flujo.  

Sistema Electroinformativo
• Convierte la luz dispersa en señales
eléctricas y las procesa para su
análisis. 
 Parámetros

Características
Características
antigénicas de las
morfológicas de las
células
células
(Inmunifenotípicas)

Granularidad relativa
Tamaño Relativo Fluorescencia relativa
o complejidad interna
(forward scatter-FSC) (FL1, FL2, FL3)
( side scatter SSC)

Determinación
Propiedad de cuantitativa de
Dispersión características antigénicas,
bioquímicas y biofísicas de
células individuales
 Señales de Dispersión

La luz dispersada frontalmente  en ángulo cónico pequeño (0-10

grados ) coincidente con luz incidente y es proporcional a
tamaño de la partícula que produce la dispersión.
 Señales de Dispersión

La luz dispersada lateralmente es proporcional al la complejidad

de la estructura celular.
Radiofrecuencia
 Eritrograma
Se trata del análisis de la serie roja e incluye los siguientes parámetros:

• Recuento de glóbulos rojos: se trata de la cantidad de eritrocitos en un

mm3. A partir del número de células contadas por unidad de volumen, se
genera el histograma de distribución de eritrocitos.

• Concentración de Hemoglobina:
Valores Normales: Hombres: 16 ± 2 gr%
Mujeres: 14 ± 2 gr%

• Hematocrito: es el porcentaje de sangre que es ocupado por eritrocitos.

Valores Normales: Hombres: 47 ± 5 gr%

Mujeres: 42 ± 5 gr%
 Índices Hematológicos

• Concentración de hemoglobina media corpuscular (C.H.MC): Se refiere a la

concentración promedio de hemoglobina por mililitro de eritrocitos. Puede ser
calculada utilizando los valores de hemoglobina y de hematócrito o medida
directamente mediante luz láser y su grado dispersión.
Valor normal: 32% a 36%

• Volumen corpuscular medio (V.C.M): Expresa en micras cúbicas (u3) el

volumen que ocupa un hematíe de tamaño medio. El valor de este parámetro puede
ser obtenido a partir del histograma de distribución de volumen de los eritrocitos o
medido directamente mediante la técnica de dispersión de la luz láser.
Valor normal: 87 ± 5 u3 ó um3
• Hemoglobina corpuscular media (H.C.M.): Es el valor promedio de la
hemoglobina contenida en cada eritrocito. Puede ser calculada utilizando los
valores de  hemoglobina y de hematocrito o medida directamente mediante
luz láser y su grado dispersión.

Valor normal: 27 – 32 pg

• Contenido de hemoglobina presente en los reticulocitos (CHr):

Constituye un indicador precoz de eritropoyesis deficiente en hierro que es
mucho más sensible a la suplementación con hierro que otros parámetros,
tales como hematócrito, hemoglobina, VCM, RDW, HCM y ferritina. Es de
reciente incorporación gracias a los analizadores hematológicos.
• La Amplitud de Distribución Eritrocitaria (ADE o RDW): se utiliza
como indicativo de anisocitosis. Este índice es facilitado por los
contadores automatizados.

Valor normal: 11,5 – 14,5%

 Leucograma
• Es la fracción del hemograma que se refiere al conteo total de los leucocitos
(glóbulos blancos) y de las diferentes clases de leucocitos. En sí está
compuesto por dos análisis:

• Conteo total de leucocitos: Los leucocitos son las células encargadas de

proteger al organismo contra las infecciones. La presencia de una infección
normalmente altera el número total de leucocitos. Valor normal: 4,500 a
10,000 glóbulos blancos por microlitro (mcL)

• Conteo de leucocitos diferencial: apodado simplemente "diferencial",

determina la proporción o porcentaje de las principales clases de
leucocitos dentro del conteo total de leucocitos. (neutrófilos, eosinófilos,
basófilos, linfocitos y monocitos). Cada clase tiene un papel diferente
en la defensa del organismo. La cantidad de cada clase de leucocito da
información muy valiosa acerca del estado del sistema inmune.
Leucocitos en Frotis
Serie Blanca
Plaquetograma
• Plaquetas (PLT): se refiere al recuento global de plaquetas realizado de
forma automatizada. Valor normal: 150 a 400 × 109/L.4

• Volumen medio plaquetario (VPM): es un indicador del tamaño de las

plaquetas y muestra una relación inversa no lineal con el número de estas.

• Plaquetocrito (PCT): se calcula relacionando el recuento de células con el

volumen medio plaquetario. Ofrece un estimado sobre la fracción del
volumen sanguíneo total ocupada por las plaquetas. Su valor aumenta en
situaciones que cursen con trombocitosis. Valor normal: 0,1 a 0,4 %.
• Componente medio plaquetario o concentración media de plaquetas
(CPM): es un indicador del grado de activación plaquetaria y una variable
clínica útil en el estudio y seguimiento de pacientes con riesgo de trombosis
como en el caso de dializados, diabéticos, fumadores, angina inestable,
mujeres embarazadas.

• Plaquetas reticuladas (PR): las PR son las más jóvenes de la sangre

periférica con un contenido de ARN superior a las demás. Son detectadas
mediante la aplicación del método inmunológico. El porcentaje normal de PR
es de 0,98 ± 0,41 %.
 Histograma de Eritrocitos
DISTRIBUCIÓN NORMAL
REL
NIo RBC 6.09 HGB
VCM x ADE 17.5 HCT 50.6
CUERPO MCV 83.1
MCH 28.7
MCHC 34.6
RDW 13.0
DEDO Artefactos glóbulos
rojos aglutinados

RBC 50 100 130 200 300

fL
 Histograma de Leucocitos
Recuento total de Leucocitos Granulocitos

EJEMPLO DE ANALISIS
REL Neutrófilos
DISTRIBUCIÓN NORMAL
NIo.

WBC 8.3 LY
# 2.5 MO
# .8 GR #
MO o MID 5.1
Linfocitos

90 160

WBC 50 100 200 300 400

MO – MID = Eosinófilo, Basófilo, Monocito

 Histograma de Plaquetas
REL DISTRIBUCIÓN NORMAL
NIo: NOMOGRAMA NORMAL

PLT 319 PCT

.239 MPV
7.5 PDW
16.3

PLT 2 10 20 FEMTOLITROS
Recuento Diferencial de Leucocitos

Cuadrante 6
Cuadrante 3 Eosinófilos
Monocitos
Cuadrante 4
Neutrofilos

Cuadrante 2
Linfocitos
Cuadrante 5 Cel.
Dañadas

Cuadrante 1 Blastos
Recuento Diferencial de Leucocitos de Cinco
Partes
 Recuento Diferencia de Leucocitos Anormal

1. Blastos 9 5. Eritrocitos

2 nucleados

2. Granulocitos
inmaduros 6. Linfocitos
7 Variantes
3. Neutrófilos 8

envejecidos
3
y lesionados 7. Blastos

6
4. Plaquetas 8. Linfocitos
gigantes Variantes
5 4
9. Blastos
Neutropenia y Linfocitosis
WBC Cuadrante 4
Cuadrante 3 Neutrofilos
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinófilos

V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 2 Cuadrante 5
Linfocitos Cel. Dañadas

Cuadrante
1 Blastos
DF1
Linfocitos Atípicos
WBC Cuadrante 4
Cuadrante 3 Neutrofilos
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinófilos

V
O
L
U
M
E
N

Cuadrante 2 Cuadrante 5
Linfocitos Cel. Dañadas

Cuadrante
1 Blastos
DF1
Eosinofilia
WBC Cuadrante 4
Cuadrante 3 Neutrofilos
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinófilos

V
O
L
U
M
E
N

Cuadrante 2 Cuadrante 5
Linfocitos Cel. Dañadas

Cuadrante
1 Blastos
DF1
Granulocitos Inmaduros
WBC Cuadrante 4
Cuadrante 3 Neutrofilos
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinófilos

V
O
L
U
M
E
N

Cuadrante 2 Cuadrante 5
Linfocitos Cel. Dañadas

Cuadrante
1 Blastos
DF1
Dispersograma
Ejemplos de Histogramas
Histograma Normal
 ANEMIA POR DEFICIENCIA DE
VITAMINA B12

La curva se desplaza
a la derecha
ANEMIA POR DEFICIENCIA DE
HIERRO

La curva se desplaza a
la izquierda
HISTOGRAMA TALASEMIA BETA

La curva se desplaza a
la izquierda
 HISTOGRAMA DE LA SERIE ROJA
• Línea Verde: Microcitosis sin anisocitosis. 
• Línea Roja: Macrocitosis sin anisocitosis. 
• Línea Amarilla: Anisocitosis, y/o Poiquilocitosis.
• Línea Azul: Doble población
HISTOGRAMA DE LA SERIE PLAQUETARIA

Distribución de plaquetas e interferencias

Posible agregación plaquetaria.

Interferencia producida por microcitosis marcada.

Alarmas en los analizadores hematológicos:
Cualitativas
Identifican blastos, células
anormales, granulocitos
inmaduros, etc.
Útiles
Identifican anisocitosis, tamaño
de plaquetas, aglutinación de
eritrocitos, plaquetas y
hemoglobinas anormales
Cuantitativas
Identifican anemia/policitemia,
leucopenia/leucocitosis,
trombocitopenia/trombocitosis
Deseables
Identifican eosinofilia, eritrocitos
nucleados, células
drepanociticas, esferocitosis,
fragmentos de eritrocitos y
células de frotis.
Utilidad Clínica
 Utilidad Clínica
• Contribuye con la valoración
del resultado de una
citometría hemática.
• Valoración de la función
medular ósea. VPM bajo:
hipoproducción medular.
VPM alto: trastorno
mieloproliferativo
• A partir de los resultados
obtenidos se puede proceder
a hacer pruebas más
profundas
Utilidad Clínica

• Ventaja: Buena apreciacion la distribución

volumétrica real entre todos los tipos celulares
presentes en la muestra incluyendo en algunas
patologías la visualización aun de linfocitos.

• Diferenciación entre ferropenia y talasemia menor.

Un VCM bajo y RDW: diagnóstico de ferropenia. Un
VCM bajo y RDW normal: diagnóstico de talasemia
menor
Muchas Gracias